本發(fā)明涉及新型化合物、包含所述化合物的藥物組合物、用于制備所述化合物的方法和中間體以及所述化合物在療法中的用途。更具體地說(shuō)，其涉及1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲或其藥學(xué)上可接受的鹽，其顯示出TrkA激酶抑制并且可用于治療疼痛、癌癥、炎癥/炎性疾病、神經(jīng)變性疾病、某些感染性疾病、舍格倫氏綜合征、子宮內(nèi)膜異位、糖尿病性周圍神經(jīng)病變、前列腺炎、盆腔疼痛綜合征、與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病以及由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。用于疼痛疾患的現(xiàn)有治療方案利用若干類別的化合物。鴉片類(諸如嗎啡)具有若干缺點(diǎn)，包括催吐作用、便秘作用和負(fù)呼吸作用、以及成癮的可能性。非甾體抗炎止痛劑(NSAID，諸如COX-1或COX-2型)也具有包括治療劇痛功效不佳在內(nèi)的缺點(diǎn)。另外，COX-1抑制劑可引起粘膜潰瘍。因此，持續(xù)需要用于減輕疼痛、特別是慢性疼痛的新型且更有效的治療。Trk′s類為由一組可溶性生長(zhǎng)因子(稱為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NT))活化的高親和力受體酪氨酸激酶。Trk受體家族具有三個(gè)成員：TrkA、TrkB和TrkC。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子為(i)活化TrkA的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、(ii)活化TrkB的腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)和NT-4/5和(iii)活化TrkC的NT3。Trk′s在神經(jīng)元組織中廣泛表達(dá)并且涉及神經(jīng)元細(xì)胞的維持、信號(hào)傳導(dǎo)和存活(Patapoutian，A.等，CurrentOpinioninNeurobiology，2001，11，272-280)。已證實(shí)Trk/神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子途徑的抑制劑在許多疼痛的臨床前動(dòng)物模型中是有效的。例如，已顯示拮抗性NGF和TrkA抗體諸如RN-624在炎性和神經(jīng)性疼痛動(dòng)物模型(Woolf，C.J.等，(1994)Neuroscience62，327-331；Zahn，P.K.等，(2004)J.Pain5，157-163；McMahon，S.B.等，(1995)Nat.Med.1，774-780；Ma，Q.P.和Woolf，C.J.(1997)NeuroReport8，807-810；Shelton，D.L.等，(2005)Pain116，8-16；Delafoy，L.等，(2003)Pain105，489-497；Lamb，K.等，(2003)Neurogastroenterol.Motil.15，355-361；Jaggar，S.I.等，(1999)Br.J.Anaesth.83，442-448)和神經(jīng)性疼痛動(dòng)物模型(Ramer，M.S.和Bisby，M.A.(1999)Eur.J.Neurosci.11，837-846；Ro，L.S.等(1999)Pain79，265-274；Herzberg，U.等，(1997)Neuroreport8，1613-1618；Theodosiou，M.等，(1999)Pain81，245-255；Li，L.等，(2003)Mol.Cell.Neurosci.23，232-250；Gwak，Y.S.等，(2003)Neurosci.Lett.336，117-120)中是有效的。還已顯示由腫瘤細(xì)胞和腫瘤侵入巨噬細(xì)胞分泌的NGF直接刺激位于周圍疼痛纖維上的TrkA。使用小鼠和大鼠中的各種腫瘤模型，已證實(shí)用單克隆抗體中和NGF抑制癌癥相關(guān)疼痛至類似于或超過嗎啡最高耐受劑量的程度。因?yàn)門rkA激酶可充當(dāng)NGF驅(qū)動(dòng)性生物反應(yīng)的中介物，所以TrkA和/或其他Trk激酶的抑制劑可提供一種用于慢性疼痛狀態(tài)和癌癥相關(guān)疼痛的有效治療。最新文獻(xiàn)還已顯示Trk激酶的過度表達(dá)、活化、擴(kuò)增和/或突變與許多癌癥有關(guān)，所述癌癥包括成神經(jīng)細(xì)胞癌(Brodeur，G.M.，Nat.Rev.Cancer2003，3，203-216)、卵巢癌(Davidson.B.等，Clin.CancerRes.2003，9，2248-2259)、結(jié)腸直腸癌(Bardelli，A.，Science2003，300，949)、黑色素瘤(Truzzi，F(xiàn).等，Dermato-Endocrinology2011，3(1)，第32-36頁(yè))、頭頸癌(Yilmaz，T.等，CancerBiologyandTherapy2010，10(6)，第644-653頁(yè))、胃癌(Du，J.等，WorldJournalofGastroenterology2003，9(7)，第1431-1434頁(yè))、肺癌(RicciA.等，AmericanJournalofRespiratoryCellandMolecularBiology25(4)，第439-446頁(yè))、乳腺癌(Jin，W.等，Carcinogenesis2010，31(11)，第1939-1947頁(yè))、分泌性乳腺癌(Euthus，D.M.，等，CancerCell2002，2(5)，第347-348頁(yè))、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤(Wadhwa，S.等，JournalofBiosciences2003，28(2)，第181-188頁(yè))、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤(Gruber-Olipitz，M.等，JournalofProteomeResearch2008，7(5)，第1932-1944頁(yè))、唾液腺癌(Li，Y.-G.等，ChineseJournalofCancerPreventionandTreatment2009，16(6)，第428-430頁(yè))、乳頭狀甲狀腺癌(Greco，A.等，MolecularandCellularEndocrinology2010，321(1)，第44-49頁(yè))以及成人骨髓性白血病(Eguchi，M.等，Blood1999，93(4)，第1355-1363頁(yè))。在癌癥的臨床前模型中，TrkA、B和C的非選擇性小分子抑制劑可有效抑制腫瘤生長(zhǎng)并阻止腫瘤轉(zhuǎn)移(Nakagawara，A.(2001)CancerLetters169：107-114；Meyer，J.等，(2007)Leukemia，21(10)：2171-2180；Pierottia，M.A.和GrecoA.，(2006)CancerLetters232：90-98；EricAdriaenssens，E.等，CancerRes(2008)68：(2)346-351)。這些數(shù)據(jù)支持使用Trk抑制劑治療癌癥的基本原理。另外，已顯示神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子/Trk途徑的抑制可有效用NGF抗體或非選擇性小分子TrkA抑制劑治療炎性疾病的臨床前模型。例如，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子/Trk途徑的抑制已涉及以下疾病的臨床前模型：炎性肺病，包括哮喘(Freund-Michel，V；Frossard，N.，Pharmacology&Therapeutics(2008)117(1)，52-76)；間質(zhì)性膀胱炎(Hu，VivianY等，TheJournalofUrology(2005)，173(3)，1016-21)；膀胱疼痛綜合征(Liu，H.-T.等，(2010)BJUInternational，106(11)，第1681-1685頁(yè))；炎性腸病，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病(Crohn’sdisease)(DiMola，F(xiàn).F等，Gut(2000)46(5)，670-678)；以及炎性皮膚病，諸如過敏性皮膚炎(Dou，Y.-C.等，ArchivesofDermatologicalResearch(2006)298(1)，31-37)、濕疹和銀屑病(Raychaudhuri，S.P.等，J.InvestigativeDermatology(2004)122(3)，812-819)。這些數(shù)據(jù)支持使用Trk抑制劑治療炎性疾病的基本原理。TrkA受體還被認(rèn)為對(duì)于克氏錐蟲在人宿主中的寄生蟲感染(美洲錐蟲病)的疾病過程是關(guān)鍵的(deMelo-Jorge，M.等，CellHost&Microbe(2007)1(4)，251-261)。Trk抑制劑還發(fā)現(xiàn)可用于治療與骨重塑調(diào)節(jié)失衡有關(guān)的疾病，諸如骨質(zhì)疏松癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及骨轉(zhuǎn)移。骨轉(zhuǎn)移為常見的癌癥并發(fā)癥，在多至70％患有晚期乳腺癌或前列腺癌的患者中發(fā)生并且在約15％至30％患有肺癌、結(jié)腸癌、胃癌、膀胱癌、子宮癌、直腸癌、甲狀腺癌或腎癌的患者中發(fā)生。溶骨性轉(zhuǎn)移可引起劇痛、病理性骨折、威脅生命的血鈣過多癥、脊髓壓迫以及其他神經(jīng)壓迫綜合征。出于這些原因，骨轉(zhuǎn)移為一種嚴(yán)重且昂貴的癌癥并發(fā)癥。因此，可誘導(dǎo)增殖性成骨細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡的藥劑將為高度有利的。已在小鼠骨折模型中的骨形成區(qū)域內(nèi)觀察到TrkA受體的表達(dá)(K.Asaumi等，Bone(2000)26(6)625-633)。另外，在幾乎所有的骨形成細(xì)胞中觀察到NGF的定位(K.Asaumi等，Bone(2000)26(6)625-633)。最近，已證實(shí)Trk抑制劑抑制了由結(jié)合至人hFOB成骨細(xì)胞中的所有三種Trk受體的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子活化的信號(hào)傳導(dǎo)(J.Pinski等，CancerResearch(2002)62，986-989)。這些數(shù)據(jù)支持使用Trk抑制劑治療骨重塑疾病諸如癌癥患者中的骨轉(zhuǎn)移的基本原理。Trk抑制劑還可發(fā)現(xiàn)可用于治療疾病和病癥，諸如舍格倫氏綜合征(Sjogren’ssyndrome)(Fauchais，A.L.等，(2009)ScandinavianJournalofRheumatology，38(1)，第50-57頁(yè))、子宮內(nèi)膜異位(BarcenaDeArellano，M.L.等，(2011)ReproductiveSciences，18(12)，第1202-1210頁(yè)；BarcenaDeArellano等，(2011)FertilityandSterility，95(3)，第1123-1126頁(yè)；Cattaneo，A.，(2010)CurrentOpinioninMolecularTherapeutics，12(1)，第94-106頁(yè))、糖尿病性周圍神經(jīng)病變(Kim，H.C.等，(2009)DiabeticMedicine，26(12)，第1228-1234頁(yè)；Siniscalco，D.等，(2011)CurrentNeuropharmacology，9(4)，第523-529頁(yè)；Ossipov，M.H.，(2011)CurrentPainandHeadacheReports，15(3)，第185-192頁(yè))、以及前列腺炎和盆腔疼痛綜合征(Watanabe，T.等，(2011)BJUInternational，108(2)，第248-251頁(yè)；以及Miller，L.J.等，(2002)Urology，59(4)，第603-608頁(yè))。TrkA抑制劑還可用于治療由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF，也稱為CCN2)異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病，例如涉及組織重塑和纖維化的疾病。CTGF為組織重塑和纖維化的重要中介物(Lipson，K.E.等，(2012)，F(xiàn)ibrogenesis&TissueRepair2012，5(增刊1)：S24)并且減少CTGF信號(hào)傳導(dǎo)的療法已證明作為纖維化的治療是有效的(Li，G.等，J.GeneMed.，2006，8：889-900)。CTGF與TrkA相互作用并活化所述TrkA(Wahab，N.A.，(2005)J.Am.Soc.Nephrol.16：340-351)并且TrkA抑制劑對(duì)此途徑的抑制可證明可用于治療各種纖維化疾病諸如雷諾氏綜合征(Raynaud’sSyndrome)、特發(fā)性肺纖維化、瘢痕(肥大型、瘢痕瘤型和其他形式)、硬化、心內(nèi)膜心肌纖維化、心房纖維化、骨髓纖維化、進(jìn)行性塊狀纖維化(肺)、腎源性系統(tǒng)性纖維化、硬皮病、系統(tǒng)性硬化、關(guān)節(jié)纖維化以及眼部纖維化。已知據(jù)稱可用于治療疼痛或癌癥的幾種類別的小分子Trk激酶抑制劑(Wang，T等，ExpertOpin.Ther.Patents(2009)19(3)，305-319；McCarthyC.和WalkerE.，ExpertOpin.Ther.Patents2014，24(7)：731-744)。國(guó)際申請(qǐng)公布No.WO2010/032856描述了由以下式表示的化合物其中環(huán)B為芳族環(huán)，環(huán)D為芳族環(huán)，并且L為NR3、NR3C(R4aR4b)、O或OC(R4aR4b)，所述化合物被視為速激肽受體拮抗劑。國(guó)際申請(qǐng)公布No.WO2012/158413公開了一個(gè)亞類的作為TrkA抑制劑的具有以下通式的吡咯烷基脲化合物：其中：Y為一個(gè)鍵、-O-或-OCH2-；X為O、S或NH；R1為(1-3C烷氧基)(1-6C)烷基、(三氟甲氧基)(1-6C)烷基、(1-3C硫烷基)(1-6C)烷基、單氟(1-6C)烷基、二氟(1-6C)烷基、三氟(1-6C)烷基、四氟(2-6C)烷基、五氟(2-6C)烷基、氰基(1-6C)烷基、氨基羰基(1-6C)烷基、羥基(1-6C)烷基、二羥基(2-6C)烷基、(1-6C)烷基、(1-3C烷基氨基)(1-3C)烷基、(1-4C烷氧基羰基)(1-6C)烷基、氨基(1-6C)烷基、羥基(1-3C烷氧基)(1-6C)烷基、二(1-3C烷氧基)(1-6C)烷基、(1-3C烷氧基)三氟(1-6C)烷基、羥基三氟(1-6C)烷基、(1-4C烷氧基羰基)(1-3C烷氧基)(1-6C)烷基、羥基羰基(1-3C烷氧基)(1-6C)烷基、hetAr5(CH2)0-1或Ar5(CH2)0-1；hetAr5為具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O或S的環(huán)雜原子的5-6元雜芳基環(huán)，其中所述環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基和CF3的取代基取代；Ar5為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基、CF3O-、(1-4C)烷氧基羰基和氨基羰基的基團(tuán)取代的苯基；B為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、CF3、CF3O-、(1-4C)烷氧基、羥基(1-4C)烷基、(1-6C)烷基和CN的取代基取代的苯基；具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、S和O的環(huán)雜原子并任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2和羥基(1-2C)烷基的基團(tuán)取代的5-6元雜芳基；1-6C烷基；或(1-6C)烷氧基；并且環(huán)C為式C-1、C-2或C-3：在WO2012/158413中此類化合物的實(shí)例包括實(shí)施例511中具有以下結(jié)構(gòu)的化合物：其也被稱為1-((3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(在下文中為“化合物2”)，以及具有以下結(jié)構(gòu)的實(shí)施例441的化合物：其也被稱為1-(1′，4-二甲基-1-苯基-1H，1′H-[3，4′-二吡唑]-5-基)-3-((3S，4R)-4-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)脲(在下文中為“化合物3”)?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)具有出乎意料的且特別需要的特征的化合物可通過選擇2-甲基嘧啶-5-基作為R4基團(tuán)并選擇3-氟苯基作為B基團(tuán)來(lái)獲得。發(fā)明概述本文提供了化合物1：或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述化合物為TrkA的抑制劑。所述化合物還可由化學(xué)名1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲描述。已出乎意料地發(fā)現(xiàn)化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3在大鼠中具有顯著更低的預(yù)測(cè)的人IV(靜脈內(nèi))清除率。還出乎意料地發(fā)現(xiàn)化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3在大鼠中在經(jīng)口給藥10mg/kg之后實(shí)現(xiàn)更高的經(jīng)口AUC(血漿藥物濃度-時(shí)間曲線下面積)。