葡聚糖組合物本發(fā)明涉及包含膠凝劑和葡聚糖的新組合物，以及其作為藥物、作為醫(yī)療裝置、加入醫(yī)療裝置、作為營養(yǎng)品、美容產品等的用途。優(yōu)選地，這種組合物用作原始傷口敷料，其可以被直接應用于傷口表面或者提供在基底上以形成復合材料。還描述了應用葡聚糖組合物以治療傷口的方法。本文還描述了傷口敷料和試劑盒。葡聚糖是在植物、細菌、真菌和原生動物的細胞壁等中發(fā)現(xiàn)的一組異質的葡萄糖聚合物。葡聚糖具有骨架鏈，并且在一些情況下具有側鏈，側鏈根據(jù)葡聚糖的來源包括β（1,3）、β（1,4）和/或β（1,6）-連接的葡糖基單元。根據(jù)來源和分離方法，β-葡聚糖在骨架和側鏈中具有不同的分支程度和鍵合類型。側鏈中鍵合的頻率和類型與分子的生物活性高度相關。葡聚糖在其分子量及其鏈聚集趨勢方面高度不同，兩者都是這些分子的效力譜的必要特征。許多真菌和酵母來源的β-葡聚糖在其天然狀態(tài)下是不溶于水的，但是可以通過酸水解或者通過衍生化而變得可溶，所述衍生化將外來基團如-磷酸、-硫酸酯、-胺、-羧基甲基等引入分子。在歐洲、亞洲和美國，特別是來自面包酵母（BakersYeast）的β-葡聚糖一直被用作動物飼料添加劑，用于美容產品中，用作人類膳食補充劑，例如在傷口治療中作為免疫調節(jié)劑，以及作為皮膚乳霜制劑中的活性成分。如WO02/058711所示，葡聚糖已經被用于治療癌癥。在該上下文中，β-葡聚糖被視為免疫刺激劑，部分地通過誘導充分調節(jié)和局部炎癥反應而增加白細胞活性。其在治療炎性腸病的用途也已經描述于WO2009/063221。葡聚糖在傷口治療中的進一步應用描述于EP815144和US6875754，以及用于治療哮喘和過敏癥的用途描述于US12/528,215。谷物葡聚糖一般包括β（1,3）的未分支鏈和顯著比例的β（1,4）鍵合，而酵母葡聚糖主要由β（1,3）連接的葡糖基殘基與用作可以包括β（1,3）和β（1,6）連接的葡糖基殘基的側鏈分支點的β（1,6）鍵合構成。被分類為葡聚糖的其他分子包括凝膠多糖（curdlan），一種由β（1,3）連接的葡糖基殘基構成而沒有分支的基本上線性的分子。香菇多糖是具有β（1,3）連接的骨架但加入了單個β（1,6）連接的葡糖基殘基的葡聚糖，β（1,6）連接的葡糖基殘基與骨架基本上規(guī)律地連接產生該分子的發(fā)梳結構。與骨架連接的單個β（1,6）連接的葡糖基殘基等同于β（1,3,6）鍵合點，但是沒有其他分子與該鍵合點連接，因此如香菇多糖的葡聚糖沒有側鏈。該組葡聚糖的其他實例有硬葡聚糖、昆布多糖和裂裥菌素。側鏈結構的分支和長度的變化導致形成對比的二級和三級結構和由此的生物活性。葡聚糖的高級結構顯著變化，并且分子量、溶解度和粒度都將以一般不可預測的方式影響活性。一些產品是靶細胞中炎性細胞因子的非常有效的誘導劑，而其他產品具有相反作用，完全抑制細胞因子釋放。對于許多不溶性β-葡聚糖產品典型的是整個范圍炎癥反應的誘導，其中例如，不溶性β-葡聚糖制劑的注射伴隨肉芽腫形成、關節(jié)炎誘導和針對革蘭氏陰性敗血癥增加的易感性。另一方面，未報道可溶性β-葡聚糖受這種不良副作用的妨礙，但是已知其作為免疫刺激劑的效力明顯變化。例如，已經顯示（WO95/30022），已經被葡聚糖酶處理修飾以選擇性去除（1,6）連接的側鏈的衍生自酵母的葡聚糖產品在刺激魚的免疫系統(tǒng)方面比具有完整（1,6）連接的側鏈的產品更有效。葡聚糖具有極大的作為治療劑和佐劑的潛力，但是許多結構可變性、此類大且復雜分子的分析問題以及缺乏對這些分子作用機制和受體的了解，意味著依然存在對改良的葡聚糖產品、特別是有效治療傷口的葡聚糖產品的巨大需求。已知β-葡聚糖是所謂的病原體相關的分子模式，因為它們存在于許多致?。ㄎⅲ┥?、特別是真菌的表面。因此，高等生物體具有用于識別這些類型結構的進化機制以發(fā)現(xiàn)并摧毀屬于這類生物體的入侵者。在哺乳動物中，所謂的先天免疫細胞表達識別β-葡聚糖的特異性受體，并且最重要的受體之一被稱為Dectin-1，但是其他受體也參與β-葡聚糖誘導的識別或信號轉導，這些中有CD11b/CD18（CR3）和toll受體2和4（TLR2和TLR4）。參與識別β-葡聚糖的細胞有先天免疫系統(tǒng)的典型吞噬細胞，即，單核細胞、巨噬細胞、樹突細胞和粒細胞，而且天然殺傷細胞以及許多內皮細胞和其他更加組織特異性的細胞具有表達β-葡聚糖受體的能力。在靶細胞中誘導生物反應的關鍵步驟是與受體的初始結合，而且，似乎是β-葡聚糖制劑交聯(lián)足夠數(shù)目的受體以誘導充分的信號轉導進入細胞的能力。本發(fā)明描述了具有誘導特定類型的生物活性的能力的產品。這與能夠通過交叉結合大量受體而誘導大規(guī)模反應并隨后被吞噬的不溶性產品相反，這是由于不溶性（或“結晶樣”）葡聚糖的性質導致誘導NLRP炎性激活的細胞內的溶酶體破裂。不溶性β-葡聚糖還可以誘導ROS（活性氧類），ROS（活性氧類）還將觸發(fā)炎性激活，導致不利的炎癥反應。本發(fā)明描述了能夠誘導顯著炎癥反應的β-葡聚糖產品，炎癥反應將激活幾種免疫機制，但是不觸發(fā)對于許多（聚集的不溶性）β-葡聚糖產品典型的炎性激活。葡聚糖產品通常是微粒，或者在一些情況下可完全溶解于水溶液，后者產生如例如美國專利5,322,841中描述的流體澄清溶液，或者一些產生如Steiner等人（ProgColloidPolymerScience77,1988中描述的粘性溶液。可溶性β-葡聚糖的真實凝膠形式是不常見的，特別是對于可溶性酵母葡聚糖，但是已經發(fā)現(xiàn)本發(fā)明凝膠產品與其他葡聚糖產品相比提供優(yōu)良的生物活性，特別是在傷口愈合中。除了顯著的藥物或醫(yī)療裝置效力特征以外，在傷口愈合中，最重要的是以保證傷口濕潤的方式應用藥物或醫(yī)療裝置。此外，最終產品必須覆蓋并優(yōu)選粘附于傷口以避免感染并提供醫(yī)師認為相關或根據(jù)傷口類型必要的施用特征。通常，微粒、半可溶或液體形式的葡聚糖不滿足這些基本要求，因為它們不是有效的，或者它們處于不可用于傷口愈合目的的狀態(tài)，或者兩者。本發(fā)明的葡聚糖組合物組合了這些必要特征，因此使它可用于其中葡聚糖凝膠組合物可以找到適當用途的所有應用。除了嚴格局部應用，其他用途包括口服施用和/或粘膜施用，例如治療胃腸道或口腔疾病。根據(jù)本發(fā)明的葡聚糖組合物的優(yōu)良的粘附性質使它能夠覆蓋作用部位的粘膜襯里，并因此加速愈合過程。因此，本發(fā)明的葡聚糖組合物還可以在治療口腔粘膜炎中具有特定效用。驚人地，本發(fā)明發(fā)明人注意到，β葡聚糖和膠凝劑的組合產生協(xié)同效應和由此改善的傷口愈合。不限于特定理論，該協(xié)同效應的可能解釋可能是由于β葡聚糖對免疫細胞上模式識別受體（PRR）的優(yōu)化的展示。這些PRR是先天免疫系統(tǒng)中細胞的細胞膜中表達的蛋白。這些PRR被設計為識別與微生物病原體和細胞應激相關的病原體相關的分子模式（PAMP）。PAMP指示吞噬細胞和抗原呈遞細胞進一步成熟并激活效應子功能的額外電池。因此，還沒有用PAMP刺激的粒細胞或巨噬細胞將不足以能夠殺死和破壞靶細胞和微生物。通過確保反應針對相關刺激（例如微生物）而不針對自身抗原，PAMP也是免疫性的基礎。已知促進PAMP識別的三個主要PRR是補體受體3（CD11b/CD18），toll樣受體2和6的異二聚體，和Dectin-1受體。這些受體的有效刺激是先天免疫系統(tǒng)激活中的關鍵步驟，并且導致所有涉及細胞的改變的狀態(tài)?；谶@種β葡聚糖和膠凝劑之間組合的積極結果，似乎膠凝劑可以用作β葡聚糖與位于這些受體上的PRR正確結合和交聯(lián)結合的手段，從而提高傷口愈合級聯(lián)的效力。因此，一方面，本發(fā)明提供了包含葡聚糖和膠凝劑的凝膠組合物，所述組合物具有高于37℃的熔點（凝膠至溶膠）。膠凝劑優(yōu)選包括一種或多種碳水化合物/多糖（不同于葡聚糖）或者由一種或多種碳水化合物/多糖（不同于葡聚糖）組成或者主要由一種或多種碳水化合物/多糖（不同于葡聚糖）組成，并且以用于穩(wěn)定凝膠結構的濃度存在。