含復合提取物的用于預防、改善或治療大腸炎的組合物的制作方法【
技術領域：
】[0001]本發(fā)明涉及知母提取物等和黃連提取物等的新用途，更具體地，涉及包含知母提取物等和黃連提取物等的、用于預防、改善或治療大腸炎的組合物?！?br>背景技術：
】[0002]大腸炎是指腸道發(fā)生炎癥的疾病，可由各種原因引起，主要癥狀為里急后重(tenesmus，不通暢）、腹部脹氣、下腹疼痛、腹瀉等，有時伴有奠便中帶著粘液、膿液或血液的情況。大腸炎根據其發(fā)病原因大體可分為感染性大腸炎和非感染性大腸炎，根據其發(fā)病時間可分為急性大腸炎和慢性大腸炎。急性大腸炎有阿米巴痢疾、細菌性痢疾、沙門氏菌或抗生素引起的偽膜性大腸炎（pseudomembranousenteritis)等，慢性大腸炎有潰瘍性大腸炎、克羅恩病、結核、梅毒、X射線等引起的疾病。另外，大腸炎還包括炎癥性大腸病(Inflammatoryboweldisease;IBD)，以及腸易激綜合征（irritablebowelsyndrome，IBS)等。作為炎癥性大腸?。↖nflammatoryboweldisease;IBD)中代表性疾病的潰瘍性大腸炎（ulcerativecolitis;UC)和克羅恩?。–rohn'sdisease;(D)其病因仍不明確，其可引起腹痛的同時導致嚴重的慢性腹瀉和出血性腹瀉，其特點是難以痊愈且反復好轉和惡化。潰瘍性大腸炎是大腸的黏膜上持續(xù)形成瘡瘍（糜爛）或潰瘍的疾病，會出現便血、粘液血便、腹瀉、腹痛，且在重癥情況下可出現發(fā)熱、體重減輕、貧血等全身性的癥狀。另外，潰瘍性大腸炎在胃腸道的任何部位均可發(fā)生?？肆_恩病是在口腔至肛門的消化道的任何部位非連續(xù)地發(fā)生潰瘍等病變的疾病，引起腹痛、腹瀉、血便的同時，在重癥情況下可出現發(fā)熱、出血、體重減輕、渾身疲倦、貧血等癥狀。潰瘍性大腸炎和克羅恩病在病變和炎癥癥狀上具有差異，然而在很多方面具有類似之處，所以經常出現兩種疾病的區(qū)分不明確的情況。[0003]以往認為西方人出現潰瘍性大腸炎和克羅恩病的發(fā)生率很高，然而近年來，由于生活習慣（飲食習慣等）的變化，韓國等東方國家中患者數也出現劇增。然而，由于病因不明確，未能確立根本性的治療方法。因此，目前無法以徹底治療為目的使用藥物，而是使用能夠緩解癥狀并盡可能地長期維持這種狀態(tài)的藥物。作為這種對癥療法的藥劑，主要使用氨基水楊酸制劑、腎上腺皮質類固醇制劑、免疫抑制劑等，然而據報道這些藥劑具有多種副作用。例如，常作為氨基水楊酸制劑使用的柳氮磺胺吡啶具有惡心，嘔吐，食欲不振，皮疹，頭痛，肝損傷，白細胞減少，紅細胞異常，蛋白尿，腹瀉等副作用。并且，作為腎上腺皮質類固醇制劑，通常以潑尼松龍進行口服、灌腸、栓劑、靜脈注射等，然而其具有胃潰瘍或長期使用能導致股骨頭壞死等強的副作用。但是，停止用藥會復發(fā)癥狀，因而不得不持續(xù)使用這些藥物。因此，人們期望開發(fā)藥效良好且安全、且沒有副作用的潰瘍性大腸炎、克羅恩病等腸疾病的治療劑。腸易激綜合征（irritablebowelsyndrome;IBS)同樣也是其原因尚不明確的慢性腹部疾病。目前，不存在IBS的根本性治療劑，也是只能采用以減輕各類型的癥狀為目的的對癥療法。例如，對于腹瀉型IBS使用具有抑制平滑肌收縮的鎮(zhèn)痙作用的抗膽堿能藥物，對于便秘型IBS使用鹽類瀉藥，且對于交替型IBS用藥難以調節(jié)，通常只是使用消化道運動功能的改善劑。[0004]一方面，知母（AnemarrhenaasphodeloidesBunge)為單子葉植物百合目知母科的多年生草，將其帶皮干燥得到的毛知母或其根莖作為藥材使用。據悉，知母的根莖在中醫(yī)上作為解熱劑使用，并且對慢性支氣管炎或糖尿病有療效。關于知母的藥學方面的用途，韓國授權專利公報第10-0856335號公開了從知母分離出來的化合物對呼吸道疾病的預防及治療效果，韓國授權專利公報第10-0923953號公開了知母提取物對膽堿能神經系統(tǒng)損傷的改善效果，韓國授權專利公報第10-1075742號公開了從知母分離出來的化合物對脂質代謝疾病的預防及治療效果。另外，黃連（Coptis)是雙子葉植物毛茛目毛茛科的常綠多年生草，具體有云南黃連（Coptisteeta)、日本黃連（Coptisjaponica)、川黃連（Coptischinensis)、三角葉黃連（Coptisdeltoidea、峨嵋黃連（Coptisomeiensis)等。中醫(yī)上，采摘其根莖并并在陽光下曬干后，將其作為藥草使用，其藥效成分有黃連素(Berberine)、黃連堿（Coptisine)、黃連寧（Worenine)、黃藤素（Palmatine)等，并且據悉其具有抗菌、消炎、解熱、促進膽汁分泌、降血壓作用等功效。關于黃連的藥學方面的用途，韓國專利公開公報第10-2001-0085669號公開了以黃連提取物為有效成分的用于預防及治療藥物中毒的藥物組合物，韓國專利公開公報第10-2009-0029022號公開了以黃連提取物為有效成分的用于預防和治療由紫外線導致的皮膚疾病的組合物，韓國專利公開公報第10-2013-0022733號公開了包含川黃連提取物的用于治療胰腺癌的組合物，韓國專利公開公報第10-0970739號公開了黃連提取物為有效成分的用于預防和治療呼吸道疾病的組合物，除此之外還公開了含有黃連提取物的用于牙周病的組合物、含有黃連提取物的用于預防和治療糖尿病并發(fā)癥的組合物、含有黃連提取物的用于保護和再生神經細胞的組合物等。【