還出乎意料地發(fā)現(xiàn)化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3在大鼠中在經(jīng)口給藥10mg/kg之后實(shí)現(xiàn)更高的C最大值(在血漿藥物濃度-時(shí)間曲線中實(shí)現(xiàn)的最大濃度)。還出乎意料地發(fā)現(xiàn)化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3在大鼠中在經(jīng)口給藥10mg/kg之后實(shí)現(xiàn)更高的谷濃度(在血漿藥物濃度-時(shí)間曲線中實(shí)現(xiàn)的最小濃度)。還出乎意料地發(fā)現(xiàn)化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3具有更高的估算的TrkA抑制。化合物1相對(duì)于化合物2具有出乎意料地提高的外周至中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布，如通過在大鼠中經(jīng)口給藥之后較高的血漿與腦內(nèi)的比率證明的?；衔?相對(duì)于化合物2還具有出乎意料地減小的hERG(人Ether-à-go-go-相關(guān)基因)通道的抑制活性。本文還提供了治療由TrkA調(diào)節(jié)的疾病或病癥的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療慢性和急性疼痛的方法，所述疼痛包括但不限于炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛、以及與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛，所述方法包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療癌癥的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療炎癥或炎性疾病的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療神經(jīng)變性疾病的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療前列腺炎或盆腔疼痛綜合征的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病的方法，所述疾病諸如骨質(zhì)疏松癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及骨轉(zhuǎn)移，所述方法包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療選自某些感染性疾病、舍格倫氏綜合征、子宮內(nèi)膜異位和糖尿病性周圍神經(jīng)病變的疾病和病癥的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了治療由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病的方法，其包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，任何以上治療包括向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與另一種治療劑的組合。本文還提供了一種包含化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療慢性和急性疼痛，包括但不限于炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛、以及與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療癌癥。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療炎癥或炎性疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療神經(jīng)變性疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療前列腺炎或盆腔疼痛綜合征。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病，諸如骨質(zhì)疏松癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨轉(zhuǎn)移。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療某些感染性疾病、舍格倫氏綜合征、子宮內(nèi)膜異位和糖尿病性周圍神經(jīng)病變。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療諸如慢性和急性疼痛的疾病和病癥的藥物中的用途，所述疼痛包括但不限于炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛、以及與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療選自以下各項(xiàng)的疾病和病癥的藥物中的用途：癌癥、炎癥或炎性疾病、神經(jīng)變性疾病、某些感染性疾病、合格倫氏綜合征、子宮內(nèi)膜異位、糖尿病性周圍神經(jīng)病變、前列腺炎、盆腔疼痛綜合征以及與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病(諸如骨質(zhì)疏松癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨轉(zhuǎn)移)。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病的藥物中的用途。本文還提供了可用于制備TrkA抑制性化合物諸如化合物1的中間體和制備此類中間體的方法。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法、分離方法和純化方法。附圖簡(jiǎn)述圖1為比較化合物1(三角形)和化合物2(正方形)在大鼠中經(jīng)口給藥10mg/kg之后血漿藥物濃度(μg/mL)對(duì)比時(shí)間(小時(shí))的圖。圖2為比較化合物1(三角形)和化合物3(圓形)在大鼠中經(jīng)口給藥10mg/kg之后血漿藥物濃度(μg/mL)對(duì)比時(shí)間(小時(shí))的圖。圖3為比較化合物1(三角形)和化合物2(正方形)在大鼠中經(jīng)口給藥10mg/kg之后估算的TrkA抑制百分比對(duì)比時(shí)間(小時(shí))的比較。圖4為比較化合物1(三角形)和化合物3(圓形)在大鼠中經(jīng)口給藥10mg/kg之后估算的TrkA抑制百分比對(duì)比時(shí)間(小時(shí))的比較。發(fā)明詳述本文提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽，所述化合物為TrkA的抑制劑。所述化合物還可由化學(xué)名1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲描述。已發(fā)現(xiàn)化合物1具有特別意外且希望的特征?；衔?特別有利的特征為其預(yù)測(cè)的人IV清除率，所述清除率相對(duì)于化合物2和化合物3的預(yù)測(cè)的IV清除率顯著更低，如表1所示。表1*不可用**針對(duì)臨床前物種觀察到的平均校正分?jǐn)?shù)用于預(yù)測(cè)人的IV清除率。***所有測(cè)試物種的臨床前平均校正因子在表1中，預(yù)測(cè)的人IV清除率由在靜脈內(nèi)(IV)給藥1mg/kg之后從臨床前物種(小鼠、大鼠、狗和猴)中收集的血漿中的化合物濃度對(duì)比時(shí)間數(shù)據(jù)計(jì)算。血漿中的化合物濃度通過LC-MS(液相色譜法-質(zhì)譜法)測(cè)量。個(gè)別Cp/t曲線(在任何時(shí)間t時(shí)血漿中的藥物濃度)的AUCinf值(從時(shí)間0外推至無(wú)限時(shí)間的給藥間隔的血漿濃度-時(shí)間曲線下面積)使用線性-梯形積分法和來(lái)自Cp/t曲線終點(diǎn)的一級(jí)外推法來(lái)確定，并且清除率(CL)使用劑量/AUCinf計(jì)算。預(yù)測(cè)的肝清除率(CLh)值通過使用表2中列出且以下等式中所采用的身體和生理標(biāo)度因子測(cè)量關(guān)于化合物在肝微粒體中的穩(wěn)定性的體外半衰期(t1/2)來(lái)計(jì)算(1mg/mL；20分鐘)，所述標(biāo)度因子用于預(yù)測(cè)內(nèi)在清除率(CLint)和肝清除率(CLhep)：其中D為每份質(zhì)量的肝的細(xì)胞色素P450-相關(guān)蛋白的量，W為每份重量的動(dòng)物存在的平均肝質(zhì)量，C為肝微粒體濃度，并且Q為物種依賴性肝血流量。表2物種WaQbDc小鼠87.09050大鼠45.07045兔30.87178狗32.03555猴32.04460人25.72053a)W＝每份質(zhì)量的動(dòng)物(kg)的平均肝質(zhì)量(g)。b)Q＝平均肝血流量(mL/min/kg)。c)D(微粒體)＝每份質(zhì)量的肝(g)的細(xì)胞色素P450-相關(guān)蛋白的量(mg)。體內(nèi)/體外校正因子然后通過用IVCL值除以微粒體CLh值來(lái)測(cè)定。每種化合物的臨床前校正因子的算術(shù)平均值用于由測(cè)量的人微粒體CLh預(yù)測(cè)人IV清除率(CLh/校正因子)。另外，化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3在經(jīng)口給藥(10mg/kg)之后實(shí)現(xiàn)更高的經(jīng)口AUC(血漿藥物濃度-時(shí)間曲線下面積)、更高的C最大值(在血漿藥物濃度-時(shí)間曲線中實(shí)現(xiàn)的最大濃度)、以及更高的谷濃度(在血漿藥物濃度-時(shí)間曲線中實(shí)現(xiàn)的最小濃度)，如由其大鼠藥代動(dòng)力學(xué)曲線舉例說(shuō)明的，如圖1和圖2所示并且如表3中所總結(jié)的。表3大鼠PK參數(shù)化合物1化合物2化合物3AUC(μg-hr/mL)2.570.9251.06C最大值(μg/mL)1.060.4200.498谷濃度(μg/mL)0.001340.0004460.00044圖3和圖4分別示出了化合物1相對(duì)于化合物2在大鼠中在經(jīng)口給藥10mg/kg之后估算的TrkA抑制和化合物1相對(duì)于化合物3的TrkA抑制。圖3和圖4中的曲線使用以下等式來(lái)計(jì)算：其中I最小值和I最大值分別為最小和最大可能的靶標(biāo)抑制，IC50為靶標(biāo)被抑制50％時(shí)的濃度，C為抑制劑的濃度，并且n為Hill斜率。如圖3和圖4所示的，化合物1估算的TrkA抑制比化合物2和化合物3更高?；衔?的較低清除率、較高AUC、較高C最大值和較高谷濃度在向患者施用化合物1之后的一整天內(nèi)引起與化合物2和化合物3相比更大的TrkA受體抑制。這轉(zhuǎn)換成化合物1相對(duì)于化合物2和化合物3的更大治療功效。實(shí)現(xiàn)提高的治療功效的能力在治療罹患例如中度至重度疼痛、某些炎癥疾患或癌癥(包括由異常TrkA信號(hào)傳導(dǎo)驅(qū)動(dòng)的癌癥)的患者中是重要的。另外，化合物1的較低清除率在施用之后引起相對(duì)于化合物2和化合物3更長(zhǎng)的半衰期，從而在經(jīng)口、靜脈內(nèi)或皮下施用所述化合物之后引起更持久的TrkA受體抑制。增加的半衰期具有提供更持久的功效和/或減少的藥物給藥頻率的益處。此外，化合物1的較低人清除率和較高經(jīng)口AUC有益之處在于相對(duì)于化合物2和化合物3僅需要更低劑量的化合物1來(lái)有效抑制TrkA受體并提供給定治療功效。功效所需要的化合物劑量降低轉(zhuǎn)換成了通過給藥方案改進(jìn)藥物耐受性、治療成本和患者順應(yīng)性。化合物1相對(duì)于化合物2具有出乎意料地提高的外周至中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布，如通過在大鼠中經(jīng)口給藥之后較高的血漿與腦內(nèi)的比率證明的，如表4中所示的。維持低腦暴露具有降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)副作用的風(fēng)險(xiǎn)的益處，所述副作用諸如與認(rèn)知或運(yùn)動(dòng)受損有關(guān)的副作用。中樞神經(jīng)系統(tǒng)暴露減少有益之處在于在患者中對(duì)于給定治療作用發(fā)生較少或減少的副作用并且/或者在觀察到任何劑量限制性副作用之前實(shí)現(xiàn)較大治療作用?；衔?相對(duì)于化合物2還具有出乎意料地減小的針對(duì)hERG(人Ether-à-go-go-相關(guān)基因)通道的抑制活性。hERG通道功能的抑制可導(dǎo)致嚴(yán)重的藥物誘導(dǎo)性(獲得性)長(zhǎng)QT綜合征副作用，所述副作用可產(chǎn)生伴隨的猝死風(fēng)險(xiǎn)。由于此副作用的嚴(yán)重性質(zhì)，具有針對(duì)hERG的減小的抑制活性是希望的。表4化合物1相對(duì)于化合物2的上述意外特征可能不能合理地預(yù)期來(lái)自這些化合物之間的微小結(jié)構(gòu)差異?；衔?對(duì)比化合物2的僅有結(jié)構(gòu)差異為去除了單個(gè)氟原子。然而，在本領(lǐng)域中已證實(shí)從化合物中去除單個(gè)氟原子通常不能提供在預(yù)測(cè)的人清除率中具有改進(jìn)的變化的化合物，所述變化為對(duì)于化合物1相對(duì)于化合物2觀察到的。實(shí)際上，在本領(lǐng)域中存在具有藥物繼續(xù)的許多實(shí)例，它們證實(shí)具有更多氟原子的類似物相對(duì)于其具有更少氟原子的類似物傾向于具有更低的體內(nèi)清除率(參見，例如，Barker，A.J.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.11(2001)1911-1914；Rosenblum，S.B.等，J.Med.Chem.，41，(1998)973-980；Brown，M.F.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.14(2004)2175-2179)。相比之下，單氟化合物1相對(duì)于二氟化合物2具有預(yù)測(cè)的更低的人清除率。類似地，化合物1相對(duì)于化合物2更高C最大值、更高AUC、更高谷暴露和更高TrkA靶敲除的藥代動(dòng)力學(xué)(PK)優(yōu)點(diǎn)(如通過臨床前大鼠PK證實(shí)的)對(duì)于此小結(jié)構(gòu)變化為相當(dāng)顯著且出乎意料的。另外，化合物1和化合物3的PK參數(shù)的比較證實(shí)化合物1的提高的藥代動(dòng)力學(xué)不是所有單氟類似物的一般現(xiàn)象。實(shí)際上，盡管具有單氟取代的苯基，但是化合物3與化合物1相比顯示一個(gè)更差的投射的人清除率和就C最大值、AUC、谷暴露和TrkA靶標(biāo)敲除而言的較差PK。在化合物1中甲基嘧啶基與單氟取代的苯基部分的獨(dú)特組合出乎意料地提供以上所列出的優(yōu)異特征。本文還提供化合物1的藥學(xué)上可接受的鹽。具體是鹽為鹽酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種化合物1的單鹽酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種化合物1的二鹽酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了化合物1的游離堿形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其鹽可以溶劑化物形式分離，并且因此其任何此類溶劑化物被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，化合物1或其鹽可以非溶劑化形式以及與藥學(xué)上可接受的溶劑諸如水、乙醇等溶劑化的形式存在。術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指物質(zhì)或組合物為在化學(xué)上和/或毒理學(xué)上與構(gòu)成制劑的其他成分、和/或用它治療的哺乳動(dòng)物相容的。本文還提供了一種用于制備化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，所述方法包括：(a)使具有以下式II-A的化合物與具有以下式III的化合物在羰基二咪唑或三光氣和堿存在下反應(yīng)；或者(b)使具有以下式II-A的化合物與具有以下式IV的化合物其中L1為離去基團(tuán)，在堿存在下反應(yīng)；或者(c)使具有以下式V的化合物其中L2為離去基團(tuán)，與具有以下式III的化合物在堿存在下反應(yīng)；或者(d)使具有以下式VI的化合物與二苯基磷酰基疊氮反應(yīng)以形成一種中間體，接著使所述中間體與具有以下式III的化合物在堿存在下反應(yīng)；或者(e)使具有以下式II-A的化合物與具有以下式VII的化合物在堿存在下反應(yīng)；并且去除保護(hù)基團(tuán)(如果存在的話)并任選地制備其藥學(xué)上可接受的鹽。參考方法(a)，所述堿可為胺堿，諸如三乙胺或二異丙基胺。適合的溶劑包括二氯甲烷、二氯乙烷、THF、DMA以及DMF。所述反應(yīng)合宜地在環(huán)境溫度下進(jìn)行。參考方法(b)，所述離去基團(tuán)可為例如苯氧基或4-硝基苯氧基。所述堿可為胺堿，諸如三乙胺或二異丙基胺。適合的溶劑包括DMA、DMF和DCE。所述反應(yīng)合宜地在環(huán)境溫度下進(jìn)行。參考方法(c)，所述離去基團(tuán)可為例如苯氧基或4-硝基苯氧基。所述堿可為胺堿，諸如三乙胺或二異丙基胺。適合的溶劑包括DCE、DMA和DMF。所述反應(yīng)合宜地在環(huán)境溫度下進(jìn)行。參考方法(d)，所述堿可為胺堿，諸如三乙胺或二異丙基胺。適合的溶劑包括甲苯和DMF。所述反應(yīng)合宜地在高溫下進(jìn)行，所述高溫例如溶劑的回流溫度。參考方法(e)，所述堿可為胺堿，諸如三乙胺或二異丙基胺。適合的溶劑包括DCM、DCE、DMF和THF。