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      布氏乳桿菌8?2N及在制備苯乳酸中的應用的制作方法

      文檔序號:11125912閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.布氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri)8-2N,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號為CCTCC No.M 2015715,保藏時間:2015年11月30日,保藏地址:中國武漢武漢大學,郵編430072。

      2.一種權(quán)利要求1所述布氏乳桿菌8-2N在制備苯乳酸中的應用。

      3.如權(quán)利要求2所述的應用,其特征在于所述應用是將布氏乳桿菌8-2N經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)獲得的發(fā)酵液離心,獲得上清液和菌體細胞,以菌體細胞為催化劑,以苯丙酮酸為底物,以葡萄糖為輔助底物,于pH 8.0、100mM磷酸鹽緩沖液中構(gòu)成反應體系,在35~45℃條件下進行轉(zhuǎn)化反應,反應完全后,獲得轉(zhuǎn)化反應液,分別將上清液和轉(zhuǎn)化反應液分離純化,獲得所述苯乳酸。

      4.如權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于所述反應體系中,濕菌體用量為90~100g/L,所述苯丙酮酸加入量為10g/L,葡萄糖加入量為10~20g/L。

      5.如權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于所述轉(zhuǎn)化反應時間為3-6h。

      6.如權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于所述催化劑按如下方法制備:

      (1)斜面培養(yǎng):將布氏乳桿菌8-2N接種至斜面培養(yǎng)基,在25~35℃培養(yǎng)1~2d,獲得斜面菌體;所述斜面培養(yǎng)基終濃度組成為:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,檸檬酸氫二胺2g/L,無水乙酸鈉5g/L,硫酸錳0.25g/L,硫酸鎂0.58g/L,磷酸氫二鉀2g/L,酵母膏5g/L,牛肉膏10g/L,吐溫85g/L,瓊脂23g/L,溶劑為去離子水,pH值自然;

      (2)種子培養(yǎng):將斜面菌體接種至種子培養(yǎng)基,在20~35℃培養(yǎng)12~24h,獲得種子液;所述種子培養(yǎng)基終濃度組成為:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,檸檬酸氫二胺2g/L,無水乙酸鈉5g/L,硫酸錳0.25g/L,硫酸鎂0.58g/L,磷酸氫二鉀2g/L,酵母膏5g/L,牛肉膏10g/L,吐溫85g/L,溶劑為去離子水,pH值自然;

      (3)發(fā)酵培養(yǎng):將種子液以體積濃度1-5%的接種量接種至發(fā)酵培養(yǎng)基,在20-35℃培養(yǎng)36-72h,將發(fā)酵液離心,收集濕菌細胞;所述發(fā)酵液培養(yǎng)基終濃度組成為:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,檸檬酸氫二胺2g/L,無水乙酸鈉5g/L,硫酸錳0.25g/L,硫酸鎂0.58g/L,磷酸氫二鉀2g/L,酵母膏5g/L,牛肉膏10g/L,吐溫85g/L,瓊脂23g/L,溶劑為去離子水,pH值自然。

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