顆粒化或涂布方法來制造。
[0063] 此外，作為上述非口服形態(tài)，可以為透皮施用型劑型，例如注射劑、點(diǎn)滴劑、軟膏、 洗劑、凝膠、霜、噴劑、懸浮劑、乳劑、栓劑、貼片等劑型，但并不限于此。
[0064] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的上述藥物組合物可以通過非口服、直腸、局部、透皮、 皮下等施用。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的藥物組合物例如可以局部施用于頭皮。
[0065] 上述有效成分的施用量的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的水平內(nèi)，藥物的1天施用量雖 然根據(jù)想要施用的對象的彌漫進(jìn)行程度、發(fā)病時(shí)期、年齡、健康狀態(tài)、并發(fā)癥等多種因素而 不同，但以成人為基準(zhǔn)時(shí)，一方面可以將lyg/kg至200mg/kg的上述組合物，另一方面可以將 50yg/kg至50mg/kg的上述組合物，1天分為1至3次施用，上述施用量無論何種方法也都不能 限定本發(fā)明的范圍。
[0066] 此外，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的生發(fā)或育發(fā)促進(jìn)用組合物可以是皮膚外用藥， 上述皮膚外用藥是可以包括在皮膚外部涂布的任一種藥的總稱，多種劑型的化妝品、醫(yī)藥 品可以包含于此。
[0067] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的健康食品組合物中，上述組合物可以是液狀或固體狀 態(tài)的劑型，可以為片劑、膠囊劑、軟質(zhì)膠囊劑、丸劑、顆粒劑、飲料（飲劑）、減肥棒（d i e t bar)、巧克力、焦糖劑型或餅干類劑型，對其劑型沒有特別限定。本發(fā)明的健康食品組合物 除了 21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3有效成分以外，還可以根據(jù)需要適當(dāng)含有賦形劑、糖類、香料、 色素、油脂類、蛋白質(zhì)等。
[0068] 健康食品組合物中所包含的有效成分即化學(xué)式1所表示的茶皂醇衍生物或21-0- 當(dāng)歸酰基茶皂醇E3的含量沒有特別限制，但以組合物總重量為基準(zhǔn)，可以為0.001至20重 量％，另一方面，可以為0.01至15重量％、0.01至10重量％、或0.1至5重量％。在上述有效成 分滿足上述含量的情況下，可以無副作用地顯示出優(yōu)異的功效。
[0069] 通過以下的實(shí)施例，更詳細(xì)說明本發(fā)明。但實(shí)施例用于例示本發(fā)明，本發(fā)明的范圍 并不僅限于此。
[0070] [制造例1 ]來自綠茶皂苷的21 -0-當(dāng)歸?；柙泶糆3的制造
[0071]在綠茶種子2kg中放入己酸6升，在常溫下攪拌提取并脫脂后，向脫脂后的綠茶種 子lkg中放入50%乙醇4升，3次回流提取后，使其在15°C沉降1天。之后，通過濾布過濾和離 心分離，將殘?jiān)c濾液分離，將分離的濾液減壓濃縮，并將所得到的提取物懸浮于水后，用1 升乙醚提取5次而去除色素，用1-丁醇500ml將水層提取3次。由此得到的全部1-丁醇層減壓 濃縮，得到1-丁醇提取物，將其溶解于少量的甲醇后，添加大量的乙酸乙酯，將所生成的沉 淀物干燥，從而獲得綠茶種子提取物300g。
[0072] 在上述獲得的綠茶種子提取物10g中，加入20倍(v/w)的IN HC1-50%甲醇溶液(v/ v)，在80°C水浴槽中進(jìn)行8小時(shí)的加熱回流，使與綠茶種子粗制皂苷結(jié)合的糖進(jìn)行水解。將 反應(yīng)液減壓濃縮而去除溶劑，向殘?jiān)屑尤胍掖?200ml)并攪拌后(3次），通過過濾去除沉 淀的鹽，然后將過濾的濾液減壓濃縮而獲得粗產(chǎn)物后，利用硅膠柱色譜(氯仿：甲醇= 7:1~ 3:1)將獲得的粗產(chǎn)物分離，獲得21-0-當(dāng)歸酰基茶皂醇E3 0.55。利用Varian Gemini 2000 300MHz(Varian公司），確認(rèn)上述獲得物是否為21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3,結(jié)果是，顯示出本 說明書參考的韓國專利申請10-2008-0088127號(hào)發(fā)明的詳細(xì)說明的實(shí)驗(yàn)例1相同的結(jié)果。
[0073] [試驗(yàn)例1]毛發(fā)生長因子VEGF在毛乳頭細(xì)胞中的表達(dá)評價(jià)
[0074] 為了確認(rèn)21-0-當(dāng)歸酰基茶皂醇E3使作為血管形成所需的生因子的、作為過渡到 毛發(fā)生長期所需的生長因子的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(Vascular endothelial growth factor;VEGF)表達(dá)的程度，應(yīng)用活體外（in vitro)體系，使用來自綠茶阜苷的21-0-當(dāng)歸酰 基茶皂醇E3后，評價(jià)活性。
