制備工藝，該方法包括如下步驟： (1) 原料的處理：將柴胡、黃琴、半夏、蒼術(shù)、白術(shù)、云等、山植、木香、草決明、垂盆草、澤 蘭、黨參、牡頗分別進行精選，按權(quán)利要求1-4之一的重量份數(shù)比，準確稱量，備用； (2) 制作：將柴胡、黃琴、半夏、蒼術(shù)、白術(shù)、云等、山植、木香、草決明、垂盆草、澤蘭、黨 參、牡頗十=味中藥材，分別加=倍體積量水煎煮=次，收集揮發(fā)油，每次1. 5小時，合并濾 液，并減壓濃縮至相對密度為1. 2,趁熱按浸膏量W-定比例加入可溶性淀粉，浸膏：可溶 性淀粉=25:1，攬拌后，噴霧干燥，粉碎成120目粉末； (3)將制得的粉末，加入到3倍體積的40°C食用植物油，所述的植物油是玉米或者大豆 色拉油，并加入提取的揮發(fā)油，用膠體磨進行均質(zhì)后，在不斷攬拌下，用有色或不透明的明 膠制成內(nèi)容物為0. 2-0. 4克的軟膠囊，打光干燥，包裝； (4)裝瓶：將制得的軟膠囊裝入瓶中，100粒/瓶。
[0037]實施例6: 實施例1-5所述的益肝寶軟膠囊及制備工藝，本工藝技術(shù)生產(chǎn)的益肝寶軟膠囊進藥理 和毒理實驗表明：是一種毒性低、對機體無任何明顯毒副作用的藥品。實驗研究如下： (1) 急性毒性試驗： 小鼠經(jīng)口半數(shù)致死量（LDJ的測定：取昆明系小鼠50只，體重18-21g/只，隨機分 為5組，每組10只，試驗前禁食10h后，用益肝寶軟膠囊（黑龍江大學生命科學學院制 備批號20141220)囊中藥液1次/天，經(jīng)口灌服，各組劑量分別20.00mg(生藥量）/kg， 42.00mg(生藥量）/kg，88. 20mg(生藥量）/kg，185. 22mg(生藥量）/kg，388.96mg(生 藥量）/kg，給藥后觀察1周，記錄動物的中毒癥狀及死亡情況，根據(jù)動物死亡情況計算 LD加， 1日1次最大耐受量（MTD)的測定：取昆明系小鼠20只，體重18-22g/只，用益腎養(yǎng) 元軟膠囊囊中藥液灌胃的最大濃度（生藥1.115g/mL)，此后連續(xù)觀察7d，此期間讓小鼠 自由進食和飲水； (2) 亞急性毒性試驗試驗方法： 雌性Wistar大白鼠60只，體重120-150g/只，預(yù)飼5d后，隨機分為4組，每組 15只，I組為對照組，II，III，IV組為用藥組，用藥組分別W益肝寶軟膠囊囊中藥液〇.2mL (1/ 10MTD)，0.67血（1/ 3MTD)和2血(MTD)的給藥劑量灌服，連續(xù)給藥60d，對照組給 予ImL的純化水，（注：大鼠MD為2ml益肝寶軟膠囊囊中藥液）， 每天觀察、記錄動物的精神狀態(tài)、進食活動及大小便情況，每周稱體重1次，在給藥 前和試驗結(jié)束后，于大鼠尾部采血，全血作血常規(guī)檢驗，血清作生化指標檢測，試驗結(jié)束后， 解剖動物，肉眼觀察各組織臟器的病變，稱取主要臟器（屯、臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟）的 濕重，并計算各臟器的臟器系數(shù)（臟器系數(shù)=臟器濕重/體重X100); 試驗結(jié)果 由于小鼠經(jīng)口半數(shù)致死量沒有測出，所W進行小鼠1日口服1次的最大耐受量的測 定，小鼠的1日口服1次的最大耐受量MD為，7d內(nèi)無一動物死亡，且小鼠攝食量正常， 體重增加，被毛有光澤、柔順，無稀便及其他異常表現(xiàn)，小鼠最大耐受量相當于人臨床用藥 量化343g中藥材/kg)的166. 7倍，說明益肝寶軟膠囊為安全性較大的藥物； 表1益肝寶軟膠囊對小鼠急性毒性試驗影響
注："+"代表有異常，"一"代表無異常 亞急性毒性試驗：一般情況試驗期間大鼠活動、食欲、毛色和糞尿未見異常，經(jīng)方差 分析，各用藥組動物的生長發(fā)育與對照組比較無明顯差異（P〉0. 05)，表明益肝寶軟膠 囊對大鼠的生長發(fā)育無不良影響，各組大鼠增重情況（見表1); 表2益肝寶軟膠囊對大鼠增重的影響（.X+S)
益肝寶軟膠囊對大鼠血常規(guī)和血清生化指標的影響，各組大鼠血常規(guī)和血清生化指 標之間比較無顯著差異（P〉〇. 05)。表明益肝寶軟膠囊對各種血液細胞、肝功能和腎功 能無不良影響。
[003引表3益肝寶軟膠囊對大鼠血常規(guī)指標的影響（X±巧
表5益肝寶軟膠囊對大鼠臟器系數(shù)的影響（X+Sg) 表5益肝寶軟膠囊對大鼠臟器系數(shù)的影響（X±Sg)