所述反應(yīng)合宜地在約0℃與環(huán)境溫度之間的溫度下進(jìn)行。本文還提供了一種用于制備式II化合物的外消旋混合物的方法其中B環(huán)和NH2部分處于反式構(gòu)型中。式II化合物(諸如式II-A化合物)可用于制備諸如TrkA抑制性化合物諸如化合物1的化合物。因此，本文提供了一種用于制備式II化合物的外消旋混合物的方法其中：環(huán)B為Ar1或hetAr1；Ar1為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的苯基：鹵素、CF3、CF3O-、(1-4C)烷氧基、羥基(1-4C)烷基、(1-6C)烷基以及CN；并且hetAr1為具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、S和O的環(huán)雜原子并且任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2和羥基(1-2C)烷基的基團(tuán)取代的5-6元雜芳基，所述方法包括：(a)使以下式(a)化合物其中環(huán)B為針對(duì)式II所定義的，與具有以下式的2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺在催化量的酸存在下反應(yīng)，以提供以下式(b)化合物其中環(huán)B為針對(duì)式II所定義的；(b)使所述式(b)化合物與羰基二咪唑在催化量的咪唑鹽酸鹽存在下反應(yīng)，接著用氨處理，以提供具有以下式(c)的化合物其中環(huán)B為針對(duì)式II所定義的；以及(c)使所述式(c)化合物與次氯酸鈉反應(yīng)，接著用KOH處理，然后用HCl處理，以提供作為反式式II外消旋混合物的所述式II化合物。參考步驟(a)，所述酸可為有機(jī)酸，諸如三氟乙酸。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的苯基：鹵素、CF3、CF3O-、(1-4C)烷氧基、羥基(1-4C)烷基、(1-6C)烷基以及CN。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素的取代基取代的苯基。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)氟取代的苯基。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為3-氟苯基。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為3，4-二氟苯基。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、S和O的環(huán)雜原子并且任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2和羥基(1-2C)烷基的基團(tuán)取代的5-6元雜芳基。在以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的基團(tuán)取代的吡啶基環(huán)、苯硫基環(huán)、噻唑基環(huán)、噁唑基環(huán)或異噁唑基環(huán)：(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2以及羥基(1-2C)烷基。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自鹵素和(1-6C)烷基的基團(tuán)取代的吡啶基環(huán)、苯硫基環(huán)、噻唑基環(huán)、噁唑基環(huán)或異噁唑基環(huán)。在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，具有以下式的2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺可通過包括以下各項(xiàng)的方法來(lái)制備：(i)使(氯甲基)三甲基硅烷與2-甲氧基乙胺反應(yīng)，以提供具有以下結(jié)構(gòu)的(2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺以及(ii)用甲醇中的甲醛處理所述(2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺，以提供所述2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺。本文還提供了一種用于分離反式式II作為游離堿或作為二-對(duì)-甲苯酰基-D-酒石酸鹽的對(duì)映體1的方法，其包括：用二-對(duì)-甲苯?；?D-酒石酸處理外消旋反式式II以提供外消旋反式II的二-對(duì)-甲苯?；?D-酒石酸鹽；使反式II的二-對(duì)-甲苯酰基-D-酒石酸鹽重結(jié)晶，以提供反式II的對(duì)映體1的二-對(duì)-甲苯?；?D-酒石酸鹽；以及任選地用無(wú)機(jī)堿處理反式II的對(duì)映體1的二-對(duì)-甲苯?；?D-酒石酸鹽，以提供具有如下所示絕對(duì)構(gòu)型的反式式II的對(duì)映體1的游離堿：在一個(gè)實(shí)施方案中，反式II的對(duì)映體1的二-對(duì)-甲苯酰基-D-酒石酸鹽用于制備諸如TrkA抑制劑化合物諸如化合物1的化合物。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，反式式II的對(duì)映體1的二-對(duì)-甲苯?；?D-酒石酸鹽用于在Shotten-Baumann條件下制備諸如TrkA抑制劑化合物諸如化合物1的化合物，在所述條件中反式式II的對(duì)映體1的二-對(duì)-甲苯酰基-D-酒石酸鹽在由水和有機(jī)溶劑(諸如二氯甲烷)組成的兩相溶劑系統(tǒng)下在諸如氫氧化鈉的堿存在下生成，并且與具有式IV的化合物反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，反式式II的對(duì)映體1的游離堿用于制備諸如TrkA抑制劑化合物諸如化合物1的化合物。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的苯基：鹵素、CF3、CF3O-、(1-4C)烷氧基、羥基(1-4C)烷基、(1-6C)烷基以及CN。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素的取代基取代的苯基。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被一個(gè)或多個(gè)氟取代的苯基。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為3-氟苯基。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為3，4-二氟苯基。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法提供了一種用于制備(3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基甲基)吡咯烷-3-胺的方法。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為具有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、S和O的環(huán)雜原子并且任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2和羥基(1-2C)烷基的基團(tuán)取代的5-6元雜芳基。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的基團(tuán)取代的吡啶基、苯硫基、噻唑基、噁唑基或異噁唑基環(huán)：(1-6C)烷基、鹵素、OH、CF3、NH2以及羥基(1-2C)烷基。在用于分離反式式II的對(duì)映體1的以上方法的一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)B為任選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自鹵素和(1-6C)烷基的基團(tuán)取代的吡啶基、苯硫基、噻唑基、噁唑基或異噁唑基環(huán)。用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法與國(guó)際申請(qǐng)公布號(hào)WO2012/158413中所述的方法相比具有若干優(yōu)點(diǎn)。例如，WO2012/158413中所述的方法包括苯甲醛試劑與硝基甲烷之間的Nitro-Aldol反應(yīng)。然后通過在高壓下加氫來(lái)還原所得2-硝基乙烯基苯中間體。這兩個(gè)反應(yīng)步驟不適合用于大規(guī)模合成，因?yàn)镹itro-Aldol反應(yīng)和由其衍生的硝基中間體不穩(wěn)定并且可能有危險(xiǎn)。相比之下，用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法并不使用任何高危害的化學(xué)劑并且避免了含硝基中間體和加氫作用。另外，在用于制備式II化合物的外消旋混合物的以上方法中使用的所有條件均處于用于大規(guī)模合成的試驗(yàn)工廠中通常可見的標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行參數(shù)內(nèi)，例如所述方法不使用極端溫度并且不需要高壓容器。化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽充當(dāng)TrkA抑制劑的能力已通過實(shí)施例A和實(shí)施例B中所述的試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于治療疾病和病癥，包括但不限于疼痛、癌癥、炎癥/炎性疾病、神經(jīng)變性疾病、某些感染性疾病、合格倫氏綜合征、子宮內(nèi)膜異位、糖尿病性周圍神經(jīng)病變、前列腺炎、盆腔疼痛綜合征、與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病、以及由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。如本文所用的，術(shù)語(yǔ)“治療(treat/treatment)”是指治療性或緩解性措施。有利的或希望的臨床結(jié)果包括但不限于與病癥或疾患有關(guān)的癥狀完全或部分緩解、疾病程度減輕、疾病處于穩(wěn)定(即未惡化)狀態(tài)、疾病進(jìn)展延遲或減慢、疾病狀態(tài)改善或緩和、以及緩解(無(wú)論是部分還是總體)，無(wú)論這些結(jié)果是可檢測(cè)的還是不可檢測(cè)的?！爸委煛边€意味著與未接受治療時(shí)的預(yù)期存活時(shí)間相比延長(zhǎng)的存活時(shí)間。在某些實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于預(yù)防本文所定義的疾病和病癥。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”意指整體或部分預(yù)防本文所述的疾病或疾患或其癥狀的發(fā)作、復(fù)發(fā)或傳播，并且包括在癥狀發(fā)作前施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽?；衔?或其藥學(xué)上可接受的鹽可與一種或多種另外的治療劑組合使用，所述另外的治療劑通過相同或不同的作用機(jī)制起作用。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥物組合”是指通過將超過一種活性成分混合或組合產(chǎn)生的藥物治療劑并且包括固定和不固定的活性成分組合。術(shù)語(yǔ)“固定組合”意指化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種另外的治療劑二者同時(shí)以單一實(shí)體或劑量形式向患者施用。術(shù)語(yǔ)“非固定組合”意指化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種另外的治療劑作為單獨(dú)的實(shí)體同時(shí)或以可變干預(yù)時(shí)限依次向患者施用，其中此施用在患者身體中提供有效水平的兩種或更多種化合物。這些也可用于混合療法(cocktailtherapy)，例如施用三種或更多種活性成分。如本文所用的，“共同施用”意指包括向單一患者施用所選擇的治療劑，并且旨在包括其中所述藥劑通過相同或不同施用途徑或在相同或不同時(shí)間施用的治療方案。此術(shù)語(yǔ)包括向哺乳動(dòng)物施用兩種或更多種藥劑以使得兩種藥劑和/或其代謝物同時(shí)存在于哺乳動(dòng)物中。它包括以單獨(dú)的組合物同時(shí)施用、以單獨(dú)的組合物在不同時(shí)間施用和/或以其中存在兩種藥劑的組合物施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和其他治療劑以單一組合物施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和其他藥劑在所述組合物中混合。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于治療疼痛，包括慢性和急性疼痛。例如，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于治療多種類型的疼痛，包括炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛、背痛、以及與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于治療急性疼痛。如國(guó)際疼痛研究協(xié)會(huì)(InternationalAssociationfortheStudyofPain)定義的急性疼痛由疾病、炎癥或組織損傷所引起。這種類型的疼痛通常例如在創(chuàng)傷或手術(shù)之后突然發(fā)作，并且可能伴隨有焦慮或緊張，并且局限于給定的時(shí)間段和嚴(yán)重性。在一些情況下，它可變成慢性的。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可用于治療慢性疼痛。如國(guó)際疼痛研究協(xié)會(huì)定義的慢性疼痛被廣泛地認(rèn)為代表疾病本身。它可能因環(huán)境和生理因素而惡化。慢性疼痛持續(xù)比急性疼痛更長(zhǎng)的時(shí)間段并且對(duì)大部分醫(yī)學(xué)治療抵抗，通常持續(xù)3個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。它可以并常常引起患者的嚴(yán)重問題。因此，本文提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的疼痛的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述疼痛的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為急性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性背痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為神經(jīng)性疼痛，諸如與糖尿病性周圍神經(jīng)病變或非糖尿病性(例如化學(xué)治療誘導(dǎo)的)周圍神經(jīng)變性有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為炎性疼痛，諸如與骨關(guān)節(jié)炎有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與癌癥有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與手術(shù)有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與骨折有關(guān)的疼痛。本文還提供了一種預(yù)防哺乳動(dòng)物的疼痛的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于預(yù)防所述疼痛的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為急性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性背痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為神經(jīng)性疼痛，諸如與糖尿病性周圍神經(jīng)病變或非糖尿病性(例如化學(xué)治療誘導(dǎo)的)周圍神經(jīng)變性有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為炎性疼痛，諸如與骨關(guān)節(jié)炎有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與癌癥有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與手術(shù)有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為與骨折有關(guān)的疼痛。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的疼痛的方法，其包括向有需要的哺乳動(dòng)物共同施用有效量的：(a)化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽；以及(b)至少一種選自選自以下各項(xiàng)的另外的治療劑：抗炎化合物、類固醇(例如，地塞米松、可的松和氟替卡松)、止痛劑諸如NSAID(例如，阿司匹林、布洛芬、消炎痛和酮洛芬)、阿片類(諸如嗎啡)、降鈣素基因相關(guān)肽受體拮抗劑、亞型選擇性離子通道調(diào)節(jié)劑、抗驚厥藥(例如普瑞巴林和加巴噴丁)、雙重血清素-去甲腎上腺素再吸收抑制劑(例如度洛西汀、文拉法辛和米那普侖)、JAK家族激酶抑制劑(例如，魯索利替尼或托法替尼)、以及三環(huán)抗抑郁藥(諸如阿米替林，去甲阿米替林和脫甲丙咪嗪)。