發(fā)明內容】[0005]本發(fā)明要解決的摶術問題[0006]本發(fā)明是在現有的技術背景下得出的，本發(fā)明的目的在于提供知母提取物等和黃連提取物等的新用途，具體地，提供包含知母提取物等和黃連提取物等的、關于預防、改善或治療大腸炎的用途。[0007]摶術方案[0008]本發(fā)明的發(fā)明人為了開發(fā)具有預防或治療大腸炎的活性的提取物，以較合成化合物更為安全的許多天然物質為對形象進行了研究。其結果發(fā)現，由知母提取物等和黃連提取物等形成的復合提取物對誘導了大腸炎的模型動物具有優(yōu)異的預防或治療大腸炎的活性，從而完成了本發(fā)明。[0009]為了達到上述目的，本發(fā)明提供用于預防、改善或治療大腸炎的組合物，其有效成分包括：選自知母提取物、知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物（岜_詈）、芒果苷（Mangiferin)、芒果苷的藥用（或食用）鹽、新芒果苷(Neomangiferin)或新芒果苷的藥用（或食用）鹽中的1種以上；以及選自黃連提取物或黃連提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物中的1種以上。這時，上述用于預防、改善或治療大腸炎的組合物優(yōu)選具有藥用組合物或食品組合物的形態(tài)。[0010]另外，選自上述知母提取物、知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物、芒果苷、芒果苷的藥用鹽、新芒果苷或新芒果苷的藥用鹽中的1種以上與選自黃連提取物或黃連提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物中的1種以上的重量比可以為10:1至1:10,優(yōu)選為1:1至5:1，更優(yōu)選為1:1至4:1，最優(yōu)選為2:1至4:1。例如，上述用于預防、改善或治療大腸炎的組合物的有效成分可由知母提取物和黃連提取物的組合構成，這時知母提取物和黃連提取物的重量比優(yōu)選為1:1至5:1，更優(yōu)選為1:1至4:1，最優(yōu)選為2:1至4:1。另外，上述用于預防、改善或治療大腸炎的組合物的有效成分可由知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物和黃連提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物的組合構成，這時知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物和知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物的重量比優(yōu)選為1:1至5:1，更優(yōu)選為1:1至4:1，最優(yōu)選為2:1至4:1。[0011]另外，優(yōu)選地，上述知母提取物的提取溶劑為水、碳原子數為1至2的醇或這些的混合溶劑。另外，優(yōu)選地，上述知母提取物的醇可溶性分離物可通過在知母提取物中添加水進行懸浮后，添加碳原子數為3至8的醇并進行分離得到，更優(yōu)選地，其為知母提取物的丁醇可溶性分離物。優(yōu)選地，上述知母提取物或知母提取物的醇可溶性分離物其活性物質可包括芒果苷（Mangiferin)或新芒果苷（Neomangiferin)〇[0012]另外，優(yōu)選地，上述黃連提取物的原料為川黃連（Coptischinensis)。另外，優(yōu)選地，上述黃連提取物的提取溶劑為水、碳原子數為1至2的醇或這些的混合溶劑。另外，優(yōu)選地，上述黃連提取物的醇可溶性分離物可通過在知母提取物上添加水進行懸浮后，添加碳原子數為3至8的醇并進行分離得到，更優(yōu)選地，是黃連提取物的丁醇可溶性分離物。優(yōu)選地，上述黃連提取物或黃連提取物的醇可溶性分離物其活性物質可包括黃連素(Berberine)〇[0013]另外，適用本發(fā)明的組合物來治療、改善或預防的大腸炎的具體種類不會特別限制在急性大腸炎或慢性大腸炎等，例如可以為炎癥性大腸病或腸易激綜合癥。[0014]有益效果[0015]本發(fā)明的由知母提取物等和黃連提取物等形成的復合提取物對誘導了大腸炎的模型動物具有優(yōu)異的預防或治療大腸炎的活性，因此可用作構成藥用組合物或功能性食品組合物的食藥性材料。