要求為:冷季置于貼膚上衣胸前口袋, 熱季置于貼膚褲袋。
[0016] 較佳實(shí)施情況下,所述步驟3)將雞精液與稀釋液按比例1:1~1:2置于集精管中 的具體操作為:利用集精管采集規(guī)定用量雞精液,根據(jù)稀釋比例將已經(jīng)預(yù)熱的1~2倍體積 的稀釋液沿杯壁緩慢加入集精管內(nèi)。
[0017] 較佳實(shí)施情況下,所述步驟3)將雞精液與稀釋液按比例1:1~1:2置于稀釋液瓶 中的具體操作為:直接利用含有固定體積稀釋液的稀釋液瓶,逐個(gè)采集雞精液,直到達(dá)到需 要的稀釋比例1:1~1:2為止。
[0018] 較佳實(shí)施情況下,所述集精管或稀釋液瓶為高4-6cm,內(nèi)徑2cm,管口為2. 5~3cm 喇叭狀的試管。上述集精管或稀釋液瓶為喇叭狀的試管,喇叭口可用于緩存精液,如果有不 合格的,可以擦除。
[0019] 較佳實(shí)施情況下,所述步驟3)中混勻時(shí)用于密封管口或瓶口的膜狀物為帶有雙面 保護(hù)層的無(wú)菌薄膜或單層滅菌膠帶或一次性滅菌PE醫(yī)用手套。
[0020] 較佳實(shí)施情況下,所述步驟3)稀釋與混勻的具體操作為將雞精液與已經(jīng)預(yù)熱的稀 釋液按比例1:1~1:2置于集精管或稀釋液瓶中,取帶有雙面保護(hù)層的薄膜,撕下其中一面 保護(hù)層,將薄膜貼在手掌靠近手腕處,撕下薄膜的另一面保護(hù)層,手掌帶膜處覆蓋集精管管 口,利用手掌與中指或無(wú)名指之間的夾緊力反復(fù)顛倒集精管至管內(nèi)液體整體顏色呈均勻狀 態(tài),所述均勻狀態(tài)為集精管或稀釋液瓶中不含有白色不規(guī)則狀物質(zhì)。
[0021] 本發(fā)明的有益效果:1)本發(fā)明方法涉及的稀釋液配制步驟中,稀釋液中添加了新 型抗氧化劑番茄紅素,能顯著提高低溫保存雞精子的活力、生存指數(shù)、滲透壓抗性、DNA的完 整性,因而上述稀釋液可采用冷凍方式保存而非傳統(tǒng)的加抗生素冷藏,解決了雞精液稀釋 液必須現(xiàn)配現(xiàn)用的問(wèn)題,延長(zhǎng)了保質(zhì)期。
[0022] 2)本發(fā)明方法涉及的稀釋液分裝冷凍保存步驟中,根據(jù)輸精時(shí)采集一杯精液的體 積與稀釋比例確定一支稀釋液的體積,實(shí)現(xiàn)一杯精液一支稀釋液,省掉定量吸取稀釋液然 后緩緩添加到精液中的步驟,解決生產(chǎn)中定量稀釋操作繁瑣問(wèn)題,可實(shí)現(xiàn)2個(gè)小時(shí)內(nèi),3人 輸精1〇〇〇只母雞。
[0023] 3)在本發(fā)明研發(fā)初期,申請(qǐng)人通過(guò)測(cè)定不同環(huán)境與條件下原精稀釋前溫度如圖 1所示,確定了原精溫度參照標(biāo)準(zhǔn),曲線(xiàn)結(jié)果顯示,精液溫度在不同體積采集量及外界溫度 之下,其受影響較小,或者說(shuō)原精溫度較為穩(wěn)定,溫度在34. 1±1.25°C (也就是32. 85~ 35. 35°C之間)。依據(jù)上述參照標(biāo)準(zhǔn)可實(shí)現(xiàn)原精溫度相對(duì)的精確預(yù)測(cè)。
