于此。將干燥 大葉冬青份量5至15倍的提取溶媒添加進(jìn)去進(jìn)行提取比較好，最好的比例是添加大葉冬青 份量的十倍。提取溫度控制在40-100°C比較好，最好是控制在60-80°C，但并不限于此。并 且，提取時間控制在4_24小時比$父好，最好是控制在8_15小時，但并不限于此。與此同時， 提取次數(shù)控制在1-5次比較好，最好是反復(fù)提取三次，但并不限于此。
[0031] 上述方法上，步驟3)的干燥選用減壓干燥、真空干燥、沸騰干燥、噴霧干燥或凍結(jié) 干燥等比較好，但并不限于此。
[0032] 上述缺血性疾病或退行性腦疾患最好是腦梗塞、腦缺血、腦中風(fēng)、癡呆、老年癡呆 癥、杭廷頓氏舞蹈病、pick病以及克羅伊茨費(fèi)爾特一雅各布氏?。–reutzfeld-Jakob)病組 成的疾病組之一，但并不限于此。
[0033] 本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】中，發(fā)明人在誘發(fā)腦梗塞的大鼠身上確認(rèn)了大葉冬青提 取物對腦梗塞以及浮腫的抑制效果（見圖1以及圖2、表1)。并且，注射β-淀粉樣蛋 白[amyloidPprotein;Αβ(25-35)]誘發(fā)神經(jīng)毒性的老鼠身上，通過大小鼠避暗測試 (passiveavoidancetest;Stepthrough)以及水迷宮（Morriswatermaze)測試，確認(rèn) 了大葉冬青提取物對記憶損傷的抑制效果（見圖3以及圖4)。
[0034] 并且，本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】中，還確認(rèn)了大葉冬青提取物根據(jù)其注射量，對過氧 化氫（H202)誘發(fā)的氧化應(yīng)激、谷氨酸以及Αβ蛋白質(zhì)等毒性物質(zhì)造成的大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞 的死亡具有抑制效果（見圖5至圖7)。并且，確認(rèn)了通過低氧癥誘導(dǎo)的大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞 的死亡，根據(jù)大葉冬青提取物的注射量受到抑制（見圖8)。
[0035] 因此，本發(fā)明的大葉冬青提取物可以作為腦血管疾患的預(yù)防或治療用，或記憶損 傷改善用藥物組合物的有效成分使用。
[0036] 含有本發(fā)明大葉冬青提取物的成分占總重量的0. 1重量％至50重量％比較合適， 但并不限于此。
[0037] 本發(fā)明的成分在臨床上被使用時，可以采用口服或非口服的方式，可以作為一般 的醫(yī)藥品制劑的形態(tài)使用。本發(fā)明的成分在實(shí)際臨床上使用時，可以采用口服以及非口服 的各種制形。制作成制劑時，采用通常使用的填充劑、增量劑、濕潤劑、崩解劑以及表面活動 劑等的稀釋劑或賦形劑調(diào)制。用于口服的固形制劑包括，片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑 等，這些固形制劑是本發(fā)明的藥物成分中至少添加一種以上的賦形劑，比如，淀粉、碳酸鈣、 蔗糖、乳糖以及凝膠等調(diào)制。并且，除了純賦形劑之外，還使用鎂、硬脂酸酯（stearate)、滑 石等潤滑劑?？诜囊籂钪苿┯?，懸浮液、內(nèi)容液狀以及糖漿等。除了通常使用的純稀釋劑 水、液體蠟之外，可以包括各種賦形劑，比如，濕潤劑、甘味劑、芳香劑、保存劑等。非口服的 制劑有，滅菌水溶液、非水性溶劑、懸浮劑、乳劑、凍結(jié)干燥劑、佐劑等。非水性溶劑以及懸浮 溶劑有，丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物性油、油酸乙酯（ethyloleate)等可注射的酯類。 作為佐劑的基劑可以采用witepsol、聚乙二醇、tween61、可可豆脂、羥基香茅醛、甘油以及 凝膠等。本發(fā)明藥物組合物的非口服使用方法有，皮下注射、靜脈注射或肌肉注射等。
