0346] 實(shí)施例11
[0347] 在治療的細(xì)胞中LAL活性增加
[0348]LAL催化膽固醇酯和甘油三酯水解為游離膽固醇、甘油以及游離脂肪酸。因此，LAL活性可以例如通過(guò)熒光底物4-甲基傘形酮油酸酯(4MU0)的裂解來(lái)測(cè)量。
[0349] 成纖維細(xì)胞
[0350] 使用正常和LAL-缺乏細(xì)胞在活體外檢查轉(zhuǎn)基因禽得到的LAL暴露增加細(xì)胞的LAL 活性的能力。成纖維細(xì)胞分離自沃爾曼氏病患者，并且將正常鼠類成纖維細(xì)胞(NIH-3T3)在 濃度為〇、〇. 16或0.5微克/mL的轉(zhuǎn)基因禽得到的LAL存在下孵育5小時(shí)。然后洗滌細(xì)胞以移除 非特異性信號(hào)，并且使用4-甲基傘形酮油酸酯(4-MU0)底物測(cè)定細(xì)胞溶胞物的LAL活性。圖 13證實(shí)了相比于NIH-3T3,內(nèi)源性細(xì)胞相關(guān)的LAL活性在沃爾曼氏病成纖維細(xì)胞中較低，并 且在與轉(zhuǎn)基因禽得到的LAL-起孵育后在兩種細(xì)胞類型中都觀察到LAL活性的劑量依賴性 增加(圖13)。
[0351]白細(xì)胞
[0352] 血清單核白細(xì)胞獲自施用前和施用后的LAL缺乏患者。血樣冷藏儲(chǔ)存，而不損失酶 的活性。使用Ficoll和泛影酸鈉的制劑從血液中分離單核白細(xì)胞(淋巴細(xì)胞）。將之前用漢 克斯平衡鹽溶液（Hanks'balancedsaltsolution) 1:1稀釋的4_8mL血液輕緩地在3mL Ficoll-Paque上分層并且離心。抽吸單核細(xì)胞環(huán)并且用漢克斯溶液洗滌一次，然后通過(guò)將 離心塊在l-2mL水中重懸而洗滌至少兩次。將離心塊在-20°C下冷凍，直到使用。在測(cè)定前， 將離心塊解凍，重懸在蒸餾水中，并且在冰上超聲處理。然后在4°C下，將制劑在20,000Xg 下離心15min。測(cè)定前將上清液(含有0.5-1.5mg蛋白質(zhì)/mL)保持在冰上。
[0353] 通過(guò)下列方式制備用于酸脂肪酶測(cè)定的底物:將lml含10mM4MU0(4_甲基傘形酮油 酸酯）的己燒添加至1mL含16mML-α-磷脂酰膽堿的CHC13中。在N2下蒸發(fā)溶劑，并且添加25ml 的2.4mM?；敲撗跄懰?鈉鹽)水溶液。將混合物在30-40W下在冰上超聲處理1 -2min。在測(cè)定 之前，將1體積的底物儲(chǔ)備液用7體積的200mM乙酸鈉/乙酸緩沖液(pH4.0)稀釋。各個(gè)2mL反 應(yīng)試杯均含有l(wèi)OOnmol4-甲基傘形酮油酸酯、160nmolL-a-磷脂酰膽堿以及600nmol?；?脫氧膽酸鈉。
[0354] 通過(guò)添加5-100yL酶來(lái)開始反應(yīng)，并且在37°C下使用熒光分光光度計(jì)來(lái)監(jiān)控。4MU0 的裂解通過(guò)例如所釋放的焚光團(tuán)4-甲基傘形酮(4MU)在約360nm處的激發(fā)和在460nm處的發(fā) 射來(lái)檢測(cè)。記錄熒光隨時(shí)間的變化。
[0355] 實(shí)施例12
[0356] 重組人LAL(SBC-102)的活體內(nèi)分析
[0357] 將LAL-缺乏Yoshida大鼠（即，純合）（參見(jiàn)Kuriyama等·（1990)，JournalofLipid Research,第31 卷，第1605-1611 頁(yè)；Nakagawa等.，（1995)Jou;rnalofLipidResearch,第 36卷，第2212-2218頁(yè)；以及Yoshida和Kuriyama(1990)LaboratoryAnimalScience，第40 卷，第486-489頁(yè)）用SBC-102 (5mg/kg，IV)或安慰劑治療，在4周齡時(shí)開始每周一次持續(xù)4周。 對(duì)于每次施用，將SBC-102以兩個(gè)相等劑量(2.5mg/kg)間隔30分鐘注射到大鼠尾靜脈中。在 最后一個(gè)劑量一周后檢查大鼠和年齡匹配的野生型對(duì)照。一式三份進(jìn)行分析。
[0358] SBC-102治療的動(dòng)物的宏觀病理學(xué)檢查證實(shí)除了器官大小減小，肝臟顏色也正常 化。SBC-102治療的大鼠顯示基本上正常的肝臟組織學(xué)，這與泡沫狀巨噬細(xì)胞在媒介物治療 的動(dòng)物中的實(shí)質(zhì)性積聚形成明顯對(duì)照。在LAL+大鼠中升高的血清丙氨酸和天冬氨酸轉(zhuǎn)移 酶水平在SBC-102治療的大鼠中也降低。
