1.利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)酶輔助超聲提取
取長春花地上部分陰干并粉碎,得到長春花干粉,加入混合酶液孵化,過濾,留長春花粉末,在長春花粉末中加入乙醇,并用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.6-6.8,超聲提??;過濾,留提取液,將提取液減壓濃縮,得到濃縮液;
(2)絡(luò)合萃取富集
以二(2-乙基己基)磷酸作為絡(luò)合劑,石油醚作為稀釋劑,組成萃取體系,對濃縮液進(jìn)行絡(luò)合萃取,分離上層液,得到富含長春質(zhì)堿的萃取液;
(3)反萃分離
將富含長春質(zhì)堿的萃取液用稀鹽酸反萃,稀鹽酸層減壓濃縮后,冷凍干燥,得到長春質(zhì)堿粗品;
(4)純化
將所得的長春質(zhì)堿粗品進(jìn)行重結(jié)晶,即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(1)中的混合酶液包括:纖維素酶3-6U/ml、果膠酶4-8U/ml和半纖維素酶6-9U/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(1)中的混合酶液pH為4.0-7.0,混合酶液中還包括金屬離子Fe2+、Co2+、Mn2+、Ca2+中的一種或多種,金屬離子的總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%;
所述孵化的溫度為25-50℃,時(shí)間為4-6h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,所述乙醇的加入量為5倍過濾得到的長春花粉末的重量,乙醇的體積分?jǐn)?shù)為70-80%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(1)中超聲提取3-4次,每次4-6h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(1)和(3)中減壓濃縮的真空度為﹣0.9MPa,轉(zhuǎn)速為150-180轉(zhuǎn)/秒。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(2)中二(2-乙基己基)磷酸和石油醚的體積比為1:1-3,萃取體系和濃縮液的體積比為1-3:1,萃取次數(shù)為3-5次。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(3)中稀鹽酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1-3%,稀鹽酸與萃取液的體積比為1-3:1,反萃次數(shù)為3-5次。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(4)長春質(zhì)堿粗品進(jìn)行重結(jié)晶的具體方法為:將長春質(zhì)堿粗品用超純水溶解,用氨水將pH調(diào)至8-9后,在20-25℃下攪拌5-6h,然后靜置12-24h,即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的利用酶輔助絡(luò)合萃取法從長春花中提取分離長春質(zhì)堿的方法,其特征在于,步驟(4)中長春質(zhì)堿粗品用超純水溶解至終濃度為4-6g/L。