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      通過調(diào)節(jié)抗體的含糖量制備抗體的方法與流程

      文檔序號:12284533閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種用于制備具有調(diào)節(jié)的糖鏈含量的抗體的方法,該方法包括:在含有甘油作為用于調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑的介質(zhì)中培養(yǎng)表達(dá)抗體的細(xì)胞。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述介質(zhì)還包含選自包含錳和尿苷的組的一種或多種,作為用于調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述糖鏈含量是選自包含半乳糖基化含量和α巖藻糖基化含量的組的一種或多種。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述抗體是曲妥珠單抗。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述培養(yǎng)包括主培養(yǎng)和進(jìn)料分批培養(yǎng)。

      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,包括:

      (a)在含有甘油和錳的介質(zhì)中培養(yǎng)表達(dá)抗體的細(xì)胞;和

      (b)在還含有尿苷的介質(zhì)中培養(yǎng)在步驟(a)中培養(yǎng)的所述細(xì)胞。

      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其中所述步驟(a)可進(jìn)行3天到8天。

      8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,還包括(c)通過加入含有甘油和錳的進(jìn)料介質(zhì)培養(yǎng)在所述步驟(b)中培養(yǎng)的所述細(xì)胞。

      9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其中所述步驟(c)的所述培養(yǎng)是進(jìn)料分批培養(yǎng)。

      10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述介質(zhì)包含濃度為0.1%到5%(v/v)的甘油。

      11.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中所述介質(zhì)包含濃度為10μM到200μM的錳或濃度為1mM到10mM的尿苷。

      12.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中所述錳是氯化錳。

      13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中通過所述方法制備的所述抗體糖鏈含量包括35%到50%范圍內(nèi)的半乳糖基化含量和8%到20%范圍內(nèi)的α巖藻糖基化含量。

      14.一種用于制備具有調(diào)節(jié)的糖鏈含量抗體的方法,該方法包括:

      (a)在含有甘油和錳的介質(zhì)中培養(yǎng)表達(dá)抗體的細(xì)胞;

      (b)在含有尿苷的介質(zhì)中培養(yǎng)在步驟(a)中培養(yǎng)的所述細(xì)胞;和

      (c)使用含甘油和錳的介質(zhì)進(jìn)料分批培養(yǎng)所述細(xì)胞。

      15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法,其中所述介質(zhì)包含濃度為0.5%到3%(v/v)的甘油,濃度為20μM到120μM的錳,和濃度為3mM到10mM的尿苷。

      16.一種具有調(diào)節(jié)的糖鏈含量的抗體群,由根據(jù)權(quán)利要求1到15中的任一項所述的方法制備。

      17.一種調(diào)節(jié)抗體糖鏈含量的方法,該方法包括在含有甘油作為調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑的介質(zhì)中培養(yǎng)表達(dá)抗體的細(xì)胞。

      18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法,其中所述介質(zhì)還包含選自包括錳和尿苷的組中的一種或多種作為調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑。

      19.一種用于調(diào)節(jié)抗體糖鏈含量的介質(zhì)組合物,所述介質(zhì)組合物包含甘油作為調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑。

      20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的介質(zhì)組合物,其中用于調(diào)節(jié)所述抗體糖鏈含量的添加劑還包含選自包括錳和尿苷的組中的一種或多種。

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