[0359] 測(cè)定各大鼠的內(nèi)部器官和組織的質(zhì)量，并且數(shù)據(jù)示于圖14中。器官大小表示為在 每周施用媒介物或5mg/kg的SBC-102持續(xù)4周后，在8周齡時(shí)在LAL+大鼠和LAL+a大鼠中測(cè) 定的體重的百分率。
[0360] 如圖15所示，將SBC-102或媒介物治療的Yoshida大鼠的體重與野生型大鼠相比 較。SBC-102 (5mg/kg)或媒介物通過(guò)IV注射以單次劑量或分開劑量(在4小時(shí)的時(shí)期內(nèi)給予） 施用至LAL+大鼠。LAL+a大鼠是年齡匹配的同窩出生的對(duì)照。
[0361] 實(shí)施例13 [0362]甘油三酯分析
[0363] 對(duì)來(lái)自野生型、純合安慰劑和純合SBC-102治療的動(dòng)物的肝臟和脾臟組織進(jìn)行甘 油三酯分析。使用標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)進(jìn)行甘油三酯分析（即MBLInternational的甘油三酯量化試 劑盒，目錄號(hào):JM-K622-100)，并且以一式三份進(jìn)行。
[0364] 表6:野生型和LAL缺乏大鼠的肝臟和脾臟的甘油三酯水平
[0366] 肝臟底物水平
[0367] 圖16示出在每周施用媒介物或5mg·kg"1的SBC-102持續(xù)4周后在8周齡時(shí)在WT和 LAL缺乏大鼠中測(cè)得的肝臟膽固醇、膽固醇酯以及甘油三酯水平。
[0368] 實(shí)施例14
[0369]大鼠劑量反應(yīng)研究
[0370] 基于以上進(jìn)行的研究，在LAL+大鼠中檢查L(zhǎng)AL( "SBC-102"）的劑量范圍和給藥方 案(qw和qow)的藥效學(xué)(PD)作用。在這些研究中，SBC-102通過(guò)IV注射以0.2、1、3和5mg/kg的 劑量q〇w施用，或者以0.35、1.0和5.Omg/kgqw施用，開始于4周齡持續(xù)1個(gè)月。結(jié)果證實(shí)體重 (BW)增加改善（圖17)、器官巨大癥改善（圖18)并且組織底物水平改善（圖19)。隨著SBC-102 劑量增加，血清轉(zhuǎn)氨酶水平也降低，在較高劑量下水平基本上達(dá)到野生型水平。
[0371] 實(shí)施例15
[0372] SBC-102的藥物代謝動(dòng)力學(xué) [0373]a.取樣
[0374]PK樣品取自患有遲發(fā)性LAL缺乏的成年患者?；颊弑唤o予0.35mg/kg，持續(xù)2小時(shí)。 在第〇天(劑量1，第2次就診)和第21天(劑量4,第6次就診）的血清樣品是在臨給藥前(給藥 30分鐘內(nèi)）；在輸注過(guò)程中（DI)在 10(±1)、15(±1)、20(±1)、40(±2)、60(±2)和90(±2) 分鐘和在輸注結(jié)束(Ε0Ι)(自開始輸注約120分鐘)時(shí)；以及在完成輸注(AI)后5(±1)、10(± 1)、20(±1)、30(±1)、40(±2)、60(±2)以及120(±2)分鐘收集。
[0375] b血清酶測(cè)定
[0376] 將保持在-20°C冷凍器中的4_MU0(4mM)在黑暗中在4°C冰箱中解凍，并且在使用前 置于黑暗中25°C的孵育器中1.5小時(shí)。通過(guò)稀釋SBC-102藥品至1.56ng/mL來(lái)制備標(biāo)準(zhǔn)品。包 括空白測(cè)定緩沖液。對(duì)于第一次稀釋將所有樣品稀釋至50ng/mL。在制備稀釋液后，立即涂 鋪標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。在制備標(biāo)準(zhǔn)品和樣品后，將62.5yL的測(cè)定緩沖液(0.2mol/L乙酸鈉三水合 物，pH5.5)添加至各孔中。將12.5yL的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入各孔，一式兩份。用4 %TritonX-100將4-MU0(4mM)稀釋1.6倍，并且每孔添加25yL。將多孔板輕拍數(shù)次以進(jìn)行混合，緊密密封 并且置于37°C的孵育器中30分鐘。在孵育后，將50yL的停止溶液(0.77MTrispH8.0)加入 各孔以使最終體積為150μ!7孔。將板置于微板讀取器上，并且從板的底部在360nm的激發(fā)和 460nm的發(fā)射下測(cè)量焚光水平。
