philic)乳酸菌"。這種發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致以下結(jié)論:蜜露包含 來自蚧殼蟲和來自多種細(xì)菌的酶，其當(dāng)然也在某些所檢測的原蜜中。不局限于理論，認(rèn)為蜜 露酶會類似于蜜蜂唾液，因此還有助于方法的第二階段。
[0046] 多種有用形式的代表性兩步法中所用成分的描述如下。
[0047]原花粉:包含脂肪酸、多肽、EPA、DHA、長鏈烷烴、激素、維生素、植物激素、纖維素、 木質(zhì)素和類黃酮。
[0048] 原蜂蠟:包含信息素、植酸、幾丁質(zhì)和脂肪酸。
[0049] 原蜜:包含天然存在的細(xì)菌，例如乳酸菌。
[0050] 蜜露:包含鉀、糖、昆蟲酶和嗜果糖乳酸菌。
[0051] 菠蘿粉:包含菠蘿蛋白酶、同源絲氨酸蛋白酶、和肽酶;包含鉀。
[0052] 包含類黃酮和/或酶的替代性植物粉:樹番茄(抗氧化劑和酶）、黑加侖(抗氧化劑/ 細(xì)胞修復(fù)/腦功能）、卡瓦椒(kawa kawa)(膀胱和消化健康/抗氧化劑/消炎/排毒/痤瘡）、蜂 膠(痤瘡）、松樹皮(雌激素調(diào)節(jié)和遮光劑）、巴西莓、石榴、櫻桃(幫助睡眠/褪黑素）、獼猴桃、 木瓜和費約果?？扇缦滤鲋苽淅鋬龈稍锏闹参锓?。制備期望植物(例如，菠蘿、樹番茄、卡 瓦椒等）的漿。將產(chǎn)生的漿冷凍至_20°C持續(xù)48小時，然后冷凍干燥?；蛘?，可從Alaron GMP Manufacturers(Alaron Products ,Nelson，新西蘭)商購有用的冷凍干燥植物粉。或者，反 應(yīng)中可使用噴霧干燥或甚至新鮮的植物源，例如在取得冷凍干燥粉之前，最初使用菠蘿的 莖和果實。
[0053]其它有用的植物組分可包括但不限于:蘋果的果肉或果皮;鱷梨的漿或果皮；山毛 櫸的樹皮或葉子;藍莓；黑莓；巴西莓衆(zhòng)果、姜；葡萄皮;麻油；芮木淚柏(rimu)的樹皮或葉 子;姜黃;洋蔥;橙子;獼猴桃的果肉、果皮或籽；貝殼松(kauri)的樹皮或葉子;新西蘭桃花 心木(kohe kohe);芒果;麥盧卡(manuka)的油或葉子;諾麗果;橄欖的廢棄物、果皮或油;葡 萄籽油、摩洛哥堅果油、荷荷巴油和新西蘭圣誕樹(pohutakawa)。
[0054]椰奶（即椰子水）：包含激素和營養(yǎng)物。椰子水/椰奶是通過購買新鮮椰子并且在臨 使用前引流出新鮮椰奶得到的。商購的椰奶可被使用但不能被巴氏滅菌。
[0055] 椰子油：包含多肽、脂肪酸、EPA、DHA，和特別地肉豆蔻烷酸。一種有用的品牌是 Home Essentials品牌，100%。
[0056] 貽貝油:包含多肽、脂肪酸、EPA和DHA。
[0057] 某些蜂巢組分(例如，蜂蜜、蜜露、花粉、蜂錯、原蜂膠)來源于Scott Apiaries,以 以下銷售Hanmer Bees ,Hanmer Springs ,North Canterbury,新西蘭。可通過在黑暗密封的 玻璃容器中處理25g蜂膠/50mL水并在28°C下溫和旋轉(zhuǎn)5天來制備用作水提取物的蜂膠。
[0058] 甘油（即，丙三醇）可購自 Sigma Aldrich(St · Louis ,Missouri)。
[0059] 水可以是過濾的無菌雨水、蒸餾水、去離子水、RO水等。
[0060]制備實施例A(包括菠蘿粉）
[0061]混合以下成分:原花粉(50g)、原蜂蠟(25g)、菠蘿粉（12.5g)、原蜂蜜（12.5g)、甘油 (12.5g)和水（1000 mL)?；旌现螅瑢⒉讳P鋼容器中的反應(yīng)混合物加熱至60°C并攪拌15分 鐘。此時，無氧地密封鋼容器并加壓至120psi。將容器貯存在60°C下24小時。在此期間，容器 中的壓力增強，且混合物變得起泡和放熱。反應(yīng)在16-24小時內(nèi)自然停止。然后過濾溶液以 除去沉降物。將這種反應(yīng)產(chǎn)物提取物加熱、倒入乳膏配方(例如，實施例3)中，并利用打蛋器 手動攪打直至平滑(即，具有粘性相等的稠度）。
[0062] 該反應(yīng)產(chǎn)生了仍然具有蛋白酶活性、肽和甘油三酯的反應(yīng)產(chǎn)物溶液。