葡聚糖存在于作為凝膠的制劑中，并且因此是可溶的，而不是微粒葡聚糖形式。優(yōu)選地，葡聚糖在25℃和中性pH下以≥1%（例如1.5-6%）的濃度溶解于水中時本身形成凝膠。當與膠凝劑組合時，β-葡聚糖組分可以被減少至≥0.1%，并且可以通過添加的膠凝劑獲得需要的凝膠性質。β-葡聚糖含量的上限將通過添加的膠凝劑的濃度和性質來測定，但是通常將小于4%。其中β-葡聚糖和膠凝劑組合時的最終產品將被配制成具有如上所述的需要的傷口愈合能力。實例包括與1或1.5%高分子量羧甲基纖維素組合的1或2%可溶性酵母β-葡聚糖，產生穩(wěn)定的凝膠并具有與兩者作為單獨劑使用時相比改善的傷口愈合能力?；旌蠒r，膠凝劑將允許以有利的超分子型組織排列β-葡聚糖的分子組織。對于新凝膠的藥物應用，凝膠內的β-葡聚糖的組織以能夠在靶細胞群表面上的受體交聯(lián)結合的形式穩(wěn)定，因此產生所需的免疫加強活性，但是不具有聚集的不溶性β-葡聚糖制劑的負面效應。優(yōu)選地，葡聚糖是酵母葡聚糖，并且具有以單鏈基礎計15,000至50,000g/mol的重均摩爾質量和以聚集體基礎計4至20x105g/mol的水溶液中重均摩爾質量?！皞孺湣敝競€體葡聚糖分子，即，其中葡糖基殘基共價連接的葡聚糖分子?！熬奂w”通過氫鍵相互作用而形成，并且限定了超分子或高級結構。這種結合比共價鍵合所提供的結合較不持久，但是本文描述的方法得到了可識別的聚集模式，其平均摩爾質量可以使用本文提到的技術來分析?！八芤骸蓖ǔＪ莗H7。要理解，水溶液可以是凝膠形式。本發(fā)明的凝膠優(yōu)選是水溶液，即水凝膠。凝膠組合物優(yōu)選是水合的水膠體。水合的水膠體可以表現(xiàn)出彈性和粘性行為。當分子內或分子間氫鍵優(yōu)于與水的氫鍵達到足以克服熵耗的程度時，水膠體通常膠凝。膠凝劑優(yōu)選是自身能夠在水溶液中形成水凝膠的聚合物，并且與葡聚糖組合可以增強葡聚糖組分的凝膠形成性質。優(yōu)選的膠凝劑的實例是源自以下的那些：纖維素、細菌或藻類如水凝膠、藻酸鹽、結冷膠以及纖維素聚合物和衍生物如羧甲基纖維素、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素酞酸酯。這些凝膠中的一些還具有加入的其他組分，如銀。因此，膠凝劑優(yōu)選是非葡聚糖的多糖。膠凝劑優(yōu)選是水膠體，并且適當?shù)乃z體可以是蛋白性質的而非基于糖的。在所有情況下，膠凝劑可以是天然存在的劑，通過化學或其他加工方法從其衍生，或者是完全合成的。樹膠例如黃蓍膠和黃原酸膠；藻酸鈉；明膠和結冷膠可用作膠凝劑。作為該組的代表，細菌衍生產品結冷膠（還被商標為AppliedGel、Phytagel或Gelrite）經常被做增稠劑、乳化劑和穩(wěn)定劑。結冷膠是陰離子的高分子量脫乙?；陌舛嗵菢淠z，作為通過純培養(yǎng)多沼假單胞菌（Pseudomonaselodea）的發(fā)酵產物而生成，具有一個α-L-鼠李糖、一個β-D-葡糖醛酸和兩個β-D-葡萄糖殘基的四糖重復單元。四糖重復具有以下結構：[D-Glc（β1→4）D-GlcA（β1→4）D-Glc（β1→4）L-Rha（α1→3）]n。使用（α1→3）糖苷鍵使四糖單元相互連接。結冷膠的確切分子式可以略微變化（例如，根據(jù)葡糖醛酸被各種鹽中和的程度）。結冷膠具有溫度依賴性和陽離子誘導的膠凝的特征性質。存在結冷膠產品的三種基本形式，其已經被表征并區(qū)別于其1）多糖含量,2）多糖上的o-乙?；〈陌俜直龋?）蛋白含量（包括核殘基和其他有機氮源）。它可以兩種形式（高或低的酰基含量）獲得。酰基對凝膠特征具有重要影響。高酰基形式產生軟的、非常彈性且不易碎的凝膠，而低?；问疆a生堅硬、無彈性且易碎的凝膠。結冷膠當作為飲食或通過管飼法作為單次大劑量（5g/kgb.w.）施用時實際上對大鼠是無毒性的。如羧甲基纖維素或甲基纖維素的產品是衍生自作為β-D-葡萄糖聚合物的纖維素的膠凝劑組的代表，所述β-D-葡萄糖與-CH2OH定向排列，產生長的無分支的鏈。纖維素是植物的主要結構材料。纖維素可以被修飾以用其他基團如氧化物（-OCH3）基團和羧甲基（-CH2-COOH）基團替代一些或全部的羥基。通過用苛性堿溶液（例如，氫氧化鈉溶液）加熱纖維素并用氯甲烷對之處理而合成產生甲基纖維素。可以根據(jù)取代的羥基的數(shù)目來制備不同種類的甲基纖維素。通過纖維素與堿和氯乙酸的反應而形成羧甲基纖維素（CMC）。不同的CMC制品可以具有不同的取代度，但是它一般處于每單體單元0.6-0.95衍生物的范圍。平均來講，CMC分子在一定程度上比具有不均勻衍生化的天然纖維素更短，不均勻衍生化產生高和低取代的面積。大多數(shù)CMC快速溶解于冷水中，并且主要用于控制粘度而無膠凝，因為CMC在通常濃度下即使在鈣離子存在下不膠凝）。其粘度控制允許用作增稠劑、相和乳液穩(wěn)定劑和懸浮劑。CMC還可因為其持水容量而使用，因為這即使在低粘度下是高的；特別是用作Ca2+鹽時。羧甲基纖維素（CMC）或纖維素樹膠經常以其鈉鹽，羧甲基纖維素鈉使用。藻酸鹽是最豐富的海洋生物聚合物，并且是纖維素之外世界上最豐富的生物聚合物。藻酸鹽的主要來源存在于褐藻例如巨藻（Macrocystispyrifera）的細胞壁和細胞內空間。藻酸鹽也有一些細菌（e.g.AzotobacterandPseudomonasspecies）合成。藻酸鹽是藻酸的鹽和酯。藻酸鹽的化學組成是以1→4鍵合連接的β-D-甘露糖醛酸和α-L-古洛糖醛酸的鏈的隨機序列。藻酸鹽在水中不可溶，但是容易吸收水。藻酸鹽作為固定劑在大多數(shù)應用中的使用依靠其形成熱穩(wěn)定的強凝膠的能力，熱穩(wěn)定的強凝膠可以再室溫形成并固定。已經在大多數(shù)應用中引起關注的是與鈣離子形成藻酸鹽凝膠。根據(jù)本發(fā)明使用的其他凝膠形成劑是但不限于卡波姆；親水聚合物，例如聚環(huán)氧乙烷、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物和聚乙烯醇。本發(fā)明的組合物可用于使用任何可溶性葡聚糖起始材料制備凝膠形式的含有有效葡聚糖的組合物。觀察到的協(xié)同效應意味著對于給定濃度的葡聚糖，凝膠組合物將證明優(yōu)良活性?？扇苄云暇厶钱a品對于技術人員是已知的，并且一些是可商業(yè)途徑獲得的。葡聚糖通常衍生自酵母、優(yōu)選釀酒酵母。這些葡聚糖的基本分子結構通常是β-1,3-骨架（表示通過β-1,3鍵合連接的葡萄糖分子的鏈）以及β-1,3側鏈（表示通過β-1,3鍵合連接的至少兩個葡萄糖分子的鏈）和將所述側鏈連接至所述骨架的β-1,3,6-鍵合點。此外，來自酵母的葡聚糖包括β-1,6鍵合，其可以連接至側鏈或者直接連接至骨架。其他類型的鍵合存在，但是以相對低的水平。可以提供葡聚糖來源的其他酵母包括啤酒酵母，假絲酵母屬（Candidasp.）如白假絲酵母（Candidaalbicans）、Candidacloacae、熱帶假死酵母（Candidatropicalis）、產朊假絲酵母（Candidautilis），漢森酵母屬（Hansenulasp.）如溫奇漢森酵母（Hansenulawingei）、阿尼漢森酵母（Hansenulaarni）、Hansenulahenricii和美洲漢森酵母（Hansenulaamericana），組織胞漿菌屬（Histoplasmasp.），克勒克酵母屬（Kloeckerasp.），克魯維酵母屬（Kluyveromycessp.）如乳酸克魯維酵母（Kluyveromyceslactis）、脆壁克魯維酵母（Kluyveromycesfragilis）、多孔克魯維酵母（Kluyveromycespolysporus），畢赤酵母屬（Pichiasp.），紅酵母屬（Rhodotorulasp.），酵母屬（Saccharomycessp.）