%、瓊脂 30%、余量為水,pH=6. 5 ; 2) 液體菌種的制作:將培養(yǎng)基B分裝于2000毫升三角瓶中,每瓶裝800毫升,高壓滅 菌60分鐘,冷卻后無菌操作接入蛹蟲草母種,20°C黑暗靜止培養(yǎng)48小時(shí),然后置于轉(zhuǎn)速為 100圈/分鐘的搖床上18°C避光振蕩培養(yǎng),待菌液中出現(xiàn)大量的菌絲球后停止振蕩; 培養(yǎng)基B :大豆粉20% (磨漿)、馬鈴薯20% (煮汁)、蜂王漿1%、人參粉1%、葡萄糖3%、蛋 白胨1%、磷酸二氫鉀1%、硫酸鎂〇. 5%、余量為水,pH=6. 5 ; 3) 蛹蟲草子實(shí)體的生產(chǎn):轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培生產(chǎn)蛹蟲草所用的罐頭瓶直徑8-10厘米、高10-12 厘米,每瓶裝大米20克、大豆粉2克、蠶蛹粉1. 5克、奶粉1克,再加入50毫升營(yíng)養(yǎng)液拌勻, pH=6. 5-7. 0,用聚丙烯塑料薄膜封口,靜置3小時(shí),100°C常壓滅菌8小時(shí),冷卻后無菌操作 接入液體菌種6-8毫升,使菌種均勻分布其中;初期黑暗培養(yǎng),溫度15-25°C,濕度70%-80%, 14-15天長(zhǎng)滿菌絲,當(dāng)培養(yǎng)基上部出現(xiàn)菌絲突起時(shí),給予10-15°C的溫差刺激,并增加光照 刺激轉(zhuǎn)色,當(dāng)子座長(zhǎng)至1厘米時(shí),及時(shí)通氣,溫度18-22°C,濕度80-90%,并加強(qiáng)房間的空氣 流通; 營(yíng)養(yǎng)液:葡萄糖12克、蜂王漿0. 5克、人參粉0. 5克、蛋白胨10克、檸檬酸銨1克、硫酸 鎂1克、維生素 BI 1克、水1000毫升; 4) 采收:當(dāng)子實(shí)體高度達(dá)6-8厘米、子座呈橘紅色或橘黃色棒狀不再生長(zhǎng),表面有黃色 粉末狀物質(zhì)出現(xiàn)時(shí),把子實(shí)體從基部切下,晾至5-6成干,再烘干; 5) 蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提?。?將合格的蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓分別粉碎,過10-20目篩,混合; 采用超臨界CO2萃取,萃取釜壓力25-28MPa,萃取溫度50-60 °C,I級(jí)分離釜壓力 10-12MPa,II級(jí)分離釜壓力6MPa,CO2 (食品級(jí),純度彡99. 0%)流量120-150L/h,萃取時(shí)間 4_5h,采用100目膜過濾,得萃取液,萃余物備用; 將萃余物用純化水浸泡6h,料液比為1 :10-15,調(diào)節(jié)pH=5. 0-6. 0,溫度50-60°C,加 入纖維素酶反應(yīng)l_2h,再加入蛋白酶反應(yīng)0. 5-lh ;所述的纖維素酶,酶活力140萬U/g, 用量為萃余物重量的〇. 01-0. 05% ;所述的蛋白酶,酶活力20萬U/g,用量為萃余物重量的 0. 01-0. 05% ;酶解過程在超聲輔助條件下進(jìn)行,超聲波頻率25-30kHz ;酶解結(jié)束將料液升 溫至KKTC,滅酶l_3min,然后將料液采用100目膜過濾,得酶解提取液; 將萃取液和酶解提取液混合均勻,〇.〇9MPa壓力下減壓濃縮至可溶性固形物含量為 12-15%,濃縮液濃度 fcix=20. 0-22. 0% ; 將濃縮液進(jìn)行真空冷凍干燥,溫度-l〇°C~-50°C,壓力1. 3~13帕,得蛹蟲草、人參、 枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提取干粉,細(xì)度為80-100目; 6)蛹蟲草復(fù)方制品的配制: 按重量百分?jǐn)?shù)計(jì):蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提取干粉80%、蜂 王漿干粉10%、螺旋藻干粉10%,進(jìn)行混合,經(jīng)常規(guī)工藝制得片劑、顆粒劑或膠囊劑。
[0013] 本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于:該復(fù)方制品利用現(xiàn)代發(fā)酵、萃取、酶解、超濾、均質(zhì)等科學(xué) 技術(shù)制成,中草藥有效成分含量高、營(yíng)養(yǎng)全面、口感純正、服用方便、該工藝是一種高效環(huán)保 的生產(chǎn)技術(shù),具有顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
【具體實(shí)施方式】
[0014] -種蛹蟲草復(fù)方制品,主要原料按重量百分?jǐn)?shù)計(jì):蛹蟲草50%、人參10%、枸杞10%、 黃精15%、茯苓15%。
[0015] 先采用固體發(fā)酵培養(yǎng)方法,獲得蛹蟲草子實(shí)體;再采用超臨界CO2萃取、超聲輔助 酶解及真空冷凍干燥的集成工藝,收集蛹蟲草、人參、枸杞、黃精和茯苓的天然活性物質(zhì);最 后添加蜂王漿和螺旋藻混合均質(zhì),制得復(fù)方制品。
