靜脈緩慢注射給藥,連續(xù)觀察12天,其 LD50 及 95%可信限為 154.54(138.46 ?171.77)g/kg。
[0075]2、小鼠腹腔注射給藥急性毒性試驗
阿壩種小鼠一次腹腔注射給藥,連續(xù)觀察12天。其LD50及95 %可信限為272.54 (254.69 ?288.66) g/kg。
[0076](七)安全性試驗
1、家兔靜脈注射給藥血管刺激性試驗
澳大利亞種白色家兔5只,由兔耳靜脈緩慢注射給予高原紅景天注射劑,每日一次,連續(xù)5次。其局部血管肉眼未見明顯變化,病理組織學(xué)未見血管存在刺激反應(yīng)。
[0077]2、豚鼠靜脈注射給藥的過敏試驗
DHP種白色豚鼠,共分為5組,每組15只。在高原紅景天注射劑致敏給藥后的第18日和第24日靜脈攻擊給藥觀察,未見豚鼠出現(xiàn)過敏性反應(yīng)。
[0078]3、溶血試驗
高原紅景天注射劑在體外與家兔紅血球接觸4小時后,未發(fā)現(xiàn)溶血和凝聚反應(yīng)。
[0079](八)長期毒性試驗
1、對犬連續(xù)給藥7周的長期毒性試驗
采用Beagle犬,每組10條,雌雄兼有,試驗共分2個給藥組(12.5g/kg和3.3g/kg)和I個溶劑對照組,連續(xù)靜脈注射給藥7周,各組2條犬停藥后再觀察2周,試驗結(jié)果顯示:除給藥期高劑量組脾臟臟器系數(shù)數(shù)值有一定升高、注射局部出現(xiàn)輕微腫脹外,其它檢測指標(biāo)無異常發(fā)現(xiàn)。動物的一般狀態(tài)狀況良好,體重各周增長正常,血液學(xué)10項指標(biāo)、血清生化學(xué)10項指標(biāo)、心電圖5項指標(biāo)、尿液常規(guī)檢查10項指標(biāo)、以及22種病理組織學(xué)檢查等未見明顯毒性反應(yīng)。
[0080]2、對大鼠連續(xù)給藥7周的長期毒性試驗采用Long Evans大鼠,每組30只,雌雄各半,試驗共分2個給藥組(32g/kg和llg/kg)和I個溶劑對照組,連續(xù)腹腔注射給藥7周,各組1/3大鼠停藥后再觀察2周。試驗結(jié)果顯示:給藥期高、低劑量組凝血時間(CT)明顯延長,停藥兩周后重復(fù)檢查該指標(biāo)恢復(fù)正常。存活動物的一般狀態(tài)尚好,體重各周增長基本正常,血清生化學(xué)、臟器系數(shù)以及病理組織學(xué)檢查等未見明顯毒性反應(yīng)。
[0081](九)臨床背景資料
由于高原紅景天注射劑尚未獲得進(jìn)行臨床試驗的批文,因此無前期臨床資料。但作為本項目的研宄基礎(chǔ),高原紅景天膠囊經(jīng)衛(wèi)生部藥政局批準(zhǔn)[(96) ZL-10號文件],由成都中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院、四川省第二人民醫(yī)院、德陽市第五人民醫(yī)院、四川省第四人民醫(yī)院等四家醫(yī)院開展了高原紅景天膠囊治療胸痹(冠心病心絞痛)II期臨床試驗。共收治患者406例,隨機(jī)設(shè)治療組303例,對照組100例(口服百路達(dá)膠囊)。臨床試驗結(jié)果:治療組胸痹心痛顯效率為45.36%,總有效率為88.37%;心電圖顯效率為27.15%,總有效率為62.33%。對照組胸痹心痛顯效率為27.00%,總有效率為72.00% ;心電圖顯效率為11.00%,總有效率為42.00%。治療組療效顯著優(yōu)于對照組(P < 0.05)。兩組治療胸痹起效時間分別為
5.75±2.45天和8.82±2.90天,治療組早于對照組(P < 0.01);兩組硝酸甘油停減率分別為92.19%和65.67%,治療組明顯高于對照組(P < 0.05)。治療組對胸部疼痛、心f季、氣短等癥狀有效率皆顯著高于對照組(P < 0.01或0.05)。高原紅景天膠囊能明顯改善患者血液流變狀態(tài),降低血小板聚集和血漿粘度,使異常升高的血脂、膽固醇含量下降。效果優(yōu)于對照組。Holter檢查,兩組總有效率分別為57.67%和31.75%,治療組優(yōu)于對照組(P< 0.05)。治療組未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用,對患者血、尿、便常規(guī)和肝、腎功能檢查均未見異常改變。高原紅景天注射劑要比口服膠囊劑更具有起效快,療效更明顯的優(yōu)點(diǎn)。由于心絞痛發(fā)病急,癥狀重,危及生命。發(fā)病時往往處于急救狀態(tài)。因此起效快極為重要。重癥者難以服藥,由它人注射能及時得到治療。因此本注射劑是最適應(yīng)該病癥的藥劑。
