同期比較，AAP〈0. 01。
[0083] 3、醉馬草提取物對慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠敞箱活動的影響
[0084] 結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠水平運動得分、垂直運動得分顯著降低 (P〈0. 05);與模型組比較，醉馬草提取物①~③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠水平運 動、垂直運動得分顯著增加（P〈〇. 05)，醉馬草提取物④~⑤低、中、高劑量組大鼠水平運動、 垂直運動得分均無明顯差異，見表3。
[0085] 表3醉馬草提取物對慢性應(yīng)激抑郁大鼠敞箱活動行為的影響n= 12)
[0086]

[0088] 注：與模型組比較，*P〈0. 05, **P〈0. 01 ;與空白組比較，AP〈0. 05。
[0089] 4、醉馬草提取物對慢性應(yīng)激模型大鼠跳臺錯誤次數(shù)的影響
[0090] 結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠訓(xùn)練期錯誤次數(shù)和測試期錯誤次數(shù)顯著增 加（P〈0. 05);與模型組比較，醉馬草提取物①~③中、高劑量組及鹽酸氟西汀組大鼠訓(xùn)練 期錯誤次數(shù)和測試期錯誤次數(shù)顯著降低（P〈〇. 05)，醉馬草提取物④~⑤低、中、高劑量組大 鼠訓(xùn)練期錯誤次數(shù)和測試期錯誤次數(shù)均無明顯差異，見表4。
[0091] 表4醉馬草提取物對慢性應(yīng)激抑郁大鼠跳臺錯誤次數(shù)的影響（￡起,n= 12)
[0092]
[0093
[0094] 注：與模型組比較，*P〈0.05，#P〈0.01 ;與空白組比較，AAP〈0.01。
[0095] 5、醉馬草提取物對慢性應(yīng)激模型大鼠大腦皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響
[0096] 結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5_HT含量明顯降 低（P〈0. 05);與模型組比較，醉馬草提取物①~③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠腦內(nèi) 單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT含量明顯升高（P〈0. 05)，醉馬草提取物④~⑤低、中、高劑量組大 鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT含量均無明顯差異，見表5。
[0097] 表5醉馬草提取物對慢性應(yīng)激模型大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響（it:s,n= 12,ng/g)
[0098]

[0099] 注：與模型組比較，*P〈0. 05, #P〈0. 01 ;與空白組比較，AP〈0. 05。
[0100] 本實驗運用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激和孤養(yǎng)兩種經(jīng)典方法，建立大鼠抑郁癥模 型，經(jīng)糖水消耗測定、行為學(xué)評分，證實該模型基本模擬了抑郁癥患者的快感缺乏、興趣缺 失、精神運動遲滯、學(xué)習(xí)記憶能力下降等抑郁表現(xiàn)。醉馬草提取物①~③在糖水消耗、水平、 垂直運動及跳臺錯誤次數(shù)方面均較模型組有明顯改善（P〈〇. 05)，證明醉馬草提取物①~③ 有良好的抗抑郁作用。本實驗研究中，造模后大鼠體質(zhì)量增長顯著減慢甚至下降，而陽性藥 及醉馬草提取物①~③可改善其體質(zhì)量下降。當(dāng)前國外許多學(xué)者對慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng) 激（CUMS)大鼠模型體質(zhì)量增長或減少的變化意見不一。在實際生活中抑郁癥患者有的厭 食、體質(zhì)量下降，有的貪食、體質(zhì)量增加，因此兩種結(jié)論在理論上并不矛盾。在抑郁癥的發(fā)病 機制研究中，腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)，如去甲腎上腺素、5-HT和多巴胺等功能不足，早已得到普遍 公認(rèn)。額葉皮質(zhì)、杏仁核、海馬和下丘腦等4個關(guān)鍵大腦結(jié)構(gòu)的功能與人類情感活動關(guān)系密 切，本實驗研究顯示慢性應(yīng)激大鼠前額皮質(zhì)內(nèi)5-HT、NE含量明顯降低，醉馬草提取物①~ ③能提高皮質(zhì)5-HT、NE的含量（P〈0. 05)。表明醉馬草提取物①~③對前額皮質(zhì)的單胺神 經(jīng)遞質(zhì)具有調(diào)節(jié)作用，是其抗抑郁作用的機制之一。
[0101] 醉馬草提取物在大鼠慢性應(yīng)激抑郁癥動物模型上表現(xiàn)出的有效性，以及對腦內(nèi)單 胺神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用，與醉馬草和添加物甘草的比例有關(guān)，二者比例過高或過低均不能 實現(xiàn)抗抑郁的效果。