[0075] 為了上述實(shí)驗(yàn)，將47歲男性的毛乳頭真皮細(xì)胞（Dermal Papilla Cell ;DPC) (Ρ· 11)以4X105細(xì)胞接種（seeding)于12孔板(well plate)，并在含有10%FBS(胎牛血清， fetal bovine serum)的DMEM(達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基，Dulbecco's modified Eagle' s medium)培養(yǎng)基中培養(yǎng)一晚。培養(yǎng)后，用20ppm的來自綠茶阜苷的21-0-當(dāng)歸?；韪反糆3 進(jìn)行處理。作為陰性對照組，使用DMS0。24小時(shí)后，收集(soup collect)用來自綠茶阜苷的 21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3處理后的混合液，使用VEGF ELISA(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免 疫吸附試驗(yàn)（Vascular endothelial growth factor Enzyme-Linked Immunosorbent Assay);R&D biosyste ms)，確認(rèn)來自綠茶阜苷的21-0-當(dāng)歸?；韪反糆3的表達(dá)程度。并 且，將其結(jié)果示于表1。
[0076]如表1所示可確認(rèn)到，來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3與對照組相比顯示 出大的效果差異，使毛發(fā)生長因子VEGF在毛乳頭細(xì)胞中的表達(dá)增加約3倍以上。由此可知， 根據(jù)本發(fā)明的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3具有優(yōu)異的毛發(fā)生成促進(jìn)能力。
[0077] 表 1
[0078] [表1]
[0080][試驗(yàn)例2]毛囊毛乳頭細(xì)胞增殖效果評價(jià)
[0081]構(gòu)成毛發(fā)的角蛋白由毛根部角蛋白形成細(xì)胞(keratinocyte)生成，該角蛋白形成 細(xì)胞由毛乳頭細(xì)胞分化。因此，如果根據(jù)本發(fā)明的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸酰基茶皂醇E3 促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞的活性，則能夠促進(jìn)由其分化的角蛋白形成細(xì)胞的活性，進(jìn)而能夠促進(jìn)毛 發(fā)生成。
[0082]由此，在本實(shí)驗(yàn)中，如下評價(jià)來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3的毛乳頭細(xì) 胞活性促進(jìn)效果。
[0083] 首先，本發(fā)明中，使用了人毛乳頭細(xì)胞（Human dermal papilla cell，首爾大學(xué) Kwon，0h Sang教授)細(xì)胞株。利用含有10%胎牛血清(FBS)的達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基 (DMEM;Gibco BRL，Gaithersburg，MD，USA)，在維持5%C02、37°C 的培養(yǎng)箱中，將上述細(xì)胞株 培養(yǎng)24小時(shí)后，分別用lppm、10ppm和20ppm的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸酰基茶皂醇E3進(jìn)行 處理。作為陰性對照組，使用了 DMS0。用試驗(yàn)物質(zhì)進(jìn)行處理后，在經(jīng)過24小時(shí)后，使用WST-1 試劑盒(Roche)，測定細(xì)胞增殖能力（％ )。將其結(jié)果示于表2。
[0084]如表2所示，根據(jù)本發(fā)明的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3在lOppm和 20ppm時(shí)均顯著增加兩種細(xì)胞的增殖。特別是，在用20ppm的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；?茶皂醇E3進(jìn)行處理時(shí)，顯示出與對照組相比約1.5倍以上高的毛乳頭細(xì)胞增殖增加率。這表 明，根據(jù)本發(fā)明的來自綠茶皂苷的21-0-當(dāng)歸?；柙泶糆3能夠促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞的增殖，也 能夠更有效促進(jìn)角蛋白形成細(xì)胞的活性和毛發(fā)生成。
[0085] 表 2
[0086] [表2]
[0088] [試驗(yàn)例3]利用人體毛囊器官的毛發(fā)生長促進(jìn)效果評價(jià)
[0089] 實(shí)施了對于本發(fā)明在實(shí)際人體毛囊器官中的毛發(fā)生長促進(jìn)能力的實(shí)驗(yàn)。
[0090] 從55歲男性的后頭部頭皮組織分離一個(gè)毛囊器官，在William's E培養(yǎng)基(含有L-谷氨酰胺(2mM)、胰島素（lOμg/ml)、氫化可的松(40ng/ml)、抗生素（1%)、抗真菌藥（1%)) 中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后第3天篩選出生長的毛囊并將其切成3_，對于該篩選出的毛囊組織，將 未進(jìn)行藥物處理的毛囊組織作為對照組，且分別用lppm、3ppm和5ppm的來自綠茶阜苷的2 ΙΟ-當(dāng)歸酰基茶皂醇 E3 進(jìn)行處理。并且，處理 8 天后分別測定長度以及照相。將其結(jié)果示于表