[0377]如表7-11中所示，施用至患有遲發(fā)性LAL缺乏的成年患者的重組LAL的血清Cmax在 約270ng/mL至720ng/mL范圍內(nèi)。半衰期（t1/2)在7.6分鐘至16.7分鐘范圍內(nèi)，并且平均七1/2為 約13分鐘(標(biāo)準(zhǔn)偏差，3.812)。
[0381 ] Cmax= 369.93ng/mL；ti/2= 16.8min；LL0Q= 4.68ng/ml
[0382]表 8
[0395] Cmax= 379ng/mL；ti/2 = 7.7min；LL0Q= 4.68ng/ml
[0396]實(shí)施例16
[0397]免疫原性分析:抗SBC-102的測(cè)量
[0398]將各未知的陽(yáng)性和陰性樣品在于1XroS中的5 %奶粉中以1:20稀釋，并且在旋轉(zhuǎn) 器(500rpm)上在4°C下孵育12-18小時(shí)。在測(cè)定之前，將樣品以2000Xg離心20分鐘，并且將 上清液移出至新的1.5ml管中。
[0399] 將SBC-102在lxros緩沖液中稀釋至濃度為0.5yg/mL，并且將100yL放置在96-孔 ELISA板的各孔中。將板用粘性蓋覆蓋，并且在室溫下孵育8小時(shí)或在4°C下孵育過(guò)夜。在孵 育后，將孔用1X洗滌緩沖液洗滌三次。將200yL的游離5 %BSA-IgG加入各孔，并且將板密 封，并且在4°C下孵育12-18小時(shí)或在室溫下孵育2小時(shí)。在孵育后，將孔用IX洗滌緩沖液洗 滌三次。將l〇〇yL的各對(duì)照樣品、未知樣品以及陰性樣品加入孔中，一式三份。將板在微板振 蕩器(500rpm)上在室溫下孵育1.5小時(shí)。在孵育后，將孔用IX洗滌緩沖液洗滌三次。將100μ L的在稀釋緩沖液中稀釋至濃度為100ng/mL的生物素化SBC-102加入各孔中，并且將板在微 板振蕩器(500rpm)上在室溫下孵育1.5小時(shí)。在孵育后，將孔用IX洗滌緩沖液洗滌三次。將 100yL的在稀釋緩沖液中以1:4000稀釋的抗生蛋白鏈菌素-HRP綴合物加入各孔中。將板在 微板振蕩器(500rpm)上在室溫下孵育1.5小時(shí)。在孵育后，將孔用IX洗滌緩沖液洗滌四次。 將100yL的TMB底物加入各孔中并且將板在黑暗中孵育15分鐘。將50yL的停止溶液（0.5N H2S〇4)加入各孔中以停止反應(yīng)。測(cè)量在450nm下的0D。
[0400]如表12中所列出，每周接受劑量0.35mg/kg的SBC-102持續(xù)4周的患者并未展現(xiàn)出 抗SBC-102抗體的水平提高，表明SBC-102輸注的酶替代療法沒(méi)有在人患者中引發(fā)任何明顯 的免疫原性。這些患者并未展現(xiàn)出任何不良事件或輸注相關(guān)的反應(yīng)(IRR)。
[0401] 表12
[0403] 實(shí)施例17
[0404] 通過(guò)施用重組LAL治療沃爾曼氏病(WD)
[0405]在7周齡時(shí)，女性患者因?yàn)槌錾笤鲋乩щy和發(fā)展不良而住院。在初始身體檢查 時(shí)，患者體重3.6kg(出生體重3.7kg)并且消瘦，具有松垂的皮膚褶皺。腹部脹大，具有6cm的 硬性肝腫大和約4cm的硬性脾腫大。在腹股溝中注意到增大的淋巴結(jié)并且肌肉活動(dòng)性弱。 [0406]初始血紅蛋白水平為9.2gm，血小板為506，000并且白血球?yàn)?1，550。尿分析正常， 并且骨髓涂片揭示了空泡狀淋巴細(xì)胞和大量泡沫狀細(xì)胞。血清化學(xué)測(cè)量：總脂質(zhì)834mg/ 100ml、憐脂 176mg/100ml、甘油三酯 141mg/100ml、膽固醇 129mg/100ml、膽紅素0 · 3mg/ 100ml、堿性磷酸酶9.0BU%、SG0T90單位、SGPT50單位、膽堿酯酶20單位、尿氮8.3mg、空腹 血糖45mg/100ml。腹部的CT掃描顯示肝脾腫大和鈣化的雙側(cè)對(duì)稱增大的腎上腺。
[0407] 患者外科植入靜脈血管接入端口用于給藥。在將端口連接至攜帶式輸注機(jī)后，用 lmg/kg的苯海拉明對(duì)患者進(jìn)行預(yù)治療，20分鐘輸注重組LAL，以便抵消潛在的過(guò)敏性輸注反 應(yīng)。然后，通過(guò)靜脈內(nèi)輸注經(jīng)5小時(shí)的過(guò)程將lmg/kg的重組LAL施用給患者。無(wú)限期地每7天 重復(fù)這種治療一次。
