棉，蠶絲或者果纖維等，本發(fā)明對(duì)此不 進(jìn)行限制，只要能夠證明其生物安全性，且能夠使膠原蛋白溶液更好的依附在基質(zhì)上即可。
[0040] 為了提高本發(fā)明膠原蛋白敷料貼的保濕效果，提高局部濕度，保持皮膚角質(zhì)層水 分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性，加速皮膚的血液循環(huán)，促進(jìn)皮膚的新陳代謝，防止角質(zhì)過度角化， 優(yōu)選的，所述膠原蛋白溶液中還包含少量的氨基酸，該氨基酸的濃度本發(fā)明對(duì)此不進(jìn)行限 制，只要能夠提高本發(fā)明膠原蛋白敷料貼的保濕效果即可，優(yōu)選的本發(fā)明實(shí)施例的氨基酸 的質(zhì)量濃度為〇. 5mg/mL。
[0041] 另一方面，本發(fā)明的實(shí)施例還提供一種膠原蛋白敷料貼，在痤瘡、面部激光、光子 治療術(shù)后的修復(fù)及護(hù)理中的應(yīng)用。
[0042] 下面通過臨床試驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明的膠原蛋白敷料貼的應(yīng)用效果：
[0043] 臨床試驗(yàn)一，將本發(fā)明的膠原蛋白敷料貼應(yīng)用于修復(fù)痤瘡：
[0044] 一、病例選擇
[0045] 尋找痤瘡患者試用膠原敷料貼，檢測(cè)評(píng)價(jià)膠原敷料貼在痤瘡治療過程中的安全性 及有效性。
[0048] 在臨床試驗(yàn)中，本發(fā)明的膠原蛋白敷料貼的使用方法為，前一周每天將一片本發(fā) 明制備的膠原蛋白敷料貼貼一片在痤瘡部位，一周后隔天敷貼，每次敷貼25~45分鐘，兩 周為一個(gè)療程，共計(jì)兩個(gè)療程。由于膠原蛋白含天然保濕因子和親水基團(tuán)，甘氨酸、丙氨酸、 天門冬氨酸和絲氨酸的含量都比較豐富，可起到保濕作用，提高局部濕度，保持皮膚角質(zhì)層 水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性，加速皮膚的血液循環(huán)，促進(jìn)皮膚的新陳代謝，防止角質(zhì)過度角 化，且本發(fā)明制備的膠原蛋白敷料貼提供的微酸性（PH為4~6)環(huán)境，直接抑制和殺滅細(xì) 菌。同時(shí)微酸環(huán)境還可以促進(jìn)白細(xì)胞介導(dǎo)的宿主吞噬細(xì)胞發(fā)揮局部殺菌力，溶解和軟化角 質(zhì)層，改善皮脂腺的分泌排泄，并有利于油脂分解。最終達(dá)到治愈痤瘡的效果。
[0049] 臨床試驗(yàn)二，將本發(fā)明的膠原蛋白敷料貼應(yīng)用于術(shù)后修復(fù)：
[0050] 一、病例選擇
[0051] 通過尋找強(qiáng)脈沖光（光子）術(shù)后志愿者試用敷料貼，檢測(cè)評(píng)價(jià)膠原敷料貼在光子 手術(shù)后皮膚修復(fù)方面的安全性及有效性。水嫩，干紋緩解。
[0053] 在臨床試驗(yàn)中，本發(fā)明的膠原蛋白敷料貼的使用方法為，前五天每天敷貼一片，五 天后隔天敷貼，每次敷貼20分鐘，十五天為一個(gè)療程，共計(jì)兩個(gè)療程。由于膠原蛋白對(duì)皮膚 有較強(qiáng)的滲透性，可透過角質(zhì)層與皮膚上皮細(xì)胞結(jié)合，參與和改善皮膚細(xì)胞的代謝，使皮膚 中的膠原蛋白活性加強(qiáng)，能夠保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性，改善皮膚細(xì)胞生存環(huán) 境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝，增強(qiáng)血液循環(huán)，達(dá)到滋潤(rùn)皮膚的目的。將膠原蛋白制作成敷 料貼敷于臉部，能夠?qū)⒒钚阅z原蛋白能直接滲入肌膚底層，與周圍組織的親和性好，可加快 膠原蛋白的生成速度，促進(jìn)皮膚細(xì)胞正常生長(zhǎng)。