[0102] 實施例8 :片劑的制備
[0103] 按實施例1方法先制得提取物，按其與賦形劑重量比為1:8的比例加入賦形劑，制 粒壓片。
[0104] 實施例9 : 口服液的制備
[0105] 按實施例1方法先制得提取物，按常規(guī)口服液制法制成口服液。
[0106] 實施例10 :膠囊劑或顆粒劑的制備
[0107] 按實施例1方法先制得提取物，按其與賦形劑重量比為1:9的比例加入賦形劑，制 成膠囊或顆粒劑。
[0108] 實施例11 :注射液的制備
[0109] 按實施例1方法制得提取物，加注射用水，精濾，灌封滅菌制成注射液。
[0110] 實施例12 :無菌粉針的制備
[0111] 按實施例1方法先制得提取物，溶于無菌注射用水中，攪拌使溶，用無菌抽濾漏斗 過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿，低溫冷凍干燥后無菌熔封得粉針劑。
[0112] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種醉馬草提取物，其特征在于所述提取物由以下方法制備：(a)以重量計，每100 份藥材包含干燥的醉馬草80~90份和干燥的甘草10~20份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回 流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；（c)對步驟（b)濃縮液依次用石油醚、乙 酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20~30%乙醇沖洗7~9個柱體積除去多糖，再 用55~65%乙醇洗脫9~11個柱體積，收集55~65%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于：步驟（d)中所述大孔樹脂為AB-8型大 孔樹脂。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于：步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采 用的乙醇濃度為65~75%。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的提取物，其特征在于：步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采 用的乙醇濃度為70%。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于：步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹 脂富集，先用25 %乙醇沖洗8個柱體積除去多糖，再用60 %乙醇洗脫10個柱體積，收集 60%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于：所述提取物的液相分析方法為： 色譜柱：Agilent Zorbax SB C18 柱（4.6mmX250mm，5iim); 流動相：A為乙腈，B為0. 1 %磷酸水溶液； 梯度洗脫程序：0.01~151^11，4 25%~35%;15~25111111，4 35%~50%;25~32111111， A 50% ;32 ~35min，A 50%~25% ;35 ~40min，A 25% ; 流動相流速：1. OmL ? min S 檢測波長：260nm ; 柱溫：30°C ; 進(jìn)樣量：10yL。7. 藥物制劑，其特征在于：含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的提取物和藥學(xué)上可接 受的載體。8. 權(quán)利要求1所述的提取物在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。9. 權(quán)利要求7所述的藥物制劑在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗抑郁作用的醉馬草提取物及其制備方法，制備方法包括：(a)以重量計，每100份藥材包含干燥的醉馬草80～90份和干燥的甘草10～20份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；(c)對步驟(b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20～30％乙醇沖洗7～9個柱體積除去多糖，再用55～65％乙醇洗脫9～11個柱體積，收集55～65％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。醉馬草提取物在糖水消耗、水平、垂直運動及跳臺錯誤次數(shù)方面均較模型組有明顯改善，證明該提取物有良好的抗抑郁作用，可以用來制備抗抑郁的藥物。
【IPC分類】A61P25/24, A61K36/484, G01N30/02, A61K36/48
【公開號】CN105106294
【申請?zhí)枴緾N201510589081
【發(fā)明人】周午賢
【申請人】周午賢
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年9月13日