如德爾布酵母（Saccharomycesdelbruekii）、羅斯酵母（Saccharomycesrosei）、（Saccharomycesmicroellipsodes）、卡爾斯伯酵母（Saccharomycescarlsbergensis）或不同的酵母菌株如釀酒酵母R4（NRRLY-15903）和R4Ad（ATCCNo.74181），裂褶菌屬（Schizophyllumsp.），裂殖酵母屬（Schizosaccharomycessp.）如栗酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe），色串孢屬（Torulasp.）和球擬酵母屬（Torulopsissp.）。然而，葡聚糖可以衍生自其他適當來源，例如細菌、真菌或谷物葡聚糖。β-葡聚糖本身缺乏凝膠形成能力可以由如上述CMC的劑的凝膠形成能力來補償，產生具有所需的傷口愈合性質的產品。各種葡聚糖的治療活性在本領域充分記載，并且本發(fā)明組合物一般可用于增強葡聚糖的活性，特別是在葡聚糖產品的物理形式和分子間結構被本發(fā)明人顯示為特別重要的傷口愈合中。不希望受理論束縛，經驗法則是根據(jù)本發(fā)明組合物中使用的葡聚糖基于單鏈計的重均摩爾質量越高，可以產生越有效的凝膠。本發(fā)明的形成凝膠的葡聚糖的側鏈通常包括2個或多個β（1,3）連接的葡糖基單元。根據(jù)本發(fā)明，與主鏈連接的單一分子不被視為“側鏈”。形成凝膠的葡聚糖優(yōu)選具有β（1,3）連接的葡糖基單元的側鏈（例如，至少2、5、10或20個連接葡糖基殘基的側鏈），即，由或基本上由β（1,3）連接的葡糖基單元的側鏈（例如，至少2、5、10或20個連接葡糖基殘基的側鏈）組成。除了β（1,3）連接的側鏈，葡聚糖還可以具有一個或多個β（1,6）連接的側鏈。通過改變結構的鏈，可能改變最終產品的特征。存在許多改變葡聚糖的不同方式，包括酶處理、使用酸如甲酸或鹽酸或不同的堿基以及通過其他方式。優(yōu)選的葡聚糖是已經通過酸（例如甲酸）或酶或任何其他適合的方法處理以顯著減少或消除葡聚糖內重復的（1,6）-連接的葡萄糖分子數(shù)目的那些。這些（1,6）-連接的葡糖基部分將正常存在于衍生自酵母的β-葡聚糖的側鏈。得到的葡聚糖具有β（1,3）主鏈和通過單個β（1,6）鍵合與之連接的β（1,3）側鏈，其通過消除處理而被切掉。優(yōu)選的葡聚糖基本上不含重復的β（1,6）連接的葡糖基殘基。在分支點（β（1,3,6）-分支點）處的單個（1,6）鍵合不提供“重復的”β（1,6）連接的葡糖基單元?！盎旧喜缓币馑际切∮诳偲咸腔鶈卧?%、優(yōu)選小于4%和最優(yōu)選小于3%。一些處理，例如酶處理，可能使側鏈中最多4個β-1,6-連接的、但通常2個β1,6連接的葡糖基單元保持未切割。這樣分子也是“基本上不含”重復的β1,6-連接的葡糖基單元。優(yōu)選葡聚糖內鍵合的分布可以表示如下：連接的葡糖基殘基的類型%β（1,3）80-98β（1,6）0-6β（1,3,6）1-8末端0,01-6β（1,3,6）指在骨架中（1,3）連接并且參與（1,6）連接以提供側鏈的分支點殘基。葡聚糖可以是單一提取級分，或者具有不同平均分子量的兩種或多種不同級分的形式。葡聚糖優(yōu)選在化學修飾基團方面是未衍生化的。可以不同的方式測定葡聚糖的摩爾質量。在可溶性葡聚糖產品的情況下，常規(guī)地通過SEC-MALS-RI（尺寸排阻色譜，具有多角度光散射和衍射系數(shù)檢測）分析測量摩爾質量，并且這種分析提供了樣品的重均摩爾質量值（MW）以及樣品內不同分子量分布。在本發(fā)明中，重均分子量（Mw）被定義如下：其中ni是具有摩爾質量Mi的分子的數(shù)目。具有摩爾質量Mi的分子的重量濃度ci與摩爾質量Mi和分子數(shù)目ni成比例。ci=Mini=＞ni=ci/Mi色譜的每個部分的重量濃度通過RI檢測器來測量，而色譜中每個部分的摩爾質量通過MALS檢測器與RI檢測器的組合來測量。計算是基于光散射理論。具體地，平均分子量（對于單鏈）通過SEC-MALS-RI在具有0,5%LiCl的DMAc（具有0,5%氯化鋰的二甲基乙酰胺）中測定，假定葡聚糖在該溶劑中的dn/dc為0,12。DMAc/LiCl溶劑將所述葡聚糖完全溶解成單鏈，并且因此，使用具有0,5%LiCl的DMAc作為洗脫劑的隨后SEC-MALS-RI分析給出了單鏈水平上的分子量分布的量度。簡單說，DMAc/LiCl中的葡聚糖分析涉及干葡聚糖以大約3mg/ml的濃度溶解在溶劑中，在通過使用3xPIgelPLgelMixed-ALS柱和具有0,5%LiCl的DMAc作為洗脫劑的SEC-MALS-RI分析之前，通過在室溫攪拌溶液過夜并在100℃加熱1h。以單鏈基礎計的葡聚糖的重均摩爾質量優(yōu)選是15,000至50,000g/mol、更優(yōu)選25,000至45,000g/mol和最優(yōu)選30,000至40,000g/mol。在水溶液中，存在的主要高級葡聚糖結構和聚集體的重均摩爾質量優(yōu)選是4-20x105g/mol、更優(yōu)選5-15×105g/mol和最優(yōu)選6-12×105g/mol。這些平均值優(yōu)選是在排除非常大的聚集體（即，摩爾質量高于1.0x107g/mol）時計算的。水溶液中葡聚糖的分析涉及將凝膠溶液在0,1MNaNO3/0,02%NaN3中稀釋至大約3mg/ml，在加帽的玻璃管中加熱至100℃持續(xù)30min，冷卻至室溫，通過0,2μm注射器濾器過濾，并通過使用TSKgelG5000PWXL+TSKgelG4000PWXL柱和0,1MNaNO3/0,02%NaN3作為洗脫劑的SEC-MALS-RI分析。使用例如0,05MNa2SO4/0,01MEDTA作為溶劑/洗脫劑的類似設置得出等同的結果。水溶液中單鏈和高級結構/聚集體的摩爾質量值的組合產生了本發(fā)明制劑中使用的優(yōu)選葡聚糖的分子和超分子結構的良好指示。上述葡聚糖凝膠是根據(jù)本發(fā)明的葡聚糖的實例。這些葡聚糖產品特征為在25℃和4至8的pH下為凝膠形式。這些葡聚糖凝膠進一步特征為其粘度特征，示例為凝膠的熔化溫度（凝膠至溶膠）高于30至高達約80℃、優(yōu)選高于正常體溫。葡聚糖產品的凝膠熔點，即凝膠→溶膠轉變溫度，通常由小應變振動測量來測定，使用StresstechHR流變儀或類似物并檢查葡聚糖溶液冷卻（70→10℃）和加熱（10→70℃）期間的粘彈性變化。測定凝膠的大致熔化溫度的另一方式是測量凝膠在連續(xù)更高溫度下的粘度（例如，使用旋轉粘度計），直至粘度基本消失并且凝膠轉變成溶液。本發(fā)明的優(yōu)選葡聚糖觸發(fā)了小鼠腹膜巨噬細胞中TNFα和CXCL2/MIP2α的表達。TNFα的弱誘導還見于衍生自外周血單核細胞的人骨髓樹突細胞。優(yōu)選的β葡聚糖對TNFα釋放的效應是劑量依賴性的，并且似乎在過表達β葡聚糖受體dectin-1的RAW細胞系變體中高于某一閾值、例如2-4μg/ml的葡聚糖濃度時減少。TNFα和CXCL-2的中到低誘導對于本發(fā)明產品是特殊的。TNFα和CXCL-2都是傷口愈合的手段。鼠趨化因子CXCL2刺激細胞遷移和血管生成，并且可用作炎癥肉芽組織中血管生成活性的替代標志。本發(fā)明的優(yōu)選葡聚糖不引發(fā)IP-10（CXCL-10）的強表達。IP-10是趨化細胞因子的α或半胱氨酸-X氨基酸-半胱氨酸（CXC）趨化因子家族的成員。在許多慢性人類炎性病癥中已經檢測到了高水平的IP-10表達，所述病癥包括一種常見的炎性皮膚疾病，銀屑病?；颊咭话阋呀涳@示出異常的傷口愈合反應，特征為更強烈的炎癥期和延長且無組織的粒化期，具有受損血管形成。本發(fā)明的葡聚糖不應該增強人類樹突細胞的LPS誘導的IP10表達，并且優(yōu)選地抑制從db/db小鼠收獲的巨噬細胞的LPS誘導的IP10表達。這表明，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選葡聚糖開啟了傷口愈合過程的有益要素，同時它們關閉了導致延長愈合期的抑制劑。此外，本發(fā)明的凝膠葡聚糖優(yōu)選激活補體系統(tǒng)。本發(fā)明的葡聚糖組合物作為傷口愈合劑具有優(yōu)良的體內效力，如實施例所示。