夠的。
[0117] 通過采用根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是熱敏性脂質(zhì)體，包封在 刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體中的活性成分，可通過對刺激-敏感性納米載體 系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體施加刺激、尤其是局部加熱而釋放。該刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其 是熱敏性脂質(zhì)體，因此尤其適于腫瘤、尤其是膀脫腫瘤、或膀脫癌的局部治療。包封在刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體中的活性成分，可在膀脫壁內(nèi)W祀向方式誘導，使得活 性成分，尤其是細胞抑制劑，可在期望的位點立刻釋放。運些經(jīng)驗還可W用于其它實體和局 部腫瘤的治療。
[0118] 本申請中描述的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體特別適于通過高溫局 部釋放活性成分。刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性的且包含至少一種憐脂酷膽堿 和至少一種具有在約40°C的每種情況下相變溫度的憐脂酷寡聚甘油的脂質(zhì)體是優(yōu)選的。運 意味著優(yōu)選地肉豆違酸、棟桐酸或硬脂酸的醋作為脂肪酸醋是適宜的。其它相變溫度當然 也可W通過相應的脂肪酸醋設定(在運方面也參見表1)。
[0119] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有約40°C相變溫度的包含至少一種憐脂酷膽堿和至少一種憐脂酷二 甘油或憐脂酷Ξ甘油的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是熱敏性脂質(zhì)體，在實驗動物的血 流中在約36至37°C的標準溫度下具有長半衰期。包封的活性成分只有當溫度局部增加至約 42°C時才釋放。
[0120] 根據(jù)本發(fā)明要求保護的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，優(yōu)選包 含至少一種憐脂酷膽堿和至少一種憐脂酷-二或-四-甘油。相變溫度取決于應用的 需要。對于臨床應用優(yōu)選地將其設定在約42°C，運可通過甘油分子中可能的脂肪酸組合W 簡單的方式實現(xiàn)(在運方面也參見表1)。對于其它應用，低于40°C的不同相變溫度可能是使 人感興趣的，例如約<30°C的溫度，運也可通過相應的脂肪酸組合來實現(xiàn)(參見表1)。運種 刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是脂質(zhì)體，是令人感興趣的，因為當立刻注射到腫瘤區(qū)域 時，它們在腫瘤組織中立即釋放其活性成分。相應地，具有較高相變溫度的刺激-敏感性納 米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體同樣重要，因為運種刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體 很穩(wěn)定而不立刻釋放活性成分但能例如在吸收到細胞中之后緩慢釋放活性成分，而熱效應 不是必需的。因此，存在甚至在50°C或50°CW上時還是穩(wěn)定的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)， 尤其是脂質(zhì)體。
[0121] 在運些刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體的Ξ種優(yōu)選的實施方案之間可 進行區(qū)分：
[0122] 1)優(yōu)選的
[0123] 由憐脂構成的脂質(zhì)體包含至少一種憐脂酷膽堿和至少一種憐脂酷寡聚甘油。對脂 肪酸鏈進行選擇W獲得約42°C的相變溫度。甘油分子中脂肪酸鏈的位置和憐酸殘基的位置 是任意的-約42°C的相變溫度對于體內(nèi)治療應用是重要的，運通?？捎镁哂蠧m至Ci8鏈長 (肉豆違酸，棟桐酸和硬脂酸)的脂肪酸醋來實現(xiàn)。
[0124] 2)更優(yōu)選的