這些另外的治療劑可與化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽作為相同或單獨(dú)劑型的一部分，經(jīng)由相同或不同施用途徑并按照根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐的相同或不同施用方案施用。因此，本文還提供了一種包含有效量的以下各項(xiàng)的藥物組合：(a)化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和(b)至少一種選自以下各項(xiàng)的另外的治療劑：抗炎化合物、類固醇(例如，地塞米松、可的松和氟替卡松)、止痛劑諸如NSAID(例如，阿司匹林、布洛芬、消炎痛和酮洛芬)、以及阿片類(諸如嗎啡)，以用于治療哺乳動(dòng)物中的疼痛，其中(a)和(b)可處于單獨(dú)的劑型中或處于相同的劑型中。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種包含以下各項(xiàng)的藥物組合：(a)有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和(b)有效量的止痛劑諸如NSAID(例如，阿司匹林、布洛芬、消炎痛和酮洛芬)?；衔?或其藥學(xué)上可接受的鹽也可用于治療癌癥。具體實(shí)例包括成神經(jīng)細(xì)胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌以及前列腺癌。因此，本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述癌癥的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽?；衔?或其藥學(xué)上可接受的鹽也可用于治療具有TrkA調(diào)節(jié)異常的癌癥。因此，本文還提供一種用于治療診斷患有具有TrkA調(diào)節(jié)異常的癌癥的患者的方法，其包括向所述患者施用治療有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括野生型TrkA過度表達(dá)(自分泌/旁分泌活化)。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括引起TrkA基因融合物的基因擴(kuò)增或一個(gè)或多個(gè)染色體易位或倒位。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述調(diào)節(jié)異常為基因易位的結(jié)果，其中所表達(dá)的蛋白質(zhì)為含有來(lái)自非-TrkA蛋白和TrkA蛋白的殘基的融合蛋白，并且最少為TrkA激酶結(jié)構(gòu)域。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA融合蛋白為L(zhǎng)MNA-TrkA、TFG-TrkA、TPM3-TrkA、CD74-TrkA、NFASC-TrkA、MPRIP-TrkA、BCAN-TrkA、或TPR-TrkA。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA融合蛋白為L(zhǎng)MNA-TrkA、TFG-TrkA、TPM3-TrkA、CD74-TrkA、NFASC-TrkA、MPRIP-TrkA、BCAN-TrkA、TP53-TrkA、RNF213-TrkA、RABGAP1L-TrkA、IRF2BP2-TrkA、SQSTM1-TrkA、SSBP2-TrkA、或TPR-TrkA，其中：LMNA＝前層蛋白-A/C；TFG＝TRK-融合基因蛋白TPM3＝原肌球蛋白α-3；CD74＝HLAII類組織相容性抗原γ鏈；NFASC＝神經(jīng)束蛋白；MPRIP＝MPRIP蛋白；BCAN＝短小蛋白聚糖(Brevican)核心蛋白；并且TP53＝細(xì)胞腫瘤抗原p53RNF213＝E3泛素-蛋白連接酶RNF213RABGAP1L＝RabGTP酶活化蛋白1-樣IRF2BP2＝干擾素調(diào)節(jié)因子2-結(jié)合蛋白2SQSTM1＝Sequestosome-lSSBP2＝單鏈DNA-結(jié)合蛋白2TPR＝核蛋白TPR在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括TrkA蛋白質(zhì)中的一個(gè)或多個(gè)缺失、插入或突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述調(diào)節(jié)異常包括來(lái)自TrkA蛋白的一個(gè)或多個(gè)殘基的缺失，從而產(chǎn)生TrkA激酶的組成型活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述缺失包括TrkA同種型2中的殘基303-377的缺失。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括拼接變化，其中所表達(dá)的蛋白質(zhì)可選地為具有一個(gè)或多個(gè)缺失的殘基的TrkA的拼接變體，從而產(chǎn)生TrkA激酶的組成型活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，具有組成型活性的TrkA的替代性拼接形式具有外顯子8、9和11的缺失，從而導(dǎo)致表達(dá)的蛋白質(zhì)相對(duì)于TrkA同種型2失去殘基192-284和393-398。已鑒別為具有TrkA調(diào)節(jié)異常的癌癥(參見以下參考文獻(xiàn)；還參見www.cancer.gov和www.nccn.org)包括：(A)類癌癥，其中TrkA調(diào)節(jié)異常包括引起TrkA基因融合物的基因擴(kuò)增或一個(gè)或多個(gè)染色體易位或倒位，所述癌癥包括：(B)類癌癥，其中TrkA調(diào)節(jié)異常包括TrkA蛋白質(zhì)中的一個(gè)或多個(gè)缺失、插入或突變，所述癌癥包括：(C)類癌癥，其由野生型TrkA的過度表達(dá)(自分泌活化)所驅(qū)動(dòng)，所述癌癥包括：在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種用于治療診斷患有帶有TrkA調(diào)節(jié)異常的癌癥的患者的方法，其包括向患者施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以治療所述癌癥，其中所述癌癥選自非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、急性骨髓性白血病、結(jié)腸直腸癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌以及胃癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種用于治療診斷患有具有TrkA調(diào)節(jié)異常的癌癥的患者的方法，其包括向患者施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以治療所述癌癥，其中所述癌癥選自非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、急性骨髓性白血病、結(jié)腸直腸癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、胃癌、膽管癌以及肉瘤。還提供了一種用于治療在有需要的哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法，所述方法包括：(a)確定所述癌癥是否與TrkA激酶調(diào)節(jié)異常有關(guān)；以及(b)如果確定癌癥與TrkA激酶調(diào)節(jié)異常有關(guān)，則向所述哺乳動(dòng)物施用治療有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1為二鹽酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括引起TrkA基因融合物的一個(gè)或多個(gè)染色體易位或倒位。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA基因融合物為L(zhǎng)MNA-TrkA、TFG-TrkA、TPM3-TrkA、CD74-TrkA、NFASC-TrkA、MPRIP-TrkA、BCAN-TrkA、TP53-TrkA、RNF213-TrkA、RABGAP1L-TrkA、IRF2BP2-TrkA、SQSTM1-TrkA、SSBP2-TrkA、或TPR-TrkA。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥為非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、結(jié)腸直腸癌、黑色素瘤、膽管癌、或肉瘤。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常包括TrkA蛋白質(zhì)中的一個(gè)或多個(gè)缺失、插入或突變。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥為急性骨髓性白血病、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、或成神經(jīng)細(xì)胞瘤。在一個(gè)實(shí)施方案中，TrkA調(diào)節(jié)異常為野生型TrkA過度表達(dá)(自分泌活化)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥為前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、或胃癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，任何以上用于治療有需要的哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法還包括施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與有效量的至少一種選自以下的另外的治療劑的組合：一種或多種另外的療法或化學(xué)治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，任何以上用于治療有需要的哺乳動(dòng)物中的癌癥的方法包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與有效量的一種或多種另外的化學(xué)治療劑的組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自受體酪氨酸激酶靶向治療劑，包括卡博替尼(cabozantinib)、克唑替尼、埃羅替尼、吉非替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、尼羅替尼、帕唑帕尼、培妥珠單抗、瑞格菲尼、舒尼替尼、以及曲妥珠單抗。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑，包括Ras-Raf-MEK-ERK途徑抑制劑(例如比尼替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、恩可非尼(encorafinib)、索拉非尼、曲美替尼、維羅非尼)、PI3K-Akt-mTOR-S6K途徑抑制劑(例如依維莫司、雷帕霉素、哌立福辛、坦羅莫司)以及細(xì)胞凋亡途徑的調(diào)節(jié)劑(例如奧巴克拉(obataclax))。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自細(xì)胞毒性化學(xué)治療劑，包括三氧化二砷、博來(lái)霉素、卡巴他塞、卡培他濱、卡鉑、順鉑、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪、柔紅霉素、多西他賽、阿霉素、依托泊苷、氟尿嘧啶、吉西他濱、伊立替康、洛莫司汀、甲氨蝶呤、絲裂霉素C、奧沙利鉑、紫杉醇、培美曲塞、替莫唑胺、以及長(zhǎng)春新堿。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自血管發(fā)生靶向治療劑，包括阿柏西普和貝伐單抗。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自免疫靶向藥劑，包括阿地白介素、伊匹木單抗、拉姆單抗(lambrolizumab)、納武單抗(nivolumab)、西普魯塞-T。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑選自具有針對(duì)TrkA途徑的活性的藥劑，包括NGF-靶向生物藥劑諸如NGF抗體和panTrk抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑或治療為放射療法，包括放射性碘療法、外部射線束放射和鐳223療法。在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的化學(xué)治療劑包括作為癌癥標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理的以上所列出的治療或治療劑中的任一種，其中所述癌癥具有TrkA調(diào)節(jié)異常。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種治療有需要的患者中的癌癥的方法，其包括向所述患者施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與至少一種選自以下各項(xiàng)的另外的治療或治療劑的組合：放射療法(例如放射性碘療法、外部射線束放射、鐳223療法)、細(xì)胞毒性化學(xué)治療劑(例如三氧化二砷、博來(lái)霉素、卡巴他塞、卡培他濱、卡鉑、順鉑、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪、柔紅霉素、多西他賽、阿霉素、依托泊苷、氟尿嘧啶、吉西他濱、伊立替康、洛莫司汀、甲氨蝶呤、絲裂霉素C、奧沙利鉑、紫杉醇、培美曲塞、替莫唑胺、長(zhǎng)春新堿)、酪氨酸激酶靶向治療劑(例如阿法替尼(afatinib)、卡博替尼、西妥昔單抗、克唑替尼、達(dá)拉菲尼、埃羅替尼、吉非替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、尼羅替尼、帕唑帕尼、帕木單抗、培妥珠單抗、瑞格菲尼、舒尼替尼、曲妥珠單抗)、細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(例如依維莫司、哌立福辛、雷帕霉素、比尼替尼、司美替尼、恩可非尼、索拉非尼、坦羅莫司、曲美替尼、維羅非尼)、免疫靶向療法(例如阿地白介素、干擾素α-2b、伊匹木單抗、派姆單抗、納武單抗、潑尼松、西普魯塞-T)以及血管生成靶向療法(例如阿柏西普、貝伐單抗)，其中所述化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與另外的治療或治療劑組合的量有效于治療所述癌癥。這些另外的治療劑可與化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽作為相同或單獨(dú)劑型的一部分，經(jīng)由相同或不同施用途徑并按照根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐的相同或不同施用方案施用。本文還提供了(i)一種用于治療有需要的患者中的癌癥的藥物組合，其包含(a)化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽、(b)另外的治療劑和(c)任選地至少一種藥學(xué)上可接受的載體，以用于同時(shí)、單獨(dú)或依次用于治療癌癥，其中所述化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和所述另外的治療劑的量一起有效于治療所述癌癥；(ii)一種包含此組合的藥物組合物；(iii)此組合用于制備治療癌癥的藥物的用途；以及(iv)一種包含此組合作為用于同時(shí)、單獨(dú)或依次使用的組合制劑的商業(yè)包裝或產(chǎn)品；以及一種治療有需要的患者的癌癥的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合治療是用于治療選自以下各項(xiàng)的癌癥：非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、急性骨髓性白血病、結(jié)腸直腸癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌以及胃癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合治療是用于治療選自以下各項(xiàng)的癌癥：非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、急性骨髓性白血病、結(jié)腸直腸癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、胃癌、膽管癌以及肉瘤?；衔?或其藥學(xué)上可接受的鹽還可用于治療炎癥或炎性疾病或病癥。因此，本文提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的炎癥或炎性疾病或病癥的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述炎癥的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述炎性疾病選自炎性肺病(諸如哮喘)、間質(zhì)性膀胱炎(IC)、痛性膀胱綜合征(PBS)、炎性腸疾病(包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病)、以及炎性皮膚病諸如特異性皮炎和銀屑病。在一個(gè)實(shí)施方案中，治療炎癥或炎性疾病或病癥的方法包括向有需要的哺乳動(dòng)物施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種另外的藥劑的組合。