這種藥用組合物或功能性食品組合物可用于有效預防、延緩、改善或治療急性大腸炎或慢性大腸炎，尤其是炎癥性大腸病（Inflammatoryboweldisease;IBD)或腸易激綜合征（irritablebowelsyndrome，IBS)等。[0016]另一方面，據報道，從藥用作物提取或分離的現有的多種生藥，其藥效不如作為代表性大腸炎治療劑的美沙拉嗪。因此，兼用知母提取物等和黃連提取物等時，具有比美沙拉嗪更突出的抗大腸炎的功效，這一點是由協(xié)同效應導致的結果，并且是難以預測的事項?！靖綀D說明】[0017]圖1為示出了芒果苷（Mangiferin)和新芒果苷（Neomangiferin)的化學結構式的圖。[0018]圖2為示出了使用制備例2中得到的知母提取物的正丁醇可溶性分離物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸外觀評分的圖，圖3為示出了使用制備例2中得到的知母提取物的正丁醇可溶性分離物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0019]圖4為示出了使用制備例3中得到的芒果苷作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸外觀評分、大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0020]圖5為示出了使用復合提取物作為藥用樣本時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸外觀評分的圖，圖6為示出了使用復合提取物作為藥用樣本時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0021]圖7為示出了使用制備例2中得到的知母提取物的正丁醇可溶性分離物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的IL-Iβ和IL-6的表達量的圖，圖8為示出了使用制備例2中得到的知母提取物的正丁醇可溶性分離物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的TNF-α和IL-10的表達量的圖。[0022]圖9為示出了使用制備例3中得到的芒果苷作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的促炎細胞因子（proinflammatorycytokine)和抗炎細胞因子（anti-inflammatorycytokine)的表達量的圖。[0023]圖10為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的IL-Iβ和IL-6的表達量的圖，圖11為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的TNF-α和IL-10的表達量的圖。[0024]圖12為示出給TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物施用制備例2中得到的知母提取物的正丁醇可溶性分離物時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應指標物質的表達被抑制的結果。[0025]圖13為示出給TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物施用制備例3中得到的芒果苷時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應的指標物質的表達被抑制的結果。[0026]圖14為示出給TNBS引發(fā)急性大腸炎的模型動物施用復合提取物時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應的指標物質的表達被抑制的結果。[0027]圖15為示出使用復合提取物作為藥物樣品時，由由DSS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸的觀評分的圖，圖16為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0028]圖17為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的IL-Iβ和IL-10的表達量的圖，圖18為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)急性大腸炎的模型動物的大腸組織中的TNF-α和IL-6的表達量的圖。