[0408] 在施用第一次劑量的重組LAL兩周內(nèi)，評(píng)估患者的增重，并且如通過(guò)超聲所測(cè)定評(píng) 估關(guān)鍵腹部器官的大小。還進(jìn)行了檢驗(yàn)患者的溶酶體酸性脂肪酶活性的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。
[0409]實(shí)施例18
[0410]通過(guò)施用重組LAL治療膽固醇酯貯積病(CESD)
[0411] 由兒科醫(yī)生檢查患有瘙癢性腹部皮疹的3歲男孩。在腹部檢查時(shí)，醫(yī)生注意到肝腫 大并且通過(guò)超聲確認(rèn)。此時(shí)，未作出診斷并且定期監(jiān)控患者。
[0412]在8歲時(shí)，他因胃腸炎住院。肝臟活組織檢查的光顯微術(shù)顯示肝細(xì)胞中胞質(zhì)內(nèi)糖原 增加并且有小脂質(zhì)微滴。電子顯微鏡檢查顯示膜結(jié)合的脂質(zhì)微滴具有小電子致密顆粒。作 出了III型糖原積病(脫支積病(DeBrancherdisease))的工作診斷，但皮膚成纖維細(xì) 胞脫支活性正常。
[0413]在10歲時(shí)，肝腫大持續(xù)并且進(jìn)行了第二次肝臟活組織檢查。光顯微術(shù)顯示肝實(shí)質(zhì) 的小葉結(jié)構(gòu)改變，其中脹大的肝細(xì)胞含有細(xì)胞質(zhì)顆粒和伴隨輕度門靜脈周纖維化的空泡。 發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞酸脂肪酶活性為正常的7%，從而確診了CESD?？偰懝檀迹═C)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的血漿濃度各自高于年齡和性別的第95個(gè)百分位數(shù)，分 別在7.51、3.24以及5.58111111 〇1/1，而血漿高密度脂蛋白膽固醇(!101^-〇低于第5個(gè)百分位數(shù)， 在0.47mmol/L;他具有混合型尚脂質(zhì)血癥（尚膽固醇血癥、尚甘油二酯血癥、低α脂蛋白血癥 以及尚Μ旨蛋白血癥）。
[0414]患者外科植入靜脈血管接入端口用于給藥。在將端口連接至攜帶式輸注機(jī)后，用 5mg/kg的苯海拉明對(duì)患者進(jìn)行預(yù)治療，20分鐘輸注重組LAL，以便抵消潛在的過(guò)敏性輸注反 應(yīng)。然后，通過(guò)靜脈內(nèi)輸注經(jīng)5小時(shí)的過(guò)程將5mg/kg的重組LAL施用給患者。無(wú)限期地每14天 重復(fù)這種治療一次。
[0415]在施用第一次劑量的重組LAL兩周內(nèi)，評(píng)估患者的增重，并且如通過(guò)超聲所測(cè)定評(píng) 估關(guān)鍵腹部器官的大小。還進(jìn)行了檢驗(yàn)患者的溶酶體酸性脂肪酶活性的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。
[0416] 氺氺氺
[0417]提供上述說(shuō)明書中的各實(shí)施例來(lái)解釋本發(fā)明而非限制本發(fā)明。事實(shí)上，本領(lǐng)域的 技術(shù)人員應(yīng)明白，在不偏離本發(fā)明的范圍或精神的情況下，可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種修改、組 合、添加、刪除以及變化。例如，說(shuō)明或描述為一個(gè)實(shí)施方案的一部分的特征可以用在另一 實(shí)施方案中以產(chǎn)生又一實(shí)施方案。本發(fā)明意欲涵蓋這些修改、組合、添加、刪除以及變化。 [0418]本文引用的所有公布、專利、專利申請(qǐng)、互聯(lián)網(wǎng)網(wǎng)站以及登錄號(hào)/數(shù)據(jù)庫(kù)序列(包括 多核苷酸和多肽序列）是出于所有目的通過(guò)引用的方式全部并入，其并入的程度就如同各 單個(gè)公布、專利、專利申請(qǐng)、互聯(lián)網(wǎng)網(wǎng)站以及登錄號(hào)/數(shù)據(jù)庫(kù)序列被特定和單獨(dú)地通過(guò)引用 并入一般。