本發(fā)明組合物中使用的葡聚糖可以是更有效的變體，具體地，是具有誘導人類骨髓樹突細胞向炎癥表型分化、顯著刺激TNF-α分泌以及誘導樹突細胞生成G-CSF和IL-10的能力的可溶性β葡聚糖。在所有情況下，CXCL-10的分泌應該基本上處于基線水平，并且不受本文描述的治療（即與膠凝劑組合）的影響。這是重要的，并且說明優(yōu)選的葡聚糖刺激特定的細胞因子組或組合的分泌。優(yōu)選的葡聚糖還可以刺激來自糖尿病小鼠（db/db）的巨噬細胞分泌PGE2和GM-CSF。根據(jù)本發(fā)明的實施例中使用的葡聚糖凝膠是水凝膠，而凝膠形式可以通過目視檢查來確認，葡聚糖凝膠的非牛頓粘度特征和假塑性和觸變性質還可以通過粘度測量來測定，例如通過使用旋轉粘度計。實施例中使用的2%葡聚糖凝膠具有至少1000cP、優(yōu)選至少1500cP的粘度，使用具有小樣品適配器和主軸SC4-31的BrookfieldDV-II+Pro可編程粘度計在25℃和10rpm的旋轉速度（對應于3,40sec-1的剪切速率）下測量。用于測量該假塑性和觸變凝膠的粘度的常規(guī)方法是使用所謂的升-降速率斜坡，例如在2rpm開始并以2rpm的增量升至10rpm，然后再以2rpm幅度回降。該實驗的數(shù)據(jù)可以說明凝膠的假塑性（隨遞增的剪切速率遞減的粘度）和觸變（在接受剪切的時隨時間遞減的粘度）特征，并且提供例如10rpm粘度的量度。用于本發(fā)明組合物的具有上述有利性質的葡聚糖可以通過下文以及在實施例中更詳細描述的兩種方法之一制備。在每種情況下，取葡聚糖分子的溶液，然后通過加熱（或其他能源）或使用破壞現(xiàn)有分子間氫鍵的化學劑處理。然后，快速冷卻該產物以形成凝膠，或者添加用于促進葡聚糖鏈之間氫鍵重新形成的劑。如下討論的，可以在處理步驟之前添加膠凝劑以離解鏈間（和可能的鏈內）氫鍵。或者，可以在該步驟但在處理步驟之前添加膠凝劑，所述處理步驟導致氫鍵形成和因此凝膠形成。因此，在進一步的方面，本發(fā)明提供了產生本文定義的凝膠組合物的方法，該方法包括：a）處理任選與膠凝劑一起的葡聚糖分子的水溶液，以離解所述葡聚糖的氫鍵；b）任選地向步驟a）產物添加膠凝劑；和然后c）處理所述水溶液以在所述葡聚糖內重新形成氫鍵。特別地，在葡聚糖鏈/分子之間形成氫鍵，這些鍵是“重新形成的”，因為在步驟a）之后，氫鍵的量顯著減少，并且在步驟c）中增加。在起始材料內的氫鍵模式是再生的意義上來說，它們不是“重新形成的”，而是該過程產生了不同的模式。根據(jù)產生如上定義的組合物的優(yōu)選方法，葡聚糖分子的水溶液被加熱至120-130℃、優(yōu)選120-125℃的溫度，并且在該溫度保持10-30分鐘，然后使葡聚糖溶液經不超過80分鐘、優(yōu)選小于60分鐘、例如50-60分鐘的時段冷卻至35-50℃、優(yōu)選35-40℃的溫度。更短的冷卻時間（例如25-50分鐘）可能適合更小的體積（例如，小于100升），以上數(shù)字涉及220升的起始產品體積。上述冷卻時間被認為是快速的，因為它們不依賴于無輔助的恢復室溫。通過這樣做，將產生不具有“退火的”β-葡聚糖鏈的典型三螺旋結構的高度隨機組織的“稻草堆”凝膠。根據(jù)該加熱和冷卻步驟，溶解的β-葡聚糖制品被賦予能量以基本溶解葡聚糖凝膠，從而破壞現(xiàn)有的高級結構并誘導具有大比例的自由單鏈分子的隨機組織。通過快速冷卻，通過快速建立分子間相互作用而將分子“冷凍”成新的分子構型，其中產品不主要形成三螺旋結構。因此，分子以更隨機的分子位置冷凍。加熱優(yōu)選在分離且攪拌的罐中進行，所述灌足夠大以容納整批產品，具有夾套或類似結構以能夠實現(xiàn)罐外部的加熱。批大小、加熱系統(tǒng)的容量、罐的體積表面比和攪拌器的效果應該以如下方式平衡：整批可以在合理時間段內被加熱至指定的溫度，同時保證整批的均勻加熱。可選地，供能步驟可以在產品填充入其最終容器之后發(fā)生，通過在高壓處理器中加熱或者通過可選的供能形式，例如超聲或微波。如果已經在罐中對整批進行了供能步驟，則主動冷卻優(yōu)選在相同罐中進行，并且將需要利用罐夾套冷卻罐表面的能力。同樣，批大小、冷卻系統(tǒng)的容量、罐的體積表面比和攪拌器的效果應該被平衡以允許冷卻在指定時間內發(fā)生，同時保證整批的均勻冷卻。這種初始冷卻之后應該是產品填充入最終容器，隨后冷卻容器至室溫。優(yōu)選地，冷卻步驟在加熱步驟開始后立即進行，即，在葡聚糖在升高的溫度下保持10-30分鐘后立即進行（目前為止對于涉及設備是實用的）。在工業(yè)化方法中進行加熱和冷卻步驟的適合程序描述于實施例1。如果已經在最終容器中進行了供能步驟，這些容器應該在上述時間范圍內被冷卻至室溫。上述加熱和冷卻步驟可以被例如再次重復。在加熱和快速冷卻步驟之前水溶液中葡聚糖的濃度優(yōu)選是1.5-6%。上述加熱和冷卻步驟可以對葡聚糖分子的任何水溶液進行；優(yōu)選的葡聚糖，包括具有修飾分支的葡聚糖，在上文討論，并且葡聚糖溶液優(yōu)選是酵母葡聚糖溶液。用于加熱和冷卻步驟的起始材料自身可以是凝膠形式，因此加熱導致向溶膠的轉變，而冷卻導致與起始材料不同的凝膠結構的形成。起始溶液中葡聚糖的重均摩爾質量（Mw）優(yōu)選以單鏈基礎計優(yōu)選是高的，溶液中葡聚糖的重均摩爾質量高于15,000、更優(yōu)選高于20,000、最優(yōu)選高于25,000g/mol。測定這些質量值的適當方法在上文給出。葡聚糖一般以微粒形式從其來源材料（例如，真菌、酵母或谷物）提取，但是從微粒葡聚糖產生可溶性形式的方法是本領域已知的，并且包括酸或堿處理，例如WO95/30022中描述的甲醛分解步驟。來自谷物如大麥的可溶性葡聚糖產品可獲自SigmaChemical。例如可以通過WO95/30022的實施例1中的方案制備的微粒起始材料將優(yōu)選通過在甲酸中加熱至少兩小時而被溶解。對微粒葡聚糖起始材料進行的甲醛分解可以常規(guī)地引起任何β（1,6）連接的葡糖基側鏈的選擇性去除以及溶解微粒葡聚糖。上述生產方法還包括在上述加熱和快速冷卻步驟之前的初步加熱步驟，其中甲酸處理的產品沸騰（>100℃）至少30分鐘。在產品冷卻之后，其優(yōu)選通過本領域已知的常規(guī)方法、例如通過離心或過濾處理以去除微粒材料。被處理以產生用于根據(jù)本發(fā)明進一步加工的可溶形式的微粒葡聚糖優(yōu)選衍生自細胞壁、特別是酵母細胞壁，其已經例如通過洗滌去除了蛋白組分和其他殘余物如甘露糖和殼多糖。適合的微粒酵母葡聚糖產品的一個實例由BiotecPharmaconASA生產，其衍生自面包酵母（釀酒酵母）并被稱為NBGCos。微粒葡聚糖原材料的另一實例是全葡聚糖顆粒如產品ImprimeWGPTM。NBGCos是天然的未衍生的（就化學修飾基團而言）微粒β（1,3）/（1,6）葡聚糖，通過NMR和化學分析表征為由含有β-1,3和β-1,6-連接的D-葡萄糖的側鏈的β-1,3-連接的D-葡萄糖的聚合物組成。作為上述方案的替代方案，相同的起始葡聚糖分子溶液可以用能夠離解葡聚糖鏈間氫鍵的劑處理，隨后用能夠恢復鏈間氫鍵相互作用的劑處理。溶解聚葡萄糖鏈中OH基團之間氫鍵的一種這樣的劑將是足夠濃度的氫氧化鈉（NaOH），其將使鏈中許多OH基團去質子化。這將導致對于這些高分子量葡聚糖而言典型的所有分子間鍵完全離解，導致溶液中鏈的隨機組織化。通過添加酸以中和堿來中和溶液，重新形成OH基團，并且可以建立鏈之間的新的氫鍵。使用NaOH作為劑，通常將需要添加例如2MNaOH溶液至終濃度高于50mM或更優(yōu)選約150mM，至水溶液中可溶性葡聚糖濃度為1-6%、更優(yōu)選1,5-4%或最優(yōu)選2-4%。為了中和溶液，可以在攪拌下向溶液添加等摩爾量的例如2M鹽酸（HCl），持續(xù)足以保證充分中和的短時段，例如對于1000ml的體積而言小于1分鐘，此后，使溶液建立凝膠構象，例如對于1000ml的體積而言1-10分鐘。具有離解氫鍵的能力的任何其他劑能夠替代NaOH，并且能夠允許快速重新建立氫鍵以形成“稻草堆”型凝膠的任何其他劑可以替代HCl。技術人員知道可以破壞并然后恢復氫鍵的其他劑，堿和酸是特別方便的，因為一個可以根據(jù)另一個而容易被平衡，以中和破壞了氫鍵的劑的作用?？