另外的藥劑的實(shí)例包括抗-TNF劑(例如單克隆抗體，諸如英利昔單抗(類克(Remicade))、阿達(dá)木單抗(修美樂(Humira))、聚乙二醇化賽妥珠單抗(Cimzia)以及戈利木單抗(辛普尼(Simponi))，或循環(huán)受體融合蛋白，諸如依那西普(恩博(Enbrel)))、抗代謝藥和抗葉酸藥(例如甲氨蝶呤)、或靶向激酶抑制劑(例如JAK家族抑制劑，諸如魯索利替尼、托法替尼、CYT387、來(lái)他替尼(Lestaurtinib)、帕克替尼(Pacritinib)以及TG101348)。這些另外的治療劑可與化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽作為相同或單獨(dú)劑型的一部分，經(jīng)由相同或不同施用途徑并按照根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐的相同或不同施用方案施用。化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽還可用于治療哺乳動(dòng)物中的神經(jīng)變性疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽還可用于通過經(jīng)由阻斷Sp35-TrkA相互作用來(lái)促進(jìn)髓鞘形成、神經(jīng)元存活和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化以治療脫髓鞘和髓鞘形成障礙。因此，本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的神經(jīng)變性疾病的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述神經(jīng)變性疾病的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述神經(jīng)變性疾病為多發(fā)性硬化。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述神經(jīng)變性疾病為帕金森病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述神經(jīng)變性疾病為阿爾茲海默病。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的某些感染性疾病諸如克氏錐蟲感染的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述克氏錐蟲感染的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的合格倫氏綜合征的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述綜合征的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的子宮內(nèi)膜異位的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述子宮內(nèi)膜異位的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的糖尿病性周圍神經(jīng)病變的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述糖尿病性周圍神經(jīng)病變的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的前列腺炎的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述前列腺炎的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中的盆腔疼痛綜合征的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述盆腔疼痛綜合征的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。本文還提供了一種治療哺乳動(dòng)物中與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病的方法，其包括向有需要的所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述疾病的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為骨質(zhì)疏松癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或骨轉(zhuǎn)移。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于治療有需要的哺乳動(dòng)物中與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病的方法包括施用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種另外的治療劑或治療的組合。另外的治療劑或治療的實(shí)例包括抗-TNF治療(例如單克隆抗體，諸如英利昔單抗(類克)、阿達(dá)木單抗(修美樂)、聚乙二醇化賽妥珠單抗(Cimzia)以及戈利木單抗(辛普尼)，或使用循環(huán)受體融合蛋白，諸如依那西普(恩博))、抗代謝藥和抗葉酸藥(例如甲氨蝶呤)、或靶向激酶抑制劑(例如JAK家族抑制劑魯索利替尼、托法替尼、CYT387、來(lái)他替尼、帕克替尼以及TG101348)。這些另外的治療劑可與化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽作為相同或單獨(dú)劑型的一部分，經(jīng)由相同或不同施用途徑并按照根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐的相同或不同施用方案施用。本文還提供了一種治療有需要的哺乳動(dòng)物中由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物施用有效于治療所述疾病的量的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病為雷諾氏綜合征、特發(fā)性肺纖維化、瘢痕(肥大型、瘢痕瘤型和其他形式)、硬化、心內(nèi)膜心肌纖維化、心房纖維化、骨髓纖維化、進(jìn)行性塊狀纖維化(肺)、腎源性系統(tǒng)性纖維化、硬皮病、系統(tǒng)性硬化、關(guān)節(jié)纖維化或眼部纖維化。如本文所用的，“有效量”意指化合物當(dāng)向需要此治療的哺乳動(dòng)物施用時(shí)足以(i)治療可用化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽治療的特定疾病、疾患或病癥，或者(ii)減輕、改善或消除本文所述特定疾病、疾患或病癥的一種或多種癥狀的量?；衔?將與此量對(duì)應(yīng)的量將根據(jù)各種因素改變，所述因素諸如疾病疾患及其嚴(yán)重性和需要治療的哺乳動(dòng)物的特性(例如，體重)，但也可由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)測(cè)定。如本文所用的，術(shù)語(yǔ)“哺乳動(dòng)物”是指具有發(fā)展本文所述的疾病的風(fēng)險(xiǎn)或處于所述風(fēng)險(xiǎn)下的溫血?jiǎng)游锊⑶野ǖ幌抻?，豚鼠、狗、貓、大鼠、小鼠、倉(cāng)鼠、以及靈長(zhǎng)類(包括人類)?；衔?或其藥學(xué)上可接受的鹽可通過任何常規(guī)路徑施用到例如胃腸道(例如經(jīng)直腸地或經(jīng)口地)、鼻、肺、肌肉系統(tǒng)或脈管系統(tǒng)、創(chuàng)口灌洗、或經(jīng)皮地或經(jīng)真皮地。化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽可以任何常規(guī)施用形式施用，所述施用形式例如片劑、散劑、膠囊、溶液、分散劑、懸浮劑、糖漿劑、噴霧劑、栓劑、凝膠劑、乳劑、貼劑等。此類組合物可含有藥物制劑中常見的組分，例如稀釋劑、載體、pH調(diào)節(jié)劑、甜味劑、膨脹劑、以及其他活性劑。如果希望胃腸外施用，則所述組合物將為無(wú)菌的并且為可用于注射或輸注的溶液或懸浮液形式。此類組合物構(gòu)成本發(fā)明的另一個(gè)方面。另一種制劑可通過將化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和載體或賦形劑混合來(lái)制備。適合的載體和賦形劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。所述制劑還可包含一種或多種緩沖劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、潤(rùn)濕劑、潤(rùn)滑劑、乳化劑、助懸劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、調(diào)味劑、稀釋劑以及提供藥物(即本文所述的化合物或其藥物組合物)高雅外觀或有助于制造藥物產(chǎn)品(即藥品)的其他已知添加劑。因此，本文還提供了一種藥物組合物，其包含化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，配制一種包含化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物以用于經(jīng)口施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，配制用于經(jīng)口施用的一種包含化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物為片劑或膠囊形式。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為急性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性背痛、炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛或與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥選自非小細(xì)胞肺癌、乳頭狀甲狀腺癌、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、急性骨髓性白血病、結(jié)腸直腸癌、大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、前列腺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌、黑色素瘤、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、胃癌、膽管癌以及肉瘤。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的炎癥或炎性疾病或病癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述炎性疾病為炎性肺病(諸如哮喘)、間質(zhì)性膀胱炎、膀胱疼痛綜合征、炎性腸疾病(包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病)、以及炎性皮膚病諸如特異性皮炎。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的感染性疾病，例如克氏錐蟲感染。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的合格倫氏綜合征。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的子宮內(nèi)膜異位。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的糖尿病性周圍神經(jīng)病變。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的前列腺炎。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的盆腔疼痛綜合征。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療哺乳動(dòng)物中的神經(jīng)變性疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽以供用于治療由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。本文還提供了化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽在制造用于治療選自以下各項(xiàng)的疾患的藥物中的用途：疼痛、癌癥、炎癥、神經(jīng)變性疾病、克氏錐蟲感染、以及由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為慢性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為急性疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為慢性背痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疼痛為炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛或與癌癥、手術(shù)或骨折有關(guān)的疼痛。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為炎癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為神經(jīng)變性疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為克氏錐蟲感染。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為舍格倫氏綜合征。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為子宮內(nèi)膜異位。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為糖尿病性周圍神經(jīng)病變。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為前列腺炎。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾患為盆腔疼痛綜合征。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為與骨重塑調(diào)節(jié)失衡相關(guān)的疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為由結(jié)締組織生長(zhǎng)因子異常信號(hào)傳導(dǎo)引起的疾病。本文還提供了一種藥品，其包含用于治療哺乳動(dòng)物中的疼痛的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與選自以下各項(xiàng)的另一種治療劑的組合：抗炎化合物、類固醇(例如，地塞米松、可的松和氟替卡松)、止痛劑諸如NSAID(例如，阿司匹林、布洛芬、消炎痛和酮洛芬)、阿片類(諸如嗎啡)、降鈣素基因相關(guān)肽受體拮抗劑、亞型選擇性離子通道調(diào)節(jié)劑、抗驚厥藥(例如普瑞巴林和加巴噴丁)、雙重血清素-去甲腎上腺素再吸收抑制劑(例如度洛西汀、文拉法辛和米那普侖)、JAK家族激酶抑制劑(諸如，魯索利替尼或托法替尼)、以及三環(huán)抗抑郁藥(諸如阿米替林，去甲阿米替林和脫甲丙咪嗪)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種藥品，其包含用于治療哺乳動(dòng)物中的疼痛的化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽與NSAID的組合。本文還提供了一種藥品，其包含用于治療哺乳動(dòng)物中的疼痛的選自以下各項(xiàng)的治療劑與化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合：抗炎化合物、類固醇(例如，地塞米松、可的松和氟替卡松)、止痛劑諸如NSAID(例如，阿司匹林、布洛芬、消炎痛和酮洛芬)和阿片類(諸如嗎啡)。實(shí)施例合成中間體的制備制備A(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺二鹽酸鹽步驟A：(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯的制備：將(3S，4R)-4-(3-氟苯基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(250mg，0.89mmol，商購(gòu)獲得)、DIEA(0.48mL，2.68mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(149mg，1.07mmol)于DMF(3mL)中的溶液在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)，然后加熱至60℃持續(xù)4小時(shí)，隨后經(jīng)16小時(shí)冷卻至環(huán)境溫度。在分配于EtOAc與飽和NaHCO3(各自10mL)之間之后，將有機(jī)層用水和鹽水(各自2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并濃縮，以獲得呈粘稠橙色油狀物的(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(250mg，83％產(chǎn)率)。LCMS(apci)m/z＝339.1(M+H)。步驟B：(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺二鹽酸鹽的制備：將5-6NHCl中的(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(250mg，0.74mmol)于異丙醇(14.8mL，73.9mmol)中的溶液在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。