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療患有溶酶體酸性脂肪酶(LAL)缺乏的人患者的方法，其包括向所述人患者 施用重組人LAL，其中所述施用足以改善所述人患者的肝功能。2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述施用足以使肝臟檢驗(yàn)正?；?。3. 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述施用足以使肝腫大減至最小。4. 如權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低肝臟大小。5. 如權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低血清肝轉(zhuǎn)氨酶水平。6. 如權(quán)利要求1~5中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低脂質(zhì)水平。7. 如權(quán)利要求1~6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低甘油三酯水平。8. 如權(quán)利要求1~7中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低膽固醇酯水平。9. 一種增加患有LAL缺乏的人患者的LAL活性的方法，所述方法包括將重組人LAL施用 至所述患者，其中所述施用使得所述患者的LAL活性增加。10. 如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述施用足以將所述患者的LAL活性增加至少大約 35pmol/mg/分鐘。11. 一種在需要的患者中治療LAL缺乏相關(guān)的病狀的方法，其包括每5天1次至每30天1 次向所述患者施用治療有效量的外源LAL蛋白。12. -種在需要的患者中治療LAL缺乏相關(guān)的病狀的方法，其包括每7天1次至每14天1 次向所述患者施用〇. 1~50mg/kg的劑量的外源LAL蛋白。13. -種在需要的患者中治療LAL缺乏相關(guān)的病狀的方法，其包括向所述患者施用0.1 ~50mg/kg的劑量的外源LAL蛋白。14. 一種在需要的人患者中治療沃爾曼氏病或CESD的方法，其包括每5天1次至每30天1 次向所述患者施用約〇. 1~50mg/kg的劑量的外源LAL蛋白。15. 如權(quán)利要求11~14中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述外源LAL是重組人LAL。16. 如權(quán)利要求11~15中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述外源LAL包含至少一個(gè)甘露糖或 至少一個(gè)甘露糖-6-磷酸。17. 如權(quán)利要求1~12或14~16中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述LAL以約0.10~約 5.0mg/kg的量施用。18. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述量是約0.3mg/kg。19. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述量是約0.35mg/kg。20. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述量是約1.Omg/kg。21. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述量是約3.Omg/kg。22. 如權(quán)利要求1~21中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用約每周進(jìn)行一次。23. 如權(quán)利要求1~21中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用約每?jī)芍苓M(jìn)行一次。24. 如權(quán)利要求1~23中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以將血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶 (AST)的水平從治療前水平降低至少50%。