梢允褂闷渌麖娝?，例如甲酸或硫酸。而且其他堿金屬鹽，包括但不限于氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化鈣，以及可能的所謂超級堿例如氰化鈉或氨基鈉，可以是用于去質子化和破壞氫鍵的潛在劑。具有適當質量的任何酸可用于中和溶液以恢復氫鍵-這包括但不限于與磷酸、乙酸和檸檬酸。尿素或甲酰胺也常用于破壞氫鍵并且可能用于該過程?；謴蛣┑男再|將由下游應用的要求決定，具體地說是存在鹽。要理解，在涉及大且復雜的有機分子的系統(tǒng)中，保證所有氫鍵被破壞或者在應用能夠使氫鍵恢復的條件之后所有分子鏈參與顯著氫鍵是不可行或者不必要的。然而，應用的條件將是為了快速改變整個葡聚糖溶液中的氫鍵組織和程度。技術人員知道例如150mMNaOH對葡聚糖溶液的影響，并且可以相應地選擇其他氫鍵破壞劑的濃度。當提供允許重新建立氫鍵的條件時，第二步的目的是有效地快速中和或逆轉通過添加氫鍵破壞劑引起的對分子間靜電相互作用電勢的影響。因此，該第二劑的性質和濃度將遵循氫鍵破壞劑的選擇。在工業(yè)化方法中，所述步驟方便地在足夠大以容納整批產品的罐中進行。上述氫鍵破壞和然后恢復的步驟可以被例如再次重復。優(yōu)選地，所述組合物包含水溶液中0.1-6%葡聚糖，優(yōu)選地，所述組合物包含水溶液中0.2-2%葡聚糖。不同濃度的使用一定取決于目的和不同的施用方式。膠凝劑或粘性劑或此類劑的適當混合物通常將以組合物重量的0.2-3%、優(yōu)選0.25-2%、更優(yōu)選0.75-1.75%、最優(yōu)選1-1.5%存在。為了輔助凝膠形成和增加的粘度，使用其他凝膠形成劑，例如但不限于阿拉伯樹膠、瓊脂、丙烯酸及其衍生物、聚丙烯酸及其衍生物例如聚甲基丙烯酸丁酯和聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸酯、抗壞血酸棕櫚酸酯、卡波姆、巴西棕櫚蠟、結冷膠、藻酸和相應的鹽、纖維素衍生物例如醋酞纖維素、rosca甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素和相關化合物、羧甲基纖維素及其鹽、酞酸羥丙基甲基纖維素、酞酸羥丙甲纖維素、鯨蠟醇及衍生物、微晶蠟、泊洛沙姆、聚乙二醇、聚氨酯、聚醋酸乙烯酯、聚醋酸乙烯酞酸酯、聚乙烯醇、硅酮橡膠和衍生物、紫膠、甘油三酸酯衍生物及其組合。組合物可以包含濕潤劑或軟化劑，例如但不限于甘油、丙二醇、三醋精、環(huán)甲硅油、聚葡萄糖及其組合。根據(jù)本發(fā)明的組合凝膠的實例將是與高分子量羧甲基纖維素混合的1或2%可溶性葡聚糖，高分子量羧甲基纖維素的終濃度為1或1.5%?？梢酝ㄟ^在1或2%葡聚糖水溶液中添加適量CMC建立制劑凝膠。在CMC完全溶解后，將制劑加熱至高于或約100℃，并快速冷卻以形成具有適當性質的凝膠。凝膠制劑的另一實例是與終濃度0,3%的結冷膠混合的2%葡聚糖，其中葡聚糖溶液被加熱至高于或約100℃，并且添加適量結冷膠干燥的粉末。使粉末溶解并冷卻至約50℃，之后添加終濃度約5mM的CaCl2以誘導凝膠形成。然后冷卻溶液以穩(wěn)定形成的凝膠。凝膠制劑的第三個實例是與終濃度0,5%的結冷膠混合的0.5%葡聚糖，其中葡聚糖溶液被加熱至高于或約100℃，并且添加適量結冷膠干燥的粉末。使粉末溶解并冷卻至約50℃，之后添加終濃度約5mM的CaCl2以誘導凝膠形成。然后快速冷卻溶液以穩(wěn)定形成的凝膠。組合凝膠的第四個實例是與終濃度分別為1%和20%的高分子量羧甲基纖維素和甘油混合的1%葡聚糖。可以通過在1%葡聚糖水溶液中添加適量CMC來建立制劑凝膠。在CMC完全溶解之后，加熱制劑至高于或約100℃，隨后添加甘油。然后快速冷卻制劑以形成具有適當性質的凝膠。本發(fā)明的葡聚糖組合物是有效的治療劑，并且在進一步的方面，本發(fā)明提供了用于治療，特別是用于治療其中受試者需要系統(tǒng)或局部增強免疫應答、例如其中存在組織損傷或感染的病癥的本文描述的組合物。所述組合物在輔助傷口或潰瘍愈合和治療口腔粘膜炎中具有特別效用。并且它們還在治療癌癥或減少腫瘤大小方面具有效用。因此，在進一步的方面，本發(fā)明提供了在有相應需要的受試者中輔助傷口或潰瘍愈合或治療口腔粘膜炎或癌癥或減少腫瘤大小的方法，該方法包括給所述受試者施用本文描述的本發(fā)明葡聚糖組合物。優(yōu)選地，葡聚糖被口服施用。優(yōu)選地，葡聚糖以5至200mg/kg/天、更優(yōu)選20至100mg/kg/天的劑量施用。提及“輔助”傷口或潰瘍愈合是因為一些傷口或潰瘍會自然愈合，而其他傷口或潰瘍可能不會自然愈合，但已經顯示本發(fā)明的組合物加速傷口和潰瘍愈合。在一些情況下，愈合在無治療的情況下可能不會令人滿意地發(fā)生。需要愈合治療的此類傷口的一個實例是糖尿病性足潰瘍。在該適應癥中，患者基于糖尿病的潛在原因而發(fā)展傷口。由于經常未治療的潛在原因和這些傷口存在于患者足上的事實，這些潰瘍不會自我愈合并且引起患者的巨大問題，通常結果是足的切除。適合的藥物組合物可以包含如上定義的葡聚糖和膠凝劑和一種或多種藥學上可接受的稀釋劑或載體、優(yōu)選水和任選一種或多種生理上可接受的穩(wěn)定劑或其他稀釋劑或載體。所述組合物可以常規(guī)配制成任何局部劑型。局部劑型可以是乳霜、洗劑、溶液、凝膠、軟膏、糊劑、噴霧劑、膜等。優(yōu)選地，本發(fā)明的凝膠組合物適合儲存于管、例如塑料管中并從其中分配。在一些變化形式中，本文描述的組合物是軟膏形式。軟膏基質可以是含油基質、可乳化基質、乳液基質或水溶性基質。在其他變化形式中，根據(jù)本發(fā)明的組合物是乳霜形式。乳霜可以是粘性液體或水包油或油包水的半固體乳液。乳霜基質可以是可水洗的，并且含有油相、乳化劑和水相。而在進一步的變化形式中，本發(fā)明的組合物是洗劑形式。洗劑可以被配制為固體的懸液，并且含有懸浮劑以產生更好的分散液。根據(jù)本發(fā)明的組合物還可以被配制為糊劑。糊劑是其中活性劑懸浮于適當基質中的半固體劑型。根據(jù)基質性質，糊劑分成脂肪糊劑或由單相水凝膠制成的那些。在一些變化形式中，組合物在傷口表面形成膜。為了輔助膜形成，使用膜形成劑，例如但不限于丙烯酸及其衍生物、聚丙烯酸及其衍生物例如聚甲基丙烯酸丁酯和聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸酯、抗壞血酸棕櫚酸酯、卡波姆、巴西棕櫚蠟、纖維素衍生物例如醋酞纖維素、rosca甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素和相關化合物、酞酸羥丙基甲基纖維素、酞酸羥丙甲纖維素、鯨蠟醇及衍生物、微晶蠟、泊洛沙姆、聚乙二醇、聚氨酯、聚醋酸乙烯酯、聚醋酸乙烯酞酸酯、聚乙烯醇、硅酮橡膠和衍生物、紫膠、甘油三酸酯衍生物及其組合。組合物還可以包括至少一種膜增塑劑，其可以用于軟化由膜形成劑形成的聚合物膜，使得它足夠柔韌以隨應用機體區(qū)域移動，而不破裂或剝離。在一些變化形式中，組合物可以在應用至傷口之前被流延成膜，或者直接應用至傷口，其中組合物原位聚合?！颁佌埂蹦ぎ攽弥疗つw時聚合，并且可以作為來自管的乳霜或軟膏、滾涂和噴霧等遞送。可以通過將硅酮橡膠加入外相而產生膜。在與外相混合后，允許得到的乳液固化并提供“鋪展”膜，其當應用至傷口時聚合。乳液可以鋪展在基底上以達到所需的厚度。在其他情況下，組合物可以預先形成層或貼片。貼片可以具有各種厚度。貼片還可以被切割以具有一般符合傷口邊緣的形狀。在一些變化形式中，貼片可以包括藥學可接受的粘合劑材料，其用于將貼片固定于傷口或皮膚。還可以包括貼片支持層。組合物可以直接置于傷口上，或者置于應用于傷口上的基底上。任何基底（載體）可用于本文描述的組合物。例如，可以使用織造、非織造、編織、泡沫和粘合劑基底。還可以使用吸收或非吸收基底。在一些變化形式中，組合物被噴灑或鋪展于基底上。在其他變化形式中，組合物被浸漬在基底內。傷口敷料可以被應用任何適當?shù)臅r間段。例如，它們可以經一天的時段、經數(shù)日、經數(shù)周或者數(shù)月或更長的時段來應用。一般而言，傷口敷料被重復應用，直至傷口愈合。用本文描述的敷料治療傷口的持續(xù)時間可以取決于如下因素：待治療的傷口類型、傷口位置和被應用的組合物的形式。根據(jù)使用的形式，組合物可以從傷口用水去除，或者擦除或剝離。本文描述的組合物可用于治療由任何病因導致的傷口。例如，傷口可以是由于燒傷、感染、局部缺血、淋巴水腫、贅生物、神經病變、放射損傷、外科手術、靜脈機能不全和外傷。本發(fā)明組合物在輔助傷口或潰瘍愈合中具有特別效用。本發(fā)明還提供了物理支持體，例如已經應用了（包括浸漬其中）本文定義的本發(fā)明組合物的用于醫(yī)療用途的任何醫(yī)療裝置或材料。這些組合物的葡聚糖的一個重要特征是其持水量和即使在缺乏可能促進凝膠愈合的條件如非中性pH或陽離子下的凝膠形成特征。一些β-葡聚糖將在低如1%、但更通常在2-4%范圍內的濃度下形成凝膠。來自酵母的可溶性β-葡聚糖如本文描述的優(yōu)選葡聚糖在3-7的pH范圍內以1-6%的濃度溶解于水溶液中時將形成觸變和假塑性凝膠，不依賴陽離子的存在。術語“傷口”和“潰瘍”包括表面?zhèn)?、手術傷口、燒傷、開放性骨折、腿潰瘍、口腔潰瘍、糖尿病潰瘍和褥瘡潰瘍。傷口可以作為損傷、手術或疾病的結果，但是全部以皮膚完整性缺失為特征，皮膚可以被撕裂、切割或穿孔，并且需要皮膚再生來封閉開口。已經顯示本發(fā)明組合物加速傷口閉合。如實施例所示，可以通過測量開放傷口的大小來容易地證明效力。組合物優(yōu)選地被局部應用，例如作為凝膠、透皮貼片、洗劑、軟膏、乳霜等。組合物可以每天、更頻繁或更不頻繁地例如每天兩次或每兩天一次應用，并且持續(xù)如臨床醫(yī)師或者在一些情況下由患者或其他健康顧問決定的持續(xù)時間。治療持續(xù)時間取決于傷口或潰瘍的性質和嚴重度，進展一般通過目測檢測而容易地確定。局部施用包括口腔施用，并且用于遞送至口腔粘膜的適合的凝膠、錠劑、糊劑、噴霧劑等是本領域已知的。所述組合物在人藥和獸藥中具有效用。如本文使用的，術語“醫(yī)療”包括獸醫(yī)應用和環(huán)境。人是優(yōu)選的治療受試者，但是可以被有效治療的其他動物包括家畜和伴侶動物。本發(fā)明組合物可應用于或加入物理/固體支持體，例如貼片、敷料、貼膏、繃帶、膜、紗布等，其可應用于傷口或潰瘍部位，并且這樣的產品構成了本發(fā)明的進一步方面。要理解，適用于本發(fā)明一個方面或實施方案的優(yōu)選特征加以必要變更應用于所有方面和實施方案。一般，傷口用生理鹽水或無菌水刺激，并完成壞死組織和硬塊的清除。然后將根據(jù)本發(fā)明的組合物應用至傷口。組合物的形式可以取決于如下因素：待覆蓋的傷口的表面積、待治療的傷口類型和傷口位置。例如，凝膠、乳霜或軟膏形式的組合物可用于潰瘍和燒傷，而用根據(jù)本發(fā)明組合物溶液浸漬的紗布可用于手術或外傷傷口。本發(fā)明組合物可以是試劑盒形式。本文描述的試劑盒可以包括一種或多種本發(fā)明組合物以及使用說明書?？梢匀芜x地包括一個或多個基底。在一些情況下，還可以提供用于涂敷組合物的涂布器。試劑盒中包括的組合物可以具有相同的局部形式或不同的局部形式。還可以采用相同或不同量的組合物?；滓部梢跃哂邢嗤虿煌男问??；走€可以具有不同的形狀和厚度?，F(xiàn)在，在以下非限制性實施例和附圖中進一步描述本發(fā)明，其中：圖1示例說明了許多批次的被定義為具有<2%重復β（1,6）連接的葡糖基單元的分支β（1,3）葡聚糖的優(yōu)選酵母葡聚糖在含有0,5%LiCl的DMAc中分析的SEC-MALS-RI色譜圖，假定dn/dc=0.12。如可以看到的，分子量分布以單鏈水平計在大約10,000g/mol至大約200,000g/mol的范圍內。圖2顯示在水性緩沖液（0,1MNaNO3）中分析的許多批次的被定義為具有<2%重復β（1,6）連接的葡糖基單元的分支β（1,3）葡聚糖的優(yōu)選酵母葡聚糖的SEC-MALS-RI色譜圖，假定dn/dc=0.15。如可以看到的，以單鏈水平計，分子量分布在大約10,000g/mol至高于10,000,000g/mol的范圍內。水性SEC-MALS-RI結果與在DMAc/LiCl中的結果組合顯示，優(yōu)選的酵母葡聚糖作為聚集體/超分子結構在水溶液中存在。圖3顯示了用于本發(fā)明的可溶性β葡聚糖的假定作用機制。該圖顯示，β葡聚糖（BG）分支同時結合例如巨噬細胞上的受體，并因此激活先天免疫系統(tǒng)。圖4顯示了db/db小鼠模型中通過局部施用單獨SG（2%）、單獨羧甲基纖維素（1%CMC）、兩者的組合（2%SG,1%CMC）相對于媒介物（水）和陽性對照（0.5%HPMC和1%CMC中rh-PDGF-BB（10μg）+rh-TGF-α（1μg）刺激的全層傷口的傷口閉合。圖5顯示了平均%保留的傷口面積隨時間的變化（±sem）–組:（1）媒介物對照,（4）Methocel,（5）Intrasite,（9）2%SG（1%CMC）,（12）+ve對照（HPMC）,&（13）+ve對照（CMC）圖6顯示了通過收縮閉合的平均%原始傷口面積隨時間的變化（±sem）–組:（1）媒介物對照,（2）1%CMC,（6）2%SG,（9）2%SG（1%CMC）,（12）+ve對照（HPMC）,&（13）+ve對照（CMC）圖7顯示了通過收縮閉合的平均%原始傷口面積隨時間的變化（±sem）–組:（1）媒介物對照,（4）Methocel,（5）Intrasite,（9）2%SG（CMC）,（12）+ve對照（HPMC）,&（13）+ve對照（CMC）圖8顯示了db/db小鼠模型中通過局部施用BiotecPharmacon`sWoulganBiogel的兩種不同的制劑、單獨水凝膠、oatβ-葡聚糖產品相對于媒介物（水）和陽性對照（水凝膠中rh-PDGF-BB（10μg）+rh-TGF-α（1μg）刺激的全層傷口的傷口閉合。圖9顯示了鋁容器中儲存的與1,5%羧甲基纖維素混合的SG和SG。T=0代表研究開始時的外觀，并且T=6指示在每周在4至37℃之間變化的變動溫度（ambulatingtemperature）下儲存6個月的樣品。實施例實施例1凝膠葡聚糖產品的制備如下所述處理1.5-2%酵母葡聚糖分子的水溶液。通過甲醛分解以選擇性去除β-1,6側鏈并隨后純化和滲濾以從甲醛分解溶液去除微粒物質和低分子量組分，從微粒葡聚糖制品制備該水溶液。適合的甲醛分解步驟公開于EP0759089B1的實施例3。通過用堿、乙醇和水單獨萃取而從面包酵母（啤酒酵母）細胞壁制備微粒葡聚糖本身，每次提取之后伴隨適當?shù)母稍铮▏婌F干燥和真空干燥）。a.熱處理調節(jié)葡聚糖濃度之后進行熱處理，一般在封閉且攪拌的800升罐中在大約60℃的溫度下產生大約220升的產品體積，通過將蒸汽引入罐周圍的夾套而加熱罐。產品被緩慢加熱至大約105℃以確保整批的平均加熱，然后更快速地加熱至123℃。從60至123℃的正常加熱時間是40-50分鐘。然后使產品在123-125℃維持20分鐘。b.主動冷卻：然后開始主動冷卻。通過直接開放和關閉手動閥來人工操作。首先，從夾套小心抽空蒸汽以排放，排放閥保持開放。然后將冷卻水小心引入夾套，開始時緩慢地以避免對罐的鋼體產生過度熱應力。隨著溫度下降，增加水流。正常繼續(xù)冷卻，直至產品溫度達到35-40℃。從123至40℃的正常冷卻時間是50-60分鐘。實施例2：凝膠葡聚糖產品的制備如下所述處理1.5-2%酵母葡聚糖分子的水溶液。如實施例1所述，通過甲醛分解以選擇性去除β-1,6側鏈而從微粒葡聚糖制品制備該水溶液。a.通過添加氫氧化鈉而破壞氫鍵在調節(jié)葡聚糖溶液濃度之后進行氫氧化鈉的添加，在封閉且攪拌的800升罐中產生約185升的產物體積，通過向罐周圍夾套引入蒸汽或水而被加熱或冷卻罐。產物被冷卻至18℃,通過罐中閘門緩慢傾倒（約1升每分鐘）溶解于約10升純化水中的24摩爾（960g）NaOH。b.通過添加鹽酸來恢復氫鍵：在最后的NaOH傾倒入罐中后，立即開始恢復過程。略低于24摩爾HCl、大約9升純化水中2.4M溶液被相對快速地（在約2分鐘內）傾倒入罐中，測量產物的pH，以小份添加更多酸，直至pH達到約4。