[0125] 此類別包括含1,2-二酷基-sn-3-甘油-憐酸-rac-寡聚甘油的脂質(zhì)體。
[0126] 沒有任何物理性質(zhì)，如相變溫度，理想的混合行為，發(fā)生變化。然而，運些分子不天 然存在因此不能被代謝或降解或者只被緩慢代謝或降解。
[0127] 3)還更優(yōu)選的
[0128] 此類別包括含天然構型憐脂的脂質(zhì)體，其中憐脂為：sn-甘油-3-憐酸醋sn-1-憐 酸-二-、-Ξ-或-四-甘油。
[0129] 所有的物理性質(zhì)，如相變溫度，理想的混合行為，都不變。該構型是天然的，即能確 保分子的生物降解。
[0130] 通過選擇具有適宜主轉(zhuǎn)變溫度的憐脂酷膽堿，可定制刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)， 尤其是熱敏性脂質(zhì)體。表1給出了主轉(zhuǎn)變溫度在0至80°C的范圍內(nèi)的憐脂酷膽堿的主轉(zhuǎn)變溫 度(Tm)。由該表可W看出，主轉(zhuǎn)變溫度依賴于鏈長和依賴于甘油-3-憐酸膽堿的在1位和2位 上或甘油-2-憐酸膽堿在1位和3位上的分布。
[0131] 憐脂酷膽堿優(yōu)選W至少10重量％的量、更優(yōu)選W至少30重量％的量、還有更優(yōu)選 W至少50重量％、但不超過90重量％的量存在于刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體 中。
[0132] 通常地，憐脂酷膽堿的相變溫度可通過脂肪酸醋的鏈長來控制，如表1所示。憐脂 酷膽堿的主轉(zhuǎn)變溫度(Tm)可按具體的要求定制。對于臨床應用，約40°C的溫度特別重要。
[0133] 除刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體的純物理性質(zhì)之外，即在37°C下穩(wěn)定 但在生理鹽溶液中在42°C下釋放活性成分，不過，刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì) 體只有當在血清的存在下W及在實驗動物的模型實驗中滿足那些需求時才能在治療上應 用。如果采原二棟桐酷基)-憐脂酷膽堿和(二棟桐酷基)-憐脂酷甘油的脂質(zhì)體，則原則上 不能實現(xiàn)那樣的穩(wěn)定性。在此系統(tǒng)中，動物實驗表明脂質(zhì)體的內(nèi)容物活性成分幾乎在<一 分鐘內(nèi)幾乎完全釋放。
[0134] 對臨床應用必要的要求，即在37°C下穩(wěn)定但在42°C下釋放活性成分，可僅使用新 的負電荷載體憐脂酷寡聚甘油、尤其是憐脂酷二甘油和憐脂酷Ξ甘油在動物實驗中實現(xiàn)。
[0135] 不過，對于臨床應用，必須考慮其它點。根據(jù)本發(fā)明，首次制備了具有sn-1連接且 因此具有天然存在構型的含憐酸醋的憐脂酷二甘油和憐脂酷Ξ甘油。
[0136]因此，本申請還提供式Ila的立體特異性憐脂酷寡聚甘油
[0137]
[0138]構型:天然的
[0139]名稱：1，2-二酷基-sn-3-甘油-憐酸-sn-1-寡聚甘油；
[0140]sn，立體特異性編號；
[0141]其中Ri和R2各自獨立地代表具有12至24個碳原子的控殘基且m為0至50的整數(shù)，其 中甘油醋至憐酸基團的連接是立體特異性的且Wsn-3連接存在，并且憐酸基團至寡聚甘油 的連接是立體特異性的且Wsn-1連接存在。
[0142]Ri和R2優(yōu)選相互獨立地為線性飽和的或單不飽和或多不飽和的烷基殘基，尤其是 飽和烷基殘基。Ri和R2各自獨立地進一步優(yōu)選為C14-至C20-，尤其是C14-至C18-殘基。
[0143] 優(yōu)選地，Ri和R2各自獨立地為線性飽和的C12-至C24-、尤其是C12-至C20-烷基殘 基。
[0144]最優(yōu)選地，Ri和R2獨立地為線性飽和的C14-、C16-或C18-烷基殘基。
[0145]m優(yōu)選為0至10的整數(shù)且最優(yōu)選為0或1。
[0146]在臨床應用例如臨床應用于腫瘤治療的情況下，生理耐受性很重要。作為載體系 統(tǒng)的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是脂質(zhì)體，將在活性成分已經(jīng)釋放之后被憐脂酶容易 降解。因此，根據(jù)本發(fā)明，與甘油結構單元具有憐酸sn-1連接的分子最優(yōu)選作為憐脂酷-二 甘油及類似物使用。優(yōu)點是被憐脂酶快速降解。