[0082]以上所述,僅是本發(fā)明的較佳實施例,并非對本發(fā)明做任何形式上的限制,凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化,均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,其特征在于:利用高原紅景天為原料,經(jīng)提取干燥、加注射用水制成,其工藝如下: 取高原紅景天中藥材進(jìn)行溶液提取,濾過,薄膜濃縮成相對密度為在40°C溫度下1.25?1.40的濃縮液; 在所述濃縮液中加乙醇使含醇量達(dá)69.15%,攪勻,在5-10°C溫度下,冷藏24小時,濾過,沉淀以5-10°C的69.15%乙醇洗滌一次,濾過,合并濾液,回收乙醇并濃縮至相對密度為在40°C為1.25?1.40的清膏,再加乙醇使含醇量達(dá)83.75%,攪勻,5_10°C冷藏24小時,濾過,沉淀以5-10°C的83.75%乙醇洗滌一次,濾過,合并濾液,調(diào)PH值至7.9,5_10°C冷藏12小時,濾過,濾液回收乙醇并濃縮至相對密度在40°C為1.40?1.50的清膏,加入注射用水,在5-10°C溫度條件下冷藏12小時,濾過,濾液調(diào)PH = 7.0,加熱煮沸30分鐘,5_10°C冷藏72小時,濾過,濾液以截留分子量為10000的超濾柱超濾,超濾液濃縮冷凍干燥得干粉狀藥物,其冷凍溫度為-5至-10°C,得干粉狀藥物,經(jīng)加注射用水即成注射劑,所述注射劑的濃度為每I毫升固體含量為55-65mg,每Ig干粉狀藥物中的紅景天甙的含量多5mg,酪醇的含量彡3.2mg,多糖的含量彡340mg?2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,其特征在于:所述溶液提取包括以下步驟: (1)將高原紅景天藥材根莖進(jìn)行干燥,并粉碎成10?60目的粉末; (2)將所述步驟(I)所得的粉末采用超臨界二氧化碳技術(shù)萃取紅景天藥材中的油脂類物質(zhì),并得殘留物; (3)在殘留物中加入溶劑水,進(jìn)行微波提取或加熱直接回流提取后離心得提取液和提取殘渣;其中料液重量體積比為1: 10?1: 30 ; (4)將所述步驟(3)中的提取液進(jìn)行濃縮,完成溶液提取。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,其特征在于:所述步驟(2)中的超臨界二氧化碳技術(shù)所采用的萃取條件是指壓力為40?50MPa、溫度為35?55°C、時間為60?120min。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,其特征在于:所述步驟(3)中的微波提取條件是指提取溫度為45?90°C、提取功率為180?30W、提取時間為1.5?5min。5.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,其特征在于:所述步驟(3)中的加熱直接回流提取條件是指加熱溫度為85?100°C,回流提取時間為1.5?3h。
【專利摘要】本發(fā)明公開了利用高原紅景天制備治療冠心病心絞痛的藥物方法,利用高原紅景天為原料,經(jīng)提取干燥、加注射用水制成,其工藝如下:取高原紅景天中藥材進(jìn)行溶液提取,濾過,薄膜濃縮成相對密度為在40℃溫度下1.25~1.40的濃縮液;所述注射劑的濃度為每1毫升固體含量為55-65mg,每1g干粉狀藥物中的紅景天甙的含量≥5mg,酪醇的含量≥3.2mg,多糖的含量≥340mg。藥理實驗表明具有明顯改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用,減輕心肌損傷程度,明顯降低血清磷酸肌酸激酶(CK)含量,可明顯擴(kuò)張冠脈血管,降低冠脈阻力。經(jīng)靜脈給藥或口服給藥對心血瘀阻引起的胸痹心痛(冠心病心絞痛)起效快、效果明顯、作用持久。
【IPC分類】A61K36/41, A61P9/10
【公開號】CN104983775
【申請?zhí)枴緾N201510396363
【發(fā)明人】周潔
【申請人】成都易創(chuàng)思生物科技有限公司
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年7月8日