純化后的側(cè)柏葉多酚洗脫液進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，后進行冷凍干燥，得到側(cè)柏葉多酚固體粉末產(chǎn)品。
[0019]進一步優(yōu)化地，步驟(2)的超高壓浸提條件為:溶劑為水，料液比為1:15 ~ 1: 30g/mL，用包裝袋密封后置于聚四氟乙烯傳壓套筒內(nèi)，控制浸提液溫度30 ~ 40°C，高壓處理條件為 100 MPa -450 MPa，保壓時間 10 min~20 min。
[0020]進一步優(yōu)化地，步驟(2)的常壓高溫浸提條件為:高壓處理后的濾渣加熱水至料液比為1:10~ 1: 15 g/mL，熱水溫度為70 ~ 95 ° C，浸提時間為3 ~ 6 h。
[0021]進一步優(yōu)化地，步驟(2)所述離心的條件均為4000 r/min, 15 min。
[0022]進一步優(yōu)化地，步驟(3)與步驟(5)所述真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮的溫度為70° C。
[0023]進一步優(yōu)化地，步驟(4)的大孔吸附樹脂純化中，所采用的樹脂型號為HPD 300、HPD 600^ HPD 722、D101、NKA-9、ADS-5、ADS-17 中的一種或多種。
[0024]進一步優(yōu)化地，步驟(4)的大孔吸附樹脂純化中，所采用的洗脫溶劑是體積分數(shù)為30% ~ 80%的乙醇。
[0025]經(jīng)黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗證明該側(cè)柏葉多酚具有良好的降尿酸活性，可用于制備具有降尿酸功效的功能性食品或高尿酸血癥、痛風等疾病的輔助治療藥物。
[0026]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點和技術(shù)效果:
本發(fā)明所獲得的側(cè)柏多酚具有簡單易得、安全性好、熱穩(wěn)定性好的優(yōu)點，經(jīng)黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗證明側(cè)柏葉多酚具有良好的降尿酸活性，可用于具有降尿酸功效的功能性食品或高尿酸血癥、痛風等疾病的輔助治療藥物。本發(fā)明的制備工藝簡單合理、綠色環(huán)保，并且易于實現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0027]圖1為大孔吸附樹脂純化側(cè)柏葉多酚柱層析洗脫曲線圖。
[0028]圖2為側(cè)柏葉多酚PFl的紅外光譜圖。
[0029]圖3為側(cè)柏葉多酚PFl的液質(zhì)連用(LC-MS)譜圖。
[0030]圖4為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物I的質(zhì)譜圖。
[0031]圖5為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物2的質(zhì)譜圖。
[0032]圖6為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物3的質(zhì)譜圖。
[0033]圖7為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物4的質(zhì)譜圖。
[0034]圖8為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物5的質(zhì)譜圖。
[0035]圖9為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物6的質(zhì)譜圖。
[0036]圖10為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物7的質(zhì)譜圖。
[0037]圖11為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物8的質(zhì)譜圖。
[0038]圖12為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物9的質(zhì)譜圖。
[0039]圖13為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物10的質(zhì)譜圖。
[0040]圖14為側(cè)柏葉多酚PFl液質(zhì)連用分析化合物11的質(zhì)譜圖。
[0041]圖15為側(cè)柏葉多酚PFl對黃嘌呤氧化酶抑制作用效果。
【具體實施方式】
[0042]以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的實施作進一步說明，但本發(fā)明的實施不限于此。
[0043]實施例1:
(I)將150g側(cè)柏葉于50。C下干燥6 h，然后用打粉機粉碎，得側(cè)柏葉粉末。