在真空下濃縮混合物并用Et2O研磨以獲得呈米色固體的標(biāo)題化合物(230mg，100％產(chǎn)率)。LCMS(apci)m/z＝239.1(M+H)。制備B4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺步驟A：5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3(2H)-酮的制備：將2-氰基丙酸乙酯(50.5g，397.2mmol)和苯肼(39mL，397.2mmol)于二噁烷(100mL)中的混合物在110℃下加熱5天。將冷卻的混合物濃縮至1/2體積并且隨后在冰中冷卻并用冷Et2O研磨。過濾所得固體，用Et2O充分洗滌并在真空下干燥，以獲得呈蓬松白色粉末的5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3(2H)-酮(34.69g，46％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝190.1(M+H)。步驟B：5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-基三氟甲烷磺酸酯的制備：用DIEA(37.9mL，217.5mmol)處理5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3(2H)-酮(13.72g，72.5mmol)和N-苯基雙(三氟甲基磺酰胺)(27.2g，76.1mmol)于DMF(100mL)中的懸浮液并且將混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。使所述混合物分配在飽和NaHCO3(400mL)與EtOAc(200mL)之間并且用EtOAc(2x200mL)萃取水層。用水(5x50mL)和鹽水(50mL)洗滌合并的有機(jī)相，然后經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。通過用4∶1己烷/EtOAc洗脫的硅膠柱色譜法純化殘余物，以獲得呈淡黃色固體的5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-基三氟甲烷磺酸酯(23.1g，99％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝322.0(M+H)。步驟C：4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺：將5-氨基-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-基三氟甲烷磺酸酯(900mg，2.8mmol)、2-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜戊烷-2-基)嘧啶(925mg，4.2mmol)、K2CO3(1.55g，11.2mmol)和Pd(PPh3)4(324mg，0.28mmol)合并在甲苯(10mL)、水(5mL)和EtOH(2.5mL)中并在密封管中升溫至95℃，持續(xù)16小時(shí)。將冷卻的混合物過濾并使濾液分配在水(50mL)與EtOAc(50mL)之間。用EtOAc(2x30mL)萃取水層并用鹽水(30mL)洗滌合并的有機(jī)相，經(jīng)Na2SO4干燥、過濾并在真空下濃縮。通過用2％MeOH/DCM洗脫的硅膠柱色譜法純化殘余物，以獲得呈粉色固體的標(biāo)題化合物(533mg，72％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝266.1(M+H)。制備C2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺步驟A：2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺的制備：在40分鐘內(nèi)在90℃下通過加料漏斗向2-甲氧基乙胺(14.2mL，163mmol)的DMSO溶液(15mL)中添加(氯甲基)三甲基硅烷(11.4mL，81.5mmol)的DMSO(10mL)溶液。將混合物在90℃下加熱3.5小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度。然后用H2O(150mL)稀釋混合物并且用EtOAc(2×150mL)萃取。用鹽水(150mL)洗滌合并的有機(jī)萃取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，以獲得呈黃色油狀物的2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(8.14g，62％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝162.0(M+H)。步驟B：2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺的制備：將甲醛(37％水溶液，4.91g，60.6mmol)的MeOH(2.45mL)溶液冷卻至0℃，并通過逐滴添加2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(8.14g，50.5mmol)來(lái)處理。將雙相混合物在0℃下攪拌3小時(shí)，然后添加K2CO3(6.97g，50.5mmol)并在0℃下攪拌1小時(shí)。將黃色油狀物傾析到K2CO3(2.00g，14.4mmol)上，并且將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。在傾析黃色油狀物之后，用Et2O(2×10mL)洗滌固體K2CO3，并且將Et2O洗滌物與傾析的黃色油狀物合并并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，以產(chǎn)生呈黃色油狀物的標(biāo)題化合物(9.92g，96％產(chǎn)率)。1HNMR(CDCl3)δ4.00(s，2H)，3.37-3.43(m，2H)，3.29(s，3H)，3.19(s，3H)，2.77-2.82(m，2H)，2.18(s，2H)，0.00(s，9H)ppm。制備D(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺步驟A：(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸的制備：依次用EtOAc(75mL)和庚烷(75mL)處理(E)-3-(3-氟苯基)丙烯酸(25.20g，151.7mmol)，隨后用TFA(1.17mL，15.17mmol)處理。將混合物置于冷水浴(內(nèi)部溫度15℃)中，并在20分鐘內(nèi)從加料漏斗中逐滴添加2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺[制備C](69.82g，197.2mmol)，加冰到水浴中，以使內(nèi)部溫度在添加過程中維持在13℃-19℃。移除冰浴并將混合物在環(huán)境溫度下攪拌18小時(shí)，然后冷卻(內(nèi)部溫度13℃)，并且在6分鐘內(nèi)從加料漏斗中逐滴添加另外的2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(制備C；34g)。移除水浴并在環(huán)境溫度下再攪拌4小時(shí)之后，將混合物濃縮至一半體積。加入庚烷(100mL)并部分濃縮混合物，除去約150mL溶劑。將此步驟重復(fù)兩次，每次除去100mL溶劑。將殘余漿液用庚烷(50mL)沖洗到燒瓶底部?jī)?nèi)，然后密封并在環(huán)境溫度下攪拌64小時(shí)。將固體過濾，用庚烷(2x50mL)沖洗并在真空下干燥，以獲得呈淡黃色固體的(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸(44.99g，111％產(chǎn)率)，其直接用于下一個(gè)步驟，假定100％產(chǎn)率。MS(apci)m/z＝268.1(M+H)。步驟B：(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺的制備：向(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸(40.54g，151.7mmol)于THF(440mL)中的懸浮液添加CDI(31.97g，197.2mmol)，接著添加咪唑鹽酸鹽(3.171g，30.33mmol)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)，并隨后在30分鐘內(nèi)通過加料漏斗添加氨(135.0mL，2M于iPrOH中，270.0mmol)。在再攪拌3小時(shí)之后，過濾所得固體，用EtOAc洗滌并濃縮濾液。將殘余物溶解于EtOAc(200mL)中并用25/75水∶鹽水(2x200mL)洗滌。經(jīng)MgSO4干燥有機(jī)相，將其過濾，濃縮并在真空下干燥，以得到呈黃色固體的(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺(54.97g，136％產(chǎn)率)，其可使用，假定100％產(chǎn)率。MS(apci)m/z＝267.2(M+H)。步驟C：(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺的制備：在20分鐘內(nèi)通過加料漏斗向配有溫度計(jì)、在冰浴中冷卻的3頸1-L圓底燒瓶中的(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺(29.33g，85.90mmol)于MeOH(345mL)中的溶液添加NaOCl(10％-15％可用的Cl，水溶液)(116.3mL，189.0mmol)[內(nèi)部溫度為7℃-13℃]。去除冰浴并將不均勻混合物在環(huán)境溫度下攪拌90分鐘，然后在55℃下攪拌3小時(shí)。添加KOH(67.48g，1203mmol)于H2O(225.9mL，12，542mmol)中的溶液并將所述溶液在75℃下攪拌19小時(shí)。將混合物冷卻至0℃并且在30分鐘內(nèi)緩慢添加濃HCl(147.1mL，4,802mmol)。通過添加K3PO4水溶液(30重量％，155mL)將pH調(diào)節(jié)至6，并且將混合物部分濃縮以去除有機(jī)溶劑。添加水性K3PO4(30重量％，280mL)直到pH10，并且用EtOAc(2x450mL)萃取所述混合物。將合并的有機(jī)萃取物濃縮并在真空下干燥，以獲得呈深琥珀色漿液的(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(28.08g，91％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝239.2(M+H)。步驟D：(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲酰基)氧基)琥珀酸酯的制備：將(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(125mg，0.52mmol)和(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲酰基)氧基)琥珀酸(222.9mg，0.58mmol)稱量到4mL小瓶中，然后用MeOH(1.57mL)處理，接著用水(0.175mL)處理。將小瓶加蓋并將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌5分鐘，然后經(jīng)17小時(shí)使其緩慢冷卻至環(huán)境溫度。將所得的固體過濾，用Et2O(4x0.2mL)洗滌并在真空下干燥，以獲得呈白色固體的(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲酰基)氧基)琥珀酸酯(131.6mg，40％產(chǎn)率)。游離堿性樣品的手性SFC分析指示＞95％對(duì)映體過量(ee)。在以下步驟中將此物質(zhì)用作晶種：將(反式)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(7.39g，18.61mmol)溶解于MeOH(52.7mL)中并用(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸(10.78g，27.91mmol)、接著用H2O(9.3mL)處理。將混合物在50℃下攪拌5分鐘。將晶種(90mg)添加到溶液中，并經(jīng)16小時(shí)使所述混合物緩慢升溫至環(huán)境溫度。將所得固體過濾，用Et2O(4x5mL)沖洗并在真空下干燥。使殘余物在MeOH(15mL)和H2O(2.7mL)中漿化，在50℃下攪拌15分鐘，然后經(jīng)19小時(shí)使其緩慢冷卻至環(huán)境溫度。將固體過濾，用Et2O(3x5mL)洗滌并在真空下干燥，以獲得呈白色固體的(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸酯(3.12g，27％產(chǎn)率)。游離堿性樣品的手性分析指示>99.7％對(duì)映體過量。步驟E：(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺的制備：用1M水性NaOH(2x15mL)洗滌(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲酰基)氧基)琥珀酸酯(2.89g，4.63mmol)于DCM(25mL)中的懸浮液。用DCM(25mL)萃取合并的水相，并用鹽水(30mL)洗滌合并的有機(jī)萃取物，經(jīng)Na2SO4干燥、過濾、濃縮并在真空下干燥，以獲得呈淺褐色油狀物(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(998mg，90％產(chǎn)率)、MS(apci)m/z＝239.2(M+H)。合成實(shí)施例實(shí)施例11-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲二鹽酸鹽步驟A：1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲的制備：向4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(制備B；61mg，0.16mmol)于DCM(2mL)中的溶液添加三光氣(24mg，0.08mmol)，接著添加DIEA(84μL，0.48mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘，然后用(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺二鹽酸鹽(制備A；50mg，0.16mmol)和DIEA(84μL，0.48mmol)處理。將反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。使所述混合物分配在水(10mL)與DCM(10mL)之間并且用DCM(2x10mL)萃取水層。用鹽水(10mL)洗滌合并的有機(jī)相，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并濃縮。通過用2.5％-5％MeOH/DCM洗脫的硅膠柱色譜法純化殘余物。通過反相HPLC(5％-95％ACN/水/0.1％TFA)純化含有所述產(chǎn)物的級(jí)分，以在堿性水性后處理之后獲得呈白色固體的標(biāo)題化合物(28mg，33％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝530.3(M+H)。步驟B：1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲二鹽酸鹽的制備：向冷卻至0℃的4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(制備B；2.56g，9.64mmol)于DCM(96mL)中的溶液一次性添加三光氣(1.72g，5.78mmol)，接著逐滴添加DIEA(8.40mL，48.20mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)。在10分鐘內(nèi)將(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺二鹽酸鹽(制備A；3.0g，9.64mmol)分小批添加到混合物中。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌40分鐘，然后將其倒入到水(100mL)中。在相分離之后，用DCM(2x100mL)萃取水層。用鹽水(100mL)洗滌合并的有機(jī)相、過濾并濃縮。通過反相色譜法(SNAP120gC18，具有0.1％HCl的5％至75％MeOH/水)純化殘余物并在真空下干燥，以獲得呈奶油色泡沫的標(biāo)題化合物(3.33g，57％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝530.3(M+H)。實(shí)施例21-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲向4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(制備B；800mg，3.02mmol)于DCM(15mL)中的懸浮液添加三乙胺(2.1mg，15.1mmol)，接著添加CDI(587mg，3.62mmol)。將混合物在N2下密封并在環(huán)境溫度下攪拌22小時(shí)，然后用DCM(4mL)中的(3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(制備D；826mg，3.47mmol)處理。繼續(xù)攪拌100分鐘。使所述混合物分配在DCM(60mL)與水(100mL)之間。在相分離之后，用0.5NHCl(50mL)萃取DCM層，然后用0.2NHCl(2x25mL)萃取。將酸性萃取物合并，將其傾析到干凈燒瓶中，將其置于室溫水浴中并用6NNaOH(水溶液)、隨后用1NNaOH(水溶液)堿化至pH9-10，同時(shí)攪拌。將懸浮液在冰浴中攪拌5分鐘。將所得固體過濾，用水和醚(各自3x20mL)沖洗并在真空下干燥，以獲得呈白色固體的標(biāo)題化合物(1.44g，90％產(chǎn)率)。MS(apci)m/z＝530.3(M+H)。