[0147]臨床應用的基本要求因此得到滿足，尤其是用于腫瘤疾病、例如膀脫腫瘤的局部 治療。運些治療的有效性已經(jīng)在動物實驗中得到證實。
[0148]根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，優(yōu)選不含膽固 醇，因為膽固醇導致相變溫度伸長因而產(chǎn)生寬的熱轉(zhuǎn)變范圍。尤其，根據(jù)本發(fā)明的，尤其是 熱敏性脂質(zhì)體，包含<〇.lwt.%、更優(yōu)選<0.01wt.%的量的膽固醇。特別優(yōu)選地，刺激-敏 感性納米載體系統(tǒng)，尤其是脂質(zhì)體不含有任何膽固醇但完全不含膽固醇。
[0149]根據(jù)優(yōu)選的實施方案，本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是脂質(zhì)體，還包 含較少量的烷基憐酸膽堿，優(yōu)選10至15wt. %的烷基憐酸膽堿。適宜的物質(zhì)為，例如，十六燒 基憐酸膽堿、油基憐酸膽堿W及酸溶血卵憐脂。在酸溶血卵憐脂的情況下，在甘油2位的徑 基基團可被甲基化或可W是游離的。在該實施方案中，可W增加包封在脂質(zhì)體中的物質(zhì)的 釋放，由不含烷基憐酸膽堿內(nèi)容物的約70%增加至幾乎100%，運歸因于刺激-敏感性納米 載體系統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體打開的加速。此外，烷基憐酸膽堿由于自刺激-敏感性納米載體系 統(tǒng)、尤其是脂質(zhì)體的溫度依賴性釋放而顯示出抗腫瘤效果。
[0150] 根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其熱敏性脂質(zhì)體，進一步優(yōu)選地包含 活性成分，尤其是適于治療膀脫腫瘤的活性成分。該刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是脂 質(zhì)體，優(yōu)選包含尤其是選自絲裂霉素C、多柔比星、表柔比星、吉西他濱、曲貝替定、順銷、卡 銷和奧沙利銷的細胞抑制劑。
[0151] 根據(jù)本發(fā)明的脂質(zhì)體的熱敏性通過脂質(zhì)體膜內(nèi)的憐脂酷膽堿的相變進行測定。如 果經(jīng)過相變溫度，則膜短暫地變得不穩(wěn)定且脂質(zhì)體內(nèi)容物因此釋放。此效果根據(jù)本發(fā)明用 于治療膀脫腫瘤。膀脫腫瘤由此被區(qū)域?qū)Ｒ坏丶訜?，例如局部高溫的范圍?nèi)。腫瘤內(nèi)的溫度 升高超出脂質(zhì)體內(nèi)容物釋放的限制溫度。然后脂質(zhì)體內(nèi)容物特定地和幾乎僅僅在腫瘤內(nèi)釋 放，使得活性成分可有效地用于治療腫瘤。
[0152] 本發(fā)明因此還設及與高溫或/和超聲波結合的本申請中描述的熱敏性脂質(zhì)體。加 熱在運種情況下可通過大量的方法諸如用溫水簡單地沖洗膀脫、借助于電磁波、超聲波或 激光加熱來實施。
[0153] 根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)、尤其是不耐熱的脂質(zhì)體，通過如下步驟 W常規(guī)的方式制備:例如在氯仿或氯仿/水/異丙醇中溶解脂質(zhì)，除去溶劑，有利地在旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)器中真空除去溶劑，用所述成分的水溶液將脂質(zhì)澤火W在高于相變溫度的溫度下使其囊 化。澤火處理的持續(xù)時間有利地為30至60分鐘但也可W較短或較長。均質(zhì)化通過重復的凍/ 融法進行，例如再次凍融2至5次。最后，將所得脂質(zhì)懸浮液在高于相變溫度的溫度下通過所 定義的孔徑尺寸的膜擠出W獲得期望的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)尺寸（？？），尤其是脂質(zhì) 體尺寸。適宜的膜例如為所定義孔徑尺寸如100至200nm的聚碳酸醋膜。最后，任何未囊化的 成分可被分離出，例如通過柱層析或類似方法分離出。
[0154] 局部治療中活性成分的釋放不限于膀脫腫瘤的治療。