[0063] 以這種方式，反應(yīng)產(chǎn)物被配制為在可商購的水性乳膏中的5重量％ (參見，例如，實 驗水性乳膏制劑，實施例3)。在具有多種皮膚病的受試者上試驗這種配制的反應(yīng)產(chǎn)物。這種 反應(yīng)產(chǎn)物作用于老年斑、結(jié)痂性濕疹、牛皮癬、皰疹、軟疏體(corpus molIuscum)和痤瘡。但 是，當(dāng)用在發(fā)炎性濕疹或狼瘡上時，反應(yīng)產(chǎn)物引起刺激。
[0064]制備實施例B(包括菠蘿粉和樹番茄粉）
[0065]混合以下成分:原花粉(50g)、原蜂蠟(25g)、菠蘿粉(6.25g)、樹番茄粉(6.25g)、貽 貝油（25g)、蜂蜜（12.5g)、甘油（12.5g)和水（1000 mL)?；旌现螅瑢⒉讳P鋼容器中的反應(yīng)混 合物加熱至60°C并攪拌15分鐘。此時，無氧地密封鋼容器并加壓至120psi。將容器貯存在37 °〇下24小時。在此期間，容器中的壓力增強，且混合物變得起泡和放熱。反應(yīng)在16-24小時內(nèi) 自然停止。然后過濾溶液以除去沉降物。
[0066] 在這個實驗中，降低溫度以保護植物粉。該方法產(chǎn)生肽、酯化的脂肪酸和酯化的類 黃酮。這種較低的溫度還保護來自花粉的維生素和氨基酸免受熱變性。還考慮可使用其它 油代替貽貝油，包括但不限于貽貝油/椰子油（1:1重量/重量)的組合。
[0067] 到以上反應(yīng)產(chǎn)生和/或經(jīng)受發(fā)酵的程度，所產(chǎn)生的基于花粉的物質(zhì)被認(rèn)為是可發(fā) 酵的。
[0068] 在一個實施方式中，可在密閉的鋼容器或其它恰當(dāng)?shù)膲毫θ萜髦腥缢鲞M行花粉 打開發(fā)酵反應(yīng)。在一個替代性實施方式中，可在恰當(dāng)?shù)乃芰匣虿Ａ萜骰蚍磻?yīng)容器中有氧 地如所述進行花粉打開發(fā)酵反應(yīng)。
[0069] 此時的一個問題是:所有其它競爭者和本文所述的方法均涉及裂開花粉粒以釋放 其中的內(nèi)容物(非生物方法）。最期望的是生物方法，以生產(chǎn)生物活性狀態(tài)增強的那些生物 活性組分，如同花粉粒開始萌發(fā)時一樣。此時，內(nèi)容物在滲透過程中被制備為對于最佳萌發(fā) 為生物可利用的。
[0070] 植物細(xì)胞萌發(fā)過程等同于人類中的胚胎形成，因此對于細(xì)胞再生、分裂、傷口修復(fù) 等是最佳的。
[0071] 已知椰奶(又名椰子水)包含胚胎形成所需的所有營養(yǎng)物以及刺激細(xì)胞分裂和生 長的植物激素包括吲哚乙酸、赤霉素和生長素。椰奶還包含通過滲透萌發(fā)所需的鉀。一個研 究發(fā)現(xiàn):椰奶(現(xiàn)在稱為椰子水)可被用于使植物細(xì)胞變?yōu)槿艿暮陀蓡渭?xì)胞長成全新的植 物。這是利用洋桔梗物種來進行的，以前洋桔梗物種中沒有一種能夠再生，因為其不受正常 激素刺激物的影響（O'Brien等人，Plant Cell Tissue and Organ Culture(1993)33:31_ 37)。
[0072] 與裂開花粉粒不同，本文中展示了生物方法來觸發(fā)萌發(fā)并因此激活它，即產(chǎn)生增 強的生物活性。不局限于理論，認(rèn)為如果花粉粒萌發(fā)，則蜜露中和/或來自花粉本身的酶可 提供其它組分(例如，乳酸菌或菠蘿粉)能夠提供的蛋白酶/肽酶酶促反應(yīng)。
[0073] 基于鉀的滲透性吸收，花粉粒將開始萌發(fā)。如果用于反應(yīng)平臺中，則蜂蜜/蜜露和 菠蘿均包含足夠的鉀以觸發(fā)該反應(yīng)，在較溫暖溫度下尤其如此。椰奶中的鉀也很高，因此鉀 與植物激素的組合導(dǎo)致觸發(fā)萌發(fā)。
[0074] 通過使用椰子水，向產(chǎn)品中摻入了椰子水中所含的礦物質(zhì)和生長激素。這些組分 與花粉協(xié)同作用，以促進細(xì)胞更新和細(xì)胞修復(fù)，這與壓力源破裂或破壞花粉的效果不同。 [0075]結(jié)合以下實施例可進一步理解上述方法。
[0076]實施例1(反應(yīng)平臺）