實(shí)施例3(3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲酰基)氧基)琥珀酸酯的制備步驟A：(2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺的制備：將(氯甲基)三甲基硅烷(3300.0g，1.0當(dāng)量)、乙腈(5.28L)和2-甲氧基乙胺(4041.0g，2.0當(dāng)量)裝到燒瓶中。將反應(yīng)混合物在74℃下攪拌16小時(shí)，然后使反應(yīng)物冷卻至25℃。添加戊烷(16L)并將反應(yīng)混合物攪拌1分鐘。分離各層。將底層(乙腈層)添加回到分液漏斗中并將戊烷(16L)添加到分液漏斗中。在攪動(dòng)之后分離各層。重復(fù)用戊烷(16L)進(jìn)行萃取。將合并的戊烷層添加到分液漏斗中并加入水(3.3L)。在攪動(dòng)之后分離各層。將MeOH(3.0L)添加到裝有機(jī)械攪拌的蒸汽冷凝器、J-Kem溫度探頭和加料漏斗的22L反應(yīng)器中。在25℃-45℃下進(jìn)行溶劑常壓蒸餾。在蒸餾期間，將戊烷溶液通過加料漏斗以一定速率添加到蒸餾燒瓶中，所述速率使體積保持約6.6L，直到所有戊烷溶液均在蒸餾燒瓶中。繼續(xù)蒸餾直到燒瓶中的總體積為約6.6L。將反應(yīng)混合物冷卻至25℃并在環(huán)境溫度下在氮?dú)夥障聰嚢?，以提?2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(72％產(chǎn)率)。步驟B：2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺的制備：將(2-甲氧基-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(380.0g，1.0當(dāng)量)、甲醇(332mL)和戊烷(193mL)裝入到燒瓶中。將反應(yīng)混合物在低于5℃的冷水浴中攪拌。將37％甲醛水溶液(97.9mL，1.2當(dāng)量)以使內(nèi)部溫度保持低于10℃的速率添加到反應(yīng)混合物，并且將反應(yīng)混合物在低于10℃的溫度下攪拌2小時(shí)。將叔丁基甲基醚(700mL，5.2當(dāng)量)和水(300.0mL)添加到反應(yīng)混合物，并且將所述混合物在環(huán)境溫度下攪拌約1分鐘。分離各層，并將有機(jī)層添加回到分液漏斗中。將鹽水(300mL)添加到分液漏斗。將混合物攪動(dòng)并分離各層。將碳酸鉀K2CO3(10.0g)添加到有機(jī)層，并且在混合之后將有機(jī)層經(jīng)濾紙過濾。用叔丁基甲基醚沖洗濾餅。將合并的有機(jī)層濃縮，以提供呈油狀物的2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺(75％產(chǎn)率)。步驟C：反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸的制備：將(E)-3-(3，4-二氟苯基)丙烯酸(57.0g，1.0當(dāng)量)、乙酸乙酯(143mL和庚烷(143mL)裝入燒瓶中并攪動(dòng)混合物。加入三氟乙酸(2.4mL，0.1當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物冷卻至低于20℃。通過加料漏斗以使內(nèi)部溫度保持在20℃-25℃的速率添加2-甲氧基-N-(甲氧基甲基)-N-((三甲基甲硅烷基)甲基)乙胺，并且將反應(yīng)混合物在20℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在減壓下在10℃至27℃的溫度下濃縮。將乙酸乙酯(200mL)加入到殘余物中，并且在減壓下濃縮混合物。將殘余物在20℃下攪動(dòng)過夜。通過真空蒸餾經(jīng)由分批加入庚烷進(jìn)行雜質(zhì)的共沸去除(總體積：1200mL)。將所得漿液在20℃下靜置過夜，然后在濾紙上過濾。用庚烷沖洗濾餅并在真空烘箱中在45℃下干燥約4小時(shí)，以提供反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸(90％產(chǎn)率)。步驟D：反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺的制備：將反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸(98.3g，1.0當(dāng)量)、羰基二咪唑(69.8g，1.3當(dāng)量)、HCl咪唑(7.2g，0.2當(dāng)量)和四氫呋喃(1000mL)裝入燒瓶中。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時(shí)，然后在環(huán)境溫度(約20℃)下在氮?dú)庀逻^夜。在15分鐘內(nèi)將氨(2.0M于異丙醇中)(307mL，1.8當(dāng)量)加入到反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌約30分鐘。將反應(yīng)混合物經(jīng)濾紙過濾并用EtOAc(200mL)沖洗過濾的固體。在減壓下在37℃下濃縮合并的有機(jī)層。將乙酸乙酯(200mL)加入到所得粗油狀物中并且在減壓下在37℃下濃縮混合物。將乙酸乙酯(200mL)、水(500mL)和NaCl(82.0g，4.1當(dāng)量)加入到殘余物并將混合物在環(huán)境溫度下攪拌約2分鐘。分離各層，并在減壓下在37℃下濃縮合并的有機(jī)層，以提供反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺(99％產(chǎn)率)。步驟E：反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺的制備：將反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-甲酰胺(96.8g，1.0當(dāng)量)和甲醇(1450mL)裝入燒瓶中并將反應(yīng)混合物冷卻至5℃。通過加料漏斗以使內(nèi)部溫度保持低于20℃的速率加入10％次氯酸鈉溶液(462.2mL，2.2當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在20℃下攪拌1小時(shí)，然后在55℃下攪拌1小時(shí)。在5分鐘內(nèi)將氫氧化鉀(314.6g，14.0當(dāng)量)作為水溶液(100mL)加入到反應(yīng)混合物中，并將反應(yīng)混合物在72℃-75℃下攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至55℃，并且在10分鐘內(nèi)加入37重量％HCl(583.8mL，55.9當(dāng)量)以將pH調(diào)節(jié)為低于2。加入三元K3PO4(30重量％，100.0mL)，以將反應(yīng)混合物的pH調(diào)節(jié)至6與7之間。在減壓下在37℃下濃縮反應(yīng)混合物。將所得水性混合物轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，并且加入30重量％三元K3PO4(540.0mL)和37重量％三元K3PO4(50.0mL)以將pH調(diào)節(jié)至≥10。加入EtOAc(1000mL)并將混合物在環(huán)境溫度下攪拌約2分鐘。分離各層，并將水層添加回到分液漏斗中。將EtOAc(500mL)加入到分液漏斗中，并攪動(dòng)混合物。分離各層，并在減壓下濃縮合并的有機(jī)層，以提供反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(99％產(chǎn)率)。步驟F：(3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸酯的制備：將反式-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(123.3g，1.0當(dāng)量)和甲醇(1603mL)裝入燒瓶中。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌。加入(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸(145.0g，1.5當(dāng)量)和水(295mL)，并且將反應(yīng)混合物加熱至65℃。用(3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸酯(0.5g，0.7當(dāng)量)接種反應(yīng)混合物(通過小規(guī)模地進(jìn)行反應(yīng)來(lái)制備晶種，所述反應(yīng)提供了呈固體的產(chǎn)物)，并且將反應(yīng)混合物經(jīng)16小時(shí)緩慢冷卻至25℃。在濾紙上過濾漿液。用叔丁基甲基醚(700mL)沖洗濾餅，然后在真空烘箱中在45℃下干燥約4小時(shí)，以提供(3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-胺(2S，3S)-2，3-雙((4-甲基苯甲?；?氧基)琥珀酸酯(2個(gè)步驟有35％產(chǎn)率)。生物測(cè)定在生物測(cè)定中，化合物1是指1-((3S，4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲；化合物2是指1-((3S，4R)-4-(3，4-二氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(在WO2012/158413中公開)；并且化合物3是指1-(1′，4-二甲基-1-苯基-1H，1′H-[3，4′-二吡唑]-5-基)-3-((3S，4R)-4-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)脲(在WO2012/158413中公開)。實(shí)施例ATrkA激酶結(jié)合測(cè)定在TrkALanthaScreenTMEu激酶結(jié)合測(cè)定中測(cè)定TrkA結(jié)合活性。在緩沖液(25mMMOPS，pH7.5，5mMMgCl2，0.005％TritonX-100)中用4nMAlexa-示蹤劑236(Invitrogen目錄號(hào)PV5592)、2nM生物素化抗-His(Invitrogen目錄號(hào)PV6090)和2nM銪標(biāo)記的鏈霉親和素(Invitrogen目錄號(hào)PV5899)孵育5nMHis-標(biāo)記的重組人TrkA(來(lái)自Invitrogen的6HIS標(biāo)記的胞質(zhì)域，目錄號(hào)PV3144)。加入化合物1、化合物2或化合物3在DMSO中的三倍連續(xù)稀釋液，以使最終百分比為2％DMSO。在22℃下孵育60分鐘之后，使用EnVision多模式讀板儀(PerkinElmer)通過在615nM和665nM下進(jìn)行TR-FRET雙波長(zhǎng)檢測(cè)來(lái)測(cè)量反應(yīng)物。使用比率測(cè)量排放系數(shù)計(jì)算對(duì)照百分比。通過將四參數(shù)模型擬合至對(duì)照數(shù)據(jù)百分比來(lái)確定IC50值?；衔?當(dāng)在實(shí)施例A的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有1.1nM的平均IC50值。化合物2當(dāng)在實(shí)施例A的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有1.5nM的平均IC50值。化合物3當(dāng)在實(shí)施例A的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有1.7nM的平均IC50值。實(shí)施例BTrkA細(xì)胞測(cè)定將用人野生型TrkA轉(zhuǎn)染的CHO-K1細(xì)胞以3x105個(gè)細(xì)胞/孔接種在96孔平底板中的含10％FBS的完全DMEM培養(yǎng)基中并且在37℃、5％CO2下使細(xì)胞附著24小時(shí)。然后用完全無(wú)血清測(cè)定培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基并使細(xì)胞在37℃，5％CO2下饑餓1小時(shí)。使用化合物1、2或3利用最終濃度范圍為1μM至152pM的1∶3連續(xù)稀釋液處理細(xì)胞。將化合物在細(xì)胞上在37℃、5％CO2下孵育1小時(shí)。然后在37℃、5％CO2下將細(xì)胞用最終濃度30ng/mL的人NGF刺激7分鐘。去除培養(yǎng)基并用含有磷酸酶和蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液裂解細(xì)胞。通過ELISA(R&D目錄號(hào)DYC2578)測(cè)量磷酸-TrkA。ELISA捕獲全部的TrkA并且檢測(cè)總磷-酪氨酸。使用Versamax讀取器在450nm波長(zhǎng)下測(cè)量每個(gè)孔的光密度。通過將四參數(shù)模型擬合至對(duì)照數(shù)據(jù)百分比來(lái)確定IC50值?；衔?當(dāng)在實(shí)施例B的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有1.9nM的平均IC50值。化合物2當(dāng)在實(shí)施例B的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有1.3nM的平均IC50值?；衔?當(dāng)在實(shí)施例B的測(cè)定中測(cè)試時(shí)具有6.1nM的平均IC50值。實(shí)施例C化合物1、2和3的人微粒體清除率和人肝細(xì)胞清除率肝微粒體孵育如下制備100mM磷酸鉀測(cè)定緩沖溶液(KPB)。將KH2PO4和K2HPO4二者單獨(dú)溶解于試劑級(jí)水中，以得到最終濃度100mM。制備K2HPO4∶KH2PO4的75∶25混合物v/v并且用稀HCl或稀NaOH溶液將溶液的pH調(diào)節(jié)至7.4。制備化合物1、化合物2和化合物3于DMSO中的的10mM(活性化合物)原液。在使用前立即用KPB溶液稀釋原液至2.5μM，以形成工作標(biāo)準(zhǔn)物。通過在室溫下目視檢查確定所有測(cè)試化合物均完全溶解于DMSO中。在分析那天通過用一個(gè)體積的78mg/mL葡萄糖-6-磷酸(二者均于KPB中制備，pH7.4)和7.9個(gè)體積的20mMMgCl2稀釋一個(gè)體積的17mg/mLNADP+來(lái)制備NADPH-再生溶液(NRS)。NADP+和葡萄糖-6-磷酸的最終濃度分別為1.7mg/mL和7.8mg/mL。就在使用前，通過每mLNRS原液加入10μL葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(KPB中的150個(gè)單位/mL，pH7.4)來(lái)活化NRS。將肝微粒體用KPB稀釋至2.5mg蛋白質(zhì)/mL。對(duì)于化合物1、化合物2和化合物3以及各種陽(yáng)性對(duì)照(即，右美沙芬、地西泮、地爾硫卓、非那西汀、甲苯磺丁脲以及維拉帕米)，將20μL2.5μM測(cè)試化合物的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液和20μL微粒體(2.5mg蛋白質(zhì)/mL)一式兩份加入96-孔聚丙烯板(Costar，VWR，WestChester，PA)的每個(gè)孔中。將所述板置于37℃的孵育箱5分鐘，之后加入起始溶液。將10-μL等份的NRS溶液加入每個(gè)初始孔中，以啟動(dòng)代謝。測(cè)試化合物在孵育開始時(shí)的濃度為1μM。對(duì)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)(即0和20分鐘)制備一個(gè)孵育板。在37℃和100％相對(duì)濕度下進(jìn)行孵育。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，從孵育箱中取出適當(dāng)?shù)姆跤澹⒑袃?nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物(150μL，60％乙腈中的0.25μM拉貝洛爾)的溶液加入到每個(gè)孔中。立即在室溫下利用Allegra臺(tái)式離心機(jī)(BeckmanCoulter，F(xiàn)ullerton，CA)將所述板在離心機(jī)中以2,095xg離心7分鐘。將200-μL等份的上清液從每個(gè)孔中轉(zhuǎn)移到96-孔淺層板(Costar)中。利用可再用板墊密封所述板。肝細(xì)胞孵育制備化合物1、化合物2和化合物3于DMSO中的10mM(活性化合物)原液。在肝細(xì)胞存在下如下評(píng)估化合物1、化合物2和化合物3(1μM)的體外穩(wěn)定性。將低溫保存的肝細(xì)胞解凍，從運(yùn)輸培養(yǎng)基中分離并根據(jù)供應(yīng)商指南利用杜氏改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)，1X，高葡萄糖(DMEM，Invitrogen，Carlsbad，CA)稀釋至1x106個(gè)活細(xì)胞/mL的密度。通過臺(tái)盼藍(lán)排除法利用血球計(jì)數(shù)器(3500Hausser，VWR，WestChester，PA)測(cè)定存活力。利用補(bǔ)充的DMEM稀釋化合物1、化合物2和化合物3的10mM原液至2μM，以形成工作標(biāo)準(zhǔn)物。將20-μL等份的測(cè)試化合物或?qū)φ?即，安替比林、地西泮、地爾硫卓、勞拉西泮、普萘洛爾、維拉帕米以及7-乙基-10-羥基喜樹堿[SN-38])加入96-孔聚丙烯板(Costar，VWR，WestChester，PA)的每個(gè)測(cè)試孔中，接著立即加入20μL肝細(xì)胞懸浮液。對(duì)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)(即0、60和120分鐘)制備一個(gè)孵育板，其中樣品一式兩份地制備。在37℃和100％相對(duì)濕度下進(jìn)行孵育。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，從孵育箱中取出適當(dāng)?shù)姆跤?，并將含有IS(200μL，60％乙腈中的0.25μM拉貝洛爾)的溶液加入到每個(gè)孔中。