[0024] 4)本發(fā)明方法在實(shí)際生產(chǎn)操作中采精員在采精前先將稀釋液進(jìn)行體溫預(yù)熱,待精 液采集完畢立即與依靠體溫預(yù)熱的稀釋液混合后進(jìn)行輸精操作,實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明體溫預(yù)熱可 以滿(mǎn)足稀釋液預(yù)熱條件,按照上述方式預(yù)熱稀釋液對(duì)于稀釋后輸精的受精率就并無(wú)太大影 響,這樣反而簡(jiǎn)化了現(xiàn)有技術(shù)中稀釋液使用前需要恒溫水浴加熱的繁瑣操作問(wèn)題,又能實(shí) 現(xiàn)精液及時(shí)相對(duì)等溫稀釋。由圖1可知,在雞舍采取控溫條件下,由于采集速度快,精液采 出到稀釋前時(shí)間短,原精溫度受采集體積的影響小,但隨舍溫升高而升高,同時(shí)也發(fā)現(xiàn)與人 體溫預(yù)熱稀釋液的溫度也是隨環(huán)境溫度升高而升高。盡管隨著環(huán)境溫度變化,但采用貼膚 口袋(熱季褲袋與冷季上衣口袋)體溫預(yù)熱稀釋液方式,與原精采集后立即測(cè)定(即稀釋前 溫度),始終在±3°C范圍內(nèi),經(jīng)試驗(yàn)證明,能獲得很好的效果。同時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)也證明了按照 上述操作時(shí)只要保證稀釋液與雞精液之間的溫差處于±3°C之內(nèi)即可達(dá)到較好受精率,這 一結(jié)果無(wú)疑為后續(xù)研究人員指明了在精液稀釋時(shí)無(wú)需再?lài)?yán)格要求等溫標(biāo)準(zhǔn),解決了溫度精 確控制的難題,稀釋操作成功率可大大提高。
[0025] 5)本發(fā)明方法涉及的雞精液稀釋與混勻步驟通過(guò)薄膜、手部、集精管的三者結(jié)合, 在最大限度不改變目前工作現(xiàn)狀下巧妙實(shí)現(xiàn)了集精、稀釋與混勻一體可由1人完成,大大 降低了技術(shù)難度,縮減了設(shè)備與人力成本。
[0026] 6)本發(fā)明克服了現(xiàn)有雞稀釋精液人工輸精技術(shù)中只能按照將稀釋液加入到雞精 液中的技術(shù)偏見(jiàn),使反秩序添加并完成雞精液稀釋成為可能,實(shí)踐證明反秩序添加的步驟 可以實(shí)現(xiàn)邊采集邊稀釋?zhuān)軌蜃畲蟪潭壬鲜闺u精液得到及時(shí)稀釋?zhuān)从绊懛趸?,反而還有 所提高。反秩序添加簡(jiǎn)化了雞精液稀釋操作,同時(shí)為雞精液大批量檢測(cè)技術(shù)提供了新思路, 在實(shí)際操作中可以先準(zhǔn)備好大量含一定量稀釋液的離心管,可邊采集邊冷藏,每小時(shí)可采 集300份精液,再集中對(duì)稀釋的雞精液進(jìn)行大批量鏡檢,實(shí)行大批量高效率檢測(cè)。
[0027] 7)本發(fā)明方法與含有番茄紅素成分的雞精液稀釋液配套使用,對(duì)雞精液進(jìn)行1:1 稀釋?zhuān)?jié)約一半公雞,達(dá)到孵化率不降低,甚至提高1%左右孵化率的效果,經(jīng)濟(jì)效益顯著。 目前該技術(shù)已經(jīng)通過(guò)了中試,即將產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。
【附圖說(shuō)明】
[0028] 圖1為不同環(huán)境與條件下原精溫度與體溫預(yù)熱稀釋液效果對(duì)比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂,下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí) 施方式做詳細(xì)說(shuō)明。在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本發(fā)明。但是本 發(fā)明能夠以很多不同于在此描述的其他方式來(lái)實(shí)施,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本發(fā)明 內(nèi)涵的情況下做類(lèi)似改進(jìn),因此本發(fā)明不受下面公開(kāi)的具體實(shí)施的限制。