[0029]圖19為示出給由DSS引發(fā)急性大腸炎的模型動物施用復合提取物時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應的指標物質的表達被抑制的結果。[0030]圖20為示出使用復合提取物作為藥物樣品時，由惡唑酮引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸外觀評分的圖，圖21為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由惡唑酮引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0031]圖22為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由惡唑酮引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸組織中的IL-Iβ和IL-10的表達量的圖，圖23為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由惡唑酮引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸組織中的TNF-α和IL-6的表達量的圖。[0032]圖24為示出給由惡唑酮引發(fā)慢性大腸炎的模型動物施用了復合提取物時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應的指標物質的表達被抑制的結果。[0033]圖25為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的體重變化和大腸外觀評分的圖，圖26為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸長度和MPO活性測定結果的圖。[0034]圖27為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸組織中的IL-Iβ和IL-10的表達量的圖，圖28為示出了使用復合提取物作為藥物樣品時，由DSS引發(fā)慢性大腸炎的模型動物的大腸組織中的TNF-α和IL-6的表達量的圖。[0035]圖29為示出給DSS引發(fā)慢性大腸炎的模型動物施用了復合提取物時，在模型動物的大腸組織中出現炎性反應的指標物質的表達被抑制的結果?！揪唧w實施方式】[0036]以下說明本發(fā)明中使用的術語。[0037]本發(fā)明中使用的術語"藥用"和"食用"意味著不明顯地刺激生物體，且不抑制所用活性物質的生物學活性和特性。[0038]本發(fā)明中使用的術語"預防"意味著施用本發(fā)明的組合物來抑制特定疾?。ɡ?，大腸炎）的癥狀或延緩癥狀的進展的所有行為。[0039]本發(fā)明中使用的術語"改善"意味著減少與治療狀態(tài)相關的參數，例如，至少減少癥狀的程度的所有行為。[0040]本發(fā)明中使用的術語"治療"意味著施用本發(fā)明的組合物使特定疾?。ɡ?，大腸炎）的癥狀好轉或向有利方向改變的所有行為。[0041]本發(fā)明中使用的術語"施用"意味著用任意合適的方法給個體提供規(guī)定的本發(fā)明的組合物。這時，個體意味著患有施用本發(fā)明的組合物后能使癥狀好轉的疾病的人、猴子、狗、山羊、豬或大鼠等所有動物。[0042]本發(fā)明中使用的術語"藥學上有效的量"意味著用可適用于醫(yī)學治療的、以合理的利益或風險比例來治療疾病所充分的量，其可由個體的疾病的種類、重癥度、藥物活性、對藥物的敏感度、給藥時間、給藥途徑和排出比例、治療時間、包含同時使用的藥物的因素及其他醫(yī)學領域中常見的因素來確定。[0043]以下詳細說明本發(fā)明。本發(fā)明提供由至少2種生藥的提取物形成的復合提取物為有效成分的用于預防、改善或治療大腸炎的組合物。上述復合提取物包括選自知母提取物、知母提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物（以下稱為"知母提取物的醇可溶性分離物"）、芒果苷（Mangiferin)、芒果苷的藥用（或食用）鹽、新芒果苷（Neomangiferin)或新芒果苷的藥用（或食用）鹽中的1種以上（以下稱為"第一有效成分"）；以及選自黃連提取物或黃連提取物中的碳原子數為3至8的醇可溶性分離物（以下稱為"黃連提取物的醇可溶性分離物"）中的1種以上（以下稱為"第二有效成分"）。這時，構成復合提取物的第一有效成分和第二有效成分的混合比不受特別限制。例如，復合提取物中，上述第一有效成分和第二有效成分的重量比可以為10:1至1:10,考慮到預防、改善或治療大腸炎的效果，優(yōu)先為1:1至5:1，更優(yōu)選為1:1至4:1，最優(yōu)選為2:1至4:1。另外，作為本發(fā)明的當前第1頁1 2 3 4 5 6