[0044](2)將側(cè)柏葉粉末與水按料液比1:15g/mL混合攪拌均勻，用包裝袋密封后置于聚四氟乙烯傳壓套筒內(nèi)，于超高壓下浸提，控制處理過程中樣品溫度35°C，高壓處理條件為450 MPa，保壓時間lOmin。處理結(jié)束后將浸提液離心(4000 r/min，15 min)，收集濾液。
[0045](3)將高壓處理后的濾渣加熱水至料液比為1: 15 g/mL，熱水溫度為70。C，浸提時間為6 ho將所得浸提液離心(4000 r/min, 15 min)，收集濾液。
[0046](4)合并兩次浸提濾液，采用抽濾法去除不溶物，取濾液于70° C下進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮；
(5)利用大孔吸附樹脂ADS-17純化步驟(4)濃縮后的粗提取液，上樣時樣品濃度為0.60 mg/mL，先后采用30%和60% (體積分數(shù))的乙醇水溶液進行梯度洗脫，每個濃度的洗脫劑用量為2倍柱體積(柱型號:Φ 2.6 cm X 20 cm)，洗脫液流速為I mL/min，以洗脫液中總酚含量為評價指標，收集側(cè)柏葉多酚在40%乙醇洗脫下的洗脫峰，記為PFl組分。
[0047](6)對大孔吸附樹脂純化后的側(cè)柏多酚PFl組分洗脫液在70。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，后進行冷凍干燥，得到側(cè)柏葉多酚PFl組分固體粉末產(chǎn)品。側(cè)柏葉多酚大孔樹脂純化洗脫曲線如圖1。
[0048]實施例2:
(I)將150g側(cè)柏葉于70。C下干燥5 h，然后用打粉機粉碎，得側(cè)柏葉粉末。
[0049](2)將側(cè)柏葉粉末與水按料液比l:20g/mL混合攪拌均勻，用包裝袋密封后置于聚四氟乙烯傳壓套筒內(nèi)，于超高壓下浸提，控制處理過程中樣品溫度35°C，高壓處理條件為300 MPa，保壓時間15 min。處理結(jié)束后將浸提液離心(4000 r/min, 15 min)，收集濾液。
[0050](3)將高壓處理后的濾渣加熱水至料液比1: 12 g/mL，熱水溫度為80。C，浸提時間為4 ho將所得浸提液離心(4000 r/min, 15 min)，收集濾液。
[0051](4)合并兩次浸提濾液，采用抽濾法去除不溶物，取濾液于70° C下進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。
[0052](5)利用大孔吸附樹脂HPD-300純化步驟(4)濃縮后的粗提取液，上樣時樣品濃度為0.50 mg/mL，先后采用40%和70% (體積分數(shù))的乙醇水溶液進行梯度洗脫，每個濃度的洗脫劑用量為2倍柱體積(柱型號:Φ 2.6 cm X 20 cm)，洗脫液流速為I mL/min，以洗脫液中總酚含量為評價指標，收集側(cè)柏葉多酚在40%乙醇洗脫下的洗脫峰，記為PFl組分。
[0053](6)對大孔吸附樹脂純化后的側(cè)柏葉多酚PFl組分洗脫液在70。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，后進行冷凍干燥，得到側(cè)柏葉多酚PFl組分固體粉末產(chǎn)品(側(cè)柏葉多酚大孔樹脂純化洗脫曲線可參考圖1)。
[0054]實施例3:
(I)將側(cè)柏葉于90。C下干燥3 h，然后用打粉機粉碎，得側(cè)柏葉粉末。
[0055](2)將側(cè)柏葉粉末與水按料液比1:30g/mL混合攪拌均勻，用包裝袋密封后置于聚四氟乙烯傳壓套筒內(nèi)，于超高壓下浸提，控制處理過程中樣品溫度35°C，高壓處理條件為100 MPa，保壓時間20 min。處理結(jié)束后將浸提液離心(4000 r/min, 15 min)，收集濾液。
[0056](3)將高壓處理后的濾渣加水至料液比1: 10 g/mL，熱水溫度為95。C，浸提時間為3 ho將所得浸提液離心(4000 r/min, 15 min)，收集濾液。
[0057](4)合并兩次浸提濾液，采用抽濾法去除不溶物，取濾液于70° C下進行真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。
[0058](5)利用大孔吸附樹脂D-101純化步驟(4)濃縮后的粗提取液，上樣時樣品為0.50 mg/mL，先后采用50%和80% (體積分數(shù))的乙醇水溶液進行梯度洗脫，每個濃度的洗脫劑用量為2倍柱體積(柱型號:Φ 2.6 cm X 20 cm)，洗脫液流速為I mL/min，以洗脫液中總酚含量為評價指標，收集側(cè)柏葉多酚在40%乙醇洗脫下的洗脫峰，記為PFl組分。
[0059](6)對大孔吸附樹脂純化后的側(cè)柏葉多酚PFl組分洗脫液在70。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，后進行冷凍干燥，得到側(cè)柏葉多酚PFl組分固體粉末產(chǎn)品(側(cè)柏葉多酚大孔樹脂純化洗脫曲線可參考圖1)。
[0060]按以上實施例1制得的側(cè)柏葉多酚PFl組分通過以下方法進行結(jié)構(gòu)鑒定和活性分析，實施例2和3的結(jié)果與實施例1類似。
[0061]1、側(cè)柏葉多酚的紅外光譜分析
取側(cè)柏葉多酚PFl樣品2.0 mg,加入適量干燥的KBr粉末，混合均勻，在瑪瑙研缽中研磨