[0077]混合以下成分:原花粉(50g)、椰奶(200ml)和蜜露（12.5g)。將這3種成分加熱至30 °C并攪拌30分鐘以刺激萌發(fā)。接下來，加入以下成分:熔化的原蜂蠟(25g)、甘油（12.5g)和 水(1000 mL)。任選的成分可包括:椰子油、菠蘿粉、或其它植物粉(如上文所列）。取決于加入 什么組分和最后期望的醫(yī)學(xué)或營養(yǎng)處理，反應(yīng)在251、30°〇、37°〇、42°〇或65°〇下進行。反應(yīng) 平臺可無氧地或有氧地實施。
[0078]實施例2(兩階段反應(yīng)平臺）
[0079] 以下進行的所有反應(yīng)均在37°C下無氧溫育72小時。任選地，可在37°C下使用蜂蠟， 從而導(dǎo)致反應(yīng)更加無氧(anaerobic)，因為蜂蠟在其它組分上形成固體蠟層。如果該反應(yīng)持 續(xù)7天，則蜂蠟被酶消化并變成溶液的一部分(即，自乳化）。
[0080] 實施例2A(濕疹/牛皮癬）
[0082](第1階段)在25°C下，將花粉浸在椰子水中30分鐘。同時在置于沸水中的不銹鋼碗 中熔化蜂蠟。一旦蜂蠟熔化便將其劇烈攪拌5分鐘，并將碗置于65°C保溫箱中，從而導(dǎo)致蜂 蠟保持為液體。
[0083] 浸泡60分鐘之后，然后將甘油攪拌進花粉混合物中，隨后將蜜露攪拌進花粉混合 物中。然后在25°C下攪拌該混合物30分鐘，這完成了第1部分。接下來，將椰子油攪拌進熔化 的蜂蠟中，這完成了第2部分。
[0084] 然后將花粉混合物(第1部分)攪拌進蜂蠟混合物中（第2部分)并用手劇烈攪拌全 部混合物約15分鐘直至形成粘稠的膠狀物(第1階段結(jié)束）。應(yīng)注意用手?jǐn)嚢枋琴M力的，在加 熱板上磁力攪拌會是有用的。
[0085] (第2階段)然后將這種膠狀混合物放入帶有螺旋密封型蓋的不銹鋼容器中并在37 °C下溫育至少72小時，這產(chǎn)生了分離的2階段提取物(第2階段結(jié)束）。
[0086] 在一個優(yōu)選的實施方式中，植物粉(或其它有用的植物部分)例如樹番茄、卡瓦椒 等可在膠狀物形成之后加入，然后使全部混合物在密閉條件和/或發(fā)酵下經(jīng)受加熱。在一個 替代性實施方式中，如果需要任何其它組分(例如，菠蘿粉、果粉等），則在膠狀物形成之后， 當(dāng)混合物冷卻時加入這些組分。也就是說，樹番茄、卡瓦椒等可在第2階段結(jié)束之后加入。
[0087] 在另一個實施方式中，其它組分(例如，菠蘿粉、樹番茄、卡瓦椒、果粉等)可在第2 階段結(jié)束之后加入并加熱。
[0088]應(yīng)該理解:第2階段的發(fā)酵過程可進行約24小時至168小時。在一個優(yōu)選的實施方 式中，溫育在37°C下進行約24小時至72小時。在一個更優(yōu)選的實施方式中，溫育在37°C下進 行約72小時。
[0089] 在另一個替代性實施方式中，增加第1階段中椰子水的含量可降低制造成本。
[0090] 在另一個替代性實施方式中，可使熔化的蜂蠟(或第2部分的組分)維持在較低溫 度(例如，42°C或37°C)下以保護其它更敏感的組分(例如，氨基酸、肽或脂肪酸）。在這個實 施方式中，蜂蠟自乳化入最終的產(chǎn)物混合物中。
[0091] 實施例2B(老年斑/光化性角化?。?br>[0093]實施例2C(抗微生物劑和創(chuàng)傷愈合）
[0095] *在反應(yīng)結(jié)束時加入。蜂膠被制備為25g/50ml水。
[0096] 實施例2D (抗病毒-皰疹、帶狀皰疹、軟疣體、水痘）
[0098] *在反應(yīng)結(jié)束時加入。蜂膠被制備為25g/50ml水。
[0099]在以下的實施例2E、2F和2G中，蜂蠟被省略，所以加入油之后溶液的更為液態(tài)(粘 性較低），且完成反應(yīng)耗費另外24-48小時。
[0100]實施例2E(化妝-美容/抗衰老）
[0102] *使微藻生長至指數(shù)期，離心并且在臨30°C下的發(fā)酵前向反應(yīng)容器中加入漿體。
[0103] 任選地，向該實施例中加入12.5g黑加侖粉作為抗氧化劑。
[0104]實施例2F(核心配方-任選的樹番茄）
[0106]實施例2G(化妝-美容/雌激素）
[0107]
[0108] *使微藻生長至指數(shù)期、離心并加入漿體。
[0109] 3松皮粉通過熱水提取松樹皮然后冷凍干燥來制備。
[0110] 化學(xué)分析