在平板振蕩器(IKAMTS2/4DigitalMicrotiterShaker，VWR)上將板以700rpm混合1分鐘并且立即在室溫下利用Allegra臺(tái)式離心機(jī)(BeckmanCoulter，F(xiàn)ullerton，CA)在離心機(jī)中以2,095xg離心10分鐘。將200-μL等份上清液從每個(gè)孔中轉(zhuǎn)移到96孔淺層板(Costar)中。利用可再用板墊密封所述板。計(jì)算使用BioAssayEnterprise進(jìn)行所有計(jì)算。通過對(duì)化合物1、化合物2、化合物3以及每種樣品的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的峰面積比率(n＝2)取平均值來(lái)計(jì)算平均峰面積比率。通過測(cè)定每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的峰面積比率與零時(shí)樣品的峰面積比率的比率來(lái)計(jì)算剩余物的百分比。通過使-ln(f(t))對(duì)比時(shí)間線性回歸來(lái)測(cè)定測(cè)試化合物損失率(km)。所述回歸利用形式“y＝mx”，因此模型迫使截取100％剩余物并且假定代謝遵循一級(jí)動(dòng)力學(xué)。將ln(2)除以km來(lái)確定t1/2。通過使用表5所列出且以下等式中所采用的物理和生理標(biāo)度因子測(cè)量化合物1、化合物2和化合物3各自穩(wěn)定性的體外半衰期來(lái)計(jì)算預(yù)測(cè)的內(nèi)在清除率(CLint)：其中D為特定物種每份質(zhì)量的肝的肝細(xì)胞數(shù)目。W為每份重量的動(dòng)物存在的平均肝質(zhì)量，并且C為在孵育期間每單位體積存在的肝細(xì)胞數(shù)目。利用表5中所列出且以下等式所采用的物理和生理標(biāo)度因子計(jì)算預(yù)測(cè)的肝清除率(CLh)：其中Q為物種依賴性肝血流量。對(duì)于測(cè)試化合物的未結(jié)合份數(shù)(fu)無(wú)需調(diào)整。通過計(jì)算預(yù)測(cè)的CLh與肝血流量的比率確定預(yù)測(cè)的肝萃取率(ER)。表5物種WaQbD(mic.)cD(hep.)d小鼠87.090501.20E+08大鼠45.070451.35E+08兔30.871781.20E+08狗32.035551.20E+08猴32.044601.20E+08人25.720531.20E+08a)W＝每份質(zhì)量的動(dòng)物(kg)的平均肝質(zhì)量(g)。b)Q＝平均肝血流量(mL/min/kg)。c)D(mic.)＝每份質(zhì)量的肝(g)的細(xì)胞色素P450-相關(guān)蛋白的量(mg)。d)D(hep.)＝每份質(zhì)量的肝臟(g)的肝細(xì)胞數(shù)目。實(shí)施例D雄性SpragueDawlev大鼠藥代動(dòng)力學(xué)通過將化合物(干燥)加入20％(羥丙基β環(huán)糊精；CDT，Inc.)(水溶液)pH5.0中并渦旋作用直到獲得均勻懸浮液(PO)或溶液(IV)來(lái)配制化合物1、化合物2和化合物3中的每一種。對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，用以O(shè)2平衡的3％異氟烷麻醉動(dòng)物。向側(cè)尾靜脈施用1mL/kg劑量體積的1mg/kg化合物1、化合物2和化合物3。當(dāng)動(dòng)物處于麻醉狀態(tài)(以O(shè)2平衡的3％異氟烷，0.2mL/時(shí)間點(diǎn))時(shí)在以下時(shí)間點(diǎn)從對(duì)側(cè)尾靜脈抽血到NaEDTA管(1.5％v/v)中：1、5、15、30分鐘以及1、2、4、8和24小時(shí)，并且徹底混合。對(duì)于經(jīng)口給藥，大鼠在過夜禁食之后接受單次經(jīng)口給藥。當(dāng)動(dòng)物用以O(shè)2平衡的3％異氟烷(0.2mL/時(shí)間點(diǎn))麻醉后在以下時(shí)間點(diǎn)從側(cè)尾靜脈抽血到NaEDTA管(1.5％v/v)中：5、15和30分鐘，以及1、2、4、8、24和26小時(shí)，并且徹底混合。在24小時(shí)血液采集后，重新向動(dòng)物經(jīng)口給藥，并在給藥后2小時(shí)采集血漿和腦，以進(jìn)行化合物分析。在去除之前用鹽水灌注腦，稱量，并且將其速凍在液氮中，直到通過LCMS/MS進(jìn)行分析。通過在14,000rpm下離心10分鐘來(lái)分離血漿并且將血漿樣品轉(zhuǎn)移到具有橡皮帽的96孔板管內(nèi)并保存在-20℃±5℃，直到分析。血漿分析通過首先連續(xù)稀釋(3-倍)化合物1、化合物2和化合物3于DMSO中的40-μg/mL原液以提供標(biāo)準(zhǔn)溶液，從而制備單個(gè)12點(diǎn)校準(zhǔn)曲線。然后將血漿(20μL)加入到萃取板中，并將2.5μL各標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到天然血漿中。隨后將內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的原液(10.0μL于乙腈中的2.5μg/mL)加入到各標(biāo)準(zhǔn)物和樣品溶液中。通過加入317.5μL乙腈以使總體積為350μL來(lái)從20μL血漿中沉淀出蛋白物質(zhì)。將樣品渦旋混合5分鐘并在AllegraX-12R離心機(jī)(BeckmanCoulter，F(xiàn)ullerton，CA)中在約1，500xg下在4℃下離心15分鐘。經(jīng)由550μL個(gè)人移液管(PersonalPipettor)(ApricotDesigns，Monrovia，CA)將100-μL等份的各上清液轉(zhuǎn)移到96-孔板中并用HPLC級(jí)水1∶1稀釋。用板墊密封所得板并通過LC-MS/MS分析化合物在血漿中的量。LC-MS/MS系統(tǒng)由HTC-PAL自動(dòng)進(jìn)樣器(LeapTechnologies，Inc.，Carrboro，NC)、HP1100HPLC(AgilentTechnologiesInc.，SantaClara，CA)和API4000三重四極桿質(zhì)譜儀(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)組成。使用Synergi4uHydro-RP80A柱(2.1x30mm，4μm粒徑；Phenomenex，Torrance，CA)結(jié)合采用流動(dòng)相A(0.1％甲酸水溶液和1％異丙醇中的10mM乙酸銨)和B(89.9％乙腈、10％甲醇、0.1％甲酸中的10mM乙酸銨)的梯度條件實(shí)現(xiàn)分析物和內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的色譜滯留。單次注射的包括再平衡時(shí)間的總運(yùn)行時(shí)間為3.5分鐘并且流速為0.8mL/分鐘。將溶劑B在1.0分鐘內(nèi)從5％增加至95％，在95％下保持1.0分鐘，然后在0.1分鐘內(nèi)降低至5％。時(shí)間(min)流動(dòng)相A(％)流動(dòng)相B(％)0.009550.259551.255952.255952.359553.50955腦分析通過首先連續(xù)稀釋(3-倍)化合物1、化合物2和化合物3各自于DMSO中的40-μg/mL原液來(lái)制備單個(gè)12點(diǎn)校準(zhǔn)曲線。通過將5.0mL水加入到含有腦的50mL錐形管中來(lái)制備腦勻漿物。將管內(nèi)容物用Omni-PrepMultiSampleHomogenizer(Kennesaw，GA)在22,000RPM下均質(zhì)化180秒。然后將勻漿物(100μL)加入到萃取板中，并將2.5μL各標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到天然腦勻漿物中。隨后將內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的原液(10.0μL乙腈中的2.5μg/mL)加入到各標(biāo)準(zhǔn)物和樣品溶液中。通過加入237.5μL乙腈以使總體積為350μL來(lái)從100μL小鼠腫瘤均漿物中沉淀蛋白物質(zhì)。將樣品渦旋混合5分鐘并在AllegraX-12R離心機(jī)(BeckmanCoulter，F(xiàn)ullerton，CA)中在約1,500xg下在4℃下離心15分鐘。經(jīng)由550μL個(gè)人移液管(PersonalPipettor)(ApricotDesigns，Monrovia，CA)將100-μL等份的各上清液轉(zhuǎn)移到96-孔板中并用HPLC級(jí)水1∶1稀釋。用板墊密封所得板并通過LC-MS/MS分析化合物1n在腦中的量。LC-MS/MS系統(tǒng)由HTC-PAL自動(dòng)進(jìn)樣器(LeapTechnologies，Inc.，Carrboro，NC)、HP1100HPLC(AgilentTechnologiesInc.，SantaClara，CA)和API4000三重四極桿質(zhì)譜儀(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)組成。使用Synergi4μHydro-RP80A柱(2.1x30mm，4μm粒徑；Phenomenex，Torrance，CA)結(jié)合采用流動(dòng)相A(0.1％甲酸水溶液和1％異丙醇中的10mM乙酸銨)和B(89.9％乙腈、10％甲醇、0.1％甲酸中的10mM乙酸銨)的梯度條件實(shí)現(xiàn)分析物和內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的色譜滯留。時(shí)間(min)流動(dòng)相A(％)流動(dòng)相B(％)0.009550.259551.255952.255952.359553.50955單次注射的包括再平衡時(shí)間的總運(yùn)行時(shí)間為3.5分鐘并且流速為0.8mL/分鐘。將溶劑B在1.0分鐘內(nèi)從5％增加至95％，在95％下保持1.0分鐘，然后在0.1分鐘內(nèi)降低至5％。使用ESI+離子化模式實(shí)現(xiàn)分析物的質(zhì)譜檢測(cè)。在化合物1、化合物2和化合物3的原液輸注期間優(yōu)化離子電流。通過多重反應(yīng)檢測(cè)(MRM)每種化合物所特有的躍遷來(lái)測(cè)量分析物反應(yīng)。通過使用內(nèi)部專有軟件(SherlockVersion2.1)建立的非房室建模來(lái)計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。使用線性梯形求積法計(jì)算AUC。實(shí)施例E狗藥代動(dòng)力學(xué)如下制備用于以1mL/kg劑量體積遞送1mg/kg的IV給藥制劑。用于配制的媒介物為水中的20％(羥丙基β環(huán)糊精；CDT，Inc.)(水溶液)。將最終體積的媒介物加入到各化合物1、化合物2和化合物3(作為無(wú)水化合物)并且攪拌混合物直到獲得均勻溶液為止。最終溶液的pH為7。用0.2μM過濾器過濾溶液，之后遞送至動(dòng)物。雄性Beagle狗在過夜禁食之后接受單次靜脈內(nèi)給藥。在給藥后的以下時(shí)間點(diǎn)在K2EDTA血液采集管中采集血液/血漿(1.5mL/時(shí)間點(diǎn))：0、1、5、15和30分鐘以及1、2、4、8、12、24和48小時(shí)，并且徹底混合。從清醒動(dòng)物的頸靜脈、頭靜脈或隱靜脈采集血液樣品。將血液樣品保持在冰上，直到加工獲得血漿為止。將血液樣品在3200RPM下在約5℃下離心10分鐘。將血漿樣品直接轉(zhuǎn)移到96孔板管(MatrixTech，0.75mL)。將可注射橡膠帽置于96孔板管上。將血漿樣品保存在-20℃±5℃，直到分析。血漿分析通過首先連續(xù)稀釋(3-倍)化合物1、化合物2和化合物3于DMSO中的40-μg/mL原液以提供標(biāo)準(zhǔn)溶液，從而制備單個(gè)12點(diǎn)校準(zhǔn)曲線。然后將血漿(20μL)加入到萃取板中，并將2.5μL各標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到天然血漿中。隨后將內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的原液(10.0μL乙腈中的2.5μg/mL)加入到各標(biāo)準(zhǔn)物和樣品溶液中。通過加入317.5μL乙腈以使總體積為350μL來(lái)從20μL血漿中沉淀出蛋白物質(zhì)。將樣品渦旋混合5分鐘并在AllegraX-12R離心機(jī)(BeckmanCoulter，F(xiàn)ullerton，CA)中在約1,500xg下在4℃下離心15分鐘。通過550μL個(gè)人移液管(ApricotDesigns，Monrovia，CA)將100-μL等份的各上清液轉(zhuǎn)移到96-孔板中并用HPLC級(jí)水1∶1稀釋。用板墊密封所得板并通過LC-MS/MS分析化合物在血漿中的量。LC-MS/MS系統(tǒng)由HTC-PAL自動(dòng)進(jìn)樣器(LeapTechnologies，Inc.，Carrboro，NC)、HP1100HPLC(AgilentTechnologiesInc.，SantaClara，CA)和API4000三重四極桿質(zhì)譜儀(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)組成。使用Synergi4μHydro-RP80A柱(2.1x30mm，4μm粒徑；Phenomenex，Torrance，CA)結(jié)合采用流動(dòng)相A(0.1％甲酸水溶液和1％異丙醇中的10mM乙酸銨)和B(89.9％乙腈、10％甲醇、0.1％甲酸中的10mM乙酸銨)的梯度條件實(shí)現(xiàn)分析物和內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物的色譜滯留。單次注射的包括再平衡時(shí)間的總運(yùn)行時(shí)間為3.5分鐘并且流速為0.8mL/分鐘。將溶劑B在1.0分鐘內(nèi)從5％增加至95％，在95％下保持1.0分鐘，然后在0.1分鐘內(nèi)降低至5％。時(shí)間(min)流動(dòng)相A(％)流動(dòng)相B(％)0.009550.259551.255952.255952.359553.50955使用ESI+離子化模式實(shí)現(xiàn)分析物的質(zhì)譜檢測(cè)。在化合物1、化合物2和化合物3的原液輸注期間優(yōu)化離子電流。通過多重反應(yīng)檢測(cè)(MRM)每種化合物所特有的躍遷來(lái)測(cè)量分析物反應(yīng)。通過使用內(nèi)部專有軟件(Sherlock2.1版)建立的非房室建模來(lái)計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。使用線性梯形求積法計(jì)算AUC。實(shí)施例FhERG測(cè)定此測(cè)定用于測(cè)量化合物1、化合物2和化合物3對(duì)人胚腎細(xì)胞(HEK293)中表達(dá)的克隆的hERG鉀通道的作用。在室溫下使用自動(dòng)平行膜片鉗系統(tǒng)QPatch(SophionBioscienceA/S，Denmark)評(píng)估化合物1、化合物2和化合物3對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的hERG(人ether-à-go-go-相關(guān)基因)鉀通道電流(IKr的替代物，快速活化的心臟延遲整流鉀電流)的體外作用。在0.3、1、3、10、30以及100μM下評(píng)估測(cè)試品，在三種或更多種細(xì)胞(n≥3)中測(cè)試各濃度。暴露于每種測(cè)試品濃度的持續(xù)時(shí)間為3分鐘。陽(yáng)性對(duì)照確認(rèn)了測(cè)試系統(tǒng)對(duì)hERG抑制的靈敏度。實(shí)施例Gp38激酶結(jié)合測(cè)定在p38αLanthaScreenTMEu激酶結(jié)合測(cè)定中測(cè)定化合物1的p38α結(jié)合活性。在緩沖液(25mM[Na+]HEPESpH7.3，10mMMgCl2，100μMNaVO4)中用5nMAlexa-示蹤劑199(Invitrogen目錄號(hào)PV5830)和2nM銪標(biāo)記的抗-GST抗體(Invitrogen目錄號(hào)PV5594)孵育5nM無(wú)活性的GST-標(biāo)記的重組人p38α(來(lái)自Invitrogen的GST-標(biāo)記的胞質(zhì)域，目錄號(hào)PV3305)。加入化合物1在DMSO中的三倍連續(xù)稀釋液，以使最終百分比為2％DMSO。在22℃下孵育60分鐘之后，使用EnVision多模式讀板儀(PerkinElmer)通過在615nM和665nM下進(jìn)行TR-FRET雙波長(zhǎng)檢測(cè)來(lái)測(cè)量反應(yīng)物。使用比率測(cè)量排放系數(shù)計(jì)算對(duì)照百分比。通過將四參數(shù)模型擬合至對(duì)照數(shù)據(jù)百分比來(lái)確定IC50值。發(fā)現(xiàn)化合物1對(duì)TrkA比對(duì)p38α有效1000倍。實(shí)施例H脫靶激酶圖譜表征通過Millipore，Inc.的KinaseProfilerTM業(yè)務(wù)測(cè)試在10μM濃度下化合物1針對(duì)其全部激酶板上可獲得的所有激酶的脫靶激酶活性。根據(jù)Millipore說(shuō)明書在接近每種單獨(dú)激酶的Km的ATP濃度下一式兩份地運(yùn)行化合物1。結(jié)果顯示在以下表中。數(shù)據(jù)被報(bào)道為對(duì)照百分比(POC)并且為兩次重復(fù)的平均值。在KinaseProfilerTM中，化合物1相對(duì)于板中的其他激酶顯示對(duì)抑制TrkA有顯著且出乎意料的選擇性。事實(shí)上，化合物1在10μM濃度下對(duì)脫靶激酶為大部分無(wú)活性的，并且因此并不預(yù)期在哺乳動(dòng)物中以治療劑量抑制脫靶激酶?；衔?選擇性抑制Trk途徑而不抑制其他脫靶激酶的能力可轉(zhuǎn)變成基本上不具有與脫靶激酶抑制相關(guān)的副作用的藥物特性。此類藥物特性可代表一種比先前已報(bào)道的方法更安全的治療疼痛、炎癥、癌癥和某些皮膚疾病的方法。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3