此外，膠原蛋白具有引導(dǎo)上皮細(xì)胞迀入缺損 區(qū)的能力，誘導(dǎo)產(chǎn)生趨化因子如血小板生長(zhǎng)因子和纖維連接蛋白等，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)有趨化 作用，對(duì)細(xì)胞的分化、運(yùn)動(dòng)、化學(xué)趨向性結(jié)締組織的修復(fù)等均起重要作用，從而改善表皮細(xì) 胞微環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織新陳代謝，達(dá)到消炎和更新肌膚的作用，進(jìn)而起到縮短術(shù)后恢復(fù) 時(shí)間的效果。
[0054] 第三方面，本發(fā)明實(shí)施例提供一種膠原蛋白敷料貼的制備方法，參見圖1，包括：
[0055] S1、將包含大分子膠原蛋白和小分子膠原蛋白的膠原蛋白溶液充分溶解于質(zhì)量濃 度為0.05%~0. 1%的稀酸溶液中，得到膠原蛋白初溶液；其中，所述大分子膠原蛋白的分 子量大于等于300KD，所述小分子膠原蛋白的分子量小于300KD ;
[0056] S2、向所述膠原蛋白初溶液中加入醫(yī)用防腐劑溶液，得到膠原蛋白溶液；
[0057] S3、將所述膠原蛋白溶液灌入無菌鋁箱袋中，封口、包裝后得到所述膠原蛋白敷料 貝占，所述無菌鋁箱袋中放置有用于附著所述膠原蛋白溶液的基質(zhì)。
[0058] 本發(fā)明實(shí)施例提供一種膠原蛋白敷料貼的制備方法，通過將包含大分子膠原蛋白 和小分子膠原蛋白的膠原蛋白溶液充分溶解于質(zhì)量濃度為〇. 05%~0. 1%的稀酸溶液中， 得到膠原蛋白溶液；其中，所述大分子膠原蛋白的分子量大于等于300KD，所述小分子膠原 蛋白的分子量小于300KD，向所述膠原蛋白溶液中加入醫(yī)用防腐劑溶液；將所述膠原蛋白 溶液灌入無菌鋁箱袋中，封口、包裝后得到所述膠原蛋白敷料貼，所述無菌鋁箱袋中放置有 用于附著所述膠原蛋白溶液的基質(zhì)，采用本發(fā)明實(shí)施例提供的一種膠原蛋白敷料貼的制備 方法制備的膠原蛋白敷料貼充分保留了膠原的大分子活性結(jié)構(gòu)；該膠原蛋白敷料貼充分保 留了膠原的大分子活性結(jié)構(gòu)并使用無毒無刺激的醫(yī)用防腐劑溶液，從而具有良好的生物相 容性，無刺激性、無過敏性，安全性，及良好的保濕型、貼附性等優(yōu)點(diǎn)，由于膠原蛋白敷料貼 具有良好的生物相容性，無刺激性、無過敏性，安全性，及良好的保濕型、貼附性等優(yōu)點(diǎn)，可 供臨床用于輕中度炎癥、較輕痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、早期淺表性疤痕的治療；皮膚 過敏，激光、光子治療術(shù)后疤痕形成的輔助性治療；在創(chuàng)面愈合期減輕色素沉著和促進(jìn)創(chuàng)面 的愈合。
[0059] 其中，稀酸是指酸性溶液中溶質(zhì)少溶劑多的酸性溶液，為了使膠原蛋白更好的在 稀酸溶液中分解，本發(fā)明實(shí)施例的稀酸優(yōu)選的采取檸檬酸，現(xiàn)有技術(shù)中采用乙酸作為稀酸 溶解膠原蛋白，但是由于乙酸具有一定的刺激性氣味，且乙酸揮發(fā)性強(qiáng)，為了避免因乙酸的 揮發(fā)使得到的膠原蛋白溶液在保存時(shí)不穩(wěn)定，影響膠原敷料貼的使用，本發(fā)明實(shí)施例優(yōu)選 采用無味無刺激無揮發(fā)的檸檬酸溶液，將包含大分子膠原蛋白和小分子膠原蛋白的膠原蛋 白溶液充分溶解于質(zhì)量濃度為〇. 05 %~0. 1 %的檸檬酸溶液中不僅能使得到的溶液體系 穩(wěn)定、無刺激性氣味，相比于乙酸，對(duì)膠原蛋白溶液的PH值影響較小，使膠原能夠最大程 度的溶解，對(duì)膠原敷料貼的性能無影響，產(chǎn)品無酸性氣味且在達(dá)到同樣PH值（如4. 0~ 6.0)時(shí)，檸檬酸的用量比乙酸要小，故可在一定程度上降低成本。優(yōu)選的，本發(fā)明的稀酸為 0. 05%~0. 1 %的檸檬酸溶液。