[0155] 本發(fā)明因此還包括刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，用于治療其 它腫瘤，尤其是軟組織肉瘤、骨肉瘤、膀脫癌(肌肉侵入性膀脫癌[MIBC]和非肌肉侵入性膀 脫癌[醒IBC])、卵巢癌、胃癌、乳癌(尤其是Ξ陰性乳癌[TNBC])、肝細胞癌、子宮癌、甲狀腺 癌、頭-頸腫瘤、前列腺癌、脊索瘤、硬纖維腫瘤、膠質(zhì)母細胞瘤和或其它優(yōu)選具有局部蔓延 的腫瘤疾病。
[0156] 運種納米載體系統(tǒng)優(yōu)選包含適于治療所討論的腫瘤的活性成分，然后其在腫瘤內(nèi) 或在腫瘤附近刺激-敏感性釋放。
[0157] 治療腫瘤的適宜的活性成分為，例如，蔥環(huán)類抗生素（例如多柔比星、表柔比星）， 氧氮憐環(huán)類(例如徑基異環(huán)憐酷胺），銷類似物(順銷、奧沙利銷、卡銷），吉西他濱，5-氣尿喀 晚，紫杉醇，多西他賽，依托泊巧，托泊替康，長春新堿，伊立替康，甲氨噪嶺，博來霉素，酪氨 酸激酶抑制劑，小分子，DNA治療劑，或者放射敏化劑(與放療結合）。
[0158] 此外，根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)可用于治療感染性疾病，尤其是由 細菌、病毒、真菌或/和寄生蟲引起的感染性疾病。
[0159] 醫(yī)療植入物醫(yī)療植入物尤其是整形外科假體感染的治療、局部感染尤其是深度軟 組織或/和骨感染的治療、或/和多抗性病原體的治療是優(yōu)選的。
[0160] 為此目的，刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，優(yōu)選包含尤其選自 抗生素、病毒抑制劑、殺真菌劑、和具有抗寄生蟲作用的醫(yī)用藥物的活性成分?；钚猿煞痔?別優(yōu)選地選自：
[0161]抗生素，尤其是β-內(nèi)酷胺，糖膚類，聚酬類，氨基武類抗菌素，多膚類抗生素，哇諾 酬類，橫酷胺類(例如利奈挫胺、氣氯西林、頭抱挫林、克林霉素、萬古霉素、替考拉寧、利福 平、氨節(jié)西林、頭抱他晚、頭抱曲松、頭抱化朽、贓拉西林、氣哇諾酬類、甲硝挫、阿米卡星等） 或/和
[0162] 病毒抑制劑，尤其是6]1化7抑制劑化]11:巧-;[]111113；[1:0'6]1)、穿透抑制劑、0魁聚合酶 抑制劑、DNA/RNA聚合酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、肌巧一憐酸脫氨酶抑制劑、蛋白酶抑制 劑、整合酶抑制劑、解螺旋酶-引發(fā)酶抑制劑、親環(huán)素抑制劑、成熟抑制劑、末端酶抑制劑、神 經(jīng)氨酸酶抑制劑等，或/和
[0163]或殺真菌劑，尤其是挫類(苯并咪挫類（"MBC")、S挫類、咪挫類）、嗎嘟類、甲氧基 丙締酸醋類、哇嘟類、苯氨基-喀晚類、嗯挫燒-二酬、簇酸酷胺等。
[0164]根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，還可用于治療眼 睛疾病，尤其用于治療炎性、退化性、感染性或/和腫瘤性眼睛疾病、傷口愈合障礙或/和青 光眼。
[0165]在其它優(yōu)選的實施方案中，刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，還 可W用于治療自身免疫性疾病，尤其用于治療類風濕性關節(jié)炎或/和慢性炎性腸疾病。為此 目的，刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，優(yōu)選還包含一種活性成分，尤其是 類固醇、TNF-a或/和免疫抑制劑。
[0166]本發(fā)明還提供一種刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，用于診斷， 尤其用于采用MR顯影劑和MR成像進行非侵入性溫度測量。此種刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)， 尤其是熱敏性脂質(zhì)體，優(yōu)選包含作為活性成分的CT或MRT顯影劑，優(yōu)選選自含艦的顯影劑或 禮馨合物。
[0167]根據(jù)本發(fā)明的刺激-敏感性納米載體系統(tǒng)，尤其是熱敏性脂質(zhì)體，還可用于治療退 行性疾病，尤其是用于局部釋放消炎藥、鎮(zhèn)痛劑或/和軟骨保護劑。刺激-敏感性納米載體系 統(tǒng)、尤其是熱敏性脂質(zhì)體的其它應用領域，是癡呆綜合征、阿爾茨海默氏病或/和局灶性神 經(jīng)精神