[0038] 用藥單位而言，比如，含有個別用藥量的1、2、3或4倍，或可以含有1/2、1/3或 1/4倍。個別用藥量最好含有有效藥物每次口服或注射的量，這相當(dāng)于通常每日用藥量的 全部、1/2、1/3或1/4倍。本發(fā)明組成物的有效容量為0. 0001~10g/kg，最好的用藥量為 0. 0001g~5g/kg，一天可以口服或注射1~6次。
[0039] 本發(fā)明的組成物在腦血管疾病的預(yù)防或治療過程中，可以單獨(dú)使用，也可以配合 手術(shù)、激素治療、化療以及生物學(xué)反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的其他方法使用。
[0040] 并且，本發(fā)明提供將大葉冬青提取物作為有效成分的缺血性疾病或退行性腦疾患 的預(yù)防或改善用保健功能食品。
[0041] 與此同時，本發(fā)明提供，將大葉冬青提取物作為有效成分的極易損傷改善用保健 功能食品。
[0042] 本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】中，發(fā)明人在誘發(fā)腦梗塞的大鼠身上確認(rèn)了大葉冬青提取 物對腦梗塞以及浮腫的抑制效果（見圖1、圖2、表1)，還在誘發(fā)神經(jīng)毒性的老鼠身上，確認(rèn) 了大葉冬青提取物對記憶損傷的抑制效果（見圖3以及圖4)。并且，確認(rèn)了根據(jù)大葉冬青 提取物的注射量，對氧化應(yīng)激、毒性物質(zhì)以及低氧癥引發(fā)的大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的死亡具有 抑制效果（見圖5至圖8)。
[0043]因此，將大葉冬青提取物作為有效成分的本發(fā)明藥物組合物，可以用于物質(zhì)缺血 性疾病或退行性腦疾患的預(yù)防或改善用，或記憶損傷改善用保健功能食品。
[0044] 本發(fā)明的保健功能食品可以直接添加大葉冬青提取物，或與其他食品或食品成分 配合使用，按照通常的方法可以合理使用。有效成分的混合量可以根據(jù)使用目的（預(yù)防、保 健或治療性處置）來決定。一般來講，制造食品或飲料時，本發(fā)明成分對原料的添加比為15 重量份以下，最好是10重量份以下的量。但是，以保健以及衛(wèi)生作為目的或調(diào)節(jié)身體為目 的的長期服用時，攝入量可能比上述范圍少，但是由于安全性方面沒有任何問題，有效性份 可以超過上述范圍以上的量。
[0045] 上述食品的種類沒有特別的限制。可以添加上述物質(zhì)的食品有，肉類、香腸、面包、 巧克力、糖果類、點(diǎn)心類、餅干類、匹薩、方便面、其他面食類、口香糖、冰淇淋在內(nèi)的乳品、各 種湯類、飲料、茶、飲品、酒精飲料以及復(fù)合維生素等，包括通常意義上的所有保健食品。
[0046] 本發(fā)明的保健飲料成分可以與普通的飲料一樣，含有各種香味劑或天然碳水化合 物等。上述的天然碳水化合物有，葡萄糖、果糖等單糖、麥芽糖、蔗糖等二糖類以及葡聚糖、 環(huán)糊精等多糖、木糖醇、山梨糖醇、赤蘚醇等糖乙醇。甘味劑可以選用非洲竹芋甜索、甜菊提 取物等天然甘味劑或糖精、阿斯巴甜等合成甘味劑。上述天然碳水化合物的比率而言，本發(fā) 明成分每1:00ral含有約〇. 01~〇. 〇4g，最好是含有約0. 02~0. 03g。
[0047] 除了上述之外，本發(fā)明的大葉冬青提取物可以含有，各種營養(yǎng)劑、維生素、電解質(zhì)、 風(fēng)味劑、著色劑、果膠酸及其鹽、海藻酸及其鹽、有機(jī)酸、保護(hù)性膠體增粘劑、pH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定 劑、防腐劑、甘油、酒精、碳酸飲料中使用的碳酸化劑等。除此之外，本發(fā)明的大葉冬青提取 物可以含有，制造天然果汁、果汁飲料、蔬菜飲料為目的的果肉?？梢元?dú)立或組合使用這些 成分。雖說這些添加劑的比率不太重要，但是通常在本發(fā)明的成分每100重量份0. 02~1 重量份的范圍內(nèi)選擇。