[0030] 實(shí)施例1 : 具體操作方式包括以下步驟: 1) 配制稀釋液及冷凍保存:取果糖7. 0g、谷氨酸鈉 6. 0g、磷酸氫二鉀11. 0g、磷酸二氫 鉀0. 7g、N-三羥甲基甲基-2-氨基乙磺酸3. 0g、檸檬酸鉀0. 8g、三水醋酸鈉3. 0g、無(wú)水氯 化鎂0. 4g、番茄紅素0. 05g、加石英雙重蒸餾水至1. 0L ;將配制好的雞精液稀釋液采用塑料 離心管5mL定量分裝并置于一 18°C條件下冷凍保存?zhèn)溆茫?2) 預(yù)熱雞精液稀釋液:將稀釋液從冷凍環(huán)境中取出存入可隨身帶的微型保溫杯中,所 述微型保溫杯中放置少量冰塊,可滿(mǎn)足6~10°C溫度要求,輸精前30min置于貼膚上衣胸前 口袋對(duì)其進(jìn)行預(yù)熱至與雞精液溫差處于±3°C之內(nèi); 3) 稀釋與混勻:利用集精管采集雞精液5mL,根據(jù)稀釋比例1:1將已經(jīng)預(yù)熱的5mL體積 稀釋液沿杯壁緩慢加入集精管內(nèi);取單層滅菌膠帶并將其貼在拇指指肚處,手部帶膜處覆 蓋集精管管口,中指支撐集精管底部,兩指夾緊集精管反復(fù)顛倒7次后管內(nèi)液體整體顏色 均勻; 4) 輸精:手拿集精管靠底部1/3處呈傾斜狀,同時(shí)該手夾住一塊滅菌棉,采用5日間隔 輸精方式進(jìn)行淺陰道輸精,每次每只母雞輸精30uL,輸一只母雞順便擦拭一下輸精管尖端。
[0031] 利用實(shí)施例1所述方法進(jìn)行稀釋精液人工輸精實(shí)驗(yàn),對(duì)照組采用原精輸精,于 2014年12月-2015年1月在湖南順成實(shí)業(yè)有限公司進(jìn)行實(shí)施例1和對(duì)照組的孵化效果檢 測(cè)。對(duì)其受精率及入孵蛋健雛率進(jìn)行統(tǒng)計(jì),統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1所示。按本實(shí)施例稀釋比例1:1 稀釋?zhuān)旱睦寐蕰?huì)提高一倍,同時(shí)孵化率提高1%左右,在生產(chǎn)實(shí)踐過(guò)程中可以有效的 利用種公雞原精液,減少種公雞的養(yǎng)殖量,降低生產(chǎn)成本,提高經(jīng)濟(jì)效益。
[0032] 表1孵化效果檢測(cè)結(jié)果
實(shí)施例2 : 具體操作方式包括以下步驟: 1) 配制稀釋液及冷凍保存:取果糖9. 0g、谷氨酸鈉4. 0g、磷酸氫二鉀14. 0g、磷酸二氫 鉀0. 5g、N-三羥甲基甲基-2-氨基乙磺酸5. 0g、檸檬酸鉀0. 4g、三水醋酸鈉 6. 0g、無(wú)水氯 化鎂0. 2g、番茄紅素0. 1 g、加石英雙重蒸餾水至1. 0L ;將配制好的雞精液稀釋液采用稀釋 液瓶lmL定量分裝并置于一 20°C條件下冷凍保存?zhèn)溆茫?2) 預(yù)熱雞精液稀釋液:將稀釋液從冷凍環(huán)境中取出置于8°C環(huán)境中保存,輸精前20min 置于貼膚褲袋對(duì)其進(jìn)行預(yù)熱至與雞精液溫差處于±3°C之內(nèi); 3) 稀釋與混勻:直接利用已經(jīng)預(yù)熱的含有l(wèi)mL體積稀釋液的稀釋液瓶,逐個(gè)采集雞精 液,直到達(dá)到需要的稀釋比例1:2為止;取一次性滅菌PE醫(yī)用手套戴在手部,將稀釋液瓶瓶 口扣在手掌靠近手腕處,利用手掌與中指或無(wú)名指之間的夾緊力反復(fù)顛倒8次稀