25. 如權(quán)利要求1~24中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以將血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 (AST)的水平從治療前水平降低至少50%。26. 如權(quán)利要求1~25中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以使LAL半衰期(t1/2)少于 約17分鐘。27. 如權(quán)利要求1~26中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以使LAL半衰期(t1/2)為約 6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17分鐘。28. 如權(quán)利要求1~27中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以使Cmax為每mL血清至少 約200ng。29. 如權(quán)利要求1~28中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以使Uax為每mL血清約 200ng至每mL血清800ng之間。30. 如權(quán)利要求1~29中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述LAL被成纖維細(xì)胞內(nèi)化。31. 如權(quán)利要求1~30中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述LAL被巨噬細(xì)胞內(nèi)化。32. 如權(quán)利要求1~31中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述LAL由轉(zhuǎn)基因禽類產(chǎn)生。33. 如權(quán)利要求1~31中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述LAL由哺乳動(dòng)物細(xì)胞系產(chǎn)生。34. 如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物細(xì)胞系是人細(xì)胞系。35. 如權(quán)利要求1~34中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用是靜脈內(nèi)的。36. 如權(quán)利要求35所述的方法，其中所述施用是通過(guò)輸注的。37. 如權(quán)利要求35所述的方法，其中所述輸注為約2小時(shí)至約4小時(shí)。38. 如權(quán)利要求36或37所述的方法，其中所述輸注的速率是約0.lmg/kg/h至約4mg/kg/ h〇39. 如權(quán)利要求1~38中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用使對(duì)重組人LAL的免疫反應(yīng) 減至最小。40. 如權(quán)利要求1~39中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用減輕淋巴結(jié)病。41. 如權(quán)利要求1~40中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以降低血清鐵蛋白水平。42. 如權(quán)利要求1~41中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以增加血清血紅蛋白水 平。43. 如權(quán)利要求1~42中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以增加兒童患者的生長(zhǎng)。44. 如權(quán)利要求1~43中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以增加體重增加的速率。45. 如權(quán)利要求1~44中任一項(xiàng)所述的方法，其中施用后所述患者的生長(zhǎng)速率為施用前 所述患者的生長(zhǎng)速率的至少約2倍。46. 