[0016] 具體步驟如下: 1) 蛹蟲草母種的制作:將無性型蛹蟲草擬青霉經(jīng)分離復(fù)壯后,按常規(guī)滅菌接種,置于培 養(yǎng)基A中,20°C恒溫培養(yǎng)12天,選用菌苔底部呈鮮黃色的作為蛹蟲草母種; 培養(yǎng)基A :葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母膏0. 5%、磷酸二氫鉀0. 2%、硫酸鎂0. 05%、瓊脂 30%、余量為水,pH=6. 5 ; 2) 液體菌種的制作:將培養(yǎng)基B分裝于2000毫升三角瓶中,每瓶裝800毫升,高壓滅 菌60分鐘,冷卻后無菌操作接入蛹蟲草母種,20°C黑暗靜止培養(yǎng)48小時(shí),然后置于轉(zhuǎn)速為 100圈/分鐘的搖床上18°C避光振蕩培養(yǎng),待菌液中出現(xiàn)大量的菌絲球后停止振蕩; 培養(yǎng)基B :大豆粉20% (磨漿)、馬鈴薯20% (煮汁)、蜂王漿1%、人參粉1%、葡萄糖3%、蛋 白胨1%、磷酸二氫鉀1%、硫酸鎂〇. 5%、余量為水,pH=6. 5 ; 3) 蛹蟲草子實(shí)體的生產(chǎn):轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培生產(chǎn)蛹蟲草所用的罐頭瓶直徑8-10厘米、高10-12 厘米,每瓶裝大米20克、大豆粉2克、蠶蛹粉1. 5克、奶粉1克,再加入50毫升營(yíng)養(yǎng)液拌勻, pH=6. 5-7. 0,用聚丙烯塑料薄膜封口,靜置3小時(shí),100°C常壓滅菌8小時(shí),冷卻后無菌操作 接入液體菌種6-8毫升,使菌種均勻分布其中;初期黑暗培養(yǎng),溫度15-25°C,濕度70%-80%, 14-15天長(zhǎng)滿菌絲,當(dāng)培養(yǎng)基上部出現(xiàn)菌絲突起時(shí),給予10-15°C的溫差刺激,并增加光照 刺激轉(zhuǎn)色,當(dāng)子座長(zhǎng)至1厘米時(shí),及時(shí)通氣,溫度18-22°C,濕度80-90%,并加強(qiáng)房間的空氣 流通; 營(yíng)養(yǎng)液:葡萄糖12克、蜂王漿0. 5克、人參粉0. 5克、蛋白胨10克、檸檬酸銨1克、硫酸 鎂1克、維生素 BI 1克、水1000毫升; 4) 采收:當(dāng)子實(shí)體高度達(dá)6-8厘米、子座呈橘紅色或橘黃色棒狀不再生長(zhǎng),表面有黃色 粉末狀物質(zhì)出現(xiàn)時(shí),把子實(shí)體從基部切下,晾至5-6成干,再烘干; 5) 蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提?。?將合格的蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓分別粉碎,過10-20目篩,混合; 采用超臨界CO2萃取,萃取釜壓力25-28MPa,萃取溫度50-60 °C,I級(jí)分離釜壓力 10-12MPa,II級(jí)分離釜壓力6MPa,CO2 (食品級(jí),純度彡99. 0%)流量120-150L/h,萃取時(shí)間 4-5h,采用100目膜過濾,得萃取液,萃余物備用; 將萃余物用純化水浸泡6h,料液比為1 :10-15,調(diào)節(jié)pH=5. 0-6. 0,溫度50-60°C,加 入纖維素酶反應(yīng)l_2h,再加入蛋白酶反應(yīng)0. 5-lh ;所述的纖維素酶,酶活力140萬U/g, 用量為萃余物重量的〇. 01-0. 05% ;所述的蛋白酶,酶活力20萬U/g,用量為萃余物重量的 0. 01-0. 05% ;酶解過程在超聲輔助條件下進(jìn)行,超聲波頻率25-30kHz ;酶解結(jié)束將料液升 溫至KKTC,滅酶l_3min,然后將料液采用100目膜過濾,得酶解提取液; 將萃取液和酶解提取液混合均勻,〇.〇9MPa壓力下減壓濃縮至可溶性固形物含量為 12-15%,濃縮液濃度 fcix=20. 0-22. 0% ; 將濃縮液進(jìn)行真空冷凍干燥,溫度-l〇°C~-50°C,壓力1. 3~13帕,得蛹蟲草、人參、 枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提取干粉,細(xì)度為80-100目; 6)蛹蟲草復(fù)方制品的配制: 按重量百分?jǐn)?shù)計(jì):蛹蟲草、人參、枸杞、黃精、茯苓的天然活性物質(zhì)的提取干粉80%、蜂 王漿干粉10%、螺旋藻干粉10%,進(jìn)行混合,經(jīng)常規(guī)工藝制得片劑、顆粒劑或膠囊劑。
[0017] 實(shí)施例1 一種蛹蟲草復(fù)方制品,主要原料按重量百分?jǐn)?shù)計(jì):蛹蟲草50%、人參10%、枸杞10%、黃精 15%、茯苓 15%。
[0018] 先采用固體發(fā)酵培養(yǎng)方法,獲得蛹蟲草子實(shí)體;再采用超臨界CO2萃取、超聲輔助 酶解及真空冷凍干燥的集成工藝,收集蛹蟲草、人參、枸杞、黃精和茯苓的天然活性物質(zhì);最 后添加蜂王漿和螺旋藻混合均質(zhì),制得復(fù)方制品。
[0019] 具體步驟如下: