WO2012/126932公開了數(shù)種新的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺及其作為HPPD抑制劑除草劑用于雜草防治的用途。
然而，N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺的除草活性會對數(shù)種作物植物造成損害，這限制了其在這些作物栽培區(qū)域作為除草劑用于雜草防治的用途。
HPPD抑制劑除草劑可在顯示出代謝耐受性的作物植物（如玉米（Zea mays），它們在其中被快速降解）中用于抵抗禾本科雜草和/或闊葉雜草（Schulz等人，(1993).FEBS letters,318,162-166；Mitchell等人，(2001)Pest Management Science,第57卷,120-128；Garcia等人，(2000)Biochem.,39,7501-7507；Pallett等人，(2001)Pest Management Science,第57卷,133-142）。為了拓寬這些HPPD抑制劑除草劑的范圍，人們已進行了許多努力，以便向植物（特別是沒有代謝耐受性或代謝耐受性表現(xiàn)不佳的植物）賦予在農(nóng)藝學(xué)田間條件下可接受的耐受性水平。
與此同時，通過避開HPPD介導(dǎo)的尿黑酸的產(chǎn)生（US 6,812,010），過表達敏感型酶而對轉(zhuǎn)基因植物進行改造，以在植物中產(chǎn)生大量靶酶，其相對施用的除草劑來說是足夠的（WO96/38567）。
或者，已產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物，其表達在多個位點已經(jīng)突變的HPPD蛋白質(zhì)以獲得靶酶，所述靶酶在保留由其催化HPP轉(zhuǎn)化為尿黑酸的性質(zhì)的同時，對HPPD抑制劑除草劑不如突變前的天然HPPD敏感（例如參見EP496630、WO 99/24585）。
最近，將假單胞菌屬（Pseudomonas）HPPD基因引入煙草和大豆的質(zhì)體基因組已顯示出比核轉(zhuǎn)化更為有效，其甚至賦予了針對至少一種HPPD抑制劑的苗后施用的耐受性（Dufourmantel等人,2007,Plant Biotechnol J.5(1):118-33）。
在WO 2009/144079中，公開了編碼在熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）HPPD蛋白的第336位突變的羥苯丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的核酸序列及其用于獲得耐受HPPD抑制劑除草劑的植物的用途。
在多個位點包含突變的熒光假單胞菌HPPD蛋白質(zhì)的其他突變體及其賦予對某些HPPD抑制劑除草劑的抗性的能力記載于提交（2013年9月13日）的PCT申請?zhí)枮镻CT/US2013/59598的PCT申請中，其要求US61/701,037（2012年9月14日提交）、US 61/766,057（2013年2月18日提交）和US 61/790,404（2013年3月15日提交）的優(yōu)先權(quán)。
這些突變體中的一些，即熒光假單胞菌HPPD蛋白質(zhì)的以下突變體：其(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且在此以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中）；(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中）；或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中），關(guān)于產(chǎn)生的賦予對HPPD抑制劑除草劑的耐受性的各轉(zhuǎn)基因植物，所述突變體分別以其縮寫PfHPPDEvo33、PfHPPDEvo40和PfHPPDEvo41以引用的方式納入本文。
在此之前，所命名的氨基酸首先具有存在于野生型熒光假單胞菌的HPPD蛋白中的氨基酸的特征且括號中所示的字符以3個字母代碼確定了各氨基酸，而在括號前所示的字符以1個字母代碼確定了各氨基酸。
在WO 04/024928中，發(fā)明人設(shè)法通過增加HPP前體進入這些植物的細胞的通量來增加異戊二烯基醌在植物細胞中的生物合成（例如，質(zhì)體醌、生育酚的合成）。這通過預(yù)苯酸脫氫酶（PDH）的過表達將所述前體的合成與“莽草酸”途徑連接來進行。他們還注意到，用編碼PDH酶的基因轉(zhuǎn)化植物使得增加所述植物對HPPD抑制劑的耐受性成為可能。
在WO 2002/046387中，記載了從燕麥（Avena sativa）獲得編碼HPPD的基因，以產(chǎn)生過表達該基因的植物并因此導(dǎo)致其耐受多種HPPD抑制劑除草劑。
在WO 2008/150473中，示例說明了兩種不同的耐受性機制——經(jīng)修飾的編碼突變HPPD酶的燕麥基因和CYP450玉米單加氧酶（nsf1基因）——的組合，以獲得改進的針對HPPD抑制劑除草劑的耐受性，但是沒有公開數(shù)據(jù)證實基于兩種蛋白質(zhì)的組合的協(xié)同效果。
在WO 2010/085705中，記載了燕麥HPPD的幾種突變體以及包含編碼該突變的HPPD的基因的植物并因此導(dǎo)致對與未突變的HPPD相比的多種HPPD抑制劑除草劑具有增加的耐受性。
在WO 2012/021785中，記載了多種生物的HPPD蛋白質(zhì)的幾種突變體，優(yōu)選從玉米獲得的HPPD。從體外的所述突變的HPPD酶以及包含編碼所述突變的HPPD的基因的植物獲得數(shù)據(jù)，并因此產(chǎn)生與未突變的HPPD相比對多種HPPD抑制劑除草劑增大的耐受性。
最近，已經(jīng)鑒定了幾種來自多種生物的編碼HPPD酶的新基因，其用于獲得作物植物，所述作物植物對施用的不同HPPD抑制劑除草劑表現(xiàn)出農(nóng)學(xué)上適用的耐受水平，所述新基因例如為(i)公開于WO2011/076877（PCT/EP2010/070561）中的由屬于聚球藻亞科（Synechococcoideae）的細菌及其某些突變體獲得的基因；(ii)公開于WO2011/076882（PCT/EP2010/070567）中的由屬于赭纖蟲科（Blepharismidae）的原生生物獲得的基因；(iii)公開于WO2011/076892（PCT/EP2010/070578）中的由屬于紅球菌屬（Rhodococcus）的細菌及其某些突變體獲得的基因；(iv)公開于WO2011/076885（PCT/EP2010/070570）中的由屬于嗜苦菌科（Picrophilaceae）的廣古菌門（Euryarchaeota）及其某些突變體獲得的基因；或(v)公開于WO2011/076889（PCT/EP2010/070575）中的由屬于克魯?shù)賮喚鷮伲↘ordia）的細菌及其某些突變體獲得的基因，關(guān)于賦予HPPD抑制劑除草劑耐受性的各轉(zhuǎn)基因植物的生產(chǎn)，將其以引用的方式納入本文中。
現(xiàn)發(fā)現(xiàn)N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽可用于耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物，所述轉(zhuǎn)基因作物植物通過含有一個或多個賦予對HPPD抑制劑除草劑耐受性的基因而具有耐受性。
本發(fā)明的主題為式(I)的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在通過包含一種或多種嵌合基因而耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物的區(qū)域中防治不想要的植物的用途，
其中，取代基為如下所定義：
A為N或CY，
R為氫、(C1-C6)-烷基、R1O-(C1-C6)-烷基、CH2R6、(C3-C7)-環(huán)烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、鹵代-(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、鹵代-(C2-C6)-炔基、OR1、NHR1、甲氧基羰基、乙氧基羰基、甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基甲基、甲基羰基、三氟甲基羰基、二甲基氨基、乙?；被⒓谆蚧╩ethylsulfenyl）、甲基亞磺?；⒓谆酋；?、或各自被s個選自以下的基團取代的雜芳基、雜環(huán)基、芐基或苯基：鹵素、硝基、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C4)-烷基，
X為硝基、鹵素、氰基、甲?；⑶枇蚧?、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、鹵代-(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、鹵代-(C3-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、COR1、COOR1、OCOOR1、NR1COOR1、C(O)N(R1)2、NR1C(O)N(R1)2、OC(O)N(R1)2、C(O)NR1OR1、OR1、OCOR1、OSO2R2、S(O)nR2、SO2OR1、SO2N(R1)2、NR1SO2R2、NR1COR1、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-OCOR1、(C1-C6)-烷基-OSO2R2、(C1-C6)-烷基-CO2R1、(C1-C6)-烷基-SO2OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、NR1R2、P(O)(OR5)2、CH2P(O)(OR5)2、(C1-C6)-烷基雜芳基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基，其中后兩個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基基團，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Y為氫、硝基、鹵素、氰基、氰硫基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、鹵代-(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、鹵代-(C2-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烯基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、COR1、COOR1、OCOOR1、NR1COOR1、C(O)N(R1)2、NR1C(O)N(R1)2、OC(O)N(R1)2、CO(NOR1)R1、NR1SO2R2、NR1COR1、OR1、OSO2R2、S(O)nR2、SO2OR1、SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-OCOR1、(C1-C6)-烷基-OSO2R2、(C1-C6)-烷基-CO2R1、(C1-C6)-烷基-CN、(C1-C6)-烷基-SO2OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、N(R1)2、P(O)(OR5)2、CH2P(O)(OR5)2、(C1-C6)-烷基苯基、(C1-C6)-烷基雜芳基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、苯基、雜芳基或雜環(huán)基，其中后面的6個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、硝基、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C4)-烷基和氰甲基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Z為氫、鹵素、氰基、氰硫基、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、鹵代-(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、鹵代-(C2-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、鹵代-(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、COR1、COOR1、OCOOR1、NR1COOR1、C(O)N(R1)2、NR1C(O)N(R1)2、OC(O)N(R1)2、C(O)NR1OR1、OSO2R2、S(O)nR2、SO2OR1、SO2N(R1)2、NR1SO2R2、NR1COR1、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-OCOR1、(C1-C6)-烷基-OSO2R2、(C1-C6)-烷基-CO2R1、(C1-C6)-烷基-SO2OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、N(R1)2、P(O)(OR5)2、雜芳基、雜環(huán)基或苯基，其中后面的3個基團被s個選自以下的基團取代：鹵素、硝基、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基或鹵代-(C1-C6)-烷氧基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
R1為氫、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-鹵代烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-鹵代烯基、(C2-C6)-炔基、(C2-C6)-鹵代炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烯基、(C3-C6)-鹵代環(huán)烷基、(C1-C6)-烷基-O-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、苯基、苯基-(C1-C6)-烷基、雜芳基、(C1-C6)-烷基雜芳基、雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-O-雜芳基、(C1-C6)-烷基-O-雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜芳基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜環(huán)基，并且其中后面的21個基團被s個選自以下的基團取代：氰基、鹵素、硝基、氰硫基、OR3、S(O)nR4、N(R3)2、NR3OR3、COR3、OCOR3、SCOR4、NR3COR3、NR3SO2R4、CO2R3、COSR4、CON(R3)2和(C1-C4)-烷氧基-(C2-C6)-烷氧基羰基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
R2為(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-鹵代烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-鹵代烯基、(C2-C6)-炔基、(C2-C6)-鹵代炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烯基、(C3-C6)-鹵代環(huán)烷基、(C1-C6)-烷基-O-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、苯基、苯基-(C1-C6)-烷基、雜芳基、(C1-C6)-烷基雜芳基、雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-O-雜芳基、(C1-C6)-烷基-O-雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜芳基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜環(huán)基，其中后面的21個基團被s個選自以下的基團取代：氰基、鹵素、硝基、氰硫基、OR3、S(O)nR4、N(R3)2、NR3OR3、COR3、OCOR3、SCOR4、NR3COR3、NR3SO2R4、CO2R3、COSR4、CON(R3)2和(C1-C4)-烷氧基-(C2-C6)-烷氧基羰基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
R3為氫、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基或(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基，
R4為(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基或(C2-C6)-炔基，
R5為甲基或乙基，
R6為乙酰氧基、乙酰氨基、N-甲基乙酰氨基、苯甲酰氧基、苯甲酰氨基、N-甲基苯甲酰氨基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、苯甲酰基、甲基羰基、哌啶基羰基、嗎啉基羰基、三氟甲基羰基、氨基羰基、甲基氨基羰基、二甲基氨基羰基、(C1-C6)-烷氧基、(C3-C6)-環(huán)烷基、或被s個選自以下的基團取代的雜芳基、雜環(huán)基或苯基：甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基和鹵素，
n為0、1或2；以及
s為0、1、2或3，
所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬（Avena），優(yōu)選燕麥（Avena sativa），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬（Pseudomonas），更優(yōu)選熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科（Synechococcoideae），優(yōu)選聚球藻屬種（Synechococcus sp.），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科（Blepharismidae），優(yōu)選日本赭纖蟲（Blepharisma japonicum），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬（Rhodococcus），優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科（Picrophilaceae），優(yōu)選嗜苦古菌（Picrophilus torridus），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲↘ordia），優(yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌（Kordia algicida），更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米（Zea mays）或大豆（Glycine max）獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)（Pseudomonas(=Comamonas)testosteroni）HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌（Pseudomonas agarici）HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在式(I)及其后所有的化學(xué)式中，具有兩個以上碳原子的烷基可為直鏈或支鏈的。烷基為，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或2-丁基、戊基、己基如正己基、異己基和1,3-二甲基丁基。鹵素為氟、氯、溴或碘。
雜環(huán)基為飽和的、半飽和的或完全不飽和的包含3至6個環(huán)原子（其中1至4個選自氧、氮和硫）的環(huán)狀基團，并且其還可通過苯并環(huán)稠合。例如雜環(huán)基為哌啶基、吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基和氧雜環(huán)丁烷基，
雜芳基為包含3至6個環(huán)原子（其中1至4個選自氧、氮和硫）的芳族環(huán)狀基團，并且其還可通過苯并環(huán)稠合。例如，雜芳基為苯并咪唑-2-基、呋喃基、咪唑基、異噁唑基、異噻唑基、噁唑基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吡啶基、苯并異噁唑基、噻唑基、吡咯基、吡唑基、噻吩基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、2H-1,2,3,4-四唑基、1H-1,2,3,4-四唑基、1,2,3,4-氧雜三唑基、1,2,3,5-氧雜三唑基、1,2,3,4-噻三唑基和1,2,3,5-噻三唑基。
當基團被取代基多取代，這意味著所述基團被一個或多個所提及的相同或不同的取代基所取代。
根據(jù)取代基的性質(zhì)和鍵合，通式(I)的化合物可作為立體異構(gòu)體存在。例如，當存在一個或多個非對稱碳原子時，可能存在對映體和非對映體。當n為1（亞砜）時也存在立體異構(gòu)體。可通過常規(guī)分離方法（例如，通過色譜分離方法）從制備中所獲得的混合物中獲得立體異構(gòu)體。同樣地，可通過使用立體選擇反應(yīng)任選地使用活性原始材料和/或助劑選擇性制備立體異構(gòu)體。本發(fā)明還涉及被通式(I)涵蓋但沒有具體定義的所有立體異構(gòu)體及其混合物。
優(yōu)選本發(fā)明的通式(I)的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺在通過包含一種或多種嵌合基因而耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物的區(qū)域中防治不想要的植物的用途，其中
A為N或CY，
R為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C7)-環(huán)烷基甲基、甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基甲基、乙?；谆?、甲氧基甲基、甲氧基乙基、芐基、吡嗪-2-基、呋喃-2-基、四氫呋喃-2-基、嗎啉、二甲基氨基、或被s個選自以下的基團取代的苯基：甲基、甲氧基、三氟甲基和鹵素；
X為硝基、鹵素、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、OR1、S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、(C1-C6)-烷基雜芳基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基，其中后兩個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Y氫、硝基、鹵素、氰基、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-鹵代烷基、OR1、S(O)nR2、SO2N(R1)2、N(R1)2、NR1SO2R2、NR1COR1、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、(C1-C6)-烷基苯基、(C1-C6)-烷基雜芳基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、苯基、雜芳基或雜環(huán)基，其中后6個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、硝基、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C4)-烷基和氰甲基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Z為鹵素、氰基、硝基、甲基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)nR2、1,2,4-三唑-1-基、吡唑-1-基、或如果Y為S(O)nR2基團，Z也可為氫，
R1為氫、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基-O-(C1-C6)-烷基、苯基、苯基-(C1-C6)-烷基、雜芳基、(C1-C6)-烷基雜芳基、雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-O-雜芳基、(C1-C6)-烷基-O-雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜芳基或(C1-C6)-烷基-NR3-雜環(huán)基，其中后面16個基團被s個選自以下的基團取代：氰基、鹵素、硝基、OR3、S(O)nR4、N(R3)2、NR3OR3、COR3、OCOR3、NR3COR3、NR3SO2R4、CO2R3、CON(R3)2和(C1-C4)-烷氧基-(C2-C6)-烷氧基羰基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
R2為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基或(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基，其中上述三個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素和OR3，
R3為氫或(C1-C6)-烷基，
R4為(C1-C6)-烷基，
n為0、1或2；
s為0、1、2或3，
所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
特別優(yōu)選本發(fā)明的通式(I)的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺在通過包含一種或多種嵌合基因而耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物的區(qū)域中防治不想要的植物的用途，其中
A為N或CY，
R為氫、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基、鹵代-(C1-C4)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基甲基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、芐基；
X為硝基、鹵素、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、環(huán)丙基、OR1、S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C2)-烷基雜芳基、(C1-C2)-烷基雜環(huán)基，其中后兩個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Y為氫、硝基、鹵素、氰基、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-鹵代烷基、OR1、S(O)nR2、SO2N(R1)2、N(R1)2、NR1SO2R2、NR1COR1、(C1-C6)-烷基-S(O)nR2、(C1-C6)-烷基-OR1、(C1-C6)-烷基-CON(R1)2、(C1-C6)-烷基-SO2N(R1)2、(C1-C6)-烷基-NR1COR1、(C1-C6)-烷基-NR1SO2R2、(C1-C6)-烷基苯基、(C1-C6)-烷基雜芳基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、苯基、雜芳基或雜環(huán)基，其中后6個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素、硝基、氰基、(C1-C6)-烷基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)n-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基、鹵代-(C1-C6)-烷氧基、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C4)-烷基和氰甲基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
Z為鹵素、氰基、硝基、甲基、鹵代-(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、S(O)nR2、1,2,4-三唑-1-基、吡唑-1-基，
R1為氫、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基-O-(C1-C6)-烷基、苯基、苯基-(C1-C6)-烷基、雜芳基、(C1-C6)-烷基雜芳基、雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-O-雜芳基、(C1-C6)-烷基-O-雜環(huán)基、(C1-C6)-烷基-NR3-雜芳基或(C1-C6)-烷基-NR3-雜環(huán)基，其中后16個基團被s個選自以下的基團取代：氰基、鹵素、硝基、OR3、S(O)nR4、N(R3)2、NR3OR3、COR3、OCOR3、NR3COR3、NR3SO2R4、CO2R3、CON(R3)2和(C1-C4)-烷氧基-(C2-C6)-烷氧基羰基，并且其中雜環(huán)基帶有n個氧代基團，
R2為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基或(C3-C6)-環(huán)烷基-(C1-C6)-烷基，其中上述三個基團各自被s個選自以下的基團取代：鹵素和OR3，
R3為氫或(C1-C6)-烷基，
R4為(C1-C6)-烷基，
n為0、1或2；
s為0、1、2或3，
所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在所有下式中，除非另有說明，取代基和符號具有與式(I)所述相同的定義。
根據(jù)本發(fā)明使用的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺可根據(jù)WO2012/126932（在此通過引用將其納入）中的詳細描述制備。
在下文中，表1至7中所列出的化合物非常特別優(yōu)選的用于在通過包含一種或多種嵌合基因而耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物區(qū)域中防治不想要的植物，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
使用的縮寫意指：
Et=乙基 Me=甲基 n-Pr=正丙基 i-Pr=異丙基
c-Pr=環(huán)丙基 Ph=苯基 Ac=乙?；?Bz=苯甲?；?/p>
表1：通式(I)的化合物，其中A為CY以及R為氫以及X、Y和Z為如下所定義。
表2：通式(I)的化合物，其中A為CY以及R為甲基，以及X、Y和Z為如下所定義
表3：通式(I)的化合物，其中A為CY以及R為乙基，以及X、Y和Z為如下所定義。
表4：通式(I)的化合物，其中A為CY以及R為三氟甲基，以及X、Y和Z為如下所定義。
表5：通式(I)的化合物，其中A為CY以及R為CH2OMe，以及X、Y和Z為如下所定義。
表6：通式(I)的化合物，其中A為CY，以及R、X、Y和Z如下所定義。
表7:通式(I)的化合物，其中A為氮，以及R、X和Z為如下所定義。
如已公開于WO2012/126932中的，根據(jù)本發(fā)明使用的式(I)的化合物和/或其鹽——在下文中還一起稱為“本發(fā)明的化合物”——對廣譜的經(jīng)濟上重要的單子葉和雙子葉一年生有害植物具有優(yōu)異的除草功效。所述活性化合物甚至有效地作用于從根莖、砧木和其它多年生器官產(chǎn)生枝條且難以防治的多年生雜草。
因此，本發(fā)明涉及一種在通過包含一種或多種嵌合基因來耐受HPPD抑制劑除草劑的作物植物區(qū)域中防治不想要的植物的方法，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述方法包括將一種或多種如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺施用至植物（例如有害植物如單子葉或雙子葉雜草或不想要的作物植物)、種子（例如谷物、種子或營養(yǎng)繁殖體如塊莖或具有芽的枝條部位）或施用至植物生長的區(qū)域（例如栽培區(qū)域）?？商峒翱捎杀景l(fā)明的化合物防治的單子葉和雙子葉雜草植物的一些代表性的具體實例，但并非限制于某些物種的列舉。
以下屬的單子葉有害植物：山羊草屬（Aegilops）、冰草屬（Agropyron）、剪股穎屬（Agrostis）、看麥娘屬（Alopecurus）、阿披拉草屬（Apera）、燕麥屬（Avena）、臂形草屬（Brachiaria）、雀麥屬（Bromus）、蒺藜草屬（Cenchrus）、鴨跖草屬（Commelina）、狗牙根屬（Cynodon）、莎草屬（Cyperus）、龍爪茅屬（Dactyloctenium）、馬唐屬（Digitaria）、稗屬（Echinochloa）、荸薺屬（Eleocharis）、穇屬（Eleusine）、畫眉草屬（Eragrostis）、野黍?qū)伲‥riochloa）、羊茅屬（Festuca）、飄拂草屬（Fimbristylis）、異蕊花屬（Heteranthera）、白茅屬（Imperata）、鴨嘴草屬（Ischaemum）、千金子屬（Leptochloa）、黑麥草屬（Lolium）、雨久花屬（Monochoria）、黍?qū)?Panicum)、雀稗屬（Paspalum）、虉草屬（Phalaris）、梯牧草屬（Phleum）、早熟禾屬（Poa）、筒軸茅屬（Rottboellia）、慈姑屬（Sagittaria）、藨草屬（Scirpus）、狗尾草屬（Setaria）、高粱屬（Sorghum）
以下屬的雙子葉雜草：苘麻屬（Abutilon）、莧屬（Amaranthus）、豚草屬（Ambrosia）、單花葵屬（Anoda）、春黃菊屬（Anthemis）、Aphanes、蒿屬（Artemisia）、濱藜屬（Atriplex）、雛菊屬（Bellis）、鬼針草屬（Bidens）、薺屬（Capsella）、飛廉屬（Carduus）、決明屬（Cassia）、矢車菊屬（Centaurea）、藜屬（Chenopodium）、薊屬（Cirsium）、旋花屬（Convolvulus）、曼陀羅屬（Datura）、山螞蝗屬（Desmodium）、Emex、糖芥屬（Erysimum）、大戟屬（Euphorbia）、鼬瓣花屬（Galeopsis）、牛膝菊屬（Galinsoga）、拉拉藤屬（Galium）、木槿屬（Hibiscus）、番薯屬（Ipomoea）、地膚屬（Kochia）、野芝麻屬（Lamium）、獨行菜屬（Lepidium）、母草屬（Lindernia）、母菊屬（Matricaria）、薄荷屬（Mentha）、山靛屬（Mercurialis）、粟米草屬（Mullugo）、勿忘草屬（Myosotis）、罌粟屬（Papaver）、牽牛屬（Pharbitis）、車前屬（Plantago）、蓼屬（Polygonum）、馬齒莧屬（Portulaca）、毛茛屬（Ranunculus）、蘿卜屬（Raphanus）、蔊菜屬（Rorippa）、節(jié)節(jié)菜屬（Rotala）、酸模屬（Rumex）、豬毛菜屬（Salsola）、千里光屬（Senecio）、田菁屬（Sesbania）、黃花稔屬（Sida）、歐白芥屬（Sinapis）、茄屬（Solanum）、苦苣菜屬（Sonchus）、尖瓣花屬（Sphenoclea）、繁縷屬（Stellaria）、蒲公英屬（Taraxacum）、遏藍菜屬（Thlaspi）、三葉草屬（Trifolium）、蕁麻屬（Urtica）、婆婆納屬（Veronica）、堇菜屬（Viola）、蒼耳屬（Xanthium）。
可對其施用如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺的經(jīng)濟上重要的作物的轉(zhuǎn)基因作物植物為，例如，以下屬的雙子葉作物：落花生屬（Arachis）、甜菜屬（Beta）、蕓苔屬（Brassica）、黃瓜屬（Cucumis）、南瓜屬（Cucurbita）、向日葵屬（Helianthus）、胡蘿卜屬（Daucus）、大豆屬（Glycine）、棉花屬（Gossypium）、番薯屬（Ipomoea）、萵苣屬（Lactuca）、亞麻屬（Linum）、番茄屬（Lycopersicon）、煙草屬（Nicotiana）、菜豆屬（Phaseolus）、豌豆屬（Pisum）、茄屬（Solanum）、蠶豆屬（Vicia），或以下單子葉作物：蔥屬（Allium）、鳳梨屬（Ananas）、蘆筍屬（Asparagus）、燕麥屬（Avena）、大麥屬（Hordeum）、稻屬（Oryza）、黍?qū)伲≒anicum）、甘蔗屬（Saccharum）、黑麥屬（Secale）、高粱屬（Sorghum）、黑小麥屬（Triticale）、小麥屬（Triticum）、玉蜀黍?qū)伲╖ea），尤其是玉蜀黍?qū)俸托←湆佟?/p>
這就是本發(fā)明優(yōu)選涉及在通過包含一種或多種嵌合基因來耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物區(qū)域中防治不想要的植物的方法的原因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述方法包括將一種或多種如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺在雙子葉作物（落花生屬、甜菜屬、蕓苔屬、黃瓜屬、南瓜屬、向日葵屬、胡蘿卜屬、大豆屬、棉花屬、番薯屬、萵苣屬、亞麻屬、番茄屬、煙草屬、菜豆屬、豌豆屬、茄屬、蠶豆屬）或單子葉作物（蔥屬、鳳梨屬、蘆筍屬、燕麥屬、大麥屬、稻屬、黍?qū)?、甘蔗屬、黑麥屬、高粱屬、黑小麥屬、小麥屬、玉蜀黍?qū)?，尤其是玉蜀黍?qū)俸托←湆伲┲惺┯弥林参铮ɡ缬泻χ参锶鐔巫尤~或雙子葉雜草或不想要的作物植物)、種子（例如谷物、種子或營養(yǎng)繁殖體如塊莖或具有芽的枝條部位）或施用至植物生長的區(qū)域（例如栽培區(qū)域）。
優(yōu)選在有用植物和觀賞植物的經(jīng)濟上重要的轉(zhuǎn)基因作物（例如谷物如小麥、大麥、黑麥、燕麥、高粱/粟、稻、木薯和玉蜀黍或甜菜作物、甘蔗、棉花、大豆、甘藍型油菜、馬鈴薯、番茄、豌豆和其它蔬菜）中使用如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽，這些作物包含一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
本發(fā)明還涉及核酸在用于轉(zhuǎn)化植物的方法中的用途，所述核酸編碼HPPD作為標記基因或作為編碼序列，其使得能夠賦予植物對HPPD抑制劑除草劑的耐受性，以及涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含一種或多種嵌合基因的植物上的用途，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在作物的商業(yè)生產(chǎn)中，希望在可靠的農(nóng)藥管理下從作物植物的田間除掉不想要的植物（即“雜草”）。理想的處理將是這樣的，其可施用至整塊田間，但將僅除掉不想要的植物，同時使得作物植物不受影響。一種此類的處理系統(tǒng)將涉及使用耐受除草劑的作物植物，從而當將除草劑噴灑在除草劑耐受的作物植物上時，作物植物將繼續(xù)茂盛生長同時非除草劑耐受性的雜草被殺死或嚴重受損。理想地，此類處理系統(tǒng)利用不同的除草劑性質(zhì)的優(yōu)點，使得雜草防治可提供靈活度和經(jīng)濟性的可能最佳的組合。例如，各除草劑在田間具有不同壽命，并且一些除草劑在其施用至田間之后能在相對長的時間內(nèi)存留并有效，而其它除草劑則迅速被分解為其它和/或非活性化合物。理想的處理系統(tǒng)將允許使用不同的除草劑，使得種植者可針對具體情況來選擇除草劑。
雖然目前大量除草劑耐受性作物植物是市售的，但很多市售除草劑和除草劑/作物組合物出現(xiàn)的一個問題是單一除草劑通常對常見的雜草物種具有不完整的活性譜。對于已使用了一段時間的大多數(shù)各除草劑而言，除草劑抗性雜草物種和生物型的種群已更為普遍（參見，例如Tranel and Wright(2002)Weed Science 50:700-712；Owen and Zelaya(2005)Pest Manag.Sci.61:301-311)。抗一種以上除草劑的轉(zhuǎn)基因植物已被記載過（參見，例如W02005/012515）。然而，在作物生產(chǎn)、雜草防治選擇、殘余雜草控制的延伸以及作物產(chǎn)量改進的每個方面，都需要持續(xù)改進。
將上述定義的編碼一個或多個HPPD蛋白質(zhì)或其突變體（其在轉(zhuǎn)基因植物中是功能性的，以實現(xiàn)對HPPD抑制劑除草劑的耐受性（屬于如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的類型））的嵌合基因與編碼賦予此類植物有用的農(nóng)藝學(xué)性質(zhì)的蛋白質(zhì)或RNA的其它基因在植物中進行有利地組合。在編碼賦予轉(zhuǎn)化植物有用的農(nóng)藝學(xué)性質(zhì)的蛋白質(zhì)或RNA的基因中，可提及的是編碼賦予一種或多種除草劑（根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)，所述除草劑不同于HPPD抑制劑除草劑）耐受性的蛋白質(zhì)的DNA序列，和編碼賦予對某些昆蟲的耐受性的其他蛋白質(zhì)的DNA序列、編碼賦予對某些病害和/或生物脅迫和非生物脅迫的耐受性的那些蛋白質(zhì)的DNA序列、編碼提供線蟲或昆蟲防治的RNA的DNA等。
此類基因具體記載于公開的PCT專利申請WO 91/02071和WO95/06128中。
在編碼賦予轉(zhuǎn)化的植物細胞和植物對某些除草劑的耐受性的蛋白質(zhì)的DNA序列中，可提及的是bar或PAT基因或記載于WO2009/152359中的天藍色鏈霉菌（Streptomyces coelicol）基因（其賦予對草銨磷除草劑的耐受性），編碼合適的EPSPS（賦予對以EPSPS作為靶標的除草劑（如草甘膦或其鹽）的耐受性）的基因（US 4,535,060、US 4,769,061、US 5,094,945、US 4,940,835、US 5,188,642、US 4,971,908、US 5,145,783、US 5,310,667、US 5,312,910、US 5,627,061、US 5,633,435），或編碼草甘膦氧化還原酶的基因（US 5,463,175）。
在編碼合適的EPSPS（其賦予對以EPSPS作為靶標的除草劑的耐受性）的DNA序列中，將特別提及編碼植物EPSPS（特別是玉米EPSPS，特別是包含兩個突變的玉米EPSPS，特別是所述兩個突變的一個突變位于第102位氨基酸處并且一個突變位于第106位氨基酸處（WO 2004/074443））的基因，其記載于專利申請US6566587中，在下文中被稱為雙突變玉米EPSPS或2mEPSPS；或編碼從土壤桿菌屬中分離的EPSPS且由美國專利5,633,435的SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示的基因，也稱為CP4。
在編碼合適的EPSPS（其賦予對以EPSPS作為靶標的除草劑的耐受性）的DNA序列中，將特別提及編碼球形節(jié)桿菌（Arthrobacter globiformis）的EPSPS GRG23，以及突變體GRG23ACE1、GRG23ACE2或GRG23ACE3（尤其是如記載于WO2008/100353中的GRG23的突變體或變體，例如WO2008/100353中的SEQ ID No.29的GRG23(ace3)R173K）的基因。
在編碼EPSPS（以及更特別是編碼上述基因）的DNA序列的情況下，編碼這些酶的序列有利地位于編碼轉(zhuǎn)運肽的序列之后，所述轉(zhuǎn)運肽特別是記載于美國專利5,510,471或5,633,448中的“經(jīng)優(yōu)化的轉(zhuǎn)運肽”。
在WO 2007/024782中，公開了耐受草甘膦和至少一種ALS（乙酰乳酸合酶）抑制劑的植物。更具體而言，公開了包含編碼GAT（草甘膦-N-乙酰轉(zhuǎn)移酶）多肽和賦予對ALS抑制劑抗性的多肽的基因的植物。
在US 6855533中，公開了包含突變擬南芥屬ALS/AHAS基因的轉(zhuǎn)基因煙草植物。
在US 6,153,401中，公開了包含編碼2,4-D-單加氧酶（其通過代謝作用賦予對2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的耐受性）的基因的植物。
在US 2008/0119361和US 2008/0120739中，公開了包含編碼麥草畏單加氧酶（其通過代謝作用賦予麥草畏(3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸)的耐受性）的基因的植物。
在WO2011/028833和WO2011/028832中，公開了包含編碼經(jīng)誘變處理或重組的乙酰輔酶A羧化酶（ACCase）的基因的植物，所述酶賦予對至少一種選自以下的除草劑的耐受性：禾草滅（alloxydim）、丁苯環(huán)酮（butroxydim）、烯草酮（clethodim）、環(huán)己烯草酮（cloproxydim）、噻草酮（cycloxydim）、烯禾啶（sethoxydim）、得殺草（tepraloxydim）、三甲苯草酮（tralkoxydim）、炔禾靈（chlorazifop）、炔草酸（clodinafop）、氯丁草（clofop）、禾草靈（diclofop）、噁唑禾草靈（fenoxaprop）、精噁唑禾草靈（fenoxaprop-P）、噻唑禾草靈（fenthiaprop）、吡氟禾草靈（fluazifop）、精吡氟禾草靈、氟吡禾靈（haloxyfop）、精氟吡禾靈、異噁草醚（isoxapyrifop）、惡草酸（propaquizafop）、喹禾靈（quizalofop）、精喹禾靈、三氟丙酸（trifop）和唑啉草酯（pinoxaden）或這些除草劑任何的農(nóng)藝學(xué)上可接受的鹽或酯。
所有上述除草劑耐受性狀可與植物中通過包含一種或多種嵌合基因而表現(xiàn)出關(guān)于如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的HPPD耐受性的那些性狀相結(jié)合，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在編碼關(guān)于對昆蟲的耐受性的特性的蛋白質(zhì)的DNA序列中，將特別提到廣泛記載于文獻中且為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的Bt蛋白。還將提到從細菌（如發(fā)光桿菌屬）提取的蛋白質(zhì)（WO 97/17432和WO 98/08932）。
在編碼賦予新穎的耐受昆蟲特性的目的蛋白質(zhì)的此類DNA序列中，將特別提到廣泛記載于文獻中且為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的Bt Cry或VIP蛋白。所述蛋白質(zhì)包括：衍生自Cry1F蛋白或衍生自源于Cry1F蛋白的雜合蛋白（例如，記載于US 6,326,169、US 6,281,016、US 6,218,188中的雜合Cry1A-Cry1F蛋白或其毒性片段)，Cry1A-型的蛋白質(zhì)或其毒性片段，優(yōu)選Cry1Ac蛋白或源于Cry1Ac蛋白的雜合蛋白（例如，記載于US 5,880,275中的雜合體Cry1Ab-Cry1Ac蛋白）或記載于EP451878中的Cry1Ab或Bt2蛋白或其殺昆蟲片段，如記載于WO02/057664中的Cry2Ae、Cry2Af或Cry2Ag蛋白或其毒性片段，記載于WO 2007/140256中的Cry1A.105蛋白(（SEQ ID No.7)）或其毒性片段，NCBI登錄號ABG20428的VIP3Aa19蛋白，NCBI登錄號ABG20429的VIP3Aa20蛋白(（SEQ ID No.2in WO 2007/142840中的SEQ ID No.2)），COT202或COT203棉花事件中產(chǎn)生的VIP3A蛋白(（分別見WO 2005/054479和WO 2005/054480)），如記載于WO01/47952中的Cry蛋白，記載于Estruch等人(1996),Proc Natl Acad Sci U S A.28;93(11):5389-94和US 6,291,156的VIP3Aa蛋白或其毒性片段，來自致病桿菌屬(（Xenorhabdus)）(（如記載于WO98/50427)）、沙雷氏菌屬（Serratia）（(尤其來自嗜蟲沙雷氏菌（S.entomophila））或發(fā)光桿菌屬（Photorhabdus）的物種的菌株的殺昆蟲蛋白，例如來自發(fā)光桿菌屬的Tc-蛋白，如WO98/08932中所述（例如，Waterfield等人，2001,Appl Environ Microbiol.67(11):5017-24；Ffrench-Constant and Bowen,2000,Cell Mol Life Sci.；57(5):828-33）。本文還包括在某些（1-10個，優(yōu)選1-5個）氨基酸上與上述序列（特別是其毒性片段的序列）中的任何不同的這些蛋白質(zhì)中任一種的任何變體或突變體，或者與轉(zhuǎn)運肽（例如質(zhì)體轉(zhuǎn)運肽）或另一種蛋白質(zhì)或肽融合的這些蛋白質(zhì)中任一種的任何變體或突變體。
本發(fā)明還涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含嵌合基因（或表達盒）的轉(zhuǎn)基因植物中的用途，所述嵌合基因包含編碼序列以及位于5'和/或3'位置（至少位于5'位置）的異源調(diào)控元件，所述異源調(diào)控元件能在宿主生物（特別是植物細胞或植物）中與含有至少一種核酸序列的編碼序列一起發(fā)揮功能，所述核酸序列編碼源于以下生物的HPPD(I)：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在另一特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含如前文所述的嵌合基因的轉(zhuǎn)基因植物中的用途，其中所述嵌合基因在5’位包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的核酸序列(I)：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），編碼植物轉(zhuǎn)運肽的核酸序列，同時該序列排列在啟動子區(qū)和編碼羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的核酸序列之間，所述編碼HPPD的核酸序列(I)來源于以下生物組：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），以便允許轉(zhuǎn)運肽/HPPD融合蛋白的表達。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含一種或多種嵌合基因的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述嵌合基因(I)源于以下生物：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），或涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在土壤（將在其中種植或播種此類植物、植物部位或種子）上的用途，所述HPPD抑制劑單獨使用或與一種或多種作用方式不同于HPPD抑制劑的其他已知除草劑組合使用。
在另一個特別的實施方案中，如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽除草劑可以與HPPD抑制劑除草劑組合以混合物同時或依序施用，所述HPPD抑制劑除草劑選自：三酮類（稱為三酮HPPD抑制劑）（例如環(huán)磺酮、磺草酮、甲基磺草酮、氟吡草酮、特呋三酮，特別是環(huán)磺酮）、二酮類（例如二酮腈）、異噁唑類（例如異噁氟草）或吡唑啉鹽（pyrazolinate）類（稱為吡唑啉鹽HPPD抑制劑）（例如磺酰草吡唑、吡唑特、苯吡唑草酮、吡草酮）構(gòu)成的組，甚至更特別地，本發(fā)明涉及環(huán)磺酮、甲基磺草酮、二酮腈、氟吡草酮、特呋三酮、吡草酮、磺酰草吡唑、吡唑特和磺草酮對包含一種或多種嵌合基因的此類HPPD抑制劑耐受性植物、植物部分或植物種子的施用，嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
作為在植物細胞和植物中起啟動子作用的調(diào)控序列，可使用天然表達于植物中的基因的任意啟動子序列，特別是尤其表達于植物葉中的啟動子，例如細菌、病毒或植物來源的“組成型”啟動子，或者“光依賴性”啟動子，例如植物核酮糖-二羧化酶/加氧酶（RuBisCO）小亞基基因的啟動子，或者任意合適的可使用的可表達的已知啟動子。在植物來源的啟動子中，將提到如記載于EP 0 507 698A1中的組蛋白啟動子、稻肌動蛋白啟動子（US5,641,876）或植物泛素啟動子（US5,510,474）。在植物病毒基因的啟動子中，將提到花椰菜花葉病毒（CaMV19S或35S，Sanders等人(1987)，Nucleic Acids Res.15(4)：1543-58）、圓環(huán)病毒（AU689311）或木薯葉脈花葉病毒（CsVMV，US7,053,205）的啟動子。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含可用于表達一種或多種嵌合基因的特異于植物的特定區(qū)域或組織的啟動子序列的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），例如特異于種子的啟動子（Datla,R.等人,1997,Biotechnology Ann.Rev.3,269-296）、尤其是油菜籽蛋白（napin）啟動子（EP 255 378A1）、菜豆蛋白啟動子、麥谷蛋白啟動子、半日花素啟動子（WO 92/17580）、白蛋白啟動子（WO 98/45460）、油質(zhì)蛋白啟動子（WO 98/45461）、SAT1啟動子或SAT3啟動子（PCT/US98/06978）。
還可使用誘導(dǎo)型啟動子，其有利地選自苯丙氨酸氨裂解酶（PAL）、HMG-CoA還原酶（HMG）、幾丁質(zhì)酶、葡聚糖酶、蛋白酶抑制劑（PI）、PR1家族基因、胭脂堿合酶（nos）和vspB啟動子（US 5 670 349，表3）、HMG2啟動子（US 5 670 349）、蘋果β-半乳糖苷酶（ABG1）啟動子和蘋果氨基環(huán)丙烷羧酸合酶（ACC合酶）啟動子（WO 98/45445）。
編碼羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的基因(I)源于以下生物的：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）也可與啟動子組合使用其它調(diào)控序列，所述調(diào)控序列位于啟動子和編碼序列之間，例如轉(zhuǎn)錄活化因子（“增強子”），例如記載于申請WO 87/07644中的煙草花葉病毒（TMV）的或由Carrington&Freed1990，J.Virol.64：1590-1597描述的煙草蝕刻病毒（TEV）的轉(zhuǎn)錄活化因子，例如，或內(nèi)含子，例如玉米的adh1內(nèi)含子或稻肌動蛋白的內(nèi)含子1，以便實現(xiàn)對上述定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的充分耐受。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在包含一種或多種嵌合基因的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）以及包含處于相同或不同可在植物中表達的啟動子控制下的CYP450玉米單加氧酶（nsf1基因）基因，以便賦予對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的耐受性。
作為調(diào)控終止子或聚腺苷酸化序列，可使用細菌來源（例如根癌農(nóng)桿菌（Agrobacterium tumefaciens）的nos終止子）、病毒來源（例如CaMV35S終止子）或植物來源（例如，如記載于公開的專利申請EP 0 633 317 A1中的組蛋白終止子）的任意相應(yīng)序列。
應(yīng)理解，為通過各嵌合基因的適應(yīng)宿主的密碼子使用獲得優(yōu)化表達，可將非植物基因用于各植物生物（其中將插入這類嵌合基因）的密碼子使用。因此，在所有記載的表達非植物源的HPPD的嵌合基因中，可將編碼各HPPD的DNA序列替換為編碼相同氨基酸序列的經(jīng)修改的DNA序列，即，可將SEQ ID No.3替換為SEQ ID No.5、可將SEQ ID No.6替換為SEQ ID No.18、可將SEQ ID No.8替換為SEQ ID No.19、可將SEQ ID No.10替換為SEQ ID No.20、可將SEQ ID No.12替換為SEQ ID No.21、可將SEQ ID No.14替換為SEQ ID No.22、可將SEQ ID No.16替換為SEQ ID No.23。
如本文所用，術(shù)語“基因”是指側(cè)翼有5’和/或3’調(diào)控序列的DNA編碼區(qū)，所述5’和/或3’調(diào)控序列允許待轉(zhuǎn)錄的RNA被翻譯為蛋白質(zhì)，其通常包含至少一個啟動子區(qū)域。當提到編碼HPPD的DNA時，“嵌合基因”是指編碼HPPD的DNA序列，其具有不同于天然存在的細菌5’和/或3’調(diào)控序列（其驅(qū)動HPPD蛋白在其天然宿主細胞中表達）的5’和/或3’調(diào)控序列（也稱為“異源啟動子”或“異源調(diào)控序列”）。
如本文所用，術(shù)語“包含序列X的DNA/蛋白質(zhì)”和“具有包含序列X的序列的DNA/蛋白質(zhì)”是指下述DNA或蛋白質(zhì)：它們的核苷酸或氨基酸序列中至少包括或含有序列X，這使得在5’（或N-末端）和/或3’（或C-末端）末端可包括其它核苷酸或氨基酸序列，例如，N-末端轉(zhuǎn)運或信號肽。如本文所用，術(shù)語“包含”為開放式語言，意指“包括”，其表示除了具體記載的那些之外還可存在其它要素。如本文所用，術(shù)語“由......組成”為封閉式語言，即，僅存在具體記載的那些要素。如本文所用，術(shù)語“編碼包含序列X的蛋白質(zhì)的DNA”是指包含編碼序列的DNA，所述編碼序列在轉(zhuǎn)錄和翻譯后產(chǎn)生至少含有氨基酸序列X的蛋白質(zhì)。編碼蛋白質(zhì)的DNA不需要是天然存在的DNA，其可以是半合成的、完全合成的或人工DNA，并且可包括內(nèi)含子和5’和/或3’側(cè)翼區(qū)域。如本文所用，術(shù)語“核苷酸序列”是指DNA或RNA分子的序列，其可以是單鏈或雙鏈形式。
本發(fā)明的HPPD蛋白可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法裝配有信號肽，如參見公開的PCT專利申請WO 96/10083，或它們可被另一種肽替代，所述另一種肽例如是使蛋白質(zhì)被運送至葉綠體的葉綠體轉(zhuǎn)運肽（如，Van Den Broeck et al.,1985,Nature 313,358，或美國專利5,510,471的經(jīng)修飾的葉綠體轉(zhuǎn)運肽），被分泌性信號肽或?qū)⒌鞍踪|(zhì)靶向至其它質(zhì)體、線粒體、ER或另一細胞器的肽替代，或者其可被甲硫氨酸氨基酸或被甲硫氨酸-丙氨酸二肽替代。在天然被靶向或分泌的蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了用于靶向至細胞內(nèi)細胞器或用于分泌至植物細胞外或分泌至細胞壁的信號序列，優(yōu)選由et al.(1989,Mol.Gen.Genet.217,155-161)、and Weil(1991,Mol.Gen.Genet.225,297-304)、Neuhaus&Rogers(1998,Plant Mol.Biol.38,127-144)、Bih et al.(1999,J.Biol.Chem.274,22884-22894)、Morris et al.(1999,Biochem.Biophys.Res.Commun.255,328-333)、Hesse et al.(1989,EMBO J.8 2453-2461)、Tavladoraki et al.(1998,FEBS Lett.426,62-66)、Terashima et al.(1999,Appl.Microbiol.Biotechnol.52,516-523)、Park et al.(1997,J.Biol.Chem.272,6876-6881)、Shcherban et al.(1995,Proc.Natl.Acad.Sci USA 92,9245-9249)記載的那些，通過引用將其全部納入本文，特別是來自玉米、棉花、大豆或稻的被靶向或分泌的蛋白質(zhì)的信號肽序列。編碼此類植物信號肽的DNA序列可被插入編碼在植物中表達HPPD蛋白的嵌合基因中。
本發(fā)明還包含氨基酸序列與以下的HPPD氨基酸序列相似的變體HPPD酶：SEQ ID No.2、SEQ ID No.ID No.4、SEQ ID No.7、SEQ ID No.9、SEQ ID No.11、SEQ ID No.13、SEQ ID No.15和SEQ ID No.17，其中在上述各HPPD氨基酸序列中一個或多個氨基酸被插入、缺失或置換。在本申請的上下文中，氨基酸序列的變體是指那些與本文記載的氨基酸序列具有相似催化活性的多肽、酶或蛋白質(zhì)，盡管對其進行任意的氨基酸置換、添加或缺失。優(yōu)選地，變體氨基酸序列分別與以下的氨基酸序列具有至少約80%、或85或90%、95%、97%、98%或99%的序列同一性：SEQ ID No.2、SEQ ID No.4、SEQ ID No.7、SEQ ID No.9、SEQ ID No.11、SEQ ID No.13、SEQ ID No.15和SEQ ID No.17。還優(yōu)選，包含所述變體氨基酸序列的多肽具有HPPD酶活性。測定HPPD酶活性的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的并包括如廣泛記載于WO 2009/144079或WO 2002/046387，或PCT/EP2010/070561中的檢測。
置換包括這樣的氨基酸改變：其中氨基酸被不同的天然存在的或不常見的氨基酸殘基替代。此類置換可被分類為“保守的”，其中，在本發(fā)明的HPPD蛋白中含有的氨基酸殘基被具有相似特征的另一天然存在的氨基酸替代，例如或本發(fā)明包含的置換還可以是“非保守的”，其中在本發(fā)明的HPPD蛋白中存在的氨基酸殘基被具有不同性質(zhì)的氨基酸置換，例如，來自不同組的天然存在的氨基酸（例如，用丙氨酸置換帶電荷的或疏水的氨基酸）。氨基酸置換通常是單殘基的，但是也可以是多個殘基的，成簇的（clustered）或分散的。氨基酸缺失通常是約1-10個氨基酸殘基數(shù)量級的，而插入可以是任何長度的。缺失和插入可以對N-末端、C-末端進行或者是內(nèi)部缺失或插入。通常，在氨基酸序列內(nèi)的插入將比氨基或羧基末端融合更小，其在1至4個氨基酸殘基的數(shù)量級上。如本文所用，“相似氨基酸”是指具有相似氨基酸側(cè)鏈的氨基酸，即具有極性、非極性或幾乎為中性的側(cè)鏈的氨基酸。如本文所用，“非相似氨基酸”是指具有不同氨基酸側(cè)鏈的氨基酸，例如，具有極性側(cè)鏈的氨基酸與具有非極性側(cè)鏈的氨基酸是不相似的。極性側(cè)鏈通常傾向于存在于蛋白質(zhì)的表面，它們在那里可以和細胞中的水性環(huán)境相互作用（“親水性”氨基酸）。另一方面，“非極性”氨基酸傾向于駐留于蛋白質(zhì)的中心，它們在那里可以與相似的非極性鄰居（“疏水性”氨基酸）相互作用。具有極性側(cè)鏈的氨基酸的實例為精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、絲氨酸和蘇氨酸（除了疏水性的半胱氨酸之外，全部都是親水性的）。具有非極性側(cè)鏈的氨基酸的實例為丙氨酸、甘氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸和色氨酸（除了中性的甘氨酸之外，全部都是疏水性的）。
除非在實施例中另有指出，用于制備和操作重組DNA的所有步驟均通過記載于以下的標準步驟進行：Sambrook et al.,Molecular Cloning-A Laboratory Manual,第二版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,NY(1989)，和Ausubel et al.(1994)Current Protocols in Molecular Biology,Current Protocols,USA,第1和2卷。用于植物分子生物學(xué)工作的標準材料和方法由R.R.D.Croy記載于Plant Molecular Biology Labfax(1993)（由BIOS Scientific Publications Ltd(UK)和Blackwell Scientific Publications(UK)聯(lián)合出版）中。用于PCR技術(shù)的步驟可在由M.A.Innis,D.H.Gelfand,J.J.Sninsky和T.J.White編輯的“PCR protocols:a guide to methods and applications”(Academic Press,Inc.,1990)中找到。
術(shù)語“耐受性”、“耐受”或“較不敏感”可互換使用，它們表示在不同濃度的各種HPPD抑制劑除草劑存在時，根據(jù)用包含編碼各HPPD蛋白的基因的核酸轉(zhuǎn)化的菌株或植物的可見指示表型（visible indicator phenotype）篩選的HPPD內(nèi)在耐受性的相對水平。與這些指示表型（棕色的形成、生長抑制、褪色、除草劑效果等）相關(guān)的劑量響應(yīng)和劑量響應(yīng)的相對改變通常用例如在除草劑的不同濃度范圍內(nèi)基于植物損害、分生組織褪色癥狀等以正常方式的GR50（生長減少50%的濃度）值或MIC（最小抑制濃度）值來表示，其中值的增加對應(yīng)于表達的HPPD的內(nèi)在耐受性增加。這些數(shù)據(jù)可以以例如源于劑量/響應(yīng)曲線的GR50值來表示，所述曲線具有繪制于x軸上的“劑量”和繪制于y軸上的“滅殺百分比（percentage kill）”、“除草劑效果”、“出苗綠色植物的數(shù)目”等，其中增加的GR50值對應(yīng)于表達的HPPD的內(nèi)在耐受性水平增加。除草劑可合適地在出苗前或出苗后應(yīng)用。
同樣地，通過試驗植物（如煙草，或作物植物如大豆或棉花）的轉(zhuǎn)基因、再生、育種和噴霧試驗并根據(jù)這些結(jié)果來篩選耐受水平，與不含任何外源編碼HPPD蛋白的基因的植物相比，這類植物對HPPD抑制劑除草劑（像如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺）的耐受性至少增加2-4倍，“宿主生物”或“宿主”理解為為了產(chǎn)生HPPD，可引入本發(fā)明的核酸或嵌合基因的任何單細胞或多細胞異源生物。這些生物特別是細菌，例如大腸桿菌（E.coli），酵母，特別是酵母屬（Saccharomyces）或克魯維酵母屬（Kluyveromyces），畢赤酵母屬（Pichia），真菌，特別是曲霉屬（Aspergillus），桿狀病毒（baculovirus），或者優(yōu)選植物細胞和植物。
根據(jù)本發(fā)明，“植物細胞”理解為源于植物或在植物中發(fā)現(xiàn)的任何細胞，其能形成未分化組織（例如愈傷組織）、分化組織（例如胚胎）、植物部位、植物或種子或者是它們的一部分。這包括原生質(zhì)體和花粉、培養(yǎng)的植物細胞或體外生長的原生質(zhì)體，以及能再生為完整植物的植物細胞。
根據(jù)本發(fā)明，“植物”理解為能光合作用的任何分化的多細胞生物，特別是單子葉或雙子葉生物，更特別是為或不是為動物或人類營養(yǎng)準備的栽培植物，例如玉米或谷物（corn），小麥、蕓苔屬物種（Brassica spp.）的植物，例如歐洲油菜（Brassica napus）或芥菜（Brassica juncea），大豆物種，稻，甘蔗，甜菜，煙草，棉花、蔬菜植物（例如黃瓜、韭、胡蘿卜、西紅柿、生菜（lettuce）、胡椒、甜瓜、西瓜等）。如本文所用，轉(zhuǎn)基因植物是指包含一種或多種穩(wěn)定插入進其基因組的外來或異源基因的植物。
為了實現(xiàn)對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的耐受，在植物中天然表達的基因的任何啟動子序列，或在植物中天然表達的基因的啟動子元件的任何雜合體或組合（包括農(nóng)桿菌屬或植物病毒啟動子），或適用于在植物中調(diào)控除草劑耐受性基因的轉(zhuǎn)錄的任何啟動子，可被用作本發(fā)明的植物中的啟動子序列（本文中稱為“可在植物中表達的啟動子”）。此類合適的可在植物中表達的啟動子的實例記載于上文中。在本發(fā)明的一個實施方案中，此類可在植物中表達的啟動子可操作地連接至這樣的DNA序列：(I)其編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或(II)其包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或(III)其包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或(IV)其包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或(V)其包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或(VI)其包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
根據(jù)本發(fā)明，還可與啟動子調(diào)控序列結(jié)合使用位于啟動子和編碼序列之間的其它調(diào)控序列，例如內(nèi)含子序列或轉(zhuǎn)錄激活因子（增強子），以實現(xiàn)對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的耐受性。此類合適的調(diào)控序列的實例記載于上文中。
可將細菌或病毒來源（例如根癌農(nóng)桿菌的nos終止子）或植物來源（例如記載于申請EP 0 633 317A1中的組蛋白終止子）的任何相應(yīng)的序列用作轉(zhuǎn)錄終止（和聚腺苷酸化）調(diào)控序列。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在含有編碼轉(zhuǎn)運肽的核酸序列的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述核酸序列位于編碼外源嵌合基因的核酸序列的5’端（上游），所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），且含有的這種轉(zhuǎn)運肽序列設(shè)置在啟動子區(qū)域和編碼外源HPPD的序列之間，以允許轉(zhuǎn)運肽-HPPD融合蛋白的表達。該轉(zhuǎn)運肽可引導(dǎo)HPPD進入質(zhì)體，更特別地為進入葉綠體，當HPPD進入質(zhì)體時融合蛋白在轉(zhuǎn)運肽和HPPD蛋白之間被切割。所述轉(zhuǎn)運肽可以是單條肽，例如EPSPS轉(zhuǎn)運肽（記載于美國專利5,188,642中）或植物核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶小亞基（RuBisCO ssu）的轉(zhuǎn)運肽，如果合適的話，包括成熟RuBisCO ssu的N-末端部分的一些氨基酸（EP 189707A1），或者可以是若干轉(zhuǎn)運肽的融合體，例如下述轉(zhuǎn)運肽：其包含與具有質(zhì)體定位的成熟蛋白的N-末端序列的一部分融合的第一植物轉(zhuǎn)運肽，該部分又進而融合至如記載于專利EP 508 909A1中的第二植物轉(zhuǎn)運肽，并且，更特別地為下述經(jīng)優(yōu)化的轉(zhuǎn)運肽：其包含向日葵RuBisCO ssu的轉(zhuǎn)運肽，該轉(zhuǎn)運肽融合至玉米RuBisCO ssu的N-末端的22個氨基酸，進而融合至玉米RuBisCO ssu的轉(zhuǎn)運肽，所述轉(zhuǎn)運肽及其編碼序列如專利EP 508 909 A1所述。
本發(fā)明還涉及轉(zhuǎn)運肽HPPD融合蛋白和編碼此類融合蛋白的核酸或可在植物中表達的嵌合基因，其中該融合蛋白的兩種元件如上文所定義。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在通過克隆、使用表達載體轉(zhuǎn)化獲得的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述表達載體含有至少一種嵌合基因，所述嵌合基因編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）(I)：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。除了上述嵌合基因，該載體可含有復(fù)制起點。該載體可以是質(zhì)粒或質(zhì)粒的部分、粘?；蚴删w或病毒（已通過引入本發(fā)明的嵌合基因而對其進行轉(zhuǎn)化）。轉(zhuǎn)化載體是技術(shù)人員所公知的，并且廣泛記載于文獻中。可以使用的轉(zhuǎn)化載體（特別是用于轉(zhuǎn)化植物細胞或植物的）可以是病毒，其可用于轉(zhuǎn)化植物細胞或植物并且額外含有其自身復(fù)制和表達元件。用于轉(zhuǎn)化植物細胞或植物的載體優(yōu)選為質(zhì)粒，例如卸甲農(nóng)桿菌屬（Agrobacterium）Ti質(zhì)粒。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在含有嵌合基因的植物、植物部位或植物種子上的用途，所述嵌合基因包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的序列(I)：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），本發(fā)明還涉及植物或種子在田間以種植作物和收獲植物產(chǎn)物（如大豆物種、稻、小麥、大麥或玉米粒或棉鈴）的用途，其中在一個實施方案中，所述用途涉及將如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽施用于所述植物以防治雜草。
在另一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在植物、植物部位或植物種子上的用途，所述植物、植物部位或植物種子的特征在于，其含有一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），此外還含有包含上述可在植物中表達的啟動子的嵌合基因，所述嵌合基因可操作地連接至編碼PDH（預(yù)苯酸脫氫酶）酶的核酸序列（US 2005/0257283），以賦予對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的耐受性。包含此類兩種轉(zhuǎn)基因的植物可通過以下方法獲得：用一種轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)化植物，然后再用第二轉(zhuǎn)基因重新轉(zhuǎn)化該轉(zhuǎn)基因植物，或者用兩種轉(zhuǎn)基因（在相同或兩種不同的轉(zhuǎn)化DNA或載體中）同時轉(zhuǎn)化植物，或者將包含第一轉(zhuǎn)基因的植物與包含第二轉(zhuǎn)基因的植物雜交，這是本領(lǐng)域所熟知的。
一種轉(zhuǎn)化方法，以通過包含一種或多種嵌合基因而獲得對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽具有耐受性的植物、植物部位或種子，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述轉(zhuǎn)化方法包括用連接有DNA或含有DNA的固體或液體顆粒轟擊細胞、原生質(zhì)體或組織。另一種轉(zhuǎn)化方法包括使用嵌合基因作為轉(zhuǎn)入植物的手段，所述嵌合基因被插入至根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)?；蛎r(nóng)桿菌（Agrobacterium rhizogenes）Ri質(zhì)粒。還可使用其它方法，例如顯微注射或電穿孔或使用PEG的直接基因轉(zhuǎn)移。技術(shù)人員可選擇用于轉(zhuǎn)化選擇的宿主生物（特別是植物細胞或植物）的任何合適的方法。例如，用于大豆轉(zhuǎn)化的技術(shù)已被廣泛記載于EP 1186666A1（通過引用將其納入本文）中公開的實施例1至3中。對于稻，可進行農(nóng)桿菌屬介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化（Hiei et al.，1994Plant J 6：271-282和Hiei et al.，1997Plant MolBiol.35：205-21，通過引用將其納入本文）、電穿孔（US 5,641,664和US5,679,558，通過引用將其納入本文）或轟擊（Christou et al.，1991，Biotechnology 9：957，通過引用將其納入本文）。用于轉(zhuǎn)化單子葉植物（特別是稻）的合適的技術(shù)記載于WO 92/09696（通過引用將其納入本文）中。對于棉花，記載了農(nóng)桿菌屬介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化（Gould J.H.和Magallanes-Cedeno M.，1998Plant Molecular Biology reporter，16：1-10和Zapata C.，1999，Theoretical Applied Genetics，98(2)：1432-2242，通過引用將其納入本文）、聚凝胺和/或處理介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化（Sawahel W.A.，2001，-Plant Molecular Biology reporter，19：377a-377f，通過引用將其納入本文）。
或者，如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽可用于包含一種或多種嵌合基因的植物、植物部位或植物種子，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），可使用質(zhì)體（例如葉綠體基因組）的轉(zhuǎn)化在質(zhì)體（例如葉綠體）中直接表達HPPD。合適的方法包括通過用包覆有DNA的固體粒子或包含DNA的液體粒子轟擊植物細胞或組織，以及通過同源重組整合引入的基因。合適的載體和選擇系統(tǒng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的。可用于向煙草植物的葉綠體基因組的此類整合的方式和方法的實例示于WO 06/108830中，在此通過引用將其內(nèi)容納入。
本發(fā)明還涉及一種用于獲得對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽具有耐受性的植物的方法，其特征在于，使用一種或多種嵌合基因?qū)λ鲋参镞M行轉(zhuǎn)化，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
因此，本發(fā)明還涉及通過包含一種或多種嵌合基因而獲得對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽具有耐受性的植物的方法，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述嵌合基因包含能在宿主生物中發(fā)揮功能的編碼序列以及位于5’和/或任選地3’位的異源調(diào)控元件，其特征在于，所述編碼序列包含定義了編碼上文所述的本發(fā)明的HPPD的基因的至少一種核酸序列以對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽具有足夠高水平的耐受性。
在本發(fā)明的一個實施方案中，上述方法中的HPPD抑制劑為單獨的如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽或其與一種或多種選自以下的HPPD抑制劑除草劑的組合物：三酮或吡唑啉鹽除草劑，優(yōu)選環(huán)磺酮、甲基磺草酮、雙環(huán)吡喃酮、特呋三酮、磺酰草吡唑、吡唑特、二酮腈、吡草酮或磺草酮，特別是環(huán)磺酮。
本發(fā)明還涉及在待栽種植物或待播種種子的田間、或在植物作物中選擇性除去雜草或預(yù)防雜草發(fā)芽的方法（通過向該田間或植物作物施用如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽），所述方法的特征在于將如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽在播種作物之前（下文中稱為栽種前施用）、作物出苗之前（下文中稱為出苗前施用）或作物出苗之后（下文中稱為出苗后施用）施用于已使用一種或多種嵌合基因轉(zhuǎn)化的植物，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
本發(fā)明還涉及一種在含有上述本發(fā)明的轉(zhuǎn)化的種子的區(qū)域或田間進行防治的方法，所述方法包括向所述田間的區(qū)域施用一定劑量的如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽，所述劑量對于所述雜草來說是毒性的，但對包含一種或多種嵌合基因的種子或植物沒有顯著的影響，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
本發(fā)明還涉及用于栽培由一種或多種嵌合基因轉(zhuǎn)化的植物的方法，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。所述方法包括在適于栽種所述植物的田間區(qū)域栽種包含上述嵌合基因的種子，以及如果存在雜草的話，向所述田間的所述區(qū)域施用一定劑量的一種或多種如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽，所述劑量對雜草而言為毒性的，但不顯著影響所述經(jīng)轉(zhuǎn)化的種子或所述經(jīng)轉(zhuǎn)化的植物，然后當栽培的植物或植物部位達到想要的成熟階段時采收它們，并且如果合適的話，從采收的植物分離種子。
在上述方法中，可根據(jù)本發(fā)明，在播種作物之前、作物出苗之前或作物出苗之后施用如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽。
在本發(fā)明的含義內(nèi)，“除草劑”理解為是自身具有除草劑活性的物質(zhì)，或者為與改變其功效的添加劑（例如，增加其活性的試劑（增效劑）或限制其活性的試劑（安全劑））結(jié)合的物質(zhì)。當然，應(yīng)當理解，就它們在實踐中的應(yīng)用而言，以本身已知的方式將上述除草劑與常規(guī)用于農(nóng)業(yè)化學(xué)中的制劑佐劑結(jié)合。
因此，可獲得轉(zhuǎn)基因植物，其除了具有一種或多種嵌合基因之外，還具有由于同源（＝天然）基因或基因序列的過表達、阻遏或抑制或異源（＝外來）基因或基因序列的表達而產(chǎn)生的經(jīng)修飾的性質(zhì)，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
在含有一種或多種嵌合基因的植物、植物細胞或種子上，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮伲瑑?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），優(yōu)選在還對生長調(diào)控劑（例如2,4-D或麥草畏）或?qū)σ种浦匾参锩福ɡ缫阴Ｈ樗岷铣擅福ˋLS）、EPSP合成酶或谷氨酰胺合成酶（GS）、乙酰輔酶A羧化酶（ACCase））的除草劑或?qū)碜曰酋ｋ孱?、咪唑啉酮類、草甘膦、草銨膦、ACCase抑制劑和類似活性物質(zhì)的除草劑有抗性的轉(zhuǎn)基因作物中將一種或多種如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽與一種或多種其他HPPD抑制劑除草劑結(jié)合使用，所述HPPD抑制劑除草劑屬于三酮類（例如環(huán)磺酮、磺草酮和甲基磺草酮）或吡唑啉鹽類（例如磺酰草吡唑和苯吡唑草酮），特別地選自環(huán)磺酮、磺草酮、苯吡唑草酮、雙環(huán)吡喃酮、特呋三酮和甲基磺草酮，更特別地為環(huán)磺酮。
因此，本發(fā)明還涉及施用至含有一種或多種嵌合基因的HPPD耐受性植物的除草劑用于防治有害植物（即，雜草）的用途，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述用途還延伸至轉(zhuǎn)基因作物植物，其除了對如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的抗性以外還包含第二種或更多種除草劑抗性。
取決于主要的生物和/或物理化學(xué)參數(shù)，如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽可以多種方式進行配制?？赡艿闹苿┑膶嵗秊椋嚎蓾裥苑蹌╓P）、水溶性粉劑（SP）、水溶性濃縮劑、乳油（EC）、乳劑（EW）例如水包油乳劑和油包水乳劑、可噴灑性溶液劑、懸浮濃縮劑（SC）、油基分散劑或水基分散劑、油混溶性溶液劑、膠囊懸浮劑（CS）、粉劑（DP）、拌種產(chǎn)品、用于撒播和土壤施用的顆粒劑、微顆粒形式的顆粒劑（GR）、噴灑顆粒劑、包衣顆粒劑和吸附顆粒劑、水分散性顆粒劑（WG）、水溶性顆粒劑（SG）、ULV制劑、微膠囊劑和蠟劑。
這些單獨的制劑類型原則上都是已知的，并記載于文獻中，例如下列文獻：Winnacker_Küchler,"Chemische Technologie"[Chemical technology],第7卷,C.Hanser Verlag Munich,第4版，1986；Wade van Valkenburg,"Pesticide Formulations",Marcel Dekker,N.Y.,1973；K.Martens,"Spray Drying"Handbook,第4版，1979,G.Goodwin Ltd.London。
所需的制劑助劑，例如惰性物質(zhì)、表面活性劑、溶劑和其他添加劑同樣也是已知的，并記載于文獻中，例如下列文獻：Watkins,"Handbook of Insecticide Dust Diluents and Carriers",第2版，Darland Books,Caldwell N.J.,H.v.Olphen,"Introduction to Clay Colloid Chemistry"；第2版，J.Wiley&Sons,N.Y.；C.Marsden,"Solvents Guide"；第2版，Interscience,N.Y.1963；McCutcheon's"Detergents and Emulsifiers Annual",MC Publ.Corp.,Ridgewood N.J.；Sisley and Wood,"Encyclopedia of Surface Active Agents",Chem.Publ.Co.Inc.,N.Y.1964；[Interface-active ethylene oxide adducts],Wiss.Verlagsgesell.,Stuttgart 1976；Winnacker_Küchler,"Chemische Technologie"[Chemical technology],第7卷，C.Hanser Verlag Munich,第4版，1986。
基于這些制劑，可以制備與其它農(nóng)藥活性物質(zhì)（例如殺蟲劑、殺螨劑、除草劑和殺真菌劑）以及與安全劑、肥料和/或生長調(diào)節(jié)劑的結(jié)合物，例如以預(yù)混（ready mix）形式或桶混形式。
可濕性粉劑為可均勻分散于水中的制劑，其除了含有活性物質(zhì)外，還含有離子型和/或非離子型表面活性劑（濕潤劑、分散劑），例如聚乙氧基化烷基酚、聚乙氧基化脂肪醇、聚乙氧基化脂肪胺、脂肪醇聚乙二醇醚硫酸鹽、烷烴磺酸鹽、烷基苯磺酸鹽、木素磺酸鈉、2,2’-二萘基甲烷-6,6’-二磺酸鈉、二丁基萘磺酸鈉或油酰基甲基?；撬徕c。為了制備可濕性粉劑，例如在常規(guī)設(shè)備例如錘磨機、鼓風(fēng)磨機和噴氣磨機中精細研磨具有除草活性的物質(zhì)，并同時或隨后與制劑助劑相混合。
乳油通過下述過程制備：將活性物質(zhì)溶于有機溶劑（例如丁醇、環(huán)己酮、二甲基甲酰胺、二甲苯或更高沸點的芳香族化合物或烴類）或有機溶劑混合物中，并加入一種或多種離子型和/或非離子型表面活性劑（乳化劑）?？墒褂玫娜榛瘎┑膶嵗秊椋和榛蓟撬徕}鹽，例如十二烷基苯磺酸鈣，或非離子型乳化劑，例如脂肪酸聚乙二醇酯、烷基芳基聚乙二醇醚、脂肪醇聚乙二醇醚、環(huán)氧丙烷/環(huán)氧乙烷縮合物、烷基聚醚、山梨聚糖酯，例如山梨聚糖脂肪酸酯或聚氧乙烯山梨聚糖酯例如聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯。
粉劑可通過將活性物質(zhì)與細分散的固體物質(zhì)一起研磨而制得，所述固體物質(zhì)例如滑石、天然粘土（例如高嶺土、膨潤土和葉蠟石）或硅藻土。
懸浮濃縮劑可為水基或油基的。它們可以通過例如使用市售的珠磨機濕法研磨而制備，如合適，可以加入上文在例如其他劑型中所述的表面活性劑。
乳劑例如水包油乳劑（EW），可以使用例如攪拌器、膠體磨機和/或靜態(tài)混合器，使用水性有機溶劑以及（如合適）例如在上文其他劑型中所述的表面活性劑而制備。
顆粒劑可以通過將活性物質(zhì)噴灑在能夠吸附的顆粒狀惰性物質(zhì)上、或通過使用粘合劑將活性物質(zhì)濃縮物施用到載體表面而制備，所述載體例如砂、高嶺石或顆粒狀惰性材料，所述粘合劑例如聚乙烯醇、聚丙烯酸鈉或礦物油。合適的活性物質(zhì)也可以以制備肥料顆粒的常規(guī)方式制備成顆?！绻枰梢灾苽錇榕c肥料的混合物。
水分散性顆粒劑通?？梢酝ㄟ^常規(guī)方法制備，所述常規(guī)方法例如噴霧干燥法、流化床制粒法、盤式制粒法、使用高速混合器的混合法以及不使用固體惰性物質(zhì)的擠出法。
為制備盤式顆粒、流化床顆粒、擠出機顆粒和噴霧顆粒，參見例如："Spray_Drying Handbook"第3版，1979,G.Goodwin Ltd.,London；J.E.Browning,"Agglomeration",Chemical and Engineering 1967,第147頁及后文；"Perry's Chemical Engineer's Handbook",第5版，McGraw_Hill,New York 1973,第8-57頁中的方法。
關(guān)于作物保護產(chǎn)品制劑的更多細節(jié)，參見例如G.C.Klingman,"Weed Control as a Science",John Wiley and Sons,Inc.,New York,1961，第81-96頁和J.D.Freyer,S.A.Evans,"Weed Control Handbook"，第5版，Blackwell Scientific Publications,Oxford,1968，第101-103頁。
所述農(nóng)業(yè)化學(xué)制劑通常含有0.1至99重量%、特別地為0.1至95重量%的本發(fā)明的化合物。
在可濕性粉劑中，活性物質(zhì)的濃度例如為約10至90重量%，100重量%的剩余部分由常規(guī)制劑成分組成。在乳油中，活性物質(zhì)的濃度可為約1至90重量%，優(yōu)選地為5至80重量%。粉劑形式的制劑中含有1至30重量%的活性物質(zhì)，優(yōu)選地通常含有5至20重量%的活性物質(zhì)，可噴灑性溶液劑中含有約0.05至80重量%、優(yōu)選地為2至50重量%的活性物質(zhì)。對于水分散性顆粒劑而言，活性物質(zhì)的含量部分地取決于所述活性物質(zhì)以液體形式還是固體形式存在，以及所使用的粒化助劑和填料等。在水分散性顆粒劑中，活性物質(zhì)的含量例如為1至95重量%，優(yōu)選地為10至80重量%。
此外，所述活性物質(zhì)的制劑中——如果合適的話——包含各常用的助劑，例如粘合劑、潤濕劑、分散劑、乳化劑、滲透劑、防腐劑、抗凍劑、溶劑、填料、載體、著色劑、消泡劑、蒸發(fā)抑制劑以及pH值和粘度調(diào)節(jié)劑。
基于這些制劑，也可制備三酮類（例如環(huán)磺酮、磺草酮和甲基磺草酮），或吡唑啉鹽類（如磺酰草吡唑和苯吡唑草酮），特別為選自環(huán)磺酮、磺草酮、苯吡唑草酮、雙環(huán)吡喃酮、特呋三酮和甲基磺草酮，更特別為環(huán)磺酮的HPPD抑制劑除草劑與其他農(nóng)藥活性物質(zhì)（例如殺蟲劑、殺螨劑、除草劑和殺真菌劑）以及與安全劑、肥料和/或生長調(diào)節(jié)劑的結(jié)合物，例如以預(yù)混物或桶混物的形式施用至本發(fā)明的HPPD耐受性植物。
制劑實施例
a)粉劑，其通過將10重量份的式(I)化合物和/或其鹽和90重量份的作為惰性物質(zhì)的滑石混合并將混合物在錘磨機中進行粉碎而獲得。
b)易在水中分散的可濕性粉劑，其通過將25重量份的式(I)化合物和/或其鹽、作為惰性物質(zhì)的64重量份的含高嶺土的石英、作為潤濕劑和分散劑的10重量份的木質(zhì)素磺酸鉀和1重量份的油?；谆；撬徕c混合，并將混合物在銷盤磨機（pinned-disk mill）中進行研磨而獲得。
c)易在水中分散的分散濃縮物，其通過將20重量份的式(I)化合物和/或其鹽與6重量份的烷基酚聚乙二醇醚（Triton X 207）、3重量份的異十三烷醇聚乙二醇醚（8EO）和71重量份的石蠟礦物油（沸程例如約255至277℃以上）混合并在球磨機中研磨混合物至5微米以下的細度而獲得。
d)乳油，其由15重量份的式(I)化合物和/或其鹽，作為溶劑的75重量份的環(huán)己酮和作為乳化劑的10重量份的氧化乙氧基化壬基苯酚而獲得。
e)水分散性顆粒，其通過將以下物質(zhì)混合：
75重量份的式(I)化合物和/或其鹽、
10重量份的木質(zhì)素磺酸鈣、
5重量份的十二烷基硫酸鈉、
3重量份的聚乙烯醇和
7重量份的高嶺土，
將混合物在銷盤磨機中進行研磨，并在流化床上通過噴水（作為成粒液體）使粉末成粒而獲得。
f)水分散性顆粒，其也是在膠體磨機中通過均質(zhì)化和預(yù)粉碎以下物質(zhì)，
25重量份的式(I)化合物和/或其鹽、
5重量份的2,2’-二萘基甲烷-6,6’-二磺酸鈉、
2重量份的油?；谆；撬徕c、
1重量份的聚乙烯醇、
17重量份的碳酸鈣和
50重量份的水混合，
然后將混合物在珠磨機中進行研磨并霧化并在噴霧塔中通過單物質(zhì)噴嘴干燥所得懸浮液而獲得。
本發(fā)明的另一方面為一種或多種如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽與以混合制劑或以桶混形式與其他HPPD抑制劑除草劑結(jié)合，和/或與其他已知活性物質(zhì)結(jié)合用于包含一種或多種嵌合基因的HPPD耐受性植物的用途，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），所述其他HPPD抑制劑除草劑屬于三酮類（例如環(huán)磺酮、磺草酮和甲基磺草酮），或?qū)儆谶吝蜻}類（例如磺酰草吡唑和苯吡唑草酮），特別選自環(huán)磺酮、磺草酮、苯吡唑草酮、雙環(huán)吡喃酮、特呋三酮和甲基磺草酮，更特別為環(huán)磺酮；所述其他已知活性物質(zhì)基于對例如乙酰乳酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶、纖維素合成酶、烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶、谷氨酰胺合成酶、對羥基苯丙酮酸雙加氧酶、八氫番茄紅素脫氫酶、光系統(tǒng)I、光系統(tǒng)II、原卟啉原氧化酶的抑制作用，其記載于例如Weed Research 26(1986)441-445或"The Pesticide Manual",第14版,The British Crop Protection Council and the Royal Soc.of Chemistry,2003和其中所引用的文獻中?？膳c本發(fā)明的化合物結(jié)合的已知除草劑或植物生長調(diào)節(jié)劑為例如以下活性物質(zhì)（所述化合物根據(jù)國際標準化組織（ISO）通過通用名命名或通過化學(xué)名命名，如果合適的話，與編號一起）并總是包含所有的使用形式，例如酸、鹽、酯和異構(gòu)體，例如立體異構(gòu)體和光學(xué)異構(gòu)體。在本發(fā)明的上下文中，通過舉例的方式提到了一種以及在某些情況下若干種使用形式：
乙草胺（acetochlor）、阿拉酸式苯（acibenzolar）、阿拉酸式苯-S-甲基、三氟羧草醚（acifluorfen）、三氟羧草醚鈉（acifluorfen-sodium）、苯草醚（aclonifen）、甲草胺（alachlor）、二丙烯草胺（allidochlor）、禾草滅（alloxydim）、禾草滅鈉（alloxydim-sodium）、莠滅凈（ametryne）、氨唑草酮（amicarbazone）、先甲草胺（amidochlor）、酰嘧磺?。╝midosulfuron）、氯丙嘧啶酸（aminocyclopyrachlor）、氨草啶（aminopyralid）、殺草強（amitrole）、氨基磺酸銨（ammonium sulfamate）、環(huán)丙嘧啶醇（ancymidol）、莎稗磷（anilofos）、黃草靈（asulam）、莠去津（atrazine）、唑啶草酮（azafenidin）、四唑嘧磺?。╝zimsulfuron）、疊氮津（aziprotryne）、BAH-043、BAS-140H、BAS-693H、BAS-714H、BAS-762H、BAS-776H、BAS-800H、氟丁酰草胺（beflubutamid）、草除靈（benazolin）、乙基草除靈（benazolin-ethyl）、苯唑磺?。╞encarbazone）、氟草胺（benfluralin）、呋草黃（benfuresate）、地散磷（bensulide）、甲基芐嘧黃隆（bensulfuron-methyl）、苯達松（bentazone）、雙苯嘧草酮（benzfendizone）、雙環(huán)磺草酮（benzobicyclon）、吡草酮（benzofenap）、氟磺胺草（benzofluor）、新燕靈（benzoylprop）、甲羧除草醚（bifenox）、雙丙氨酰膦（bilanafos）、雙丙氨酰膦鈉鹽（bilanafos-sodium）、雙嘧苯甲酸（bispyribac）、雙嘧苯甲酸鈉鹽（bispyribac-sodium）、除草定（bromacil）、溴丁酰草胺（bromobutide）、溴酚肟（bromofenoxim）、溴苯腈（bromoxynil）、莠谷?。╞romuron）、特克草（buminafos）、羥草酮（busoxinone）、丁草胺（butachlor）、氟丙嘧草酯（butafenacil）、抑草磷（butamifos）、丁烯草胺（butenachlor）、仲丁靈（butralin）、丁氧環(huán)酮（butroxydim）、丁草敵（butylate）、唑草胺（cafenstrole）、雙酰草胺（carbetamide）、唑草酮（carfentrazone）、唑酮草乙酯（carfentrazone-ethyl）、甲氧除草醚（chlomethoxyfen）、草滅平（chloramben）、炔禾靈（chlorazifop）、丁基炔禾靈（chlorazifop-butyl）、氯溴隆（chlorbromuron）、氯草靈（chlorbufam）、伐草克（chlorfenac）、伐草克鈉（chlorfenac-sodium）、燕麥酯（chlorfenprop）、氯甲丹（chlorflurenol）、氯甲丹甲酯（chlorflurenol-methyl）、氯草敏（chloridazon）、氯嘧磺?。╟hlorimuron）、氯嘧磺隆乙酯（chlorimuron-ethyl）、矮壯素（chlormequat-chloride）、草枯醚（chlornitrofen）、氯酞酰亞胺（chlorophthalim），敵草索二甲酯（chlorthal-dimethyl）、綠麥?。╟hlorotoluron）、氯磺隆（chlorsulfuron）、cinidon、吲哚酮草酯（cinidon-ethyl）、環(huán)庚草醚（cinmethylin）、醚磺?。╟inosulfuron）、烯草酮（clethodim）、炔草酸（clodinafop）、炔草酯（clodinafop-propargyl）、苯噠嗪（clofencet）、廣滅靈（clomazone）、氯甲酸草胺（clomeprop）、調(diào)果酸（cloprop）、克草立特（clopyralid）、cloransulam、氯酯磺草胺（cloransulam-methyl）、芐草?。╟umyluron）、氨基氰（cyanamide）、氰草津（cyanazine）、環(huán)丙酸酰胺（cyclanilide）、草滅特（cycloate）、環(huán)磺隆（cyclosulfamuron）、噻草酮（cycloxydim）、環(huán)莠隆（cycluron）、cyhalofop、氰氟草酯（cyhalofop-butyl）、牧草快（cyperquat）、環(huán)丙津（cyprazine）、三環(huán)塞草胺（cyprazole）、2,4-D、2,4-DB、殺草?。╠aimuron/dymron）、茅草枯（dalapon）、丁酰肼（daminozide）、棉?。╠azomet）、正癸醇（n-decanol）、甜菜安（desmedipham）、敵草凈（desmetryn）、detosyl-pyrazolate（DTP）、燕麥敵（di-allate）、麥草畏（dicamba）、敵草腈（dichlobenil）、滴丙酸（dichlorprop）、2,4-滴丙酸（dichlorprop-P）、二氯苯氧基丙酸（diclofop）、禾草靈（diclofop-methyl）、二氯苯氧基丙酸-P-甲基（diclofop-P-methyl）、雙氯磺草胺（diclosulam）、diethatyl、乙酰甲草胺（diethatyl-ethyl）、枯莠?。╠ifenoxuron）、野燕枯（difenzoquat）、吡氟草胺（diflufenican）、二氟吡隆（diflufenzopyr）、二氟吡隆鈉（diflufenzopyr-sodium）、惡唑隆（dimefuron）、敵草克（dikegulac-sodium）、惡唑隆、哌草丹（dimepiperate）、二甲草胺（dimethachlor）、異戊乙凈（dimethametryn）、二甲噻草胺（dimethenamid）、二甲噻草胺-P（dimethenamid-P）、噻節(jié)因（dimethipin）、醚黃隆（dimetrasulfuron）、氨氟靈（dinitramine）、達諾殺（dinoseb）、特樂酚（dinoterb）、草乃敵（diphenamid）、異丙凈（dipropetryn）、敵草快（diquat）、敵草快二溴化物（diquat-dibromide）、氟硫草定（dithiopyr）、敵草隆（diuron）、二硝酚（DNOC）、甘草津（eglinazine-ethyl）、茵多酸（endothal）、茵草敵（EPTC）、禾草畏（esprocarb）、乙丁烯氟靈（ethalfluralin）、甲基胺苯磺?。╡thametsulfuron-methyl）、乙烯利（ethephon）、磺噻?。╡thidimuron）、乙嗪草酮（ethiozin）、乙氧呋草黃（ethofumesate）、氯氟草醚（ethoxyfen）、氯氟苯醚（ethoxyfen-ethyl）、乙氧嘧磺?。╡thoxysulfuron）、乙氧苯草胺（etobenzanid）、F-5331，即N-[2-氯-4-氟-5-[4-(3-氟-丙基)-4,5-二氫-5-氧代-1H-四唑-1-基]-苯基]乙烷磺酰胺、涕丙酸（fenoprop）、惡唑禾草靈（fenoxaprop）、惡唑禾草靈-P、惡唑禾草靈乙酯（fenoxaprop-ethyl）、精噁唑禾草靈乙酯（fenoxaprop-P-ethyl）、四唑酰草胺（fentrazamide）、非草?。╢enuron）、麥草伏（flamprop）、高效麥草伏異丙酯（flamprop-M-isopropyl）、高效麥草伏甲酯（flamprop-M-methyl）、啶嘧磺隆（flazasulfuron）、雙氟磺草胺（florasulam）、吡氟樂草靈（fluazifop）、吡氟樂草靈-P（fluazifop-P）、吡氟禾草靈（fluazifop-butyl）、精吡氟禾草靈（fluazifop-P-butyl）、異丙吡草酯（fluazolate）、氟唑磺?。╢lucarbazone）、氟唑磺隆鈉（flucarbazone-sodium）、氟吡磺?。╢lucetosulfuron）、氯乙氟靈（fluchloralin）、氟噻草胺（flufenacet（thiafluamide））、氟噠嗪（flufenpyr）、氟噠嗪乙酯（flufenpyr-ethyl）、氟節(jié)胺（flumetralin）、唑嘧磺草胺（flumetsulam）、氟烯草酸（flumiclorac）、氟烯草酸戊酯（flumiclorac-pentyl）、丙炔氟草胺（flumioxazin）、氟米丙平（flumipropyn）、伏草?。╢luometuron）、三氟硝草醚（fluorodifen）、氟草醚（fluoroglycofen）、乙羧氟草醚（fluoroglycofen-ethyl）、氟胺草唑（flupoxam）、flupropacil、四氟丙酸（flupropanate）、氟啶嘧磺?。╢lupyrsulfuron）、氟啶嘧磺隆甲酯-鈉、抑草丁（flurenol）、9-羥基芴-9-羧酸丁酯（flurenol-butyl）、氟啶草酮（fluridone）、氟草吡酮（flurochloridone）、氟草煙（fluroxypyr）、氯氟吡氧乙酸（fluroxypyr-meptyl）、呋嘧醇（flurprimidol）、呋草酮（flurtamone）、嗪草酸（fluthiacet）、嗪草酸甲酯（fluthiacet-methyl）、氟唑草胺（fluthiamide）、氟磺胺草醚（fomesafen）、甲酰胺磺?。╢oramsulfuron）、調(diào)吡脲（forchlorfenuron）、殺木膦（fosamine）、呋氧草醚（furyloxyfen）、赤霉烯酸（gibberellic acid）、草銨膦（glufosinate）、L-草銨膦（L-glufosinate）、L-草銨膦（L-glufosinate-ammonium）、草銨膦（glufosinate-ammonium）、草甘膦（glyphosate）、草甘膦異丙基銨（glyphosate-isopropylammonium）、H-9201、halosafen、吡氯黃?。╤alosulfuron）、吡氯黃隆-甲基（halosulfuron-methyl）、吡氟氯禾靈（haloxyfop）、吡氟氯禾靈-P（haloxyfop-P）、吡氟氯禾靈-乙氧乙酯（haloxyfop-ethoxyethyl）、吡氟氯禾靈-P-乙氧乙酯（haloxyfop-P-ethoxyethyl）、吡氟氯禾靈-甲酯（haloxyfop-methyl）、吡氟氯禾靈-P-甲酯（haloxyfop-P-methyl）、環(huán)嗪酮（hexazinone）、HNPC-9908、HOK-201、HW-02、咪草酸（imazamethabenz）、咪草甲酯（imazamethabenz-methyl）、甲氧咪（imazamox）、甲咪唑煙酸（imazapic）、滅草煙（imazapyr）、滅草喹（imazaquin）、咪草煙（imazethapyr）、唑吡嘧磺?。╥mazosulfuron）、抗倒胺（inabenfide）、茚草酮（indanofan）、吲哚乙酸（indoleacetic acid）（IAA）、4-吲哚-3-基丁酸（IBA）、碘磺隆（iodosulfuron）、甲基碘磺隆鈉（iodosulfuron-methyl-sodium）、碘苯腈（ioxynil）、草特靈（isocarbamid）、異丙樂靈（isopropalin）、異丙?。╥soproturon）、異噁惡隆（isouron）、異惡酰草胺（isoxaben）、異惡氯草酮（isoxachlortole）、異噁唑草酮（isoxaflutole）、惡草醚（isoxapyrifop）、KUH-043、KUH-071、隆草特（karbutilate）、ketospiradox、乳氟樂草靈（lactofen）、環(huán)草定（lenacil）、利谷?。╨inuron）、馬來酰肼（maleic hydrazide）、MCPA、MCPB、MCPB-甲酯、MCPB-乙酯和MCPB-鈉、mecoprop、mecoprop-鈉、mecoprop-butotyl、mecoprop-P-butotyl、mecoprop-P-二甲基銨、mecoprop-P-2-乙基己基、mecoprop-P-鉀、苯噻草胺（mefenacet）、氟磺酰草胺（mefluidide）、縮節(jié)胺（mepiquat-chloride）、磺胺磺?。╩esosulfuron）、甲磺胺磺隆（mesosulfuron-methyl）、甲基苯噻?。╩ethabenzthiazuron）、威百畝（metam）、惡唑酰草胺（metamifop）、苯嗪草酮（metamitron）、吡唑草胺（metazachlor）、滅草定（methazole）、去草酮（methoxyphenone）、甲基殺草?。╩ethyldymron）、1-甲基環(huán)丙烯、甲基異硫氰酸鹽（methyl isothiocyanate）、吡喃?。╩etobenzuron）、吡喃隆、溴谷?。╩etobromuron）、異丙甲草胺（metolachlor）、S-異丙甲草胺（S-metolachlor）、磺草唑胺（metosulam）、甲氧隆（metoxuron）、嗪草酮（metribuzin）、磺?。╩etsulfuron）、甲磺?。╩etsulfuron-methyl）、草達滅（molinate）、庚酰草胺（monalide）、monocarbamide、monocarbamide二氫硫酸鹽、綠谷?。╩onolinuron）、單嘧磺?。╩onosulfuron）、滅草?。╩onuron）、MT 128、MT-5950，即N-[3-氯-4-(1-甲基乙基)-苯基]-2-甲基戊酰胺、NGGC-011、萘丙胺（naproanilide）、敵草胺（napropamide）、萘草胺（naptalam）、NC-310，即4-(2,4-二氯苯甲酰基)-1-甲基-5-芐基氧吡唑、草不?。╪eburon）、煙嘧磺?。╪icosulfuron）、氟氯草胺（nipyraclofen）、甲磺樂靈（nitralin）、除草醚（nitrofen）、硝酚鈉（nitrophenolat-sodium）（異構(gòu)體混合物）、三氟甲草醚（nitrofluorfen）、正壬酸（nonanoic acid）、氟草敏（norflurazon）、攔草凈（orbencarb）、嘧苯胺磺?。╫rthosulfamuron）、氨磺樂靈（oryzalin）、農(nóng)思它（oxadiargyl）、惡草靈（oxadiazon）、環(huán)氧嘧磺隆（oxasulfuron）、惡嗪草酮（oxaziclomefone）、乙氧氟草醚（oxyfluorfen）、多效唑（paclobutrazole）、百草枯（paraquat）、百草枯二氯化物（paraquat dichloride）、正壬酸（pelargonic acid（nonanoic acid））、二甲戊樂靈（pendimethalin）、pendralin、五氟磺草胺（penoxsulam）、甲氯酰草胺（pentanochlor）、環(huán)戊惡草酮（pentoxazone）、黃草伏（perfluidone）、烯草胺（pethoxamid）、棉胺寧（phenisopham）、苯敵草（phenmedipham）、苯敵草-乙酯（phenmedipham-ethyl）、毒莠定（picloram）、氟吡酰草胺（picolinafen）、唑啉草酯（pinoxaden）、哌草磷（piperophos）、pirifenop、pirifenop-丁酯、丙草胺（pretilachlor）、氟嘧磺?。╬rimisulfuron）、甲基氟嘧磺?。╬rimisulfuron-methyl）、噻菌靈（probenazole）、氟唑草胺（profluazol）、環(huán)丙腈津（procyazine）、氨氟樂靈（prodiamine）、prifluraline、環(huán)笨草酮（profoxydim）、調(diào)環(huán)酸（prohexadione）、調(diào)環(huán)酸鈣（prohexadione-calcium）、prohydrojasmone、撲滅通（prometon）、撲草凈（prometryn）、毒草胺（propachlor）、敵稗（propanil）、惡草酸（propaquizafop）、撲滅津（propazine）、苯胺靈（propham）、異丙草胺（propisochlor）、丙苯磺?。╬ropoxycarbazone）、丙苯磺隆鈉（propoxycarbazone-sodium）、炔苯酰草胺（propyzamide）、甲硫磺樂靈（prosulfalin）、芐草丹（prosulfocarb）、氟磺?。╬rosulfuron）、丙炔草胺（prynachlor）、雙唑草腈（pyraclonil）、吡草醚（pyraflufen）、吡草醚-乙酯（pyraflufen-ethyl）、吡唑特（pyrazolynate（pyrazolate））、吡嘧黃?。╬yrazosulfuron-ethyl）、芐草唑、pyribambenz、異丙酯草醚（pyribambenz-isopropyl）、嘧啶肟草醚（pyribenzoxim）、稗草丹（pyributicarb）、氯苯噠醇（pyridafol）、噠草特（pyridate）、環(huán)酯草醚（pyriftalid）、嘧草醚（pyriminobac）、甲基嘧草醚（pyriminobac-methyl）、嘧磺草胺（pyrimisulfan）、嘧草硫醚（pyrithiobac）、嘧草硫醚鈉（pyrithiobac-sodium）、派羅克殺草砜（pyroxasulfone）、甲氧磺草胺（pyroxsulam）、二氯喹啉酸（quinclorac）、氯甲喹啉酸（quinmerac）、滅藻醌（quinoclamine）、精喹禾靈（quizalofop）、精喹禾靈-乙酯（quizalofop-ethyl）、精喹禾靈-P（quizalofop-P）、精喹禾靈-P-乙酯（quizalofop-P-ethyl）、喹禾糠酯（quizalofop-P-tefuryl）、砜嘧磺?。╮imsulfuron）、苯嘧磺草胺（saflufenacil）、密草通（secbumeton）、稀禾定（sethoxydim）、環(huán)草?。╯iduron）、西瑪津（simazine）、西草凈（simetryn）、SN-106279、sulf-allate（CDEC）、甲磺草胺（sulfentrazone）、嘧磺?。╯ulfometuron）、甲嘧磺?。╯ulfometuron-methyl）、草硫膦（sulfosate）（草甘膦-trimesium）、磺?；锹。╯ulfosulfuron）、SYN-523、SYP-249、SYP-298、SYP-300、牧草胺（tebutam）、丁噻?。╰ebuthiuron）、四氯硝基苯（tecnazene）、吡喃草酮（tepraloxydim）、特草定（terbacil）、特草靈（terbucarb）、特丁草胺（terbuchlor）、特丁通（terbumeton）、特丁津（terbuthylazine）、特丁凈（terbutryne）、TH-547、甲氧噻草胺（thenylchlor）、thiafluamide、噻氟?。╰hiazafluron）、噻草啶（thiazopyr）、噻二唑草胺（thidiazimin）、噻苯?。╰hidiazuron）、酮脲磺草吩（thiencarbazone）、酮脲磺草吩甲酯（thiencarbazone-methyl）、噻磺?。╰hifensulfuron）、噻吩磺隆-甲酯（thifensulfuron-methyl）、禾草丹（thiobencarb）、仲草丹（tiocarbazil）、甲黃隆對（tralkoxydim）、野麥畏（tri-allate）、醚苯磺?。╰riasulfuron）、三嗪氟草胺（triaziflam）、triazofenamide、苯磺?。╰ribenuron）、苯磺?。╰ribenuron-methyl）、三氯乙酸（trichloroacetic acid）（TCA）、綠草定（triclopyr）、滅草環(huán)（tridiphane）、草達津（trietazine）、三氟啶磺?。╰rifloxysulfuron）、三氟啶磺隆鈉（trifloxysulfuron-sodium）、氟樂靈（trifluralin）、triflusulfuron、氟胺磺隆-甲基（triflusulfuron-methyl）、三甲隆（trimeturon）、trinexapac、抗倒酯（trinexapac-ethyl）、三氟甲磺?。╰ritosulfuron）、tsitodef、烯效唑（uniconazole）、烯效唑-P（uniconazole-P）、滅草敵（vernolate）、ZJ-0166、ZJ-0270、ZJ-0543、ZJ-0862和以下化合物：
待施用于HPPD耐受性植物的生長區(qū)域的如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的所需施用率根據(jù)外部條件（如溫度、濕度、所用除草劑的性質(zhì)等）變化，所述HPPD耐受性植物包含一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。所述施用率可在寬的范圍內(nèi)變化，例如0.001至1.0kg/ha及更多的活性物質(zhì)，但優(yōu)選0.005至750g/ha。
在如上所定義的N-(四唑-4-基)-或N-(三唑-3-基)芳基甲酰胺或其鹽除草劑（不同于如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽）結(jié)合施用至HPPD耐受性植物的情況下，所述HPPD耐受性植物含有一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中），基于存在與如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽不同的除草劑，這些混合物可導(dǎo)致作物損傷。為了減少/消除這種作物損傷，可加入合適的安全劑。這些以解毒（antidotically）活性量使用的安全劑降低了例如在經(jīng)濟上重要的作物中所用的除草劑/農(nóng)藥的植物毒性副作用，所述作物為例如谷物（小麥、大麥、黑麥、玉米、稻、粟）、苜蓿、甜菜、甘蔗、油菜、棉花和大豆物種，優(yōu)選玉米、棉花、甜菜或大豆物種。
所述安全劑優(yōu)選選自以下物質(zhì)：
A)式(S-I)的化合物
其中符號和指數(shù)具有如下含義：
nA為0至5的自然數(shù)，優(yōu)選0至3；
RA1為鹵素、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、硝基或(C1-C4)-鹵代烷基；
WA為未取代或取代的二價雜環(huán)基，其選自具有1至3個N或O型的雜環(huán)原子的部分不飽和的或芳族5元雜環(huán)，其中環(huán)中存在至少一個氮原子和至多一個氧原子，優(yōu)選為選自(WA1)至(WA4)的基團，
mA為0或1；
RA2為ORA3、SRA3或NRA3RA4或飽和或不飽和的具有至少一個氮原子和至多3個雜原子（優(yōu)選選自O(shè)和S）的3至7元雜環(huán)，其通過氮原子與（S-I）中的羰基相連且其為未取代的或被選自(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基和任選取代的苯基的基團取代，優(yōu)選為式ORA3、NHRA4或N(CH3)2的基團，特別為式ORA3的基團；
RA3為氫或未取代或取代的脂族烴基團，其優(yōu)選總共具有1至18個碳原子；
RA4為氫、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基或取代或未取代的苯基；
RA5為H、(C1-C8)-烷基、(C1-C8)-鹵代烷基、(C1-C4)-烷氧基-(C1-C8)-烷基、氰基或COORA9（其中RA9為氫）、(C1-C8)-烷基、(C1-C8)-鹵代烷基、(C1-C4)-烷氧基-(C1-C4)-烷基、(C1-C6)-羥烷基、(C3-C12)-環(huán)烷基或三-(C1-C4)-烷基甲硅烷基；
RA6、RA7、RA8為相同或不同的且為氫、(C1-C8)-烷基、(C1-C8)-鹵代烷基、(C3-C12)-環(huán)烷基或取代或未取代的苯基；
優(yōu)選：
a)二氯苯基吡唑啉-3-羧酸型的化合物，優(yōu)選的化合物為例如1-(2,4-二氯苯基)-5-(乙氧基羰基)5-甲基-2-吡唑啉-3-羧酸乙酯(S1-1)(吡咯二酸二乙酯”，參見Pestic.Man.)以及相關(guān)化合物，如WO 91/07874所述；
b)二氯苯基吡唑羧酸的衍生物，優(yōu)選的化合物為例如1-(2,4-二氯苯基)-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(S1-2)、1-(2,4-二氯苯基)-5-異丙基吡唑-3-羧酸乙酯(S1-3)、1-(2,4-二氯苯基)-5-(1,1-二甲基乙基)吡唑-3-羧酸乙酯(S1-4)、1-(2,4-二氯苯基)-5-苯基吡唑-3-羧酸乙酯(S1-5)和相關(guān)化合物，如EP-A-333 131和EP-A-269 806所述；
c)三唑羧酸型化合物，優(yōu)選的化合物為例如解草唑(-乙酯)，即1-(2,4-二氯苯基)-5-三氯甲基-(1H)-1,2,4-三唑-3-羧酸乙酯(S1-6)和相關(guān)化合物，如EP-A-174 562和EP-A-346 620所述；
d)5-芐基-或5-苯基-2-異噁唑啉-3-羧酸或5,5-二苯基-2-異噁唑啉-3-羧酸型化合物，優(yōu)選的化合物為例如5-(2,4-二氯芐基)-2-異噁唑啉-3-羧酸乙酯(S1-7)或5-苯基-2-異噁唑啉-3-羧酸乙酯(S1-8)和相關(guān)化合物，如WO 91/08202所述，或5,5-二苯基-2-異噁唑啉羧酸乙酯(S1-9)(“雙苯噁唑酸（isoxadifen-ethyl）”)或5,5-二苯基-2-異噁唑啉羧酸正丙酯（S1-10）或5-(4-氟苯基)-5-苯基-2-異噁唑啉-3-羧酸乙酯（S1-11），如專利申請WO-A-95/07897所述。
B)式(S-II)的喹啉衍生物
其中符號和指數(shù)具有如下含義：
RB1為鹵素、(C1-C4)-烷基,(C1-C4)-烷氧基、硝基或(C1-C4)-鹵代烷基；
nB為0至5的自然數(shù)，優(yōu)選0至3的自然數(shù)；
RB2ORB3、SRB3或NRB3RB4或飽和或不飽和的具有至少一個氮原子和至多3個雜原子（優(yōu)選選自O(shè)和S）的3至7元雜環(huán)，其通過氮原子與(S-II)中的羰基相連且其為未取代的或被選自以下的基團取代：(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基或任選取代的苯基，優(yōu)選為式ORB3、NHRB4或N(CH3)2的基團，特別為式ORB3的基團；
RB3為氫或未取代或取代的脂族烴基團，其優(yōu)選總共具有1至18個碳原子；
RB4為氫、(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷氧基或取代或未取代的苯基；
TB為(C1-或C2)-烷二基鏈，其為未取代的或被一個或兩個(C1-C4)-烷基取代或被[(C1-C3)-烷氧基]羰基取代；
優(yōu)選：
a)8-喹啉氧基乙酸型的化合物(S2)，優(yōu)選(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸1-甲基己酯（通用名“解草酯（cloquintocet-mexyl）”(S2-1)）（參見Pestic.Man.），1,3-二甲基丁-1-基(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸酯(S2-2)、(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸4-烯丙氧基丁酯(S2-3)、1-烯丙氧基丙-2-基(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸酯(S2-4)、(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸乙酯(S2-5)、(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸甲酯(S2-6)、(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸烯丙酯(S2-7)、2-(2-亞丙基亞胺氧基)-1-乙基(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸酯(S2-8)、2-氧代丙-1-基(5-氯-8-喹啉氧基)乙酸酯(S2-9)和相關(guān)的化合物，如EP-A-86 750、EP-A-94 349和EP-A-191 736或EP-A-0 492 366所述，以及它們的水合物和鹽，如WO-A-2002/034048所述。
b)(5-氯-8-喹啉氧基)丙二酸型的化合物，優(yōu)選的化合物為例如(5-氯-8-喹啉氧基)丙二酸二乙酯、(5-氯-8-喹啉氧基)丙二酸二烯丙酯、(5-氯-8-喹啉氧基)丙二酸甲基乙酯和相關(guān)的化合物，如EP-A-0 582 198所述。
C)式(S-III)的化合物
其中符號和指數(shù)具有如下含義：
RC1為(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-鹵代烷基、(C2-C4)-烯基、(C2-C4)-鹵代烯基、(C3-C7)-環(huán)烷基，優(yōu)選二氯甲基；
RC2、RC3為相同或不同的且為氫、(C1-C4)-烷基、(C2-C4)-烯基、(C2-C4)-炔基、(C1-C4)-鹵代烷基、(C2-C4)-鹵代烯基、(C1-C4)-烷基氨基甲?；?(C1-C4)-烷基、(C2-C4)-烯基氨基甲酰基-(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基-(C1-C4)-烷基、二氧戊環(huán)基-(C1-C4)-烷基、噻唑基、呋喃基、呋喃基烷基、噻吩基、哌啶基、取代或未取代的苯基，或RC2和RC3一起形成取代或未取代的雜環(huán)，優(yōu)選噁唑烷、噻唑烷、哌啶、嗎啉、六氫嘧啶或苯并噁嗪環(huán)；
優(yōu)選：
二氯乙酰胺型的活性化合物，其經(jīng)常被用作出苗前安全劑（作用于土壤的安全劑），例如“二氯丙烯胺（dichlormid）”（參見Pestic.Man.）（=N,N-二烯丙基-2,2-二氯乙酰胺）、“R-29148”（=3-二氯乙?；?2,2,5-三甲基-1,3-噁唑烷，來自Stauffer）、“R-28725”（=3-二氯乙?；?2,2,-二甲基-1,3-噁唑烷，來自Stauffer）、“解草酮（benoxacor）”（參見Pestic.Man.）（=4-二氯乙酰基-3,4-二氫-3-甲基-2H-1,4-苯并噁嗪）、“PPG-1292”（=N-烯丙基-N-[(1,3-二氧戊環(huán)-2-基)甲基]二氯乙酰胺，來自PPG Industries）、“DKA-24”（=N-烯丙基-N-[(烯丙基氨基羰基)甲基]二氯乙酰胺，來自Sagro-Chem）、“AD-67”或“MON 4660”（=3-二氯乙?；?1-氧雜-3-氮雜-螺[4,5]癸烷，來自Nitrokemia或Monsanto）、“TI-35”（=1-二氯乙酰基環(huán)己亞胺，來自TRI-Chemical RT）、“diclonon”（dicyclonone）或“BAS145138”或“LAB145138”（=3-二氯乙?；?2,5,5-三甲基-1,3-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬烷，來自BASF）和“解草噁唑（furilazole）”或“MON 13900”（參見Pestic.Man.）（=(RS)-3-二氯乙?；?5-(2-呋喃基)-2,2-二甲基噁唑烷）。
D)式(S-IV)的N-?；酋０芳八鼈兊柠}
其中
XD為CH或N；
RD1為CO-NRD5RD6或NHCO-RD7；
RD2為鹵素、(C1-C4)-鹵代烷基、(C1-C4)-鹵代烷氧基、硝基、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、(C1-C4)-烷基磺酰基、(C1-C4)-烷氧基羰基或(C1-C4)-烷基羰基；
RD3為氫、(C1-C4)-烷基、(C2-C4)-烯基或(C2-C4)-炔基；
RD4為鹵素、硝基、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-鹵代烷基、(C1-C4)-鹵代烷氧基、(C3-C6)-環(huán)烷基、苯基、(C1-C4)-烷氧基、氰基、(C1-C4)-烷硫基、(C1-C4)-烷基亞磺?；?、(C1-C4)-烷基磺?；?C1-C4)-烷氧基羰基或(C1-C4)-烷基羰基;
RD5為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C6)-炔基、(C5-C6)-環(huán)烯基、苯基或含有選自氮、氧和硫的vD個雜原子的3至6元雜環(huán)基，其中最后提及的7個基團被選自以下的vD個取代基取代：鹵素、(C1-C6)-烷氧基、(C1-C6)-鹵代烷氧基、(C1-C2)-烷基亞磺酰基、(C1-C2)-烷基磺酰基、(C3-C6)-環(huán)烷基、(C1-C4)-烷氧基羰基、(C1-C4)-烷基羰基和苯基，且在環(huán)狀基團的情況下，還有(C1-C4)-烷基和(C1-C4)-鹵代烷基；
RD6為氫、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-烯基或(C2-C6)-炔基，其中最后提及的3個基團被選自以下的vD個基團取代：氫、羥基、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基和(C1-C4)-烷硫基，或
RD5和RD6與攜帶它們的氮原子一起形成吡咯烷基或哌啶基；
RD7為氫、(C1-C4)-烷基氨基、二-(C1-C4)-烷基氨基、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基，其中最后提及的2個基團被選自以下的vD個取代基取代：鹵素、(C1-C4)-烷氧基、鹵素-(C1-C6)-烷氧基和(C1-C4)-烷硫基且在環(huán)狀基團的情況下，還有(C1-C4)-烷基和(C1-C4)-鹵代烷基；
nD為0、1或2；
mD為1或2；
vD為0、1、2或3；
其中，優(yōu)選N-?；酋０沸偷幕衔铮缦率?S-V)的化合物，其例如已知于WO 97/45016
其中
RD7為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基，其中最后提及的2個基團被選自以下的vD個取代基取代：鹵素、(C1-C4)-烷氧基、鹵素-(C1-C6)-烷氧基和(C1-C4)-烷硫基，且在環(huán)狀基團的情況下，還有(C1-C4)-烷基和(C1-C4)-鹵代烷基；
RD4為鹵素、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、CF3；
mD為1或2；
vD為0、1、2或3；
以及
?；被酋；郊柞０?，例如下式(S-VI)的化合物，其例如已知于WO 99/16744，
例如，其中
RD5=環(huán)丙基和(RD4)=2-OMe（“環(huán)丙磺酰胺（cyprosulfamide）”，S3-1）
RD5=環(huán)丙基和(RD4)=5-Cl-2-OMe(S3-2)，
RD5=乙基和(RD4)=2-OMe(S3-3)、
RD5=異丙基和(RD4)=5-Cl-2-OMe(S3-4)以及
RD5=異丙基和(RD4)=2-OMe(S3-5)；
以及
式(S-VII)的N-?；被酋；交逍偷幕衔?，其例如已知于EP-A-365484
其中
RD8和RD9彼此獨立地為氫、(C1-C8)-烷基、(C3-C8)-環(huán)烷基、(C3-C6)-烯基、(C3-C6)-炔基，
RD4為鹵素、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、CF3
mD為1或2；
這些中特別為：
1-[4-(N-2-甲氧基苯甲酰基氨磺?；?苯基]-3-甲基脲、
1-[4-(N-2-甲氧基苯甲?；被酋；?苯基]-3,3-二甲基脲、
1-[4-(N-4,5-二甲基苯甲?；被酋；?苯基l]-3-甲基脲、
1-[4-(N-萘酰基氨磺?；?苯基]-3,3-二甲基脲，
G)來自羥基芳族和芳族-脂族羧酸衍生物類的活性化合物，例如3,4,5-三乙酰氧基苯甲酸乙酯、3,5-二甲氧基-4-羥基苯甲酸、3,5-二羥基苯甲酸、4-羥基水楊酸、4-氟水楊酸、1,2-二氫-2-氧代-6-三氟甲基吡啶-3-甲酰胺、2-羥基肉桂酸、2,4-二氯肉桂酸，如WO 2004084631、WO 2005015994、WO 2006007981、WO 2005016001所述；
H)來自1,2-二氫喹喔啉-2-酮類的活性化合物，例如1-甲基-3-(2-噻吩基)-1,2-二氫喹喔啉-2-酮、1-甲基-3-(2-噻吩基)-1,2-二氫喹喔啉-2-硫酮、1-(2-氨基乙基)-3-(2-噻吩基)-1,2-二氫喹喔啉-2-酮鹽酸鹽、1-(2-甲基磺?；被一?-3-(2-噻吩基)-1,2-二氫-喹喔啉-2-酮，如WO 2005112630所述，
I)除了對有害植物的除草作用之外，還對作物植物（例如稻）具有安全劑作用的活性化合物，例如
“哌草丹（dimepiperate）”或“MY-93”（參見Pestic.Man.）（=S-1-甲基-1-苯基乙基哌啶-1-硫代羧酸酯），已知其作為稻的安全劑抵抗除草劑草達滅（molinate）的損害，
“殺草?。╠aimuron）”或“SK 23”（參見Pestic.Man.）（=1-(1-甲基-1-苯基乙基)-3-對甲苯基脲），已知其作為稻的安全劑抵抗除草劑唑吡嘧磺?。╥mazosulfuron）的損害，
“芐草?。╟umyluron）”=“JC-940”（=3-(2-氯苯基甲基)-1-(1-甲基-1-苯基乙基)脲，參見JP-A-60087254），已知其作為稻的安全劑抵抗多種除草劑的損害，
“去草酮（methoxyphenone）”或“NK 049”（=3,3'-二甲基-4-甲氧基二苯甲酮），已知其作為稻的安全劑抵抗多種除草劑的損害，
“CSB”（=1-溴-4-(氯甲基磺?；?苯）（CAS登記號54091-06-4，來自Kumiai），已知其在稻中作為安全劑抵抗多種除草劑的損害，
K)式(S-IX)的化合物，如WO-A-1998/38856所述
其中符號和指數(shù)具有如下含義：
RK1、RK2彼此獨立地為鹵素、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基、(C1-C4)-鹵代烷基、(C1-C4)-烷基氨基、二-(C1-C4)-烷基氨基、硝基；
AK為COORK3或COORK4
RK3、RK4彼此獨立地為氫、(C1-C4)-烷基、(C2-C6)-烯基、(C2-C4)-炔基、氰基烷基、(C1-C4)-鹵代烷基、苯基、硝基苯基、芐基、鹵代芐基、吡啶基烷基或烷基銨，
nK1為0或1，
nK2、nK3彼此獨立地為0、1或2
優(yōu)選：(二苯基甲氧基)乙酸甲酯（CAS登記號：41858-19-9），
L)式(S-X)的化合物，如WO A-98/27049所述
其中符號和指數(shù)具有如下含義：
XL為CH或N，
nL在X=N的情況下為0至4的整數(shù)，在X=CH的情況下為0至5的整數(shù)，
RL1為鹵素、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-鹵代烷基、(C1-C4)-烷氧基、(C1-C4)-鹵代烷氧基、硝基、(C1-C4)-烷硫基、(C1-C4)-烷基磺?；?、(C1-C4)-烷氧基羰基、任選取代的苯基、任選取代的苯氧基，
RL2為氫或(C1-C4)-烷基，
RL3為氫、(C1-C8)-烷基、(C2-C4)-烯基、(C2-C4)-炔基或芳基，其中上述各含碳基團為未取代的或被一個或多個（優(yōu)選至多三個）選自鹵素和烷氧基的相同或不同的基團取代；或其鹽，
M)來自3-(5-四唑基羰基)-2-喹諾酮類的活性化合物，例如1,2-二氫-4-羥基-1-乙基-3-(5-四唑基羰基)-2-喹諾酮（CAS登記號：219479-18-2）、1,2-二氫-4-羥基-1-甲基-3-(5-四唑基羰基)-2-喹諾酮（CAS登記號：95855-00-8），如WO-A-1999000020所述，
N)式(S-XI)或(S-XII)的化合物，如WO-A-2007023719和WO-A-2007023764所述
其中，
RN1為鹵素、(C1-C4)-烷基、甲氧基、硝基、氰基、CF3、OCF3
Y、Z彼此獨立地為O或S，
nN為0至4的整數(shù)，
RN2為(C1-C16)-烷基、(C2-C6)-烯基、(C3-C6)-環(huán)烷基、芳基、芐基、鹵代芐基，
RN3為氫、(C1-C6)烷基，
O)一種或多種選自以下的化合物：
1,8-萘二甲酸酐、
O,O-二乙基S-2-乙基硫代乙基二硫代磷酸酯（乙拌磷（disulfoton））、
4-氯苯基甲基氨基甲酸酯（mephenate）、
O,O-二乙基O-苯基硫代磷酸酯（dietholate）、
4-羧基-3,4-二氫-2H-1-苯并吡喃-4-乙酸（CL-304415、CAS登記號：31541-57-8）、
1-氧雜-4-氮雜螺[4.5]癸烷-4-二硫代碳酸2-丙烯酯（MG-838，CAS登記號：133993-74-5）、
[(3-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-4(3H)-亞基)甲氧基]乙酸甲酯（來自WO-A-98/13361；CAS登記號：205121-04-6）、
氰基甲氧基亞氨基(苯基)乙腈（解草胺腈（cyometrinil））、
1,3-二氧戊環(huán)-2-基甲氧基亞氨基(苯基)乙腈（解草腈（oxabetrinil））、
4'-氯-2,2,2-三氟苯乙酮O-1,3-二氧戊環(huán)-2-基甲基肟（氟草肟（fluxofenim））、
4,6-二氯-2-苯基嘧啶（解草啶（fenclorim））、
2-氯-4-三氟甲基-1,3-噻唑-5-羧酸芐酯（解草胺（flurazole））、
2-二氯甲基-2-甲基-1,3-二氧戊環(huán)（MG-191），
包括立體異構(gòu)體以及農(nóng)業(yè)中常用的鹽。
同樣也可為如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽與其他已知的活性化合物結(jié)合施用至轉(zhuǎn)基因植物的混合物，所述其他已知的活性化合物為例如殺真菌劑、殺蟲劑、殺螨劑、殺線蟲劑、驅(qū)鳥劑、植物養(yǎng)分和土壤結(jié)構(gòu)改良劑，所述轉(zhuǎn)基因植物含有一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。
一些安全劑已知為除草劑，因此，除了對有害植物的除草作用之外，它們還通過保護作物植物發(fā)揮作用。
除草劑（混合物）與安全劑的重量比通常取決于除草劑施用率和所討論的安全劑的有效性，所述重量比可在寬范圍內(nèi)變化，例如200:1至1:200，優(yōu)選100:1至1:100，特別為20:1至1:20。可將安全劑類似地配制到式(I)化合物或它們與其它除草劑/農(nóng)藥的混合物，并且作為最終制劑或作為與除草劑的桶混劑提供并使用。
用于所述轉(zhuǎn)基因植物區(qū)域的如上所定義的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽的所需施用率尤其根據(jù)外部條件（例如溫度和濕度）和使用的除草劑類型而變化，所述轉(zhuǎn)基因植物含有一種或多種嵌合基因，所述嵌合基因(I)包含編碼源于以下生物的羥基苯基丙酮酸雙加氧酶（HPPD）的DNA序列：(a)燕麥屬，優(yōu)選燕麥，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.1（其編碼由SEQ ID No.2定義的HPPD）相同的DNA序列，(b)假單胞菌屬，更優(yōu)選熒光假單胞菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.3（其編碼由SEQ ID No.4定義的HPPD）相同的DNA序列，(c)聚球藻亞科，優(yōu)選聚球藻屬種，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.6（其編碼由SEQ ID No.7定義的HPPD）相同的DNA序列，(d)赭纖蟲科，優(yōu)選日本赭纖蟲，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.8（其編碼由SEQ ID No.9定義的HPPD）相同的DNA序列，(e)紅球菌屬，優(yōu)選紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro03041，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.10（其編碼由SEQ ID No.11定義的HPPD）相同的DNA序列，或紅球菌屬種（菌株RHA1），分離菌ro02040，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.12（其編碼由SEQ ID No.13定義的HPPD）相同的DNA序列，(f)嗜苦菌科，優(yōu)選嗜苦古菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.14（其編碼由SEQ ID No.15定義的HPPD）相同的DNA序列，(g)克魯?shù)賮喚鷮?，?yōu)選克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌，更優(yōu)選其包含與SEQ ID No.16（其編碼由SEQ ID No.17定義的HPPD）相同的DNA序列；或所述嵌合基因(II)包含上文所定義的生物的HPPD編碼基因的一種或多種突變DNA序列，優(yōu)選的突變體如WO 2010/085705、US6,245,968、WO 2009/144079、WO2011/076877、WO2011/076882、WO2011/076892、WO2011/076885、WO2011/076889、WO 2012/021785中所述，根據(jù)后者，更具體而言其包含從玉米或大豆獲得的HPPD編碼基因（尤其優(yōu)選從玉米獲得的HPPD編碼基因）的一種或多種突變DNA序列；或所述嵌合基因(III)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.25公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中以及以SEQ ID No.29公開于本申請中）；或所述嵌合基因(IV)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第356位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi428H-Evo40且以SEQ ID No 55公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 32公開于本申請中），(ii)在第351位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第352位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第355位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第356位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi428H-Evo41且以SEQ ID No 56公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 33公開于本申請中）；或所述嵌合基因(V)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言是綠膿假單胞菌菌株ATX22717 HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第342位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi305H-Evo40且以SEQ ID No 51公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 40公開于本申請中），(ii)在第337位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第338位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第341位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第342位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi305H-Evo41且以SEQ ID No 52公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 41公開于本申請中）；或所述嵌合基因(VI)包含PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為傘菌假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為Axmi309H-Evo40且以SEQ ID No 53公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 36公開于本申請中），(ii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為Axmi309H-EVO41且以SEQ ID No 54公開于PCT/US2013/59598中以及作為HPPD蛋白序列以SEQ ID No 37公開于本申請中）。所述施用率可在寬的范圍內(nèi)變化，例如0.001至10 000g/ha或更多的活性物質(zhì)；然而，優(yōu)選0.5至5000g/ha，特別優(yōu)選0.5至1000g/ha以及非常特別優(yōu)選0.5至500g/ha。
序列表
SEQ ID No.1:為在大腸桿菌細胞中表達而優(yōu)化的編碼燕麥HPPD的核酸序列
SEQ ID No.2:SEQ ID No.1編碼的蛋白質(zhì)
SEQ ID No.3:編碼在第336位突變（突變Gly=>Trp（Pfw336））的熒光假單胞菌HPPD的核酸序列，
SEQ ID No.4:SEQ ID No.3編碼的蛋白質(zhì)（PfHPPD336W）
SEQ ID No.5:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼在第336位突變（突變Gly=>Trp）的熒光假單胞菌HPPD的核酸序列
SEQ ID No.6:編碼聚球藻屬種HPPD的核酸序列
SEQ ID No.7:SEQ ID No.6編碼的蛋白
SEQ ID No.8:編碼日本赭纖蟲HPPD（FMP37）的核酸序列
SEQ ID No.9:SEQ ID No.8編碼的蛋白
SEQ ID No.10:編碼紅球菌屬種（菌株RHA1），分離株ro03041HPPD（FMP22）的核酸序列
SEQ ID No.11:SEQ ID No.10編碼的蛋白
SEQ ID No.12:編碼紅球菌屬種（菌株RHA1），分離株ro02040HPPD的核酸序列
SEQ ID No.13:SEQ ID No.12編碼的蛋白
SEQ ID No.14:編碼嗜苦古菌HPPD的核酸序列
SEQ ID No.15:SEQ ID No.14編碼的蛋白
SEQ ID No.16:編碼克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌HPPD（FMP27）的核酸序列
SEQ ID No.17:SEQ ID No.16編碼的蛋白
SEQ ID No.18:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼聚球藻屬種HPPD的核酸序列
SEQ ID No.19:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼日本赭纖蟲HPPD的核酸序列
SEQ ID No.20:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼紅球菌屬種（菌株RHA1），分離株ro0341HPPD的核酸序列
SEQ ID No.21:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼紅球菌屬種（菌株RHA1），分離株ro0240HPPD的核酸序列
SEQ ID No.22:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼嗜苦古菌HPPD的核酸序列
SEQ ID No.23:為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌HPPD的核酸序列
SEQ ID No 24編碼在第335位突變（突變Glu=>Pro）和在第336位突變（突變Gly=>Trp）的熒光假單胞菌HPPD（PfHPPD-Evo33）的核酸序列
SEQ ID No 25SEQ ID No 24編碼的蛋白
SEQ ID No 26編碼在第335位突變（突變Glu-->Pro），在第336位突變（突變Gly-->Ser）和在第340位突變（突變Ala-->Glu）的熒光假單胞菌HPPD（PfHPPD-Evo40）的核酸序列
SEQ ID No 27SEQ ID No 26編碼的蛋白
SEQ ID No 28編碼在第335位突變（突變Glu-->Pro），在第336位突變（突變Gly-->Trp），在第339位突變（突變Lys-->Ala）和在第340位突變（突變Ala-->Gln）的熒光假單胞菌HPPD（PfHPPD-Evo41）的核酸序列
SEQ ID No 29SEQ ID No 28編碼的蛋白
SEQ ID No 30編碼睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)Axmi428H HPPD的核酸序列
SEQ ID No 31SEQ ID No 30編碼的蛋白
SEQ ID No 32在第351位突變（突變Glu-->Pro），在第352位突變（突變Gly-->Ser）和在第356位突變（突變Ala-->Glu）的睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)Axmi428H HPPD的蛋白序列（Axmi428-Evo40）
SEQ ID No 33在第351位突變（突變Glu-->Pro），在第352位突變（突變Gly-->Trp），在第355位突變（突變Lys-->Ala）和在第356位突變（突變Ala-->Gln）的睪丸酮假單胞菌(=叢毛單胞菌)Axmi428H HPPD的蛋白序列（Axmi428-Evo41）
SEQ ID No 34編碼傘菊假單胞菌Axmi309H HPPD的核酸序列
SEQ ID No 35SEQ ID No 34編碼的蛋白
SEQ ID No 36在第335位突變（突變Glu-->Pro），在第336位突變（突變Gly-->Ser）和在第340位突變（突變Ala-->Glu）的傘菊假單胞菌Axmi309H HPPD的蛋白序列（Axmi309-Evo40）
SEQ ID No 37在第335位突變（突變Glu-->Pro），在第336位突變（突變Gly-->Trp），在第339位突變（突變Lys-->Ala）和在第340位突變（突變Ala-->Gln）的傘菊假單胞菌Axmi309H HPPD的蛋白序列（Axmi309-Evo41）
SEQ ID No 38編碼綠膿假單胞菌Axmi305H HPPD的核酸序列
SEQ ID No 39SEQ ID No 38編碼的蛋白
SEQ ID No 40在第337位突變（突變Glu-->Pro），在第338位突變（突變Gly-->Ser）和在第342位突變（突變Ala-->Glu）的綠膿假單胞菌Axmi305H的蛋白序列（Axmi305-Evo40）
SEQ ID No 41在第337位突變（突變Glu-->Pro），在第338位突變（突變Gly-->Trp），在第341位突變（突變Lys-->Ala）和在第342位突變（突變Ala-->Gln）綠膿假單胞菌Axmi305H的蛋白序列（Axmi305-Evo41）
SEQ ID No 42燕麥編碼的HPPD蛋白
SEQ ID No 43在SEQ ID No 42的第109位缺失的HPPD蛋白（燕麥ΔA109）
SEQ ID No 44玉米編碼的HPPD蛋白
SEQ ID No 45編碼熒光假單胞菌HPPD（PfHPPD）的核酸
SEQ ID No 46SEQ ID No 45編碼的蛋白
實施例
A.燕麥屬HPPD的克隆（根據(jù)WO02/46387）
A1-用于在大腸桿菌細胞中表達的克隆
使用為在大腸桿菌細胞中進行基因表達而優(yōu)化的密碼子用法（usage）在GeneArt（雷根斯堡，德國）訂購編碼燕麥HPPD（AvHPPD;SEQ ID No.1）的cDNA。在起始密碼子ATG的上游加入對應(yīng)于限制性酶BamHI的識別位點的序列，并在終止密碼子的下游加入對應(yīng)于酶HindIII的識別位點的延伸序列。使用限制性酶BamHI和HindIII將合成的片段克隆到之前切開的載體pET32a（Novagen，達姆施塔特，德國）中，以獲得融合體，載體中的HisTag位于AvHPPD蛋白（SEQ ID No.2）的N-末端。所得載體稱為pET32a-AvHPPDe。
大腸桿菌中產(chǎn)生所述蛋白質(zhì)并按照標準方案（如WO2009/144097所述）進行分離。
B PfHPPD-G336W的克隆
B1-用于在大腸桿菌細胞中表達的PfHPPD-G336W的克隆
將在質(zhì)粒pKK233-2（Clontech）（US 6245968）中的編碼來自熒光假單胞菌的突變HPPD G336W（SEQ ID No.3）（US 6,245,968）的基因用作PCR的模板，以在其5’端的序列增加對應(yīng)于酶NcoI的識別位點的序列并在其3’端的序列增加對應(yīng)于酶XbaI的識別位點的序列（參見WO 2009/144079）。進行這種克隆以獲得位于假單胞菌HPPD G336W的N-末端的His tag融合蛋白，也稱為PfW336或PfG336W或PfHPPDW336（SEQ ID No.4），其被稱為“pSE420(RI)NX-PfG336W”。
B2-用于在植物中表達的PfHPPD-G336W的克隆
例如，通過CaMV35啟動子驅(qū)動基因PfHPPD-G336W（SEQID No 5）的表達，通過對密碼子用法進行優(yōu)化以在雙子葉植物中表達，構(gòu)建用于煙草或大豆轉(zhuǎn)化的雙元載體，并且在所述雙元載體的5’端增加編碼OTP的序列以及在上游的序列TEV（煙草蝕刻病毒）以提高mRNA在植物中的穩(wěn)定性，之后是CaMV35S終止子。此外，所述轉(zhuǎn)化載體還含有PAT基因盒（其中，基因被CaVM35S啟動子驅(qū)動，以及之后是CaMV35S終止子），用于轉(zhuǎn)化過程中基于草銨膦的選擇，以及含有2mEPSPS基因盒（其中基因被來自擬南芥屬的組蛋白啟動子驅(qū)動），以向經(jīng)轉(zhuǎn)化的植物賦予對除草劑草甘膦的耐受性。所述雙元載體被稱為pFCO117。
所有其他突變的假單孢桿菌基因和根據(jù)本發(fā)明的其他生物獲得的基因可以通過類似于上述方法的方法進行克隆。
B3–用于將HPPD基因克隆進植物表達盒的其他方法
對于本文記載的各HPPD基因，通過PCR從全長DNA模板擴增開放閱讀框（ORF）。在PCR的過程中將Hind III限制性位點添加至各ORF的末端。此外，將核酸序列ACC加到緊靠基因的起始密碼子的5’端以提高翻譯效率（Kozak(1987)Nucleic Acids Research 15:8125-8148;Joshi(1987)Nucleic Acids Research 15:6643-6653）。使用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)克隆PCR產(chǎn)物并進行測序以確保在PCR過程中沒有引入突變。
使用Hind III消化含有PCR產(chǎn)物的質(zhì)粒并分離含有完整ORF的片段。將該片段克隆到質(zhì)粒（例如pAX200，含有稻肌動蛋白啟動子（McElroy et al.(1991)Molec.Gen.Genet.231:150-160）和PinII終止子（An et al.(1989)The Plant Cell 1:115-122）的植物表達載體）的Hind III位點。然后將來自該中間質(zhì)粒的啟動子-基因-終止子片段亞克隆到質(zhì)粒pSB11（日本煙草公司）中以形成最終基于pSB11的質(zhì)粒。這些基于pSB11的質(zhì)粒具有通常的結(jié)構(gòu)，從而可使用限制性酶（如Kpn I和Pme I）經(jīng)雙酶消化切下含有啟動子-基因-終止子構(gòu)建體的DNA片段并通過氣溶膠束注入（aerosol beam injection）將其轉(zhuǎn)化到植物中。通過限制酶切消化和凝膠電泳，并通過跨越各克隆接點（junction）進行測序證實了所得基于pSB11的克隆的結(jié)構(gòu)。
使用本領(lǐng)域熟知的三親本雜交方法將質(zhì)粒轉(zhuǎn)移至還包含質(zhì)粒pSB1（日本煙草公司）的根癌農(nóng)桿菌菌株LBA4404，并接種到含有壯觀霉素（Agrobacterium）的培養(yǎng)基上?；趐SB11的質(zhì)?？寺【哂袎延^霉素抗性但為窄宿主范圍質(zhì)粒并且不能在農(nóng)桿菌屬（Agrobacterium）中進行復(fù)制。當通過同源重組將基于pSB11的質(zhì)粒整合到寬宿主范圍質(zhì)粒pSB1中時，出現(xiàn)了壯觀霉素抗性菌落。通過Southern雜交確認基于pSB1和pSB11的質(zhì)粒的共合體產(chǎn)物。通過本領(lǐng)域已知的方法（例如PureIntro法（日本煙草））將具有共合體的農(nóng)桿菌屬菌株用于轉(zhuǎn)化玉米。
C多種HPPD酶的突變
C1-第一代點突變（如PCT/US2013/59598中詳細描述的）
將Pfw336突變體進一步在多個位置進行誘變處理。使用lightning試劑盒進行這些位置的隨機化。文庫的理論多樣性為約300。合并突變體并轉(zhuǎn)化進DH5α大腸桿菌細胞。針對HPPD抑制劑環(huán)磺酮（TBT）的耐受性篩選600個單個克隆。使所述克隆在37℃于搖瓶中的LB培養(yǎng)基+卡那霉素中生長，直至OD600nm達到0.3。然后將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)換到30℃并繼續(xù)孵育17小時。將培養(yǎng)物離心沉降并將細胞沉淀重新懸浮于10mM Hepes/KOH（pH為7.6）、4mM MgCl2、1mM DTT中。通過波珠擊打法（bead beating）將細胞裂解并在離心后獲得可溶性細胞提取物。
使用棕色測定法分析突變體。具體而言，通過滴在含有LB-瓊脂、卡那霉素、5mM酪氨酸、42mM琥珀酸和HPPD抑制劑的固體培養(yǎng)基上為HPPD抑制劑耐受性設(shè)計的96孔板中測定HPPD提取物。在初步篩選中，以一式三份將20μL的提取物滴在含有250μM環(huán)磺酮的平板上。將平板覆蓋透氣膠帶并在37℃下孵育。在24小時后，與含有PfHPPD336W的樣品相比，可看到棕色色素形成。針對異噁唑草酮（isoxaflutole）（IFT）的250μM TBT和250μM二酮腈（DKN）活性化合物，重新測定在TBT存在的情況下顯示增加的色素形成的變體。再次顯示增強的抑制劑耐受性的那些變體再次被表達，針對250μM TBT和250μM DKN滴定提取物，以測定增強的程度。還通過SDS-PAGE分析提取物樣品并發(fā)現(xiàn)提取物含有等量的HPPD蛋白。
C2-第二代排列（permutational）文庫（如PCT/US2013/59598中詳細描述的）
分析性能最佳的第一代變體的序列，在結(jié)合位置335、336、339、340的區(qū)域中產(chǎn)生排列文庫。如以上C1所述進行篩選。與PfHPPD336W相比，以下滴定數(shù)據(jù)顯示變體PfHPPDEvo40對TBT和DKN具有提高的耐受性。進行SDS-PAGE分析，顯示出變體之間的HPPD表達水平無差異。
還通過將表達HPPD的完整大腸桿菌細胞涂在含有各HPPD抑制劑的培養(yǎng)基上來測試變體。對于這些實驗，使含有HPPD表達質(zhì)粒的DH5α細胞生長在LB培養(yǎng)基+卡那霉素中直至達到OD600nm＝0.5。在LB培養(yǎng)基+卡那霉素中制備細胞的連續(xù)稀釋物，其對應(yīng)于0.016、0.008、0.004和0.002的OD600值。將各10微升的稀釋物以一式三份涂在不含HPPD抑制劑，含有250μM TBT、250μM DKN和250μM硝磺草酮（MST）的平板上。將平板在37℃孵育18小時。進行SDS-PAGE分析，所述分析顯示變體之間的HPPD表達水平無差異。
C3-熒光假單胞菌HPPD突變體G336W（Pfw336）的制備和HPPD酶的動力學(xué)表征
首先將天然熒光假單胞菌HPPD核苷酸序列（PfHPPD、1077bp，如WO2009144079所述）（其編碼本文中所列出的SEQ ID No 45的氨基酸序列，以及如WO2009144079、WO 96/38567和Rüetschi等人（Eur.J.Biochem.,205,459-466,1992）所述的氨基酸序列）克隆進提供起始密碼子的表達載體pKK233-2（Pharmacia）的唯一NcoI位點。
在5’末端，緊接ATG的下游，插入編碼丙氨酸的核酸序列和編碼N末端HIS6-Tag的核酸序列。在ATG上游，增加兩個額外的半胱氨酸堿基對以獲得對應(yīng)于限制性酶NcoI的識別位點的序列，并且在終止密碼子的下游增加對應(yīng)于限制性酶XbaI的識別位點的序列。用限制性酶NcoI和XbaI切割對應(yīng)于該基因的DNA序列（包括編碼HIS-TAG的序列），隨后將其克隆進經(jīng)修飾的表達載體pSE420(RI)NX（5261bp）。
克隆和表達載體pSE420(RI)NX（5261bp）基于由Invitrogen（Karlsruhe，德國）生產(chǎn)的質(zhì)粒pSE420。該載體的修飾包括添加賦予對抗生素卡那霉素的耐受性并且在大多數(shù)超級接頭區(qū)域（superlinker region）（多克隆位點）中缺失的nptII基因（新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶；Sambrook和Russell,2001,Molecular Cloning:a laboratory manual（第3版））。
該質(zhì)粒具有trp-lac(trc)啟動子和在每個大腸桿菌宿主菌株中提供lac阻遏物的lacIq基因。Lac阻遏物結(jié)合lac操縱子（lacO）并限制目標基因的表達；該抑制可通過利用異丙基β-D-1-半乳糖硫吡喃糖苷（IPTG）的誘導(dǎo)來緩解。
所得的載體稱為pSE420(RI)NX-PfHPPD，并且其用于轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21細胞（Merck，Darmstadt，德國）。
在含有pSE420(RI)NX-PfHPPD或pSE420(RI)NX-Pfw336的大腸桿菌K-12BL21中進行HPPD的表達（詳細內(nèi)容參見上文B1）。讓細胞生長直至OD達到0.5，隨后通過用1mM IPTG誘導(dǎo)從trp-lac(trc)啟動子起始表達，所述IPTG結(jié)合至lac阻遏物并使其從lac操縱子解離。在28℃進行表達15小時以上。
為制備起始前培養(yǎng)物（pre-starter culture），用50μL大腸桿菌K-12BL21甘油原液接種2mL的TB培養(yǎng)基（100μg*mL-1羧芐青霉素）。在以140rpm振蕩下將所述起始前培養(yǎng)物于37℃培養(yǎng)15小時。將200μL起始前培養(yǎng)物用于啟動起始培養(yǎng)物（5mL補充有100μg*L-1的TB)，其在37℃培養(yǎng)3小時。
為制備主要培養(yǎng)物，用4mL起始培養(yǎng)物接種400mL的TB培養(yǎng)基（100μg*mL-1羧芐青霉素）。在140rpm振蕩下將該起始培養(yǎng)物在37℃下培養(yǎng)直至達到OD600為0.5。隨后用400μL的1M IPTG溶液誘導(dǎo)重組蛋白表達。讓細胞在這些條件下再生長1小時，隨后將溫度降至28℃，在140rpm振蕩培養(yǎng)物15小時。在4℃以6000x g離心15分鐘來收獲細胞。隨后將細胞沉淀在-80℃下貯存。
D-HPPD蛋白在大腸桿菌中的產(chǎn)生，通過His-Tag純化
將所有上文定義的大腸桿菌表達載體用于轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21細胞（Merck，Darmstadt，德國）。
在含有pQE30-AtHPPD、pET32a-AvHPPDe、pSE420(RI)NX-Pfw336、pSE420(RI)NX-FMP27（參見WO2011/076889）或pSE420(RI)NX-FMP37（參見WO2011/076882）的大腸桿菌K-12BL21中進行HPPD的表達。讓細胞生長直至OD達到0.5，隨后通過用1mM IPTG誘導(dǎo)從trp-lac(trc)啟動子起始表達，所述IPTG結(jié)合至lac阻遏物并使其從lac操縱子解離。表達在28℃進行15小時以上。
為制備起始前培養(yǎng)物，用50μL大腸桿菌K-12BL21甘油原液接種2mL的TB培養(yǎng)基（100μg*mL-1羧芐青霉素）。在140rpm振蕩條件下將起始前培養(yǎng)物于37℃培養(yǎng)15小時。將200μL的起始前培養(yǎng)物用于啟動起始培養(yǎng)物（5mL補充有100μg*L-1的TB)，其在37℃培養(yǎng)3小時。
為制備主要培養(yǎng)物，用4mL起始培養(yǎng)物接種400mL的TB培養(yǎng)基（100μg*mL-1羧芐青霉素）。在140rpm振蕩下將該起始培養(yǎng)物于37℃下培養(yǎng)直至達到OD600為0.5。隨后用400μL的1M IPTG溶液誘導(dǎo)重組蛋白表達。讓細胞在這些條件下再生長1小時，隨后將溫度降至28℃，在140rpm下振蕩培養(yǎng)物15小時。通過在4℃以6000x g離心15分鐘來收獲細胞。隨后將細胞沉淀在-80℃下貯存。
D1-在天然形式的細胞裂解中分離和純化His6-標記的HPPD
使用裂解酶（切割形成細菌細胞壁的肽聚糖中N-乙?；谒岷蚇-乙?；?D-葡糖胺殘基之間的1,4-β-鍵的酶）裂解細胞。然后通過細菌細胞的內(nèi)部壓力破壞細胞膜。此外，裂解緩沖液含有核酸酶，這是水解所有形式的DNA和RNA但是不損害蛋白質(zhì)由此能大大降低細胞裂解液粘度的內(nèi)切核酸酶。自然條件下的裂解在冰上進行。
為純化His6-標記的蛋白，按照用戶操作說明書使用Ni-NTAFast Start試劑盒。
D2-通過固定的金屬離子親和色譜法（IMAC）來純化His6-標記的蛋白
將對裂解反應(yīng)進行離心之后獲得的澄清的細胞裂解液（10mL）上樣到Ni-NTA Fast Start柱（來自Ni-NTA Fast Start試劑盒（Qiagen，Hilden，德國））上，按照操作說明書進行純化。用2.5mL洗脫緩沖液來洗脫His6-標記的蛋白質(zhì)。
D3-通過凝膠過濾對HPPD溶液脫鹽
按照用戶操作說明書，將用2.5mL洗脫緩沖液從Ni-NTA Fast Start柱上洗脫的HPPD溶液應(yīng)用到Sephadex G-25PD-10柱（GE Healthcare，F(xiàn)reiburg，德國）上。在全部樣品都進入凝膠床之后，用3.5mL貯藏緩沖液進行洗脫。
將從脫鹽柱上洗脫的HPPD溶液以1mL等分試樣在-80℃冷凍。
D4-使用Bradford蛋白質(zhì)試驗測定HPPD蛋白濃度
使用標準Bradford試驗（Bradford，(1976)，Anal Biochem 72：248-254）來測定蛋白質(zhì)濃度。
D5-使用SDS-PAGE測定HPPD溶液的純度
使用凝膠Novex 4-12%Bis-Tris Gels（Invitrogen，Karlsruhe，德國），通過SDS-PAGE蛋白質(zhì)凝膠電泳來檢查洗脫的蛋白質(zhì)的完整性，大約10μg蛋白質(zhì)被上樣。向1-10μL蛋白質(zhì)溶液中加入10μL Laemmli樣品緩沖液，在90℃孵育混合物10分鐘。在短暫的離心步驟之后，將全部混合物上樣至之前固定于XCell SureLockTM Novex Mini-Cell凝膠室（填裝有MOPS SDS跑膠緩沖液（用ddH2O從20x溶液稀釋的））中的SDS凝膠的上樣孔中。然后向凝膠室施加150伏的電壓，持續(xù)1小時。為對蛋白質(zhì)條帶進行染色，將凝膠浸入考馬斯亮藍R-250染色溶液中。為對聚丙烯酰胺凝膠進行脫色，將其浸入考馬斯亮藍R-250脫色溶液中，直到蛋白質(zhì)條帶在白色凝膠上呈現(xiàn)為藍色。
E-在N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺存在下測定HPPD活性
在室溫下，通過向總體積為1mL的200mM Tris-HCl pH 7.6、10mM抗壞血酸、20μM FeSO4、650個單位的過氧化氫酶、8μg HGA雙加氫酶（HGA：尿黑酸）和600μM HPP的溶液中加入適量的HPPD來測定HPPD活性。在不存在抑制劑或存在抑制劑的情況下，由于形成馬來酰乙酰乙酸，通過在318nm處吸光度的增加來測定起始反應(yīng)速率（ε318=11,900M-1cm-1）。使用ID Business Solutions Ltd.XLfit軟件套件的4參數(shù)邏輯模型或反曲（Sigmoidal）劑量-響應(yīng)模型，由HPPD活性相對于測試的抑制劑濃度（0.1至100μM）的劑量響應(yīng)曲線來測定pI50值（以摩爾濃度表示的抑制50%的酶活性所需的抑制劑的濃度的負對數(shù)值）。由于測試了HPPD抑制劑的UV吸光度，則不能測試抑制劑的濃度>100μM。如果使用符號“>”，這表示值遠高于所示的值但不能在測試的抑制劑的濃度范圍內(nèi)被精確地計算。
所有結(jié)果示于表8中。
在表8的第1列中，命名了試驗中所用的化合物（根據(jù)上述表1至7的數(shù)目）。在第2、3、4和5列中，示出抗各HPPD酶的相應(yīng)化合物的pI50值（分別示出名稱和SEQ ID序號）。
表8
這些數(shù)據(jù)顯示源于各生物的HPPD顯示出對多種N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺可接受的耐受性。
F–轉(zhuǎn)基因植物表達HPPD編碼基因的突變DNA序列來評估大豆轉(zhuǎn)化和除草劑耐受性
F1-大豆轉(zhuǎn)化和T0植物建立
通過使用本領(lǐng)域公知的方法通過最佳模式，如使用基本上由Paz et al.(2006),Plant cell Rep.25:206描述的方法，使用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化大豆半種子外植體的方法來實現(xiàn)大豆轉(zhuǎn)化。使用各種HPPD抑制劑（環(huán)磺酮或異氟草）作為選擇標記來鑒定轉(zhuǎn)化體?？捎^察到綠芽的出現(xiàn)，將其記錄為對各除草劑的耐受性的指標。耐受性轉(zhuǎn)基因芽表現(xiàn)出與未用各HPPD抑制劑處理的野生型大豆芽相當?shù)恼＾D(zhuǎn)綠，然而用相同量的各HPPD抑制劑處理的野生型大豆芽將完全褪色。這表明HPPD蛋白的存在使得能夠產(chǎn)生對HPPD抑制劑除草劑的耐受性。
將耐受性綠芽轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基或嫁接。在適應(yīng)環(huán)境一段時間后將生根的小植物轉(zhuǎn)移至溫室。然后用HPPD抑制劑除草劑（例如，用以100至200g AI/ha的速度補充硫酸銨和菜籽油甲酯的環(huán)磺酮或用以100至400g AI/ha的速度補充硫酸銨和菜籽油甲酯的甲基磺草酮）對含有轉(zhuǎn)基因的植物進行噴霧。噴霧施用10天后，評估因施用除草劑而導(dǎo)致的癥狀，將其與對在相同條件下在野生型植物觀察到的癥狀相比較。根據(jù)上述獲得的耐受性T0大豆植物產(chǎn)生T1代。
F2-轉(zhuǎn)基因大豆T2植物的溫室試驗
在此項除草劑功效測試中，建立的T2植物含有表達載體，其包含至少一種嵌合基因，所述嵌合基因編碼PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中并以SEQ ID No.25公開于本申請中），或在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->S(Ser)置換以及在第340位包含A(Ala)->E(Glu)置換（稱為PfHPPDEvo40且以SEQ ID No:8公開于PCT/US2013/59598中并以SEQ ID No.27公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中并以SEQ ID No.29公開于本申請中），或表達專利WO99/24585中所述的熒光假單胞菌HPPD蛋白PfHPPD-G336W的變體。
T2事件發(fā)芽并且生長于溫室中，以及在大豆發(fā)育的V2-V3階段使用一種示例性的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺的劑型WP20（濃度范圍6.25g AI/ha-75g AI/ha）（補充有硫酸銨和甲基化菜籽油（Actirob））進行噴霧。
作為噴霧對照，已使用不含除草劑的噴霧混合物對野生型大豆（Merlin和Thorne）和上述轉(zhuǎn)基因T2大豆植物進行噴霧。在處理后14天（DAT），對試驗中的所有植物的除草劑耐受性進行評估。用以下除草劑耐受性分類對植物進行定義：“0”=微弱耐受性；損傷的葉面積為41%-100%；“1”=中等耐受性；損傷的葉面積為26%-40%；“2”=良好的耐受性；損傷的葉面積為16%-25%；“3”=高耐受性；損傷的葉面積為小于或等于15%。
表9
評估來自表達熒光假單胞菌HPPD蛋白PfHPPD-G336W(WO99/24585)、或PfHPPD-Evo33、或PfHPPD-Evo40、或PfHPPD-Evo41（PCT/US2013/59598）的變體的T2大豆轉(zhuǎn)基因事件相對于野生型（wt）大豆植物（Merlin和Thorne）的HPPD抑制劑耐受性。使用最終濃度為6.25、25、50或75g AI/ha的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺（化合物“2-145”；表2）處理植物。在處理14天后對除草劑耐受性進行評分。作為對照，使用不含除草劑的噴霧混合物處理野生型大豆和轉(zhuǎn)基因大豆T2植物。所有這些對照植物沒有顯示出褪色的葉面積。定義以下的葉面積損傷分類以用于除草劑耐受性評分：“0”=微弱耐受性；損傷的葉面積為41%-100%；“1”=中等耐受性；損傷的葉面積為26%-40%；“2”=良好的耐受性；損傷的葉面積為16%-25%；“3”=高耐受性；損傷的葉面積為小于或等于15%。
與幾種事件對農(nóng)學(xué)相關(guān)水平的示例性的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺的耐受性的對照相比，表達HPPD編碼基因的突變DNA序列的轉(zhuǎn)基因T2大豆植物具有優(yōu)異的耐受性。
G–表達HPPD編碼基因的突變DNA序列的轉(zhuǎn)基因植物的棉花轉(zhuǎn)化、選擇和除草劑耐受性評估
G1-棉花轉(zhuǎn)化和T0植物建立
使用本領(lǐng)域公知的方法，尤其是記載于PCT專利公開WO 00/71733中的方法中的優(yōu)選方法來實現(xiàn)棉花轉(zhuǎn)化。將再生植物轉(zhuǎn)移至溫室。在適應(yīng)環(huán)境一段時間后，用HPPD抑制劑除草劑（例如，補充以硫酸銨和菜籽油甲酯的相當于100g AI/ha的環(huán)磺酮或相當于100至200g AI/ha的甲基磺草酮）對充分生長的植物進行噴霧。噴霧施用7天后，評估因使用除草劑處理而導(dǎo)致的癥狀，將其與對在相同條件下進行相同處理的野生型棉花植物觀察到的癥狀相比較。對獲得的耐受性T0植物加以選擇并產(chǎn)生T1代。
G2–T3轉(zhuǎn)基因棉花植物的HPPD抑制劑耐受性的田間研究
為了在田間條件下進一步測試產(chǎn)生的HPPD耐受性棉花植物的性質(zhì)，在兩個位置進行研究。
特別地，對幾個獨立事件含有棉花最優(yōu)植物表達盒進行分析，所述表達盒包含且表達至少一種嵌合基因，所述嵌合基因編碼PCT/US2013/59598中所述的突變DNA序列，更具體而言為熒光假單胞菌HPPD蛋白的突變序列，所述突變序列(i)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換以及在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換（稱為PfHPPDEvo33且以SEQ ID No:6公開于PCT/US2013/59598中并以SEQ ID No.25公開于本申請中），或(iii)在第335位包含E(Glu)->P(Pro)置換、在第336位包含G(Gly)->W(Trp)置換、在第339位包含K(Lys)->A(Ala)置換以及在第340位包含A(Ala)->Q(Gln)置換（稱為PfHPPDEvo41且以SEQ ID No:16公開于PCT/US2013/59598中并以SEQ ID No.29公開于本申請中），或表達專利WO99/24585中所述的熒光假單胞菌HPPD蛋白PfHPPD-G336W的變體。
將研究設(shè)計成如下且為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的：用非選擇性除草劑的種前（pre-planting）處理使區(qū)域無雜草。對照行與非轉(zhuǎn)基因棉花品種“Cocker”和各轉(zhuǎn)基因棉花事件（其用不含不同除草劑的噴霧混合物進行處理）組合。棉花植物在V3階段用除草劑進行處理。建立并進行至多三次復(fù)制以及平均最大植物毒性匯總于表10中。
用最終濃度為200g AI/ha的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺化合物“2-145”進行萌發(fā)后施用并在14天后進行評分（表10）。
對照處理未顯示出褪色的葉面積。品種“Cocker”顯示至少87%和至多98%的葉損傷。根據(jù)可見除草劑耐受性評分對以下葉面積損傷（植物毒性）分類進行定義：
·“0”=微弱耐受性/農(nóng)學(xué)非相關(guān)耐受性；損傷的葉面積為大于20%；
·“1”=中等耐受性/農(nóng)學(xué)非相關(guān)耐受性；損傷的葉面積為16%-20%；
·“2”=良好的耐受性；損傷的葉面積為大于10%且至多為15%；
·“3”=高耐受性；損傷的葉面積為小于或等于10%。
表10
評估來自表達熒光假單胞菌HPPD蛋白PfHPPD-G336W（WO99/24585)、或PfHPPD-Evo33、或PfHPPD-Evo41（PCT/US2013/59598）的變體的T3棉花轉(zhuǎn)基因事件的HPPD抑制劑耐受性。對照品種“Cocker”顯示在所有處理條件下在至多98%時至少87%葉損傷。結(jié)果示出使用最終濃度為200g AI/ha的N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺化合物“2-145”（表2）處理的植物。在生長階段V3（萌發(fā)后）在萌發(fā)后處理植物并在14天后進行評分。
作為對照，非轉(zhuǎn)基因和轉(zhuǎn)基因棉花植物一直用不含除草劑的噴霧混合物進行處理。所有這些對照植物未顯示出褪色的葉面積。對以下葉面積損傷（植物毒性）分類進行定義以進行除草劑耐受性評分：“0”=微弱耐受性；損傷的葉面積>20%；“1”=中等的耐受性；損傷的葉面積為16%-20%；“2”=良好的耐受性；損傷的葉面積為11%-15%；“3”=高的耐受性；損傷的葉面積為0%-10%。
大多數(shù)表達HPPD編碼基因的變體的轉(zhuǎn)基因棉花植物具有抗N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺的農(nóng)學(xué)相關(guān)耐受性水平。這些田間研究首次示出，可通過過表達目的作物中的突變的HPPD編碼基因而產(chǎn)生對N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺具有耐受性的作物植物。
H-通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化進行的玉米植物細胞轉(zhuǎn)化
最好在授粉后的8-12天收集穗。從穗分離胚，以及優(yōu)選大小為0.8-1.5mm的那些胚用于轉(zhuǎn)化。將胚以角質(zhì)鱗片側(cè)向上鋪在合適的培養(yǎng)基上，以及在25℃在黑暗中過夜培養(yǎng)。
然而，本質(zhì)上沒有必要過夜培養(yǎng)胚。將胚與包含具有本發(fā)明的核酸序列的合適載體的土壤桿菌菌株接觸，以Ti質(zhì)粒介導(dǎo)轉(zhuǎn)化約5-10分鐘，然后鋪在共培養(yǎng)基上約3天（黑暗中25℃）。在共培養(yǎng)之后，將外植體轉(zhuǎn)移至恢復(fù)期培養(yǎng)基約5天（黑暗中25℃）。根據(jù)特定使用的選擇的性質(zhì)和特性，將外植體在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)最多8周。在選擇期之后，將所得愈傷組織轉(zhuǎn)移至胚胎成熟培養(yǎng)基上，直至觀察到成熟體細胞胚的形成。然后將所得成熟體細胞胚置于弱光下，以及根據(jù)本領(lǐng)域已知的最佳模式啟動再生過程。讓所得芽在生根培養(yǎng)基上生根，以及將所得芽轉(zhuǎn)移至育盆并作為轉(zhuǎn)基因植物進行繁殖。
說明書中提到的所有出版物和專利申請都表示關(guān)于本發(fā)明的所屬領(lǐng)域技術(shù)人員的技術(shù)水平。通過引用將所有出版物和專利申請納入本文，其程度就如同指明通過引用將各個出版物或?qū)＠暾執(zhí)貏e并單獨地納入。
盡管本發(fā)明通過舉例和實施例進行詳述以理解清楚，但顯然可在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)作一些改變和修飾。
序列表
<110> 拜耳作物科學(xué)股份公司
<120> N-(1,3,4-噁二唑-2-基)芳基甲酰胺或其鹽
在耐受HPPD抑制劑除草劑的轉(zhuǎn)基因作物植物
的區(qū)域中防治不想要的植物的用途
<130> BCS141011
<160> 46
<170> 專利版本3.5
<210> 1
<211> 1323
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大腸桿菌細胞中表達而優(yōu)化的編碼燕麥HPPD的核酸序列
<400> 1
atgcctccga caccggcaac agcaaccggt gcagcagcag cagccgttac accggaacat 60
gcagcacgta gctttccgcg tgttgttcgt gttaatccgc gtagcgatcg ttttccggtt 120
ctgagctttc atcatgttga actgtggtgt gcagatgcag caagcgcagc aggtcgtttt 180
agctttgcac tgggtgcacc tctggcagca cgttctgatc tgagcaccgg taatagcgca 240
catgcaagcc tgctgctgcg tagcggtgca ctggcatttc tgtttaccgc tccgtatgca 300
cctcctccgc aggaagcagc aaccgcagcc gcaaccgcaa gcattccgag ctttagcgca 360
gatgcagccc gtacctttgc agcagcacat ggcctggcag ttcgtagcgt tggtgttcgt 420
gttgcagatg ccgcagaagc atttcgcgtt agcgttgcgg gaggtgcacg tcctgcattt 480
gcaccggcag atctgggtca tggttttggt ctggcagaag ttgaactgta cggcgatgtt 540
gttctgcgtt ttgttagcta tccggatgaa accgatctgc cgtttctgcc tggttttgaa 600
cgtgttagct ctccgggtgc agttgattat ggtctgaccc gttttgatca tgttgttggc 660
aatgttccgg aaatggcacc ggttattgat tatatgaaag gctttctggg ctttcatgaa 720
tttgcagaat ttaccgcaga agatgttggc accaccgaaa gcggtctgaa tagcgttgtt 780
ctggccaata atagcgaagc agttctgctg ccgctgaatg aaccggtgca tggcaccaaa 840
cgtcgtagcc agattcagac ctatctggaa tatcatggtg gtccgggtgt tcagcatatt 900
gcactggcaa gcaatgatgt tctgcgtacc ctgcgtgaaa tgcgtgcacg taccccgatg 960
ggtggttttg aatttatggc acctccgcag gcaaaatatt atgaaggtgt gcgtcgtatt 1020
gccggtgatg ttctgagcga agagcagatt aaagaatgcc aggaactggg cgttctggtt 1080
gatcgtgatg atcagggtgt tctgctgcag atttttacca aaccggttgg tgatcgtccg 1140
accttttttc tggaaatgat tcagcgtatt ggctgcatgg aaaaagatga agtgggtcag 1200
gaatatcaga aaggcggttg tggtggtttt ggtaaaggca attttagcga actgtttaaa 1260
agcattgaag attatgaaaa aagcctggaa gttaaacaga gcgttgttgc ccagaaaagc 1320
taa 1323
<210> 2
<211> 440
<212> PRT
<213> 燕麥
<400> 2
Met Pro Pro Thr Pro Ala Thr Ala Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala Val
1 5 10 15
Thr Pro Glu His Ala Ala Arg Ser Phe Pro Arg Val Val Arg Val Asn
20 25 30
Pro Arg Ser Asp Arg Phe Pro Val Leu Ser Phe His His Val Glu Leu
35 40 45
Trp Cys Ala Asp Ala Ala Ser Ala Ala Gly Arg Phe Ser Phe Ala Leu
50 55 60
Gly Ala Pro Leu Ala Ala Arg Ser Asp Leu Ser Thr Gly Asn Ser Ala
65 70 75 80
His Ala Ser Leu Leu Leu Arg Ser Gly Ala Leu Ala Phe Leu Phe Thr
85 90 95
Ala Pro Tyr Ala Pro Pro Pro Gln Glu Ala Ala Thr Ala Ala Ala Thr
100 105 110
Ala Ser Ile Pro Ser Phe Ser Ala Asp Ala Ala Arg Thr Phe Ala Ala
115 120 125
Ala His Gly Leu Ala Val Arg Ser Val Gly Val Arg Val Ala Asp Ala
130 135 140
Ala Glu Ala Phe Arg Val Ser Val Ala Gly Gly Ala Arg Pro Ala Phe
145 150 155 160
Ala Pro Ala Asp Leu Gly His Gly Phe Gly Leu Ala Glu Val Glu Leu
165 170 175
Tyr Gly Asp Val Val Leu Arg Phe Val Ser Tyr Pro Asp Glu Thr Asp
180 185 190
Leu Pro Phe Leu Pro Gly Phe Glu Arg Val Ser Ser Pro Gly Ala Val
195 200 205
Asp Tyr Gly Leu Thr Arg Phe Asp His Val Val Gly Asn Val Pro Glu
210 215 220
Met Ala Pro Val Ile Asp Tyr Met Lys Gly Phe Leu Gly Phe His Glu
225 230 235 240
Phe Ala Glu Phe Thr Ala Glu Asp Val Gly Thr Thr Glu Ser Gly Leu
245 250 255
Asn Ser Val Val Leu Ala Asn Asn Ser Glu Ala Val Leu Leu Pro Leu
260 265 270
Asn Glu Pro Val His Gly Thr Lys Arg Arg Ser Gln Ile Gln Thr Tyr
275 280 285
Leu Glu Tyr His Gly Gly Pro Gly Val Gln His Ile Ala Leu Ala Ser
290 295 300
Asn Asp Val Leu Arg Thr Leu Arg Glu Met Arg Ala Arg Thr Pro Met
305 310 315 320
Gly Gly Phe Glu Phe Met Ala Pro Pro Gln Ala Lys Tyr Tyr Glu Gly
325 330 335
Val Arg Arg Ile Ala Gly Asp Val Leu Ser Glu Glu Gln Ile Lys Glu
340 345 350
Cys Gln Glu Leu Gly Val Leu Val Asp Arg Asp Asp Gln Gly Val Leu
355 360 365
Leu Gln Ile Phe Thr Lys Pro Val Gly Asp Arg Pro Thr Phe Phe Leu
370 375 380
Glu Met Ile Gln Arg Ile Gly Cys Met Glu Lys Asp Glu Val Gly Gln
385 390 395 400
Glu Tyr Gln Lys Gly Gly Cys Gly Gly Phe Gly Lys Gly Asn Phe Ser
405 410 415
Glu Leu Phe Lys Ser Ile Glu Asp Tyr Glu Lys Ser Leu Glu Val Lys
420 425 430
Gln Ser Val Val Ala Gln Lys Ser
435 440
<210> 3
<211> 1077
<212> DNA
<213> 熒光假單胞菌
<220>
<221> misc_feature
<222> (1006)..(1008)
<223> GGT密碼子被密碼子TGG替代
<400> 3
atggcagatc tatacgaaaa cccaatgggc ctgatgggct ttgaattcat cgaattcgcg 60
tcgccgacgc cgggtaccct ggagccgatc ttcgagatca tgggcttcac caaagtcgcg 120
acccaccgtt ccaagaacgt gcacctgtac cgccagggcg agatcaacct gatcctcaac 180
aacgagccca acagcatcgc ctcctacttt gcggccgaac acggcccgtc ggtgtgcggc 240
atggcgttcc gcgtgaagga ctcgcaaaag gcctacaacc gcgccctgga actcggcgcc 300
cagccgatcc atattgacac cgggccgatg gaattgaacc tgccggcgat caagggcatc 360
ggcggcgcgc cgttgtacct gatcgaccgt ttcggcgaag gcagctcgat ctacgacatc 420
gacttcgtgt acctcgaagg tgtggagcgc aatccggtcg gtgcaggtct caaagtcatc 480
gaccacctga cccacaacgt ctatcgcggc cgcatggtct actgggccaa cttctacgag 540
aaattgttca acttccgtga agcgcgttac ttcgatatca agggcgagta caccggcctg 600
acttccaagg ccatgagtgc gccggacggc atgatccgca tcccgctgaa cgaagagtcg 660
tccaagggcg cggggcagat cgaagagttc ctgatgcagt tcaacggcga aggcatccag 720
cacgtggcgt tcctcaccga cgacctggtc aagacctggg acgcgttgaa gaaaatcggc 780
atgcgcttca tgaccgcgcc gccagacact tattacgaaa tgctcgaagg ccgcctgcct 840
gaccacggcg agccggtgga tcaactgcag gcacgcggta tcctgctgga cggatcttcc 900
gtggaaggcg acaaacgcct gctgctgcag atcttctcgg aaaccctgat gggcccggtg 960
ttcttcgaat tcatccagcg caagggcgac gatgggtttg gcgagtggaa cttcaaggcg 1020
ctgttcgagt ccatcgaacg tgaccaggtg cgtcgtggtg tattgaccgc cgattaa 1077
<210> 4
<211> 358
<212> PRT
<213> 熒光假單胞菌
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> Gly被Trp替代
<400> 4
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Glu Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro Asn
50 55 60
Ser Ile Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Asp Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Tyr
130 135 140
Leu Glu Gly Val Glu Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Val Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Val Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ala Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Ser Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Ala Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asp His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ala Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ser Ser Val Glu Gly Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Glu Trp
325 330 335
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Thr Ala Asp
355
<210> 5
<211> 1077
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼在第336位突變（Gly-->Trp）的熒光假單胞菌 HPPD的核酸序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1006)..(1008)
<223> GGT密碼子被密碼子TGG替代
<400> 5
atggctgatc tttatgagaa ccctatgggt cttatgggct tcgagtttat tgagttcgct 60
tctcctaccc ctggtactct tgaacctatt ttcgagatca tgggcttcac taaggttgca 120
actcacaggt ctaagaacgt tcacctttac aggcagggtg agatcaacct tatccttaac 180
aacgagccta actccattgc ttcttatttc gctgctgagc atggtccatc tgtttgcggt 240
atggctttca gagttaagga ttctcagaag gcttacaaca gggctcttga acttggtgct 300
cagcctattc atattgatac cggacctatg gaactcaacc ttcctgctat taagggtatt 360
ggtggtgctc ctctttacct tattgataga ttcggtgagg gctcctccat ctacgatatt 420
gatttcgttt accttgaggg cgttgagaga aaccctgttg gtgctggtct taaggttatc 480
gatcacctta cccacaacgt ttacagaggt aggatggttt actgggctaa cttctacgag 540
aagttgttca acttcagaga ggctcgttac ttcgatatta agggcgagta cactggtctt 600
acctctaagg ctatgtctgc tcctgatggt atgatcagga ttcctcttaa cgaagagtcc 660
tctaagggtg ctggtcaaat tgaagagttc ctcatgcaat tcaacggtga gggtattcag 720
catgttgctt tcttgaccga tgaccttgtt aagacttggg acgctcttaa gaaaatcggc 780
atgcgtttca tgactgctcc tccagatact tactacgaaa tgcttgaggg taggcttcct 840
gatcatggtg aacctgttga tcaacttcag gctaggggta ttcttcttga tggttcttct 900
gttgagggcg ataagaggct tttgcttcag attttctccg agactcttat gggtcctgtg 960
ttcttcgagt tcattcagag aaagggtgat gatggtttcg gtgaatggaa cttcaaggct 1020
cttttcgagt ccattgagag ggatcaagtt agaaggggtg ttcttaccgc tgattaa 1077
<210> 6
<211> 1053
<212> DNA
<213> 聚球藻屬
<400> 6
atgaacccgt ccattcgaat tgtccaaggg atccaccacc tgcacttcta cctttgggat 60
ctgccccgtt ggcgggaaca cttttgtcgg gtttggggct tccgggtggc aagcgacgcc 120
ggcaacaccc tggagctgga gcagggatcc ctgcgcttgc gcctgtctca gccggcacgg 180
gcgggggacg aggtggaccg ccatttgcag cggcatgggc cgggggtggt ggatgtggcc 240
ttggcggtgg gagagcagga gctaccggcc ttggcggagc tgttgcgggg ccgaggcgcc 300
caactggcgt ggatcccggc agcagcggcg ctctgcctcc acacccccta cgggatccgg 360
cattctctga tccctggccc cttggatgcc gcccctgccg aagcgggcct gttttcccac 420
tgggatcacg tggtgttgaa cgtggagcag ggatccctgc aggcggcagc cgactggtat 480
gggcgggtgc tgggctggcg gcggctgtac cgctacagca tcggcaccgc cacctccggc 540
ctggaaagcg tggtggtggg ggatccggaa gcggggatcc aatgggccat caacgagccc 600
acctgtgccg cttcccagat tcaggagttt ttgcatgccc atggcggccc gggcattcag 660
cacgcggcgc tgcacagctc agacattgtt gccagcctgc gccggttgcg gcagggggga 720
gtggactttt tgcaagtggc gccgcagtac tacaccagcc tggaaaggga gctggggttg 780
gcgctccgtt ctgcccttgg gcaggccatc tcctggcaag acctggtgga gcagcagatc 840
cttctggatg ctaccctgcc cgcttctgat ggccaggatc gcccccttct gctgcagacc 900
tttacccagc ccctctttgg tcggcccacc tttttctttg aagtcattca acggctaggc 960
ggggccacgg gctttggcga ggccaatttt caggctttgt tcgaggccct ggaacggcaa 1020
cagcgacagc gacaccaggc gctgacccct tag 1053
<210> 7
<211> 350
<212> PRT
<213> 聚球藻屬
<400> 7
Met Asn Pro Ser Ile Arg Ile Val Gln Gly Ile His His Leu His Phe
1 5 10 15
Tyr Leu Trp Asp Leu Pro Arg Trp Arg Glu His Phe Cys Arg Val Trp
20 25 30
Gly Phe Arg Val Ala Ser Asp Ala Gly Asn Thr Leu Glu Leu Glu Gln
35 40 45
Gly Ser Leu Arg Leu Arg Leu Ser Gln Pro Ala Arg Ala Gly Asp Glu
50 55 60
Val Asp Arg His Leu Gln Arg His Gly Pro Gly Val Val Asp Val Ala
65 70 75 80
Leu Ala Val Gly Glu Gln Glu Leu Pro Ala Leu Ala Glu Leu Leu Arg
85 90 95
Gly Arg Gly Ala Gln Leu Ala Trp Ile Pro Ala Ala Ala Ala Leu Cys
100 105 110
Leu His Thr Pro Tyr Gly Ile Arg His Ser Leu Ile Pro Gly Pro Leu
115 120 125
Asp Ala Ala Pro Ala Glu Ala Gly Leu Phe Ser His Trp Asp His Val
130 135 140
Val Leu Asn Val Glu Gln Gly Ser Leu Gln Ala Ala Ala Asp Trp Tyr
145 150 155 160
Gly Arg Val Leu Gly Trp Arg Arg Leu Tyr Arg Tyr Ser Ile Gly Thr
165 170 175
Ala Thr Ser Gly Leu Glu Ser Val Val Val Gly Asp Pro Glu Ala Gly
180 185 190
Ile Gln Trp Ala Ile Asn Glu Pro Thr Cys Ala Ala Ser Gln Ile Gln
195 200 205
Glu Phe Leu His Ala His Gly Gly Pro Gly Ile Gln His Ala Ala Leu
210 215 220
His Ser Ser Asp Ile Val Ala Ser Leu Arg Arg Leu Arg Gln Gly Gly
225 230 235 240
Val Asp Phe Leu Gln Val Ala Pro Gln Tyr Tyr Thr Ser Leu Glu Arg
245 250 255
Glu Leu Gly Leu Ala Leu Arg Ser Ala Leu Gly Gln Ala Ile Ser Trp
260 265 270
Gln Asp Leu Val Glu Gln Gln Ile Leu Leu Asp Ala Thr Leu Pro Ala
275 280 285
Ser Asp Gly Gln Asp Arg Pro Leu Leu Leu Gln Thr Phe Thr Gln Pro
290 295 300
Leu Phe Gly Arg Pro Thr Phe Phe Phe Glu Val Ile Gln Arg Leu Gly
305 310 315 320
Gly Ala Thr Gly Phe Gly Glu Ala Asn Phe Gln Ala Leu Phe Glu Ala
325 330 335
Leu Glu Arg Gln Gln Arg Gln Arg His Gln Ala Leu Thr Pro
340 345 350
<210> 8
<211> 1149
<212> DNA
<213> 日本赭纖蟲
<400> 8
atgacttatt acgacaagca agaaacgcgt ccagatcttg gcgaattcta tggtttccat 60
cacgttcgtt tttacgtctc caactcagag caagccgctt cgttctacac atctcgcttt 120
gggttttctc cggttgccta tgaaggattg gaaacaggaa accaaaaatt ctgtaccaat 180
gtcgtccgaa gcaaccatgt agtcatcgct tttacctcag ctctcactcc tgaagacaat 240
gaagtgaacc gtcacgttgg caagcatagt gatggagttc aagacattgc ctttagtgta 300
agtgacgcaa gagggatgta tgagaaagcg atagctaaag gctgtaaaag cttccgtgag 360
ccacaggttt tacaagatca atttggatct gttataatag cgtctctcca gacttatgga 420
gacactgttc acacattagt ccaaaatgtc gactatacag gacccttttt gcctggcttc 480
agagcaatca caaaagatga tccattaaac tctgcctttc ctcaggtaaa ttatgacatt 540
attgatcatg ttgtaggaaa tcagcctggt ggcgatatga ctcctacagt agaatggtat 600
gagaaatatc tagaatttca tcgatattgg tctgctgatg agtctgtaat ccataccgat 660
tattcagcat taaggtctgt tgtggttgct gattgggatg aagtgatcaa aatgcctatt 720
aatgagcctg ctgatggact tagaaaaagt caaatccaag aatatgtcga atattatggt 780
ggagcaggcg tacaacatat tgccttaaaa gtcaatgata ttatttcagt aataagcacc 840
ttaagggcta gaggtgtgga attcttagaa gttcctccta aatattatga tagcttaaga 900
aaaagacttg cgcattctgc ggtacaaatt gaagaagact taaaaagaat tgaagacctt 960
catattttgg ttgactttga cgaccgtggg tatttacttc agattttcac aaaaccagta 1020
gaagacagac ctactctgtt ttatgaaatt attcaaagac ataataacaa tggattcgga 1080
attggaaatt ttaaagccct atttgaatca ttggaacaag agcaagaaag aagaggtaat 1140
ttgatctaa 1149
<210> 9
<211> 382
<212> PRT
<213> 日本赭纖蟲
<400> 9
Met Thr Tyr Tyr Asp Lys Gln Glu Thr Arg Pro Asp Leu Gly Glu Phe
1 5 10 15
Tyr Gly Phe His His Val Arg Phe Tyr Val Ser Asn Ser Glu Gln Ala
20 25 30
Ala Ser Phe Tyr Thr Ser Arg Phe Gly Phe Ser Pro Val Ala Tyr Glu
35 40 45
Gly Leu Glu Thr Gly Asn Gln Lys Phe Cys Thr Asn Val Val Arg Ser
50 55 60
Asn His Val Val Ile Ala Phe Thr Ser Ala Leu Thr Pro Glu Asp Asn
65 70 75 80
Glu Val Asn Arg His Val Gly Lys His Ser Asp Gly Val Gln Asp Ile
85 90 95
Ala Phe Ser Val Ser Asp Ala Arg Gly Met Tyr Glu Lys Ala Ile Ala
100 105 110
Lys Gly Cys Lys Ser Phe Arg Glu Pro Gln Val Leu Gln Asp Gln Phe
115 120 125
Gly Ser Val Ile Ile Ala Ser Leu Gln Thr Tyr Gly Asp Thr Val His
130 135 140
Thr Leu Val Gln Asn Val Asp Tyr Thr Gly Pro Phe Leu Pro Gly Phe
145 150 155 160
Arg Ala Ile Thr Lys Asp Asp Pro Leu Asn Ser Ala Phe Pro Gln Val
165 170 175
Asn Tyr Asp Ile Ile Asp His Val Val Gly Asn Gln Pro Gly Gly Asp
180 185 190
Met Thr Pro Thr Val Glu Trp Tyr Glu Lys Tyr Leu Glu Phe His Arg
195 200 205
Tyr Trp Ser Ala Asp Glu Ser Val Ile His Thr Asp Tyr Ser Ala Leu
210 215 220
Arg Ser Val Val Val Ala Asp Trp Asp Glu Val Ile Lys Met Pro Ile
225 230 235 240
Asn Glu Pro Ala Asp Gly Leu Arg Lys Ser Gln Ile Gln Glu Tyr Val
245 250 255
Glu Tyr Tyr Gly Gly Ala Gly Val Gln His Ile Ala Leu Lys Val Asn
260 265 270
Asp Ile Ile Ser Val Ile Ser Thr Leu Arg Ala Arg Gly Val Glu Phe
275 280 285
Leu Glu Val Pro Pro Lys Tyr Tyr Asp Ser Leu Arg Lys Arg Leu Ala
290 295 300
His Ser Ala Val Gln Ile Glu Glu Asp Leu Lys Arg Ile Glu Asp Leu
305 310 315 320
His Ile Leu Val Asp Phe Asp Asp Arg Gly Tyr Leu Leu Gln Ile Phe
325 330 335
Thr Lys Pro Val Glu Asp Arg Pro Thr Leu Phe Tyr Glu Ile Ile Gln
340 345 350
Arg His Asn Asn Asn Gly Phe Gly Ile Gly Asn Phe Lys Ala Leu Phe
355 360 365
Glu Ser Leu Glu Gln Glu Gln Glu Arg Arg Gly Asn Leu Ile
370 375 380
<210> 10
<211> 1206
<212> DNA
<213> 紅球菌屬
<400> 10
atgacgatcg agcagactct caccgacaag gaacgcctgg caggtctcga cctcggccag 60
ctcgagcagt tggtcgggct cgtcgagtac gacggcaccc gcgacccgtt cccggtcagc 120
ggctgggatg ccgtcgtctg ggtggtcggc aacgccaccc agaccgccca ctacttccag 180
tccgcgttcg ggatgaccct cgtcgcctac tccggaccca ccaccggcaa ccgcgaccac 240
cacagcttcg tcctcgaatc cggggccgtc cgcttcgtca tcaaaggcgc cgtgaacccg 300
gacagccccc tgatcgacca ccaccgcacc cacggcgacg gcgtcgtcga catcgccctc 360
gccgtccccg acgtcgacaa gtgcatcgcc cacgcccgcg cccagggcgc caccgtcctc 420
gacgaacccc acgacgtgac cgacgaccac ggcaccgtcc gcctcgccgc gatcgccacc 480
tacggcgaca cccgccacac cctcgtcgac cgcagccact acaccggccc ctacctgccc 540
ggctacaccg cccgcacctc cggccacacc aaacgggacg gggcacccaa gcgcctgttc 600
caggccctcg accacgtcgt cggcaacgtc gaactcggca agatggacca ctgggtcgac 660
ttctacaacc gggtcatggg ctttacgaac atggccgagt tcgtcggcga ggacatcgcc 720
accgactact ccgcgctgat gagcaaggtc gtctccaacg gcaaccaccg ggtcaagttc 780
cccctcaacg aacccgccct cgccaagaaa cgctcgcaga tcgacgaata cctcgacttc 840
taccgcggcc ccggcgccca gcacctggcc ctggccacca atgacatcct caccgccgtc 900
gaccagctga ccgccgaggg cgtcgagttc ctggccaccc ccgactccta ctacgaggac 960
cccgaactgc gggcccggat cggcaacgtc cgcgccccca tcgccgaact gcagaaacgc 1020
ggcatcctcg tcgaccgcga cgaagacggc tacctgctgc agatcttcac caaacccctc 1080
gtcgaccggc ccaccgtgtt cttcgaactc atcgaacgcc acggctccct cggcttcggc 1140
atcggcaact tcaaagccct cttcgaggcc atcgaacgcg aacaagccgc ccgcggaaac 1200
ttctga 1206
<210> 11
<211> 401
<212> PRT
<213> 紅球菌屬
<400> 11
Met Thr Ile Glu Gln Thr Leu Thr Asp Lys Glu Arg Leu Ala Gly Leu
1 5 10 15
Asp Leu Gly Gln Leu Glu Gln Leu Val Gly Leu Val Glu Tyr Asp Gly
20 25 30
Thr Arg Asp Pro Phe Pro Val Ser Gly Trp Asp Ala Val Val Trp Val
35 40 45
Val Gly Asn Ala Thr Gln Thr Ala His Tyr Phe Gln Ser Ala Phe Gly
50 55 60
Met Thr Leu Val Ala Tyr Ser Gly Pro Thr Thr Gly Asn Arg Asp His
65 70 75 80
His Ser Phe Val Leu Glu Ser Gly Ala Val Arg Phe Val Ile Lys Gly
85 90 95
Ala Val Asn Pro Asp Ser Pro Leu Ile Asp His His Arg Thr His Gly
100 105 110
Asp Gly Val Val Asp Ile Ala Leu Ala Val Pro Asp Val Asp Lys Cys
115 120 125
Ile Ala His Ala Arg Ala Gln Gly Ala Thr Val Leu Asp Glu Pro His
130 135 140
Asp Val Thr Asp Asp His Gly Thr Val Arg Leu Ala Ala Ile Ala Thr
145 150 155 160
Tyr Gly Asp Thr Arg His Thr Leu Val Asp Arg Ser His Tyr Thr Gly
165 170 175
Pro Tyr Leu Pro Gly Tyr Thr Ala Arg Thr Ser Gly His Thr Lys Arg
180 185 190
Asp Gly Ala Pro Lys Arg Leu Phe Gln Ala Leu Asp His Val Val Gly
195 200 205
Asn Val Glu Leu Gly Lys Met Asp His Trp Val Asp Phe Tyr Asn Arg
210 215 220
Val Met Gly Phe Thr Asn Met Ala Glu Phe Val Gly Glu Asp Ile Ala
225 230 235 240
Thr Asp Tyr Ser Ala Leu Met Ser Lys Val Val Ser Asn Gly Asn His
245 250 255
Arg Val Lys Phe Pro Leu Asn Glu Pro Ala Leu Ala Lys Lys Arg Ser
260 265 270
Gln Ile Asp Glu Tyr Leu Asp Phe Tyr Arg Gly Pro Gly Ala Gln His
275 280 285
Leu Ala Leu Ala Thr Asn Asp Ile Leu Thr Ala Val Asp Gln Leu Thr
290 295 300
Ala Glu Gly Val Glu Phe Leu Ala Thr Pro Asp Ser Tyr Tyr Glu Asp
305 310 315 320
Pro Glu Leu Arg Ala Arg Ile Gly Asn Val Arg Ala Pro Ile Ala Glu
325 330 335
Leu Gln Lys Arg Gly Ile Leu Val Asp Arg Asp Glu Asp Gly Tyr Leu
340 345 350
Leu Gln Ile Phe Thr Lys Pro Leu Val Asp Arg Pro Thr Val Phe Phe
355 360 365
Glu Leu Ile Glu Arg His Gly Ser Leu Gly Phe Gly Ile Gly Asn Phe
370 375 380
Lys Ala Leu Phe Glu Ala Ile Glu Arg Glu Gln Ala Ala Arg Gly Asn
385 390 395 400
Phe
<210> 12
<211> 1209
<212> DNA
<213> 紅球菌屬
<400> 12
atgactaccg ccgacattcg cctgacgccc cgcgaggtgg ccgcacatct ggagaccgac 60
gagctccggc agttggtcgg gctcgtcgaa cacgacgacg cgtcggatcc gtttcccgtg 120
gtcgcgatgg atgccgtggt gttcgtgtgc ggcaacgcga cgcagagcac gcagtacttc 180
gtctccacgt ggggcatgac cctcgtcgcc tacgccgggc cggagaccgg tcagcgctcg 240
cacaagtcct tcgtcctcga gtcggggtcg gcacggttcg tgctgcacgg cgccgtcgat 300
ccgaagagcc cgctcgcgga ccatcaccgg gcgcacggcg acggcgtggt ggacctggcg 360
atggaagttc tcgacgtcga ccgctgcatc gcgcatgcac gctcgcaggg ggccaccatt 420
ctcgaggagc cgcgcgacgt cacggatcag ttcggcaccg tgcggctcgc ggcgatcgcc 480
acgtacggca gcacccggca caccatcgtc gaccgaagcc gatacgacgg cccctacctc 540
cccggattcg tcgcgcgctc cagcggtttc gcggcgcgac cgggtaaacc cccgcgattg 600
ttccaggcgc tcgaccacgc cgtcggcaac gtcgagatgg gccggatgga tcactgggtc 660
cggttctaca accgcgtcat gggcttcacg aacatggccg aattcgtcgg cgacgacatc 720
gccacggagt actcggcgct gatgtcgaag gtcgtggcga acggcaatca ccgggtgaag 780
ttcccgctca acgaacccgc ggtgggaaag aagaagtcgc agatcgacga atatctcgag 840
ttctacggtg agccgggctg ccagcatctg gccctcgcga ccggagacat cctcgcgacg 900
gtggacgcgt tgcgggccga gggtgtcgaa ttcctgaaca cacccgacgc gtactacgag 960
gacccacagc tgcgcgcccg gatcggcagg gtgcgggtgc cggtggagga actgcagaag 1020
cgcggaatcc tcgtcgaccg cgacgaggac ggatacctcc tgcagatctt caccaaaccg 1080
ctcggcgacc ggccgaccgt gttcttcgag gtgatcgaac ggcacggttc gctcgggttc 1140
ggggcgggta acttccaggc cctgttcgaa tccatcgagc gtgagcaggc ggcgcgcggc 1200
aatctgtga 1209
<210> 13
<211> 402
<212> PRT
<213> 紅球菌屬
<400> 13
Met Thr Thr Ala Asp Ile Arg Leu Thr Pro Arg Glu Val Ala Ala His
1 5 10 15
Leu Glu Thr Asp Glu Leu Arg Gln Leu Val Gly Leu Val Glu His Asp
20 25 30
Asp Ala Ser Asp Pro Phe Pro Val Val Ala Met Asp Ala Val Val Phe
35 40 45
Val Cys Gly Asn Ala Thr Gln Ser Thr Gln Tyr Phe Val Ser Thr Trp
50 55 60
Gly Met Thr Leu Val Ala Tyr Ala Gly Pro Glu Thr Gly Gln Arg Ser
65 70 75 80
His Lys Ser Phe Val Leu Glu Ser Gly Ser Ala Arg Phe Val Leu His
85 90 95
Gly Ala Val Asp Pro Lys Ser Pro Leu Ala Asp His His Arg Ala His
100 105 110
Gly Asp Gly Val Val Asp Leu Ala Met Glu Val Leu Asp Val Asp Arg
115 120 125
Cys Ile Ala His Ala Arg Ser Gln Gly Ala Thr Ile Leu Glu Glu Pro
130 135 140
Arg Asp Val Thr Asp Gln Phe Gly Thr Val Arg Leu Ala Ala Ile Ala
145 150 155 160
Thr Tyr Gly Ser Thr Arg His Thr Ile Val Asp Arg Ser Arg Tyr Asp
165 170 175
Gly Pro Tyr Leu Pro Gly Phe Val Ala Arg Ser Ser Gly Phe Ala Ala
180 185 190
Arg Pro Gly Lys Pro Pro Arg Leu Phe Gln Ala Leu Asp His Ala Val
195 200 205
Gly Asn Val Glu Met Gly Arg Met Asp His Trp Val Arg Phe Tyr Asn
210 215 220
Arg Val Met Gly Phe Thr Asn Met Ala Glu Phe Val Gly Asp Asp Ile
225 230 235 240
Ala Thr Glu Tyr Ser Ala Leu Met Ser Lys Val Val Ala Asn Gly Asn
245 250 255
His Arg Val Lys Phe Pro Leu Asn Glu Pro Ala Val Gly Lys Lys Lys
260 265 270
Ser Gln Ile Asp Glu Tyr Leu Glu Phe Tyr Gly Glu Pro Gly Cys Gln
275 280 285
His Leu Ala Leu Ala Thr Gly Asp Ile Leu Ala Thr Val Asp Ala Leu
290 295 300
Arg Ala Glu Gly Val Glu Phe Leu Asn Thr Pro Asp Ala Tyr Tyr Glu
305 310 315 320
Asp Pro Gln Leu Arg Ala Arg Ile Gly Arg Val Arg Val Pro Val Glu
325 330 335
Glu Leu Gln Lys Arg Gly Ile Leu Val Asp Arg Asp Glu Asp Gly Tyr
340 345 350
Leu Leu Gln Ile Phe Thr Lys Pro Leu Gly Asp Arg Pro Thr Val Phe
355 360 365
Phe Glu Val Ile Glu Arg His Gly Ser Leu Gly Phe Gly Ala Gly Asn
370 375 380
Phe Gln Ala Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Glu Gln Ala Ala Arg Gly
385 390 395 400
Asn Leu
<210> 14
<211> 1107
<212> DNA
<213> 嗜苦古菌
<400> 14
atgtatggca aaaatttaat ctcagaacta agggaaaagg agatctttaa acgattacat 60
cacgtggaat tttacgttag cagtgccaaa acatggtcat atttcatgaa caggggtctt 120
ggatttaaaa cagtggcata tgccggtcca gaaaccggga taagggacaa gatatcctat 180
gttatgtccc agggcactgc aaggatatct tttacatcat caatgaatga tgatagctat 240
atatcgaatc atgttaaaaa acacggggat ggcgtaaagg atatagcact tgaggtcgat 300
gatctggacg aggcaaaaag cctgatagaa aagtatggaa caaaggtttc aaaaataaat 360
gaaataaagg atggaaatgg aaagataaga actgcagaga taaaaacgta cggtgaaacc 420
gttcatacat taatagaaac cggggattac aatggcgtat tcatgcccgg ttatgaggaa 480
tctgaaataa attcaaaaaa cactgggata aaaaagatcg atcatatagt tggaaatgtc 540
tatgagggcg agatggatag ctgggttaat ttttacatag aaaaacttgg ctttgagcat 600
ttaataacct ttgatgataa agatataaga actgattaca gcgcattaag atcaaaggtt 660
gtaaaataca atgacgatat cgtatttcca ataaatgagc ctgcaaaggg cttaagaaaa 720
tcacagatag aggaatatct tgactattac aggtctgagg gcgttcagca catagcactg 780
ttaactgatg atataataaa aactgtatcc atgatggagg aaaacggcat agaattttta 840
aaaacaccag gatcatacta tgaatcccta tcatcaagga taggctcaat agacgaggat 900
ttaaatgaaa tagagaaaca taacatactt gtggatcgtg atgagaacgg atacctatta 960
cagatcttca caaagcctgt tactgacagg ccaacgttct tctttgaggt catacagaga 1020
aagggtgcaa ggtcattcgg caacggtaac tttaaggcac tttttgaggc gatagaaagg 1080
gagcaggcaa agagaggaaa cctatga 1107
<210> 15
<211> 368
<212> PRT
<213> 嗜苦古菌
<400> 15
Met Tyr Gly Lys Asn Leu Ile Ser Glu Leu Arg Glu Lys Glu Ile Phe
1 5 10 15
Lys Arg Leu His His Val Glu Phe Tyr Val Ser Ser Ala Lys Thr Trp
20 25 30
Ser Tyr Phe Met Asn Arg Gly Leu Gly Phe Lys Thr Val Ala Tyr Ala
35 40 45
Gly Pro Glu Thr Gly Ile Arg Asp Lys Ile Ser Tyr Val Met Ser Gln
50 55 60
Gly Thr Ala Arg Ile Ser Phe Thr Ser Ser Met Asn Asp Asp Ser Tyr
65 70 75 80
Ile Ser Asn His Val Lys Lys His Gly Asp Gly Val Lys Asp Ile Ala
85 90 95
Leu Glu Val Asp Asp Leu Asp Glu Ala Lys Ser Leu Ile Glu Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Val Ser Lys Ile Asn Glu Ile Lys Asp Gly Asn Gly Lys
115 120 125
Ile Arg Thr Ala Glu Ile Lys Thr Tyr Gly Glu Thr Val His Thr Leu
130 135 140
Ile Glu Thr Gly Asp Tyr Asn Gly Val Phe Met Pro Gly Tyr Glu Glu
145 150 155 160
Ser Glu Ile Asn Ser Lys Asn Thr Gly Ile Lys Lys Ile Asp His Ile
165 170 175
Val Gly Asn Val Tyr Glu Gly Glu Met Asp Ser Trp Val Asn Phe Tyr
180 185 190
Ile Glu Lys Leu Gly Phe Glu His Leu Ile Thr Phe Asp Asp Lys Asp
195 200 205
Ile Arg Thr Asp Tyr Ser Ala Leu Arg Ser Lys Val Val Lys Tyr Asn
210 215 220
Asp Asp Ile Val Phe Pro Ile Asn Glu Pro Ala Lys Gly Leu Arg Lys
225 230 235 240
Ser Gln Ile Glu Glu Tyr Leu Asp Tyr Tyr Arg Ser Glu Gly Val Gln
245 250 255
His Ile Ala Leu Leu Thr Asp Asp Ile Ile Lys Thr Val Ser Met Met
260 265 270
Glu Glu Asn Gly Ile Glu Phe Leu Lys Thr Pro Gly Ser Tyr Tyr Glu
275 280 285
Ser Leu Ser Ser Arg Ile Gly Ser Ile Asp Glu Asp Leu Asn Glu Ile
290 295 300
Glu Lys His Asn Ile Leu Val Asp Arg Asp Glu Asn Gly Tyr Leu Leu
305 310 315 320
Gln Ile Phe Thr Lys Pro Val Thr Asp Arg Pro Thr Phe Phe Phe Glu
325 330 335
Val Ile Gln Arg Lys Gly Ala Arg Ser Phe Gly Asn Gly Asn Phe Lys
340 345 350
Ala Leu Phe Glu Ala Ile Glu Arg Glu Gln Ala Lys Arg Gly Asn Leu
355 360 365
<210> 16
<211> 1164
<212> DNA
<213> 克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌
<400> 16
atggcagcag aaataaaaaa cttaaaagat ttacaaaata cagaatacgg actcaaaaaa 60
ttatttgacg aagcagaaga ctttcttcca cttttaggaa cagactacgt agaattatac 120
gtcgggaacg ccaaacaatc ggcacatttc tacaaaacgg cttttggttt tcaatcagaa 180
gcttacgcag gattggaaac aggattaacc gacagagttt catacgtatt aaaacaagat 240
aaaattcgct tggtcttaac aacaccatta ggaaaaggtg gcgaaatcaa tgagcatatc 300
gatttacacg gcgatggcgt aaaagtagta gcactttggg tagaagatgc tacaaaagcc 360
tttgaagaaa cgaccaaaag aggcgcaaaa ccgtacatgg aaccaacaaa agaagaagat 420
gaaaacggat atgtaattcg ctcaggaatc tatacgtacg gagaaacggt tcatgttttt 480
gtagaacgta aaaactataa cggagtcttt ttaccaggat atcaaagatg ggaatctcac 540
tacaatccgg agccagttgg cttaaaattc atcgatcaca tggtaggaaa tgtaggttgg 600
ggagaaatga aagaatggtg tgaattctac gcgaaagtaa tgggatttgc gcaaattatc 660
tcctttacag atgatgatat ttctaccgat tttactgcgt tgatgagtaa agtaatgagt 720
aatggaaatg gtagaatcaa atttccaatc aatgaacccg cagaaggaaa aaagaaatcg 780
caaattgaag aatatctaga cttttacaat ggttcaggag tacaacatat tgcggttgct 840
acagacaata ttattgatac ggtttcgcaa atgcgcgaac gtggagtaga attcttatac 900
gttccagata catattatga tgacttgtta gaacgtgttg gcgacatcga tgaagatgta 960
gaagaactca aaaaacacgg aatcttaatt gatcgtgatg aagaaggata cttattgcag 1020
ttatttacca aaaccattgt agacagacca acaatgttct ttgaagtcat tcagcgtaaa 1080
ggcgcacaat catttggagt aggaaacttt aaagctttat ttgaagcgat agaaagagaa 1140
caagctgctc gcggaacatt gtaa 1164
<210> 17
<211> 387
<212> PRT
<213> 克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌
<400> 17
Met Ala Ala Glu Ile Lys Asn Leu Lys Asp Leu Gln Asn Thr Glu Tyr
1 5 10 15
Gly Leu Lys Lys Leu Phe Asp Glu Ala Glu Asp Phe Leu Pro Leu Leu
20 25 30
Gly Thr Asp Tyr Val Glu Leu Tyr Val Gly Asn Ala Lys Gln Ser Ala
35 40 45
His Phe Tyr Lys Thr Ala Phe Gly Phe Gln Ser Glu Ala Tyr Ala Gly
50 55 60
Leu Glu Thr Gly Leu Thr Asp Arg Val Ser Tyr Val Leu Lys Gln Asp
65 70 75 80
Lys Ile Arg Leu Val Leu Thr Thr Pro Leu Gly Lys Gly Gly Glu Ile
85 90 95
Asn Glu His Ile Asp Leu His Gly Asp Gly Val Lys Val Val Ala Leu
100 105 110
Trp Val Glu Asp Ala Thr Lys Ala Phe Glu Glu Thr Thr Lys Arg Gly
115 120 125
Ala Lys Pro Tyr Met Glu Pro Thr Lys Glu Glu Asp Glu Asn Gly Tyr
130 135 140
Val Ile Arg Ser Gly Ile Tyr Thr Tyr Gly Glu Thr Val His Val Phe
145 150 155 160
Val Glu Arg Lys Asn Tyr Asn Gly Val Phe Leu Pro Gly Tyr Gln Arg
165 170 175
Trp Glu Ser His Tyr Asn Pro Glu Pro Val Gly Leu Lys Phe Ile Asp
180 185 190
His Met Val Gly Asn Val Gly Trp Gly Glu Met Lys Glu Trp Cys Glu
195 200 205
Phe Tyr Ala Lys Val Met Gly Phe Ala Gln Ile Ile Ser Phe Thr Asp
210 215 220
Asp Asp Ile Ser Thr Asp Phe Thr Ala Leu Met Ser Lys Val Met Ser
225 230 235 240
Asn Gly Asn Gly Arg Ile Lys Phe Pro Ile Asn Glu Pro Ala Glu Gly
245 250 255
Lys Lys Lys Ser Gln Ile Glu Glu Tyr Leu Asp Phe Tyr Asn Gly Ser
260 265 270
Gly Val Gln His Ile Ala Val Ala Thr Asp Asn Ile Ile Asp Thr Val
275 280 285
Ser Gln Met Arg Glu Arg Gly Val Glu Phe Leu Tyr Val Pro Asp Thr
290 295 300
Tyr Tyr Asp Asp Leu Leu Glu Arg Val Gly Asp Ile Asp Glu Asp Val
305 310 315 320
Glu Glu Leu Lys Lys His Gly Ile Leu Ile Asp Arg Asp Glu Glu Gly
325 330 335
Tyr Leu Leu Gln Leu Phe Thr Lys Thr Ile Val Asp Arg Pro Thr Met
340 345 350
Phe Phe Glu Val Ile Gln Arg Lys Gly Ala Gln Ser Phe Gly Val Gly
355 360 365
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Ala Ile Glu Arg Glu Gln Ala Ala Arg
370 375 380
Gly Thr Leu
385
<210> 18
<211> 1056
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼聚球藻屬種HPPD的核酸序列
<400> 18
atggctaacc catccattag gatcgttcag ggaatccatc accttcactt ctacctttgg 60
gatcttccaa ggtggagaga gcatttctgt agagtttggg gattcagagt tgcttctgat 120
gctggaaaca ctcttgaact tgagcaagga tctcttaggc ttaggctttc tcaaccagct 180
agagctggtg atgaagttga taggcatctt caaagacatg gaccaggtgt tgttgatgtt 240
gctcttgctg ttggagaaca agaacttcca gctcttgctg aacttcttag aggaaggggt 300
gctcaacttg cttggattcc agctgctgct gctctttgcc ttcatactcc atacggaatt 360
aggcactccc ttattccagg accacttgat gctgctccag ctgaggctgg acttttttct 420
cattgggatc acgttgttct taatgtggag cagggatctc ttcaagctgc tgctgattgg 480
tatggaagag ttcttggatg gcgtagactt taccgttact ccatcggaac tgctacttca 540
ggacttgagt ctgttgttgt tggagatcca gaggctggca ttcaatgggc tatcaacgaa 600
cctacttgcg ctgcttctca gattcaagag ttccttcatg ctcatggtgg accaggtatt 660
caacatgctg ctctccactc ttcagatatt gtggcttctc ttagaaggct taggcaaggt 720
ggagttgatt tccttcaagt ggctccacag tactatactt ctcttgagag agagcttgga 780
cttgctctta gatctgctct tggacaggct atttcttggc aggatcttgt tgagcagcag 840
attcttcttg atgctactct tccagcttct gatggacaag ataggccact tttgctccaa 900
actttcactc aaccactttt cggaaggcca acattcttct tcgaagtgat tcaaagactt 960
ggaggtgcta ctggatttgg agaggctaat ttccaagctc ttttcgaggc tcttgaaagg 1020
caacaaaggc aaaggcatca agctcttact ccatga 1056
<210> 19
<211> 1152
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼日本赭纖蟲HPPD的核酸序列
<400> 19
atggctactt actacgataa gcaagagact agaccagatc ttggagagtt ctacggattc 60
caccatgtta ggttctacgt gtctaattct gagcaagctg cttctttcta cacttcccgt 120
ttcggatttt ctccagttgc ttacgaagga cttgagactg gaaatcagaa gttctgcact 180
aacgttgtta ggtctaacca cgtggtgatt gcttttactt ctgctctcac tccagaggat 240
aatgaggtta acaggcatgt tggaaagcac tctgatggtg ttcaggatat tgctttctct 300
gtgtctgatg ctagaggaat gtacgagaag gctattgcta agggatgcaa gtctttcaga 360
gagccacaag ttcttcaaga tcagttcgga tcagtgatta ttgcttccct tcagacttac 420
ggtgatactg ttcacactct cgttcagaac gttgattaca ctggaccatt ccttccaggt 480
ttcagggcta tcactaagga tgatccactt aactctgctt tcccacaggt gaactacgat 540
atcattgatc acgttgtggg aaatcagcca ggtggagata tgactccaac tgttgagtgg 600
tacgagaagt accttgagtt tcacaggtat tggagtgctg atgagtctgt gatccacact 660
gattactctg ctcttagatc tgttgttgtg gctgattggg atgaggttat caagatgcct 720
attaacgaac cagctgatgg acttaggaag tcccagattc aagagtacgt tgagtattat 780
ggtggagctg gtgttcaaca cattgctctc aaggtgaacg atatcatttc cgtgatttcc 840
actcttagag ctagaggagt tgagtttctt gaagtcccac caaagtacta cgattctctc 900
agaaagaggc ttgctcattc tgctgttcag atcgaagagg atcttaaacg tattgaggac 960
cttcacatcc tcgtggattt tgatgatagg ggataccttc tccagatttt cactaagcca 1020
gttgaggata ggccaacttt gttctacgag atcatccaaa ggcataacaa caacggattc 1080
ggaatcggaa atttcaaggc tcttttcgag tctcttgagc aagaacaaga gagaagggga 1140
aacctcatct ga 1152
<210> 20
<211> 1209
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼紅球菌屬（菌株RHA1），
分離株ro03041 HPPD的核酸序列
<400> 20
atggctacta ttgagcagac tctcactgat aaggaaaggc ttgctggact tgatcttgga 60
caacttgagc agcttgttgg acttgttgag tacgatggaa ctagggaccc atttccagtt 120
tctggatggg atgctgttgt ttgggttgtg ggaaatgcta ctcaaactgc tcactacttc 180
caatctgctt tcggaatgac tcttgtggct tactctggac caactactgg aaatagggat 240
caccactctt tcgttcttga atctggtgct gtgagattcg ttattaaggg tgctgtgaac 300
ccagattctc cacttattga tcaccatagg actcatggtg atggtgttgt ggatattgct 360
cttgctgttc cagatgtgga taagtgcatt gctcatgcta gggctcaagg tgctactgtt 420
cttgatgagc cacacgatgt tactgatgat cacggaactg ttaggcttgc tgctattgct 480
acttacggtg atacaaggca cactcttgtt gataggtcac actacactgg accatatctt 540
ccaggataca ctgctagaac ttccggacac actaagaggg atggtgctcc aaagagactt 600
ttccaggctc ttgatcacgt tgttggaaac gttgagcttg gaaagatgga tcactgggtg 660
gacttctaca atagggtgat gggattcact aatatggctg agtttgtggg agaagatatc 720
gctactgatt actctgctct catgtctaag gttgtgtcta atggaaacca cagggtgaag 780
ttcccactta atgaaccagc tctcgctaaa aaaaggtcac agatcgatga gtacctcgat 840
ttttatcgtg gaccaggtgc tcaacatctt gctctcgcta ctaacgatat tctcactgct 900
gtggatcaac ttactgctga gggtgttgag tttcttgcta ctccagattc ctattacgag 960
gacccagaac ttagagctag gatcggaaat gttagggctc caatcgctga acttcagaag 1020
aggggaatac tcgttgatag agatgaggat ggataccttc tccagatctt cactaagcca 1080
ttggttgata ggccaactgt tttcttcgag cttattgaga ggcatggatc tcttggattc 1140
ggaatcggaa acttcaaggc tcttttcgag gctattgaga gagaacaagc tgctagggga 1200
aatttctga 1209
<210> 21
<211> 1212
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼紅球菌屬（菌株RHA1），
分離株ro02040 HPPD的核酸序列
<400> 21
atggctacta ctgctgatat taggcttact ccaagggaag ttgctgctca tcttgagact 60
gatgagctta ggcaacttgt tggacttgtt gagcacgatg atgcttcaga tccattccca 120
gttgttgcta tggatgctgt tgtttttgtt tgcggaaacg ctactcaatc tactcagtac 180
ttcgtgtcta cttggggaat gactcttgtt gcttatgctg gaccagaaac tggacagaga 240
tctcacaagt ctttcgtgct tgaatctgga tctgctagat tcgttcttca cggtgctgtt 300
gatccaaagt ctccacttgc tgatcatcat agggctcatg gtgatggtgt tgtggatctt 360
gctatggaag tgcttgatgt ggatagatgc attgctcatg ctagatctca gggtgctact 420
attcttgaag aacctcgtga tgtgactgat cagtttggaa ctgttaggct tgctgctatt 480
gctacttacg gctccactag gcacactatt gtggataggt ccagatatga tggaccatac 540
cttccaggat ttgttgctag gtcatctgga tttgctgcta gaccaggaaa gccaccaaga 600
cttttccaag ctcttgatca cgctgttgga aatgttgaaa tgggaaggat ggatcattgg 660
gtgaggttct acaatagggt gatgggattc actaatatgg ctgagttcgt gggtgatgat 720
attgctactg agtactctgc tcttatgtct aaggttgtgg ctaatggaaa tcacagggtg 780
aagttcccac ttaatgaacc agctgtggga aagaagaagt cccagatcga cgagtacctt 840
gagttttacg gtgaaccagg atgtcaacat cttgctctcg ctactggtga tattcttgct 900
actgtggatg ctcttagagc tgaaggtgtt gagttcctca atactccaga tgcttactac 960
gaggacccac aacttagagc taggattgga agagttaggg ttccagttga ggaacttcag 1020
aagaggggaa tactcgttga tagagatgag gatggatacc ttctccagat cttcactaag 1080
ccacttggag ataggccaac tgttttcttc gaagtgattg agaggcatgg atctcttgga 1140
tttggagcag gaaacttcca ggcacttttc gagtctattg agagagaaca agctgctagg 1200
ggaaatcttt ga 1212
<210> 22
<211> 1110
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼嗜苦古菌HPPD的核酸序列
<400> 22
atggcttacg gaaagaacct tatttctgag cttagagaga aagagatctt caagaggctt 60
catcacgttg agttctacgt ttcttccgct aagacttggt cctacttcat gaatagggga 120
ctcggattca agactgttgc ttatgctgga ccagaaactg gaatcaggga taagatctcc 180
tacgttatgt ctcaaggtac tgctaggatt tctttcactt cctccatgaa cgatgattcc 240
tacatttcca accacgttaa gaaacacggt gatggtgtta aggatatcgc tctcgaagtg 300
gatgatcttg atgaggctaa gtctctcatt gagaagtacg gaactaaggt gtccaagatc 360
aacgagatca aggatggaaa cggaaagatt aggactgctg agatcaagac ttacggtgaa 420
actgtgcaca ctcttatcga gactggtgat tacaacggtg ttttcatgcc aggatacgaa 480
gagtctgaga tcaactccaa gaacactggt atcaaaaaaa tcgatcacat tgtgggaaat 540
gtttacgagg gtgaaatgga ttcttgggtg aacttctaca ttgagaagtt gggattcgag 600
caccttatca ctttcgatga taaggatatc aggactgatt actctgctct taggtctaag 660
gtggtgaagt acaacgatga tatcgtgttc cctattaacg aaccagctaa gggacttagg 720
aagtcccaaa tcgaagagta cctcgattat taccgttctg agggtgttca acacattgct 780
ttgctcacag acgatatcat caagactgtg tccatgatgg aagagaacgg aattgagttc 840
cttaagactc caggatctta ctacgagtct ttgtcctcta ggattggatc tatcgatgag 900
gatctcaacg aaatcgagaa gcacaacatt cttgtggata gggatgagaa cggatacctt 960
ctccagattt tcactaagcc agtgactgat aggccaacat tcttcttcga agtgatccaa 1020
agaaagggtg ctagatcttt cggaaacgga aacttcaagg ctcttttcga ggctattgag 1080
agagaacaag ctaagagggg aaacctttga 1110
<210> 23
<211> 1167
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 為在大豆和棉花中表達而優(yōu)化的編碼克魯?shù)賮啺柶澪鬟_菌HPPD的核酸序列
<400> 23
atggctgctg ctgagattaa gaacctcaag gatctccaga atactgagta cggactcaag 60
aaactttttg atgaggctga ggatttcctt ccacttctcg gaactgatta cgttgagctt 120
tatgtgggaa acgcaaagca atctgctcac ttctacaaga ctgctttcgg atttcaatct 180
gaggcttacg ctggacttga aactggactt actgataggg tttcctacgt gcttaagcag 240
gataagatta ggcttgtgct cactactcca cttggaaagg gtggagagat taacgagcac 300
attgatcttc atggtgatgg tgttaaggtt gtggctcttt gggttgaaga tgctactaag 360
gctttcgaag agactactaa gagaggtgca aagccttata tggaacctac aaaagaagag 420
gacgagaacg gatacgtgat tagatccgga atctacactt acggtgagac tgttcacgtt 480
ttcgtggaga ggaagaacta caacggagtc tttcttcctg gataccaacg atgggagtct 540
cattacaatc cagagccagt gggacttaag ttcatcgatc acatggtggg taatgttgga 600
tggggagaga tgaaggaatg gtgcgagttt tacgctaagg ttatgggatt cgctcagatc 660
atttccttca ctgatgatga tatctccact gatttcactg ctcttatgtc caaggtgatg 720
tctaatggaa acggaaggat caagttccct attaacgaac cagctgaggg aaagaagaag 780
tcccagatcg aagagtacct cgatttctac aacggatctg gtgttcagca tattgctgtg 840
gcaactgata acatcatcga tactgtgtct caaatgagag aaaggggagt ggagtttctt 900
tacgtcccag atacttacta cgatgatctc cttgagagag tgggagatat tgacgaggat 960
gtggaggaac ttaagaagca cggaatcctc attgatagag atgaagaggg ataccttctc 1020
cagcttttca ctaagactat cgtggatagg ccaactatgt tcttcgaagt gatccaaaga 1080
aagggtgctc aatctttcgg agtgggaaac ttcaaggctc ttttcgaggc tattgagaga 1140
gaacaagctg ctagaggaac tctttga 1167
<210> 24
<211> 1077
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼在第335位突變（突變Glu -->Pro）以及
在第336位突變（突變Gly -->Trp）的熒光假單胞菌HPPD的核酸序列
<400> 24
atggcagatc tatacgaaaa cccaatgggc ctgatgggct ttgaattcat cgaattcgcg 60
tcgccgacgc cgggtaccct ggagccgatc ttcgagatca tgggcttcac caaagtcgcg 120
acccaccgtt ccaagaacgt gcacctgtac cgccagggcg agatcaacct gatcctcaac 180
aacgagccca acagcatcgc ctcctacttt gcggccgaac acggcccgtc ggtgtgcggc 240
atggcgttcc gcgtgaagga ctcgcaaaag gcctacaacc gcgccctgga actcggcgcc 300
cagccgatcc atattgacac cgggccgatg gaattgaacc tgccggcgat caagggcatc 360
ggcggcgcgc cgttgtacct gatcgaccgt ttcggcgaag gcagctcgat ctacgacatc 420
gacttcgtgt acctcgaagg tgtggagcgc aatccggtcg gtgcaggtct caaagtcatc 480
gaccacctga cccacaacgt ctatcgcggc cgcatggtct actgggccaa cttctacgag 540
aaattgttca acttccgtga agcgcgttac ttcgatatca agggcgagta caccggcctg 600
acttccaagg ccatgagtgc gccggacggc atgatccgca tcccgctgaa cgaagagtcg 660
tccaagggcg cggggcagat cgaagagttc ctgatgcagt tcaacggcga aggcatccag 720
cacgtggcgt tcctcaccga cgacctggtc aagacctggg acgcgttgaa gaaaatcggc 780
atgcgcttca tgaccgcgcc gccagacact tattacgaaa tgctcgaagg ccgcctgcct 840
gaccacggcg agccggtgga tcaactgcag gcacgcggta tcctgctgga cggatcttcc 900
gtggaaggcg acaaacgcct gctgctgcag atcttctcgg aaaccctgat gggcccggtg 960
ttcttcgaat tcatccagcg caagggcgac gatgggtttg gcccttggaa cttcaaggcg 1020
ctgttcgagt ccatcgaacg tgaccaggtg cgtcgtggtg tattgaccgc cgattaa 1077
<210> 25
<211> 358
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由SEQ ID No 24編碼的蛋白質(zhì)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (335)..(335)
<223> 突變Glu --> Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> 突變Gly --> Trp
<400> 25
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Glu Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro Asn
50 55 60
Ser Ile Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Asp Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Tyr
130 135 140
Leu Glu Gly Val Glu Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Val Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Val Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ala Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Ser Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Ala Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asp His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ala Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ser Ser Val Glu Gly Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Pro Trp
325 330 335
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Thr Ala Asp
355
<210> 26
<211> 1077
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼在第335位突變（突變Glu-->Pro）、
在第336位突變（突變Gly-->Ser）以及
在第340位突變（突變Ala-->Glu）的熒光假單胞菌HPPD的核酸序列
<400> 26
atggcagatc tatacgaaaa cccaatgggc ctgatgggct ttgaattcat cgaattcgcg 60
tcgccgacgc cgggtaccct ggagccgatc ttcgagatca tgggcttcac caaagtcgcg 120
acccaccgtt ccaagaacgt gcacctgtac cgccagggcg agatcaacct gatcctcaac 180
aacgagccca acagcatcgc ctcctacttt gcggccgaac acggcccgtc ggtgtgcggc 240
atggcgttcc gcgtgaagga ctcgcaaaag gcctacaacc gcgccctgga actcggcgcc 300
cagccgatcc atattgacac cgggccgatg gaattgaacc tgccggcgat caagggcatc 360
ggcggcgcgc cgttgtacct gatcgaccgt ttcggcgaag gcagctcgat ctacgacatc 420
gacttcgtgt acctcgaagg tgtggagcgc aatccggtcg gtgcaggtct caaagtcatc 480
gaccacctga cccacaacgt ctatcgcggc cgcatggtct actgggccaa cttctacgag 540
aaattgttca acttccgtga agcgcgttac ttcgatatca agggcgagta caccggcctg 600
acttccaagg ccatgagtgc gccggacggc atgatccgca tcccgctgaa cgaagagtcg 660
tccaagggcg cggggcagat cgaagagttc ctgatgcagt tcaacggcga aggcatccag 720
cacgtggcgt tcctcaccga cgacctggtc aagacctggg acgcgttgaa gaaaatcggc 780
atgcgcttca tgaccgcgcc gccagacact tattacgaaa tgctcgaagg ccgcctgcct 840
gaccacggcg agccggtgga tcaactgcag gcacgcggta tcctgctgga cggatcttcc 900
gtggaaggcg acaaacgcct gctgctgcag atcttctcgg aaaccctgat gggcccggtg 960
ttcttcgaat tcatccagcg caagggcgac gatgggtttg gcccctcgaa cttcaaggag 1020
ctgttcgagt ccatcgaacg tgaccaggtg cgtcgtggtg tattgaccgc cgattaa 1077
<210> 27
<211> 358
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由Seq ID No 26編碼的蛋白質(zhì)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (335)..(335)
<223> 突變Glu-->Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> 突變Glu-->Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (340)..(340)
<223> 突變Ala-->Glu
<400> 27
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Glu Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro Asn
50 55 60
Ser Ile Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Asp Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Tyr
130 135 140
Leu Glu Gly Val Glu Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Val Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Val Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ala Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Ser Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Ala Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asp His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ala Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ser Ser Val Glu Gly Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Pro Ser
325 330 335
Asn Phe Lys Glu Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Thr Ala Asp
355
<210> 28
<211> 1077
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼在第335位突變（突變Glu-->Pro）、
在第336位突變（突變Gly-->Trp）、
在第339位突變（突變Lys-->Ala）以及
在第340位突變（突變Ala-->Gln）的熒光假單胞菌HPPD的核酸序列
<400> 28
atggcagatc tatacgaaaa cccaatgggc ctgatgggct ttgaattcat cgaattcgcg 60
tcgccgacgc cgggtaccct ggagccgatc ttcgagatca tgggcttcac caaagtcgcg 120
acccaccgtt ccaagaacgt gcacctgtac cgccagggcg agatcaacct gatcctcaac 180
aacgagccca acagcatcgc ctcctacttt gcggccgaac acggcccgtc ggtgtgcggc 240
atggcgttcc gcgtgaagga ctcgcaaaag gcctacaacc gcgccctgga actcggcgcc 300
cagccgatcc atattgacac cgggccgatg gaattgaacc tgccggcgat caagggcatc 360
ggcggcgcgc cgttgtacct gatcgaccgt ttcggcgaag gcagctcgat ctacgacatc 420
gacttcgtgt acctcgaagg tgtggagcgc aatccggtcg gtgcaggtct caaagtcatc 480
gaccacctga cccacaacgt ctatcgcggc cgcatggtct actgggccaa cttctacgag 540
aaattgttca acttccgtga agcgcgttac ttcgatatca agggcgagta caccggcctg 600
acttccaagg ccatgagtgc gccggacggc atgatccgca tcccgctgaa cgaagagtcg 660
tccaagggcg cggggcagat cgaagagttc ctgatgcagt tcaacggcga aggcatccag 720
cacgtggcgt tcctcaccga cgacctggtc aagacctggg acgcgttgaa gaaaatcggc 780
atgcgcttca tgaccgcgcc gccagacact tattacgaaa tgctcgaagg ccgcctgcct 840
gaccacggcg agccggtgga tcaactgcag gcacgcggta tcctgctgga cggatcttcc 900
gtggaaggcg acaaacgcct gctgctgcag atcttctcgg aaaccctgat gggcccggtg 960
ttcttcgaat tcatccagcg caagggcgac gatgggtttg gcccgtggaa cttcgcgcag 1020
ctgttcgagt ccatcgaacg tgaccaggtg cgtcgtggtg tattgaccgc cgattaa 1077
<210> 29
<211> 358
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由SEQ ID No 28編碼的蛋白質(zhì)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (335)..(335)
<223> 突變Glu-->Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> 突變Gly-->Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (339)..(339)
<223> 突變Lys-->Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (340)..(340)
<223> 突變Ala -->Gln
<400> 29
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Glu Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro Asn
50 55 60
Ser Ile Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Asp Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Tyr
130 135 140
Leu Glu Gly Val Glu Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Val Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Val Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ala Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Ser Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Ala Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asp His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ala Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ser Ser Val Glu Gly Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Pro Trp
325 330 335
Asn Phe Ala Gln Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Thr Ala Asp
355
<210> 30
<211> 1122
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼Axmi428H的核酸序列
<400> 30
atgaacgccc cgttgaccca aagcaatgcc agccagttcc agacctggga caaccccatg 60
ggcacggacg gcttcgagtt cgtcgaatac gcggcccccg atcccgtggc catgggtcag 120
ctgttcgagc gcatgggctt tcaggccatt gccaagcacc gccgcaagaa cgtgaccctg 180
tatcgccagg gcgagatcaa cttcatcatc aatgccgaac ccgacagctt tgcccagcgt 240
ttcgcgcgtc tgcacggccc cagcgtctgc gccatcgcca tccgcgtcaa cgacgccaag 300
tacgcctatg agcgcgccac ctcgctgggt gcctggggct atgcccagca ggccgccccc 360
ggcgaactga gcattcccgc catcaagggc attggcgact ccctgatcta tttcatcgac 420
aaatggcgcg gcaagaatgg cgccaaggac ggtgatctcg gcaatatcag cttcttcgac 480
gtggacttcg agcctctgcc cggtgccgat ctgcatcccg agggcctggg cctgacctat 540
atcgaccacc tgaccaacaa cgtctaccgc ggccgcatgg ccgagctggc cgagttctac 600
gagcgcatct tcaacttccg cgagatccgc tacttcgaca tcgaaggcca ggccacaggc 660
gtcaagagca aggccatgac cagcccctgc ggcaagatcc gcattcccat caacgaggaa 720
ggcaacgaca aggccggcca gattcaggag tatctggaca tgtaccgcgg cgaaggcata 780
cagcacatcg cgctgggatc gaccaatctc tacgacaccg tggacggtct gcagatgaac 840
ggcatcaagc tgctgaacac cagcgagacc tattacgagc tgctgcccaa gcgcatcccg 900
gacctgcagg aacccattcc cgagctgctg gcgcgcaaca tccttgtgga cggccagccc 960
ggcgagctgc tgctgcagat cttcagcgaa aaccagctgg gtcccatctt cttcgagttc 1020
atccagcgca agggcaatag cggctttggc gagggcaatt tcaaggcctt gttcgagacc 1080
atggaactcg accagatgcg ccgcggcgtg ctcaagacct ga 1122
<210> 31
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由SEQ ID No 30編碼的蛋白質(zhì)
<400> 31
Met Asn Ala Pro Leu Thr Gln Ser Asn Ala Ser Gln Phe Gln Thr Trp
1 5 10 15
Asp Asn Pro Met Gly Thr Asp Gly Phe Glu Phe Val Glu Tyr Ala Ala
20 25 30
Pro Asp Pro Val Ala Met Gly Gln Leu Phe Glu Arg Met Gly Phe Gln
35 40 45
Ala Ile Ala Lys His Arg Arg Lys Asn Val Thr Leu Tyr Arg Gln Gly
50 55 60
Glu Ile Asn Phe Ile Ile Asn Ala Glu Pro Asp Ser Phe Ala Gln Arg
65 70 75 80
Phe Ala Arg Leu His Gly Pro Ser Val Cys Ala Ile Ala Ile Arg Val
85 90 95
Asn Asp Ala Lys Tyr Ala Tyr Glu Arg Ala Thr Ser Leu Gly Ala Trp
100 105 110
Gly Tyr Ala Gln Gln Ala Ala Pro Gly Glu Leu Ser Ile Pro Ala Ile
115 120 125
Lys Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ile Tyr Phe Ile Asp Lys Trp Arg Gly
130 135 140
Lys Asn Gly Ala Lys Asp Gly Asp Leu Gly Asn Ile Ser Phe Phe Asp
145 150 155 160
Val Asp Phe Glu Pro Leu Pro Gly Ala Asp Leu His Pro Glu Gly Leu
165 170 175
Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr Asn Asn Val Tyr Arg Gly Arg
180 185 190
Met Ala Glu Leu Ala Glu Phe Tyr Glu Arg Ile Phe Asn Phe Arg Glu
195 200 205
Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Gln Ala Thr Gly Val Lys Ser Lys
210 215 220
Ala Met Thr Ser Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu Glu
225 230 235 240
Gly Asn Asp Lys Ala Gly Gln Ile Gln Glu Tyr Leu Asp Met Tyr Arg
245 250 255
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Gly Ser Thr Asn Leu Tyr Asp
260 265 270
Thr Val Asp Gly Leu Gln Met Asn Gly Ile Lys Leu Leu Asn Thr Ser
275 280 285
Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Leu Pro Lys Arg Ile Pro Asp Leu Gln Glu
290 295 300
Pro Ile Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asn Ile Leu Val Asp Gly Gln Pro
305 310 315 320
Gly Glu Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Asn Gln Leu Gly Pro Ile
325 330 335
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asn Ser Gly Phe Gly Glu Gly
340 345 350
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Thr Met Glu Leu Asp Gln Met Arg Arg
355 360 365
Gly Val Leu Lys Thr
370
<210> 32
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第351位（Glu-->Pro）、第352位（Gly--> Ser）、
第356位（Ala -->Glu）包含突變的蛋白序列Axmi428H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (351)..(351)
<223> 突變Glu --> Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (352)..(352)
<223> 突變Gly --> Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (356)..(356)
<223> 突變Ala --> Glu
<400> 32
Met Asn Ala Pro Leu Thr Gln Ser Asn Ala Ser Gln Phe Gln Thr Trp
1 5 10 15
Asp Asn Pro Met Gly Thr Asp Gly Phe Glu Phe Val Glu Tyr Ala Ala
20 25 30
Pro Asp Pro Val Ala Met Gly Gln Leu Phe Glu Arg Met Gly Phe Gln
35 40 45
Ala Ile Ala Lys His Arg Arg Lys Asn Val Thr Leu Tyr Arg Gln Gly
50 55 60
Glu Ile Asn Phe Ile Ile Asn Ala Glu Pro Asp Ser Phe Ala Gln Arg
65 70 75 80
Phe Ala Arg Leu His Gly Pro Ser Val Cys Ala Ile Ala Ile Arg Val
85 90 95
Asn Asp Ala Lys Tyr Ala Tyr Glu Arg Ala Thr Ser Leu Gly Ala Trp
100 105 110
Gly Tyr Ala Gln Gln Ala Ala Pro Gly Glu Leu Ser Ile Pro Ala Ile
115 120 125
Lys Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ile Tyr Phe Ile Asp Lys Trp Arg Gly
130 135 140
Lys Asn Gly Ala Lys Asp Gly Asp Leu Gly Asn Ile Ser Phe Phe Asp
145 150 155 160
Val Asp Phe Glu Pro Leu Pro Gly Ala Asp Leu His Pro Glu Gly Leu
165 170 175
Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr Asn Asn Val Tyr Arg Gly Arg
180 185 190
Met Ala Glu Leu Ala Glu Phe Tyr Glu Arg Ile Phe Asn Phe Arg Glu
195 200 205
Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Gln Ala Thr Gly Val Lys Ser Lys
210 215 220
Ala Met Thr Ser Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu Glu
225 230 235 240
Gly Asn Asp Lys Ala Gly Gln Ile Gln Glu Tyr Leu Asp Met Tyr Arg
245 250 255
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Gly Ser Thr Asn Leu Tyr Asp
260 265 270
Thr Val Asp Gly Leu Gln Met Asn Gly Ile Lys Leu Leu Asn Thr Ser
275 280 285
Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Leu Pro Lys Arg Ile Pro Asp Leu Gln Glu
290 295 300
Pro Ile Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asn Ile Leu Val Asp Gly Gln Pro
305 310 315 320
Gly Glu Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Asn Gln Leu Gly Pro Ile
325 330 335
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asn Ser Gly Phe Gly Pro Ser
340 345 350
Asn Phe Lys Glu Leu Phe Glu Thr Met Glu Leu Asp Gln Met Arg Arg
355 360 365
Gly Val Leu Lys Thr
370
<210> 33
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第351位（Glu-->Pro）、第352位（Gly-->Trp）、
第355位（Lys-->Ala）、第356位（Ala-->Gln）
包含突變的蛋白序列Axmi428H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (351)..(351)
<223> 突變Glu --> Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (352)..(352)
<223> 突變Gly -->Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (355)..(355)
<223> 突變Lys-->Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (356)..(356)
<223> 突變Ala-->Gln
<400> 33
Met Asn Ala Pro Leu Thr Gln Ser Asn Ala Ser Gln Phe Gln Thr Trp
1 5 10 15
Asp Asn Pro Met Gly Thr Asp Gly Phe Glu Phe Val Glu Tyr Ala Ala
20 25 30
Pro Asp Pro Val Ala Met Gly Gln Leu Phe Glu Arg Met Gly Phe Gln
35 40 45
Ala Ile Ala Lys His Arg Arg Lys Asn Val Thr Leu Tyr Arg Gln Gly
50 55 60
Glu Ile Asn Phe Ile Ile Asn Ala Glu Pro Asp Ser Phe Ala Gln Arg
65 70 75 80
Phe Ala Arg Leu His Gly Pro Ser Val Cys Ala Ile Ala Ile Arg Val
85 90 95
Asn Asp Ala Lys Tyr Ala Tyr Glu Arg Ala Thr Ser Leu Gly Ala Trp
100 105 110
Gly Tyr Ala Gln Gln Ala Ala Pro Gly Glu Leu Ser Ile Pro Ala Ile
115 120 125
Lys Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ile Tyr Phe Ile Asp Lys Trp Arg Gly
130 135 140
Lys Asn Gly Ala Lys Asp Gly Asp Leu Gly Asn Ile Ser Phe Phe Asp
145 150 155 160
Val Asp Phe Glu Pro Leu Pro Gly Ala Asp Leu His Pro Glu Gly Leu
165 170 175
Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr Asn Asn Val Tyr Arg Gly Arg
180 185 190
Met Ala Glu Leu Ala Glu Phe Tyr Glu Arg Ile Phe Asn Phe Arg Glu
195 200 205
Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Gln Ala Thr Gly Val Lys Ser Lys
210 215 220
Ala Met Thr Ser Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu Glu
225 230 235 240
Gly Asn Asp Lys Ala Gly Gln Ile Gln Glu Tyr Leu Asp Met Tyr Arg
245 250 255
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Gly Ser Thr Asn Leu Tyr Asp
260 265 270
Thr Val Asp Gly Leu Gln Met Asn Gly Ile Lys Leu Leu Asn Thr Ser
275 280 285
Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Leu Pro Lys Arg Ile Pro Asp Leu Gln Glu
290 295 300
Pro Ile Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asn Ile Leu Val Asp Gly Gln Pro
305 310 315 320
Gly Glu Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Asn Gln Leu Gly Pro Ile
325 330 335
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asn Ser Gly Phe Gly Pro Trp
340 345 350
Asn Phe Ala Gln Leu Phe Glu Thr Met Glu Leu Asp Gln Met Arg Arg
355 360 365
Gly Val Leu Lys Thr
370
<210> 34
<211> 1074
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼Axmi309H的核酸序列
<400> 34
atggcagatt tatacgaaaa cccaatgggc ctgatgggct tcgagttcat cgagttcgca 60
tcgccgactc ctggcaccct ggagccgatc ttcgagatca tgggcttcac caaggtcgcg 120
acccaccgtt ccaagaacgt gcacctgtat cgccagggcg cgatcaacct gatcctcaac 180
aacgaacccc acagcgttgc ttcgtacttc gcggctgaac acggcccgtc cgtttgcggc 240
atggcgttcc gggtcaagga ttcgcagaag gcctacaacc gcgcactgga actcggcgcc 300
cagccgatcc acatcgaaac aggcccgatg gagctgaacc tgccggcgat caaaggcatt 360
ggcggcgcgc cgctgtacct gatcgaccgt ttcggcgaag gcagctcgat ctatgacatc 420
gacttcgtgt tcctcgaagg cgttgaccgc aacccggtcg gtgccggcct gaagatcatc 480
gaccacctga cccacaacgt gtatcgcggc cgcatggcct actgggccaa cttctacgag 540
aagctgttca acttccgcga gatccgctac ttcgacatca aaggcgaata caccggcctg 600
acctcgaaag cgatgaccgc accggacggc atgatccgca tcccgctcaa cgaagaatcg 660
tcgaagggtg ccgggcagat cgaagagttc ctgatgcagt tcaacggcga aggcatccag 720
cacgtggcgt tcctcaccga cgacctggtc aagacctggg atcagttgaa gaagatcggc 780
atgcgtttca tgaccgcgcc gccggacacc tactacgaaa tgctcgaagg ccgcctgccg 840
aaccacggcg agccggtgga tcaactgcaa tcgcgcggca tcctgctcga cggtgcgtcg 900
gataaagaag acaagcgtct gctgctgcag atcttctcgg aaaccctgat gggcccggtg 960
ttcttcgaat tcatccagcg taaaggcgat gatggtttcg gagaaggcaa cttcaaggct 1020
ctgttcgaat cgatcgagcg tgaccaggtg cgtcgtggcg tgctcgctac cgag 1074
<210> 35
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由SEQ ID No 34編碼的蛋白質(zhì)
<400> 35
Met Asn Ala Pro Leu Thr Gln Ser Asn Ala Ser Gln Phe Gln Thr Trp
1 5 10 15
Asp Asn Pro Met Gly Thr Asp Gly Phe Glu Phe Val Glu Tyr Ala Ala
20 25 30
Pro Asp Pro Val Ala Met Gly Gln Leu Phe Glu Arg Met Gly Phe Gln
35 40 45
Ala Ile Ala Lys His Arg Arg Lys Asn Val Thr Leu Tyr Arg Gln Gly
50 55 60
Glu Ile Asn Phe Ile Ile Asn Ala Glu Pro Asp Ser Phe Ala Gln Arg
65 70 75 80
Phe Ala Arg Leu His Gly Pro Ser Val Cys Ala Ile Ala Ile Arg Val
85 90 95
Asn Asp Ala Lys Tyr Ala Tyr Glu Arg Ala Thr Ser Leu Gly Ala Trp
100 105 110
Gly Tyr Ala Gln Gln Ala Ala Pro Gly Glu Leu Ser Ile Pro Ala Ile
115 120 125
Lys Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ile Tyr Phe Ile Asp Lys Trp Arg Gly
130 135 140
Lys Asn Gly Ala Lys Asp Gly Asp Leu Gly Asn Ile Ser Phe Phe Asp
145 150 155 160
Val Asp Phe Glu Pro Leu Pro Gly Ala Asp Leu His Pro Glu Gly Leu
165 170 175
Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr Asn Asn Val Tyr Arg Gly Arg
180 185 190
Met Ala Glu Leu Ala Glu Phe Tyr Glu Arg Ile Phe Asn Phe Arg Glu
195 200 205
Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Gln Ala Thr Gly Val Lys Ser Lys
210 215 220
Ala Met Thr Ser Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu Glu
225 230 235 240
Gly Asn Asp Lys Ala Gly Gln Ile Gln Glu Tyr Leu Asp Met Tyr Arg
245 250 255
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Gly Ser Thr Asn Leu Tyr Asp
260 265 270
Thr Val Asp Gly Leu Gln Met Asn Gly Ile Lys Leu Leu Asn Thr Ser
275 280 285
Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Leu Pro Lys Arg Ile Pro Asp Leu Gln Glu
290 295 300
Pro Ile Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asn Ile Leu Val Asp Gly Gln Pro
305 310 315 320
Gly Glu Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Asn Gln Leu Gly Pro Ile
325 330 335
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asn Ser Gly Phe Gly Glu Gly
340 345 350
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Thr Met Glu Leu Asp Gln Met Arg Arg
355 360 365
Gly Val Leu Lys Thr
370
<210> 36
<211> 358
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第335位（Glu-->Pro）、第336位突變（Gly-->Ser）、
第340位突變（Ala --> Glu）包含突變的蛋白序列Axmi309H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (335)..(335)
<223> 突變Glu-->Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> 突變Gly-->Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (340)..(340)
<223> 突變Ala-->Glu
<400> 36
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Ala Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro His
50 55 60
Ser Val Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Glu Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Phe
130 135 140
Leu Glu Gly Val Asp Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Ile Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Ala Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ile Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Thr Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Gln Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asn His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ser Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ala Ser Asp Lys Glu Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Pro Ser
325 330 335
Asn Phe Lys Glu Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Ala Thr Glu
355
<210> 37
<211> 358
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第335位（Glu-->Pro）、第336位（Gly--> Trp）、
第339位（Lys-->Ala）以及第340位（Ala -->Gln）
包含突變的蛋白序列Axmi309H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (335)..(335)
<223> 突變Glu -->Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (336)..(336)
<223> 突變Gly --> Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (339)..(339)
<223> 突變Lys --> Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (340)..(340)
<223> 突變Ala --> Gln
<400> 37
Met Ala Asp Leu Tyr Glu Asn Pro Met Gly Leu Met Gly Phe Glu Phe
1 5 10 15
Ile Glu Phe Ala Ser Pro Thr Pro Gly Thr Leu Glu Pro Ile Phe Glu
20 25 30
Ile Met Gly Phe Thr Lys Val Ala Thr His Arg Ser Lys Asn Val His
35 40 45
Leu Tyr Arg Gln Gly Ala Ile Asn Leu Ile Leu Asn Asn Glu Pro His
50 55 60
Ser Val Ala Ser Tyr Phe Ala Ala Glu His Gly Pro Ser Val Cys Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Arg Val Lys Asp Ser Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Ala Leu
85 90 95
Glu Leu Gly Ala Gln Pro Ile His Ile Glu Thr Gly Pro Met Glu Leu
100 105 110
Asn Leu Pro Ala Ile Lys Gly Ile Gly Gly Ala Pro Leu Tyr Leu Ile
115 120 125
Asp Arg Phe Gly Glu Gly Ser Ser Ile Tyr Asp Ile Asp Phe Val Phe
130 135 140
Leu Glu Gly Val Asp Arg Asn Pro Val Gly Ala Gly Leu Lys Ile Ile
145 150 155 160
Asp His Leu Thr His Asn Val Tyr Arg Gly Arg Met Ala Tyr Trp Ala
165 170 175
Asn Phe Tyr Glu Lys Leu Phe Asn Phe Arg Glu Ile Arg Tyr Phe Asp
180 185 190
Ile Lys Gly Glu Tyr Thr Gly Leu Thr Ser Lys Ala Met Thr Ala Pro
195 200 205
Asp Gly Met Ile Arg Ile Pro Leu Asn Glu Glu Ser Ser Lys Gly Ala
210 215 220
Gly Gln Ile Glu Glu Phe Leu Met Gln Phe Asn Gly Glu Gly Ile Gln
225 230 235 240
His Val Ala Phe Leu Thr Asp Asp Leu Val Lys Thr Trp Asp Gln Leu
245 250 255
Lys Lys Ile Gly Met Arg Phe Met Thr Ala Pro Pro Asp Thr Tyr Tyr
260 265 270
Glu Met Leu Glu Gly Arg Leu Pro Asn His Gly Glu Pro Val Asp Gln
275 280 285
Leu Gln Ser Arg Gly Ile Leu Leu Asp Gly Ala Ser Asp Lys Glu Asp
290 295 300
Lys Arg Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Thr Leu Met Gly Pro Val
305 310 315 320
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asp Asp Gly Phe Gly Pro Trp
325 330 335
Asn Phe Ala Gln Leu Phe Glu Ser Ile Glu Arg Asp Gln Val Arg Arg
340 345 350
Gly Val Leu Ala Thr Glu
355
<210> 38
<211> 1071
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼Axmi305H的核酸序列
<400> 38
atgaacgccg tggccaagat cgaacagcac aatcccatcg gtaccgacgg attcgaattc 60
gtcgagttca ccgcccccga cgccaagggc atcgagcagc tgcgccagct gttcaacatg 120
atgggcttca ccgaaaccgc caagcatcgt tccaaggaag tcttcctgtt ccagcagaac 180
gatatcaaca tcgtgctcaa cggcagccca accgggcatg tccatgaatt cgccctcaag 240
cacggcccga gcgcctgcgc catggccttc cgggtgaaga acgcttccca ggccgccgcc 300
tacgccgaat cccagggcgc caagctggtg ggcagccacg ccaacttcgg cgagctgaac 360
atcccttccc tggaaggcat cggcggttcg ctgctgtatc ttgtcgaccg ctacggcgac 420
cgcagcatct atgacgtcga cttcgagttc atcgaaggcc gcagcgccaa cgacaactcg 480
gtcggcctga cctacatcga ccacctcacc cacaacgtca agcgcggcca gatggacgtc 540
tggtccggtt tctacgagcg catcgccaac ttccgcgaga ttcgctactt cgacatcgaa 600
ggcaagctca ccggcctgtt ctcccgcgcc atgaccgcac cttgcgggaa gatccgcatc 660
ccgatcaacg agtcggccga cgatacctcg cagatcgagg aattcatccg cgaataccat 720
ggcgaaggca tccagcacat cgccctgacc accgacgaca tctatgccac cgtgcgcaag 780
ctgcgcgaca acggcgtgaa gttcatgtcg accccggaca cctactacga gaaggtcgac 840
acccgcgtcg ccgggcatgg cgagccgctc gagcaactgc gcgaactgaa cctgctgatc 900
gacggcgccc cgggcgacga cggcatcctg ctgcagatct tcaccgacac ggtgatcggc 960
ccgatcttct tcgagatcat ccagcgcaag ggcaaccagg gcttcggcga gggcaatttc 1020
aaggccctgt tcgagtccat cgaggaagac cagattcgcc gcggcgtgat c 1071
<210> 39
<211> 373
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 由SEQ ID No 38編碼的蛋白質(zhì)
<400> 39
Met Asn Ala Pro Leu Thr Gln Ser Asn Ala Ser Gln Phe Gln Thr Trp
1 5 10 15
Asp Asn Pro Met Gly Thr Asp Gly Phe Glu Phe Val Glu Tyr Ala Ala
20 25 30
Pro Asp Pro Val Ala Met Gly Gln Leu Phe Glu Arg Met Gly Phe Gln
35 40 45
Ala Ile Ala Lys His Arg Arg Lys Asn Val Thr Leu Tyr Arg Gln Gly
50 55 60
Glu Ile Asn Phe Ile Ile Asn Ala Glu Pro Asp Ser Phe Ala Gln Arg
65 70 75 80
Phe Ala Arg Leu His Gly Pro Ser Val Cys Ala Ile Ala Ile Arg Val
85 90 95
Asn Asp Ala Lys Tyr Ala Tyr Glu Arg Ala Thr Ser Leu Gly Ala Trp
100 105 110
Gly Tyr Ala Gln Gln Ala Ala Pro Gly Glu Leu Ser Ile Pro Ala Ile
115 120 125
Lys Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ile Tyr Phe Ile Asp Lys Trp Arg Gly
130 135 140
Lys Asn Gly Ala Lys Asp Gly Asp Leu Gly Asn Ile Ser Phe Phe Asp
145 150 155 160
Val Asp Phe Glu Pro Leu Pro Gly Ala Asp Leu His Pro Glu Gly Leu
165 170 175
Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr Asn Asn Val Tyr Arg Gly Arg
180 185 190
Met Ala Glu Leu Ala Glu Phe Tyr Glu Arg Ile Phe Asn Phe Arg Glu
195 200 205
Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Gln Ala Thr Gly Val Lys Ser Lys
210 215 220
Ala Met Thr Ser Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu Glu
225 230 235 240
Gly Asn Asp Lys Ala Gly Gln Ile Gln Glu Tyr Leu Asp Met Tyr Arg
245 250 255
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Gly Ser Thr Asn Leu Tyr Asp
260 265 270
Thr Val Asp Gly Leu Gln Met Asn Gly Ile Lys Leu Leu Asn Thr Ser
275 280 285
Glu Thr Tyr Tyr Glu Leu Leu Pro Lys Arg Ile Pro Asp Leu Gln Glu
290 295 300
Pro Ile Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asn Ile Leu Val Asp Gly Gln Pro
305 310 315 320
Gly Glu Leu Leu Leu Gln Ile Phe Ser Glu Asn Gln Leu Gly Pro Ile
325 330 335
Phe Phe Glu Phe Ile Gln Arg Lys Gly Asn Ser Gly Phe Gly Glu Gly
340 345 350
Asn Phe Lys Ala Leu Phe Glu Thr Met Glu Leu Asp Gln Met Arg Arg
355 360 365
Gly Val Leu Lys Thr
370
<210> 40
<211> 357
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第337位（Glu-->Pro）、第338位（Gly--> Ser）以及
第342位（Ala -->Glu）包含突變的蛋白序列Axmi305H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (337)..(337)
<223> 突變Glu --> Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (338)..(338)
<223> 突變Gly --> Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (342)..(342)
<223> 突變Ala --> Glu
<400> 40
Met Asn Ala Val Ala Lys Ile Glu Gln His Asn Pro Ile Gly Thr Asp
1 5 10 15
Gly Phe Glu Phe Val Glu Phe Thr Ala Pro Asp Ala Lys Gly Ile Glu
20 25 30
Gln Leu Arg Gln Leu Phe Asn Met Met Gly Phe Thr Glu Thr Ala Lys
35 40 45
His Arg Ser Lys Glu Val Phe Leu Phe Gln Gln Asn Asp Ile Asn Ile
50 55 60
Val Leu Asn Gly Ser Pro Thr Gly His Val His Glu Phe Ala Leu Lys
65 70 75 80
His Gly Pro Ser Ala Cys Ala Met Ala Phe Arg Val Lys Asn Ala Ser
85 90 95
Gln Ala Ala Ala Tyr Ala Glu Ser Gln Gly Ala Lys Leu Val Gly Ser
100 105 110
His Ala Asn Phe Gly Glu Leu Asn Ile Pro Ser Leu Glu Gly Ile Gly
115 120 125
Gly Ser Leu Leu Tyr Leu Val Asp Arg Tyr Gly Asp Arg Ser Ile Tyr
130 135 140
Asp Val Asp Phe Glu Phe Ile Glu Gly Arg Ser Ala Asn Asp Asn Ser
145 150 155 160
Val Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr His Asn Val Lys Arg Gly
165 170 175
Gln Met Asp Val Trp Ser Gly Phe Tyr Glu Arg Ile Ala Asn Phe Arg
180 185 190
Glu Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Lys Leu Thr Gly Leu Phe Ser
195 200 205
Arg Ala Met Thr Ala Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu
210 215 220
Ser Ala Asp Asp Thr Ser Gln Ile Glu Glu Phe Ile Arg Glu Tyr His
225 230 235 240
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Thr Thr Asp Asp Ile Tyr Ala
245 250 255
Thr Val Arg Lys Leu Arg Asp Asn Gly Val Lys Phe Met Ser Thr Pro
260 265 270
Asp Thr Tyr Tyr Glu Lys Val Asp Thr Arg Val Ala Gly His Gly Glu
275 280 285
Pro Leu Glu Gln Leu Arg Glu Leu Asn Leu Leu Ile Asp Gly Ala Pro
290 295 300
Gly Asp Asp Gly Ile Leu Leu Gln Ile Phe Thr Asp Thr Val Ile Gly
305 310 315 320
Pro Ile Phe Phe Glu Ile Ile Gln Arg Lys Gly Asn Gln Gly Phe Gly
325 330 335
Pro Ser Asn Phe Lys Glu Leu Phe Glu Ser Ile Glu Glu Asp Gln Ile
340 345 350
Arg Arg Gly Val Ile
355
<210> 41
<211> 357
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 在第337位（Glu-->Pro）、第338位（Gly--> Trp）、
第341位（Lys-->Ala）以及第342位（Ala -->Gln）
包含突變的蛋白序列Axmi305H
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (337)..(337)
<223> 突變Glu --> Pro
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (338)..(338)
<223> 突變Gly --> Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (341)..(341)
<223> 突變Lys --> Ala
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (342)..(342)
<223> 突變Ala --> Gln
<400> 41
Met Asn Ala Val Ala Lys Ile Glu Gln His Asn Pro Ile Gly Thr Asp
1 5 10 15
Gly Phe Glu Phe Val Glu Phe Thr Ala Pro Asp Ala Lys Gly Ile Glu
20 25 30
Gln Leu Arg Gln Leu Phe Asn Met Met Gly Phe Thr Glu Thr Ala Lys
35 40 45
His Arg Ser Lys Glu Val Phe Leu Phe Gln Gln Asn Asp Ile Asn Ile
50 55 60
Val Leu Asn Gly Ser Pro Thr Gly His Val His Glu Phe Ala Leu Lys
65 70 75 80
His Gly Pro Ser Ala Cys Ala Met Ala Phe Arg Val Lys Asn Ala Ser
85 90 95
Gln Ala Ala Ala Tyr Ala Glu Ser Gln Gly Ala Lys Leu Val Gly Ser
100 105 110
His Ala Asn Phe Gly Glu Leu Asn Ile Pro Ser Leu Glu Gly Ile Gly
115 120 125
Gly Ser Leu Leu Tyr Leu Val Asp Arg Tyr Gly Asp Arg Ser Ile Tyr
130 135 140
Asp Val Asp Phe Glu Phe Ile Glu Gly Arg Ser Ala Asn Asp Asn Ser
145 150 155 160
Val Gly Leu Thr Tyr Ile Asp His Leu Thr His Asn Val Lys Arg Gly
165 170 175
Gln Met Asp Val Trp Ser Gly Phe Tyr Glu Arg Ile Ala Asn Phe Arg
180 185 190
Glu Ile Arg Tyr Phe Asp Ile Glu Gly Lys Leu Thr Gly Leu Phe Ser
195 200 205
Arg Ala Met Thr Ala Pro Cys Gly Lys Ile Arg Ile Pro Ile Asn Glu
210 215 220
Ser Ala Asp Asp Thr Ser Gln Ile Glu Glu Phe Ile Arg Glu Tyr His
225 230 235 240
Gly Glu Gly Ile Gln His Ile Ala Leu Thr Thr Asp Asp Ile Tyr Ala
245 250 255
Thr Val Arg Lys Leu Arg Asp Asn Gly Val Lys Phe Met Ser Thr Pro
260 265 270
Asp Thr Tyr Tyr Glu Lys Val Asp Thr Arg Val Ala Gly His Gly Glu
275 280 285
Pro Leu Glu Gln Leu Arg Glu Leu Asn Leu Leu Ile Asp Gly Ala Pro
290 295 300
Gly Asp Asp Gly Ile Leu Leu Gln Ile Phe Thr Asp Thr Val Ile Gly
305 310 315 320
Pro Ile Phe Phe Glu Ile Ile Gln Arg Lys Gly Asn Gln Gly Phe Gly
325 330 335
Pro Trp Asn Phe Ala Gln Leu Phe Glu Ser Ile Glu Glu Asp Gln Ile
340 345 350
Arg Arg Gly Val Ile
355
<210> 42
<211> 440
<212> PRT
<213> 燕麥
<400> 42
Met Pro Pro Thr Pro Ala Thr Ala Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala Val
1 5 10 15
Thr Pro Glu His Ala Ala Arg Ser Phe Pro Arg Val Val Arg Val Asn
20 25 30
Pro Arg Ser Asp Arg Phe Pro Val Leu Ser Phe His His Val Glu Leu
35 40 45
Trp Cys Ala Asp Ala Ala Ser Ala Ala Gly Arg Phe Ser Phe Ala Leu
50 55 60
Gly Ala Pro Leu Ala Ala Arg Ser Asp Leu Ser Thr Gly Asn Ser Ala
65 70 75 80
His Ala Ser Leu Leu Leu Arg Ser Gly Ala Leu Ala Phe Leu Phe Thr
85 90 95
Ala Pro Tyr Ala Pro Pro Pro Gln Glu Ala Ala Thr Ala Ala Ala Thr
100 105 110
Ala Ser Ile Pro Ser Phe Ser Ala Asp Ala Ala Arg Thr Phe Ala Ala
115 120 125
Ala His Gly Leu Ala Val Arg Ser Val Gly Val Arg Val Ala Asp Ala
130 135 140
Ala Glu Ala Phe Arg Val Ser Val Ala Gly Gly Ala Arg Pro Ala Phe
145 150 155 160
Ala Pro Ala Asp Leu Gly His Gly Phe Gly Leu Ala Glu Val Glu Leu
165 170 175
Tyr Gly Asp Val Val Leu Arg Phe Val Ser Tyr Pro Asp Glu Thr Asp
180 185 190
Leu Pro Phe Leu Pro Gly Phe Glu Arg Val Ser Ser Pro Gly Ala Val
195 200 205
Asp Tyr Gly Leu Thr Arg Phe Asp His Val Val Gly Asn Val Pro Glu
210 215 220
Met Ala Pro Val Ile Asp Tyr Met Lys Gly Phe Leu Gly Phe His Glu
225 230 235 240
Phe Ala Glu Phe Thr Ala Glu Asp Val Gly Thr Thr Glu Ser Gly Leu
245 250 255
Asn Ser Val Val Leu Ala Asn Asn Ser Glu Ala Val Leu Leu Pro Leu
260 265 270
Asn Glu Pro Val His Gly Thr Lys Arg Arg Ser Gln Ile Gln Thr Tyr
275 280 285
Leu Glu Tyr His Gly Gly Pro Gly Val Gln His Ile Ala Leu Ala Ser
290 295 300
Asn Asp Val Leu Arg Thr Leu Arg Glu Met Arg Ala Arg Thr Pro Met
305 310 315 320
Gly Gly Phe Glu Phe Met Ala Pro Pro Gln Ala Lys Tyr Tyr Glu Gly
325 330 335
Val Arg Arg Ile Ala Gly Asp Val Leu Ser Glu Glu Gln Ile Lys Glu
340 345 350
Cys Gln Glu Leu Gly Val Leu Val Asp Arg Asp Asp Gln Gly Val Leu
355 360 365
Leu Gln Ile Phe Thr Lys Pro Val Gly Asp Arg Pro Thr Phe Phe Leu
370 375 380
Glu Met Ile Gln Arg Ile Gly Cys Met Glu Lys Asp Glu Val Gly Gln
385 390 395 400
Glu Tyr Gln Lys Gly Gly Cys Gly Gly Phe Gly Lys Gly Asn Phe Ser
405 410 415
Glu Leu Phe Lys Ser Ile Glu Asp Tyr Glu Lys Ser Leu Glu Val Lys
420 425 430
Gln Ser Val Val Ala Gln Lys Ser
435 440
<210> 43
<211> 439
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 與在第109位包含缺失的SEQ ID 42相同的HPPD蛋白
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (109)..(109)
<223> 缺失Ala
<400> 43
Met Pro Pro Thr Pro Ala Thr Ala Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala Val
1 5 10 15
Thr Pro Glu His Ala Ala Arg Ser Phe Pro Arg Val Val Arg Val Asn
20 25 30
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<213> 玉米
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<212> DNA
<213> 熒光假單胞菌
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aacgagccca acagcatcgc ctcctacttt gcggccgaac acggcccgtc ggtgtgcggc 240
atggcgttcc gcgtgaagga ctcgcaaaag gcctacaacc gcgccctgga actcggcgcc 300
cagccgatcc atattgacac cgggccgatg gaattgaacc tgccggcgat caagggcatc 360
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acttccaagg ccatgagtgc gccggacggc atgatccgca tcccgctgaa cgaagagtcg 660
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<212> PRT
<213> 熒光假單胞菌
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355