[0048] 本發(fā)明的大葉冬青提取物幾乎沒有毒性和副作用，作為預(yù)防目的可以長期服用。 [0049] 實(shí)施例
[0050]下面，結(jié)合實(shí)施例和制造例詳細(xì)說明本發(fā)明。但，下面的實(shí)施例和制造例只是本發(fā) 明的例示，并非本
【發(fā)明內(nèi)容】
限定在下面的實(shí)施例和制造例。
[0051] 實(shí)施例1大葉冬青（Ilex latifolia)提取物的制造
[0052] 〈1_1>乙醇提取物的制造
[0053] 大葉冬青是在首爾慶東的中藥材市場購買后切碎使用。準(zhǔn)備100克大葉冬青后， 在室溫環(huán)境下利用3L的100%乙醇，三個小時內(nèi)用回流冷凝器中提取了三次。通過沃特曼 1號紙過濾上述溶液后烘干，最終收獲了乙醇提取物18.7g。最終收獲的大葉冬青提取物是 放入二甲基亞砜（dimethylsulfoxide;DMSO)內(nèi)溶解成§〇mg/燦的濃度，保管在-20°C的 環(huán)境中。實(shí)驗(yàn)時，對實(shí)驗(yàn)緩沖液進(jìn)行稀釋，使DMS0的最終濃度達(dá)到0. 1 %-下后使用。
[0054] 〈1-2>水提取物的制造
[0055] 除了用水作為提取溶媒取代100%乙醇之外，按上述實(shí)施例〈1_1>的提取方法獲 得了粉末（收率21.5% )。
[0056] 〈1_3>80%乙醇提取物的制造
[0057] 除了用80%的乙醇作為提取溶媒取代100%乙醇之外，按上述實(shí)施例〈1_1>的提 取方法獲得了粉末（收率20. 4% )。
[0058] 〈1_4>100甲醇提取物的制造
[0059] 除了用100%的甲醇作為提取溶媒取代100%乙醇之外，按上述實(shí)施例〈1_1>的提 取方法獲得了粉末（收率19. 1% )。
[0060] 實(shí)施例2誘發(fā)腦梗寒的大鼠身h,大葉冬青提取物的腦梗寒以及浮腫抑制效果的 確認(rèn)
[0061] 本發(fā)明人為了在誘發(fā)腦梗塞的大鼠身上確認(rèn)大葉冬青提取物的效能，實(shí)施了如下 的實(shí)驗(yàn)。首先，使300±5g的SD大鼠（SAMTAK0,京畿道）吸入l-2%isoflurane(N2:02 = 4:1)進(jìn)行麻醉后，通過外科手術(shù)小心地曝光出了右側(cè)頸動脈。對大鼠的外徑動脈分支到中 央部的舌動脈（linguinalartery)和從外頸動脈向內(nèi)頸動脈分支的甲狀腺動脈（thyroid artery)，通過電灼進(jìn)行了結(jié)扎。此時，在動脈結(jié)扎前30分鐘、結(jié)扎后一個小時、去除結(jié)扎 后一個小時后，喂食了大葉冬青提取物（分別50, 100或200mg/kg)或作為陽性對照組 的MK-801(lmg/kg)。作為陰性對照組使用了未添加任何物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)緩沖液（生理食鹽水 注射液）的注射大鼠。之后，發(fā)現(xiàn)內(nèi)頸動脈上方的Y字形分支為止，清理好周圍后，將外頸 動脈的頭部用線結(jié)扎切斷血流，并為了防止總頸動脈和內(nèi)頸動脈之間的血流，用夾子夾住 了上下。之后，在總頸動脈打一個小孔插入探針后，用線輕輕結(jié)扎探針和外頸動脈的下方 部位止血，然后去除了防止血流的夾子。切開插入探針的孔和結(jié)扎外頸動脈的部位之間， 將插入到外頸動脈的探針小心地挪到內(nèi)頸動脈插入后，在內(nèi)頸動脈上方分支為Y字形的 血管中，向內(nèi)側(cè)血管插入了探針。此時，探針從總頸動脈分支只插入了 20mm。手術(shù)后馬上 測量直腸溫度開始，在6小時內(nèi)維持了 37±0