益肝寶軟膠囊對大鼠臟器系數(shù)的影響，結(jié)果見表4,各組大鼠臟器系數(shù)之間比較差異不 顯著（P〉0. 05)，表明益肝寶軟膠囊對大鼠主要實質(zhì)性器官無明顯的損害作用，益肝寶 軟膠囊經(jīng)口給藥的小鼠最大耐受量不低于55. 75g/kg，血常規(guī)的檢測說明益肝寶軟膠囊對 大鼠的各種血細胞W及骨髓造血機能無不良影響，對血清中堿性憐酸酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋 白、白蛋白和肌酢的檢測表明，益肝寶軟膠囊對大鼠的肝功能無影響，血清尿素氮水平是反 映腎功能的重要指標，檢測結(jié)果顯示其在正常范圍內(nèi)變化，腎功能未見異常，說明對腎功能 無不良影響，臟器系數(shù)是毒理學中反映受試物對某些臟器損害程度的靈敏而有效的指標， 結(jié)果表明益肝寶軟膠囊對屯、、肝、脾、肺和腎等實質(zhì)性器官無損害作用，試驗結(jié)果表明益肝 寶軟膠囊毒性比較低，可確保臨床安全使用，益肝寶軟膠囊可采用不同顏色的透明和不透 明的囊材，能有效地掩蓋異味，方便患者，還可W在囊材上印上文字或符號，增加了外觀的 美感，服用的情趣和便于識別，提高了質(zhì)量和檔次； 藥理研究結(jié)果明確表明：益肝寶軟膠囊能有效改善高脂肪對小鼠肝臟的損傷和恢復(fù)肝 功能的生理指標，效果與服用劑量有直接關(guān)系，益肝寶軟膠囊有效防治肝臟脂肪化病變療 效確切，并證明益肝寶軟膠囊效果明顯好于相同處方益腎養(yǎng)元湯劑劑型。
[0039] 藥理實驗：益肝寶軟膠囊對高脂肪飼料小鼠的影響，取體重18-22g，健康雄性昆 明種小鼠80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，實驗動物分為五組，各組分別標記，設(shè)生理鹽水對照 組20只小鼠，正常飼養(yǎng)，每天灌喂ImL生理鹽水，4周后處死取樣，作為空白對照組1，另外 10只繼續(xù)每天灌喂ImL生理鹽水，飼養(yǎng)到第九周后處死取樣，作為空白對照組2。設(shè)立高 脂肪實驗組40只小鼠，喂食高脂肪飼料（在基礎(chǔ)飼料中添加2%膽固醇，10%豬油，0. 5%膽 酸鋼），4周后處死取樣，作為高脂肪對照組1，其中10只繼續(xù)飼養(yǎng)到第九周后處死取樣， 作為高脂肪對照組2,另外取40只小鼠在喂食高脂肪飼料4周后，其中30只分成每10只 1組，每天分別加喂食一次益肝寶軟膠囊囊中藥液（黑龍江大學生命科學學院制備批號 20141220)0. 558g(生藥量)/kg、1.115g(生藥量)/kg、2.230g(生藥量)/kg，第九周后處死 取樣，作為益肝寶軟膠囊實驗組I(低劑量)、II(中劑量組)、111(高劑量組)，剩余10只小鼠 同法喂益肝寶湯劑1. 115g(生藥量）/kg(黑龍江大學生命科學學院制備批號20141219每 100ml含234g生藥)作為益肝寶湯劑對照組，在實驗過程中，隨時觀察試驗小鼠行為、飲食、 外觀、排泄、體重、死亡等情況，如有死亡，立即解剖，觀察臟器情況， 實驗處死的小鼠分別按照分組確立的采樣時間，小鼠禁食12h，稱重，斷頸取血，全血經(jīng)3000巧m離屯、lOmin，分離血清備用。分別采用硫憐鐵法及比色法分別檢測小鼠血清總膽固 醇的（TC)含量及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)活性，取血采樣后之后，解剖觀察小鼠與對照組觀 察各臟器外觀情況(顏色、性狀、有無渺血、壞死、脂肪化程度等)，特別仔細對照觀察肝臟外 觀變化，完整切除肝臟、并稱濕重，計算肝指數(shù)。（肝指數(shù)=(肝濕重/體重）X100%)并將肝 臟分割成小塊，投入10%甲醒中固定，石蠟包埋，切片，肥染色，光鏡下觀察。
[0040] 實驗結(jié)果： 實驗過程中空白對照1、2組：鼠毛柔順有光澤，體態(tài)活潑，反應(yīng)敏捷，食量、糞便均正常 解剖后，各組織器官均正常，肝臟外觀呈暗紅色，質(zhì)地柔軟，彈性好，邊緣銳，切面光滑，肝小 葉結(jié)構(gòu)正常。鏡檢核膜清楚光滑，完整，核仁清楚，胞漿染色新鮮均勻，細胞膜完整，界線清 楚，細胞充實，飽滿，肝索圍繞中央靜脈呈放射排列，肝竇大小正常，匯管區(qū)未見纖維組織增 生和炎細胞浸潤； 高脂肪對照1、2組：造模初期食欲好，體重增長迅速，但鼠毛欠光澤，糞便稀軟變黃，在 第13天開始出現(xiàn)食欲下降現(xiàn)象，并且在第16天開始明顯下降，其中高脂肪對照1組解剖 后肝臟體積增大（表1)，邊緣圓純，切面油膩，質(zhì)軟而脆，顏色泛白，組織出現(xiàn)脂肪性病變， 胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)脂滴，其中有部分細胞內(nèi)大脂滴將細胞核擠向一側(cè)，高脂肪對照2組4周后小 鼠體態(tài)呆板、肢體懈軟、糞便稀軟、食量明顯減少、毛欠光澤；解剖后小鼠肝臟體積增大嚴重 (表1)，邊緣圓純，切面油膩，顏色蒼白，鏡檢觀察肝臟肝小葉結(jié)構(gòu)欠清晰，肝細胞增大肝竇 消失，細胞核略小核膜增厚，染色質(zhì)略深染，胞漿內(nèi)充