添加的HCl總量是23.4摩爾。c.去除鹽為了去除步驟a和b中添加的離子（Na+和Cl-），可以針對4體積的純化水經切向濾器滲濾產物。實施例3：體內傷口愈合組合物通過在糖尿?。╠b/db）小鼠模型（即BKS.Cg-mD℃k7m+/+Leprdb/J小鼠）中分析全層切除皮膚傷口的修復來考察根據(jù)實施例1制備的單獨凝膠葡聚糖（SG）、單獨媒介物（羧甲基纖維素或結冷膠）、或SG和媒介物的組合對傷口愈合的影響。本發(fā)明的組合產品還根據(jù)本文描述和實施例1中示例的加熱和快速冷卻方法制備，簡言之，將葡聚糖和媒介物溶解于水溶液，然后在高壓釜中加熱至120℃，持續(xù)約18分鐘。然后快速冷卻產物以允許凝膠形成，如實施例1所述。適應后（5-7天，無干擾），根據(jù)HomeOffice法規(guī)和糖尿病動物的特定要求，分組圈養(yǎng)動物，每組5只動物。實驗受傷之后，將動物圈養(yǎng)于個體籠子（籠子尺寸35x15x15cm，具有鋸末底層，每兩天更換一次），環(huán)境維持在23℃的環(huán)境溫度，12小時明/暗循環(huán)。小鼠被自由供給食物（標準嚙齒類動物飲食）和水。在所有麻醉事件之后，將動物置于溫暖環(huán)境并監(jiān)測，直至它們從程序完全恢復。所有動物在手術后接受適當鎮(zhèn)痛藥（丁丙諾啡叔丁啡）和如需要的其他鎮(zhèn)痛藥。所有動物程序在HomeOffice許可的機構中進行，HomeOffice許可證（PCD:50/2505;PPL:40/3300;PIL:50/3482;PIL:70/4934）。在整個研究期間，每天監(jiān)測動物健康。在第0天，麻醉動物（異氟烷&空氣），并且背部剃毛并用鹽水浸泡的紗布清潔。在每個實驗動物的左背側皮膚中產生單個標準化的全層傷口（10.0mmx10.0mm）。隨后用透明膜敷料BioclusiveTM（SystagenixWoundManagement,UK）的圓周條帶包扎所有治療組中的傷口；之后它們通過使用29號針頭經由Bioclusive膜注射50μl溶解于純水中的材料而接受SG、媒介物、或SG和媒介物的組合。使用適當軟件將糖尿病動物隨機分入治療方案之一。在受傷后第2、4和6天再次應用治療。這些動物中的傷口部位被密切監(jiān)測應用劑的過度累積和過度的傷口部位水化；如果過度應用的劑累積/水化明顯，在再次應用之前通過抽吸去除之前應用的材料。在受傷后第4、8、12、16、20和24天，所有動物被再次麻醉，去除它們的膜敷料和任何游離碎片，使用鹽水浸泡的無菌紗布清潔它們的傷口。在第4、8、12、16、20和24天照相之后，如上使用Bioclusive膜敷料再次包扎傷口。根據(jù)血纖蛋白、肉芽組織、血管生成和re-epitelisation的存在來評價傷口愈合（非定量地）。基于上述因素的出現(xiàn)，新皮膚組織形成（愈合）被分類為：非常好、好、輕微、無。從在每個評估點對每個傷口拍攝的有刻度的傷口圖像進一步測定了傷口閉合數(shù)據(jù)。在給定時間點給定傷口的面積被表示為受傷后立即（即，第0天）傷口的面積的百分比。計算每組的保留的平均百分比傷口面積（&平均值的標準誤差），并圖形展示。每種葡聚糖制品的影響與接受以下的傷口的影響相比較：i）媒介物（水）；和ii）PDGF-BB+TGF-α（陽性對照）。表1:愈合傷口的分數(shù)，第8天。表1結果顯示，接受單獨葡聚糖的愈合傷口頻率相對于接受單獨媒介物的傷口高。這表明單獨葡聚糖與膠凝劑（媒介物）相比是更好的新皮膚組織形成誘導劑。此外，存在明顯的濃度依賴性變化，2%至4%葡聚糖溶液顯示增加的傷口愈合（好至非常好）。然而，葡聚糖和媒介物兩者的組合由于每種劑的單獨使用（從略微至好和非常好的顯著變化），表明了組合產品的協(xié)同效應。實施例4:根據(jù)本發(fā)明的葡聚糖制品對傷口愈合的影響進行研究以評價根據(jù)本發(fā)明的基于葡聚糖的制品在延遲傷口愈合的公認體內模型中促進組織修復的能力。具有糖尿病的患者易于受損的傷口愈合，足潰瘍是特別流行的。這種傷口愈合的延遲擴展至糖尿病動物，包括自發(fā)糖尿病（db/db）小鼠（即，BKS.Cg-mDock7m+/+Leprdb/J小鼠）。在本研究中，接受Biotec葡聚糖SG131-9（以各種濃度，有或沒有各種媒介物）的糖尿病小鼠的傷口愈合與暴露于以下媒介物的類似傷口愈合相比較：（i）純化水[注射用水]，（ii）1.0%羧甲基纖維素，和（iii）0.3%Phytagel。接受Biotec葡聚糖SG131-9的糖尿病傷口的愈合還與如下對比劑比較：（i）Methocel-對比多糖材料，和（ii）IntrasiteGel-市場領先的傷口控制水凝膠制品。與重組人轉化生長因子-α（rh-TGF-α）組合的重組人血小板衍生的生長因子-BB（rh-PDGF-BB）在本研究中用作“陽性對照”。該陽性對照與兩種載體一起應用-0.5%羥丙基甲基纖維素（HPMC）和1.0%羧甲基纖維素（CMC）。材料和方法測試材料1.注射用水2.純化水中1.0%羧甲基纖維素（CMC,SigmaC5013,鈉鹽）3.0.3%Phytagel+4mMCaCl24.2.0%Methocel5.Intrasite6.2.0%SG7.4.0%SG8.1.0%CMC+1.0%SG9.1.0%CMC+2.0%SG10.1.0%CMC+4.0%SG11.0.3%Phytagel+2.0%SG12.rh-PDGF-BB[10%]+rh-TGF-α[1%]–于0.5%HPMC中13.rh-PDGF-BB[10%]+rh-TGF-α[1%]–于1.0%CMC中根據(jù)實施例1和3中描述的方法制備上述材料。Phytagel總是與CaCl2一起使用。BKS.Cg-mDock7m+/+Leprdb/J糖尿病小鼠模型將年齡約5-6周的小鼠帶到UK，并維持“圈養(yǎng)”直至12周（±1周）–根據(jù)HomeOffice法規(guī)和糖尿病動物的特定要求。簡言之，在第0天，使用異氟烷和空氣麻醉小鼠；并且背部側翼皮膚剃毛并根據(jù)方案清潔。在緊靠脊椎左側的皮膚中產生單個標準化的全層傷口（10mmx10mm）。將糖尿病動物隨機分入13個實驗組之一（如下表中描述的）。所有組中的傷口用半封閉膜敷料BioclusiveTM（SystagenixWoundManagement,UK）的圓周條帶包扎，并通過經由Bioclusive膜的皮下注射施用治療（50μl體積[第1-11組]和100μl[第12&13組]）。在整個研究期間每日檢查敷料狀態(tài)并在必要時更換。第1至11組的動物被限制，并在受傷后第2、4和6天通過經由Bioclusive膜的皮下注射再次應用治療。再次應用之前通過抽吸去除水合/之前應用的劑的任何累積。對于實驗組12&13（陽性對照），每天再次應用治療，直至受傷后第6天。在第4天，再次麻醉所有動物，對傷口照相，并使動物在溫暖環(huán)境（34℃）中恢復。因為傷口邊界通過BioclusiveTM敷料清晰可見，并且為了最小化通過反復去除敷料帶來的傷口周圍損傷，決定在該評估點保留膜敷料。在第8&12、16&20天，再次麻醉所有動物，去除其膜敷料和任何自由碎片，并使用無菌鹽水浸泡的無菌紗布清潔其傷口。然后對傷口照相，用BioclusiveTM膜敷料重新包扎（如上）-并且使動物在溫暖環(huán)境（34℃）中恢復。受傷后立即以及在第4、8、12、16、20&24天隨后，與校正/身份板一起對所有傷口數(shù)碼照相（在膜敷料去除和傷口清潔之后-適用時）。實驗組:傷口閉合的圖像分析:使用ImageProPlus圖像分析軟件（版本4.1.0.0,MediaCybernetics,USA）計算在每個評估點拍攝的帶刻度的傷口圖像的傷口閉合。由于傷口閉合過程涉及傷口收縮的效應（邊緣組織向內運動），這也被測定。進行了以下評估:1.隨時間保留的百分比傷口面積即，在給定時間點保留的開放傷口面積-相對于在第0天損傷后立即的同一傷口的面積。2.隨時間的百分比傷口收縮即，在給定時間點的收縮傷口面積和原始傷口面積之間的差異[作為原始傷口面積的百分比。傷口愈合開始的評估（新皮膚組織產生）:本研究中所有傷口在每天基礎上目視評估，直至第8天–并且隨后在第10、12、14、16、20&24天目視評估，以建立其“愈合”狀態(tài)。記錄每個傷口是否表現(xiàn)出“新皮膚組織產生活性”（即，傷口是否開始了愈合過程）。每個傷口由兩個獨立的觀察者評估，并且在每個評估點比較治療組之間表現(xiàn)出“新皮膚組織產生活性”的平均百分比。當傷口基質筋膜內的血管被覆蓋“材料”掩蔽時，認為已經開始了新皮膚組織形成。這種掩蔽可能源自渾濁滲出液、聚合的/半聚合的血纖蛋白或肉芽組織的形成。不變地，新皮膚組織起始的第一跡象是傷口孔隙內紅色滲出液的形成。結果傷口閉合:對于給定時間點的給定傷口，傷口閉合表示為相對于損傷后立即（即，第0天）的初始傷口面積的百分比保留的傷口面積。所有治療組的平均百分比保留的傷口面積數(shù)據(jù)描述于下表2。表2:所有研究組的百分比“保留的傷口面積”數(shù)據(jù)如表2和圖4和5所示，發(fā)現(xiàn)“%隨時間保留的傷口面積”數(shù)據(jù)的傷口閉合特征在治療組之間明顯不同。僅接受水的傷口證明了最緩慢的傷口閉合，而接受陽性對照的傷口表現(xiàn)出最快的閉合，所有其他治療組介于中間。發(fā)現(xiàn)接受2%SG（CMC中）的傷口比任何其他實驗治療組（不包括陽性對照）更快閉合。兩種對比劑（Methocel和Intrasite）與水處理相比趨于加速傷口閉合。第24天達到的最終傷口閉合水平對于Methocel是～91%，并且對于Intrasite是～92%。CMC中SG131-9（1、2或4%）的應用與水治療相比趨于加速傷口閉合。用1%SG131-9（CMC中）的治療導致在受傷后第12至20天顯著提高的閉合。用2%SG131-9（CMC中）的治療似乎導致更明顯且持續(xù)的效應，并且發(fā)現(xiàn)導致從第12天之后閉合的顯著加速。用4%SG131-9（CMC中）的治療雖然比水更有效，但是似乎不如1%和2%治療有效。在第24天達到的最終傷口閉合水平:1%SG131-9（CMC中）是90%，2%SG131-9（CMC中）是96%，并且4%SG131-9（CMC中）是89%。1%CMC中應用的2%SG131-9趨于比水中應用2%SG131-9更大程度上提高傷口閉合。當比較三種2%SG131-9治療方案時，可以看到所有三種比其各自的媒介物對照（即，水、1%CMC&0.3%Phytagel）促進閉合至更高水平。從絕對數(shù)字上看，CMC中2%SG趨于導致最高水品的閉合。水治療組中2%SG的閉合特征類似于Phytagel治療組中2%SG的閉合特征，兩者都表現(xiàn)出比用CMC制劑中2%SG131-9治療的傷口更低水平的閉合。在所有評價的SG131-9制劑中，1%CMC中2%SG131-9似乎是最有效的。發(fā)現(xiàn)2%SG131-9（CMC中）比對比多糖材料Intrasite和市場領先的傷口控制水凝膠制品Methocel更大程度地促進傷口閉合。傷口收縮收縮是傷口邊緣的向心運動-由于傷口“主體”內肉芽組織的壓縮。認為驅動該過程的“壓縮”力存在于成纖維細胞系的細胞中。在該研究中，%收縮被計算為：傷口收縮結果顯示于下表3和圖6和7。表3:值得注意的是，與所有其他治療組相比，僅水的治療組中明顯更少的收縮。兩個陽性對照方案，2%SG（CMC中）和更晚時間點（第20和24天）用2%SG（Phytagel中）中觀察到最高水平的收縮。兩種對比劑Methocel和Intrasite相對于水處理促進了傷口收縮。在第8、20和24天，Methocel處理的傷口比用水處理的那些顯著更收縮，而Intrasite處理的傷口從第12天開始表現(xiàn)出顯著更大的收縮。兩種對比劑治療組趨于表現(xiàn)出比陽性對照治療的傷口更小的傷口收縮。用1%CMC中配制的SG131-9（1%、2%或4%）的治療相對于水治療促進了傷口收縮。從第12天開始，用每種濃度的治療導致了比水治療顯著更大的收縮。發(fā)現(xiàn)2%SG131-9（CMC中）與單獨CMC相比促進了傷口收縮，在第16和24天觀察到顯著提高的收縮。發(fā)現(xiàn)2%SG（CMC中）比1%和4%SG131-9（CMC中）更有效促進收縮。直至并且包括第20天，用2%SG（CMC中）治療導致與陽性對照傷口類似的收縮水平，它們之間沒有顯著的測量的差異；而如之前描述的，單獨CMC導致了比陽性對照治療更小的收縮。令人感興趣的，在最終評估點（第24天），發(fā)現(xiàn)用2%SG（CMC中）治療的傷口比用陽性對照治療治療的那些相比更大程度地收縮。1%CMC中應用的2%SG131-9趨于比水中應用的2%SG131-9更大程度提高傷口收縮。在絕對數(shù)字上講，CMC中2%SG趨于導致最高水平的收縮。還發(fā)現(xiàn)2%SG131-9（Phytagel中）與水治療相比和與單獨Phytagel相比促進傷口收縮。所有評價的SG131-9制品中，1%CMC中的2%SG131-9似乎在傷口收縮方面是最有效的。發(fā)現(xiàn)2%SG131-9（CMC中）比Intrasite和Methocel更大程度地促進傷口收縮。傷口愈合的開始（新皮膚組織產生）本研究中所有傷口在每天基礎上目視評估，直至第8天，并且隨后在第10、12、14、16、20&24天目視評估，以建立其“愈合”狀態(tài)。記錄每個傷口是否表現(xiàn)出“新皮膚組織產生活性”（即，傷口是否開始了愈合過程）。每個傷口由兩個獨立的觀察者評估，并且在每個評估點比較治療組之間表現(xiàn)出“新皮膚組織產生活性”的平均百分比。發(fā)現(xiàn)不同治療組中的傷口證明在受傷后不同時間愈合的第一跡象。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，其中發(fā)現(xiàn)不同組響應的級別從最快到最慢：發(fā)現(xiàn)被隨機分入水治療的十個傷口（70%）中的七個在第24天研究結束時具有起始的新皮膚組織形成。在該時間點，發(fā)現(xiàn)所有其他組中所有傷口具有起始的新皮膚組織形成。考慮在1%CMC中配制的SG，接受2%和4%SG的傷口首先響應，隨后是接受1%SG的傷口。當與水治療相比時，顯著更大數(shù)目的1%SG131-9治療的傷口在第6至14天響應，顯著更大數(shù)目接受2%SG131-9的傷口在第3至14天響應，并且顯著更大數(shù)目的用4%SG131-9治療的傷口在第4至14天響應。在第4天后，注意到這三個治療組和兩個陽性對照治療組之間沒有顯著差異。就平均響應天數(shù)而言，所有三個濃度比水治療的傷口顯著更早地響應。發(fā)現(xiàn)接受Phytagel中配制的2%SG的傷口比接受單獨Phytagel的傷口更早地響應。當與對照組相比時，比接受水的傷口顯著更多的接受2%SG（Phytagel中）的傷口在第4至14天響應。就平均響應天數(shù)而言，2%SG（Phytagel）比單獨的水或Phytagel顯著更早地響應。實施例5:葡聚糖凝膠穩(wěn)定性如下制備·2,7%SBG（純化水中Biotec`s可溶性酵母β葡聚糖）·在攪拌中添加BlanoseTM（7H4XFPH,KirschPharmaGmbh，藥物級羧甲基纖維素）至終濃度1,5%（w/v）?！嚢柚敝罜MC溶解·添加甘油（99,7%）至終濃度20%·在120℃高壓釜中滅菌18min·快速冷卻并允許凝膠固化，如實施例1所述并且在加速降解的條件下儲存于鋁管（以4℃和37℃的交替溫度振搖）達六個月。根據(jù)實施例1制備單獨的SG，即，沒有羧甲基纖維素，并在相同條件下儲存。起始材料SBG是與實施例1中使用的相同起始材料。如圖9所示，通過這些儲存條件增強SG凝膠的降解。在這些條件下，可以在早達1個月時看到降解跡象，即，合成。6個月后，SG凝膠顯示明顯的合成跡象，并且被描述為非常軟、薄、異質、塊狀、裂縫、粒狀凝膠，而由具有添加的羧甲基纖維素的SG組成的凝膠與其在研究開始時的外觀相比沒有改變，并且在整個研究期間、至少持續(xù)6個月保持同質且粘性凝膠。已經證明組合產品與單獨SG相比具有增強的穩(wěn)定性。