如權(quán)利要求1~45中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述施用足以增加脂肪組織。47. 如權(quán)利要求1~46中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述患者小于1歲。48. 如權(quán)利要求1~46中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述患者至少1歲。49. 如權(quán)利要求1~48中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述患者已被診斷為沃爾曼氏病。50. 如權(quán)利要求1~49中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述患者已被診斷為膽固醇酯貯積病 (CESD)〇51. 如權(quán)利要求50所述的方法，其中所述CESD是在10歲前被診斷的。52. 如權(quán)利要求1~51中任一項(xiàng)所述的方法，其進(jìn)一步包括施用第二治療劑。53. 如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述第二治療劑是降膽固醇藥物。54. 如權(quán)利要求53所述的方法，其中所述第二治療劑是斯達(dá)汀。55. 如權(quán)利要求53所述的方法，其中所述第二治療劑是依澤替米貝。56. 如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述第二治療劑減少LAL的免疫原性。57. 如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述第二治療劑是抗組胺劑。58. 如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述第二治療劑是免疫抑制劑。59. 如權(quán)利要求57所述的方法，其中所述抗組胺劑是在LAL施用之前施用的藥物有效劑 量的苯海拉明。60. 如權(quán)利要求59所述的方法，其中所述苯海拉明的劑量為約1~約5mg/kg。61. 如權(quán)利要求59或60所述的方法，其中所述苯海拉明在施用LAL之前約20~約90分鐘 施用。62. 如權(quán)利要求1~61中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述方法進(jìn)一步包括完成評(píng)價(jià)以監(jiān)控 患者的臨床和病理學(xué)表現(xiàn)。63. 如權(quán)利要求62所述的方法，其中所述評(píng)價(jià)為：脂質(zhì)分析、胸部X-射線、肝功能檢驗(yàn)、 糞便分類檢查、血漿甲羥戊酸分析、免疫原性檢驗(yàn)、血漿溶酶體酸性脂肪酶分析、殼三糖苷 酶分析、門脈高血壓分析、人體測(cè)量、肝或脾的分析、胃腸道成像、或它們的組合。64. 如權(quán)利要求63所述的方法，其中所述成像技術(shù)是超聲波、核磁共振成像或核磁共振 光譜法。65. -種組合物，用于根據(jù)權(quán)利要求1~64中任一項(xiàng)所述的方法施用LAL。
【專利摘要】本發(fā)明提供LAL缺乏(例如沃爾曼氏病，CESD)的治療，所述治療包括以有效給藥頻率向哺乳動(dòng)物施用治療有效量的溶酶體酸性脂肪酶。還提供了在患有LAL缺乏的人患者中改善生長(zhǎng)和肝功能、增加LAL組織濃度和增加LAL活性的方法。
【IPC分類】A61K31/135, A61K31/366, A61K31/397, A61K38/46, A61P3/06
【公開號(hào)】CN105457018
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511021370
【發(fā)明人】A·奎因
【申請(qǐng)人】辛那杰瓦生物制藥股份有限公司
【公開日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2011年9月9日
【公告號(hào)】CA2810999A1, CN103200958A, EP2613798A1, EP2613798B1, EP2977057A1, US8663631, US20120064055, US20140348752, US20160051638, WO2012050695A1