[0060] 為了獲取效果更好的膠原蛋白敷料貼，本發(fā)明對(duì)膠原蛋白初溶液的質(zhì)量濃度不 進(jìn)行限制，只要保證向膠原蛋白初溶液中加入醫(yī)用防腐劑溶液以后，得到的膠原蛋白溶液 的質(zhì)量濃度大于等于0. 5mg/mL即可，優(yōu)選的，本發(fā)明實(shí)施例的膠原蛋白溶液的質(zhì)量濃度為 0· 5mg/mL〇
[0061] 如圖2所示，為了避免溫度過高對(duì)膠原蛋白粘度的影響以及膠原蛋白分子受熱迅 速解螺旋發(fā)生斷裂，失去活性，本發(fā)明實(shí)施例優(yōu)選的在2~6°C下將包含大分子膠原蛋白和 小分子膠原蛋白的膠原蛋白溶液充分溶解于質(zhì)量濃度為〇. 05%~0. 1 %的稀酸溶液中。如 圖2所示，圖2中縱軸表示膠原蛋白的相對(duì)粘度，橫軸表示溫度，從圖2中的曲線變化可以 看出，膠原蛋白在最初升溫階段粘度降低速度不明顯，這與膠原蛋白的蛋白質(zhì)大分子的伸 展性能有關(guān)；之后隨著溫度的增高，膠原蛋白的粘度迅速降低，蛋白質(zhì)分子受熱迅速解螺旋 便發(fā)生斷裂，黏度降低的速率較大，這與膠原蛋白的結(jié)構(gòu)緊密度有關(guān)系。由圖2可知，牛皮 膠原蛋白變性溫度在40°C附近。
[0062] 優(yōu)選的，為了所得膠原蛋白敷料貼使用時(shí)既能達(dá)到較好的使用效果，又能避免浪 費(fèi)，所述S3中的膠原蛋白溶液的體積為20mL~25mL。
[0063] 為了避免膠原蛋白的熱變性及防止膠原蛋白的各種次級(jí)鍵斷裂，本發(fā)明的一優(yōu)選 實(shí)施例中，在步驟S3之前還包括：調(diào)節(jié)所述膠原蛋白溶液的PH值至4. 0~6. 0。
[0064] 進(jìn)一步優(yōu)選的，為了使得所有的原料都可以溶解，避免所述膠原蛋白溶液中出現(xiàn) 沉淀物而所述膠原蛋白敷料的使用效果，可調(diào)節(jié)所述膠原蛋白溶液的PH值為4. 5。
[0065] 本發(fā)明對(duì)調(diào)節(jié)所述膠原蛋白溶液的PH值的方式不進(jìn)行限定，例如，可以使用 lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)所述膠原蛋白溶液的PH值至4. 0~6. 0,可以理解的，上述方式只是 本發(fā)明實(shí)施例的一種可選方式，并不對(duì)調(diào)節(jié)膠原蛋白溶液PH的實(shí)現(xiàn)方式構(gòu)成任何限制，例 如，可以根據(jù)需要選擇不同濃度的NaOH或者不同的堿性試劑調(diào)節(jié)膠原蛋白溶液的PH值。
[0066] 如圖3所示，示例性的，本發(fā)明實(shí)施例用0. 5mol/L乙酸溶液配制成4mg/ml的膠原 蛋白溶液，再用5mol/L HCl與5mol/L NaOH調(diào)節(jié)pH值至2~10(間隔為1.0)，測(cè)定分析 膠原蛋白溶液在不同PH值條件下粘度的變化，由于膠原蛋白溶液的PH值對(duì)牛皮膠原蛋白 粘度的影響比較明顯。如圖3所示，縱軸表示牛皮膠原蛋白的粘度，橫軸表示膠原蛋白溶液 的PH值，在所測(cè)定的PH值范圍內(nèi)，當(dāng)膠原蛋白溶液的PH值為3. 0左右時(shí)牛皮膠原蛋白的 粘度最大，當(dāng)膠原蛋白溶液的PH值在6. 0左右牛皮膠原蛋白的粘度達(dá)到最低值，出現(xiàn)一個(gè) 波谷，此后又有所上升。牛皮膠原蛋白的等電點(diǎn)在6.0附近，在等電點(diǎn)附近蛋白質(zhì)分子不帶 電荷，牛皮膠原蛋白的蛋白質(zhì)分子相聚集沉淀，使溶解度下降，膠原蛋白溶液的中溶解的膠 原蛋白濃度下降，因此會(huì)導(dǎo)致牛皮膠原蛋白的粘度大幅度下降。而當(dāng)膠原蛋白溶液的PH為 9.0時(shí)牛皮膠原蛋白的粘度又開始上升，是因?yàn)樵趶?qiáng)堿作用下，膠原蛋白分子上的正負(fù)電荷 增多，電荷間強(qiáng)烈的排斥作用會(huì)引起膠原蛋白的各種次級(jí)鍵斷裂，二、三級(jí)結(jié)構(gòu)破壞，膠原 蛋白分子的緊密構(gòu)象變成松散的無序狀態(tài)，從而使膠原蛋白粘度增加。由于從牛皮中提取 的膠原蛋白在2. 5 < pH < 3. 0時(shí)粘度