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      引起白化的巴馬香豬MC1R突變基因及其應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:11145289閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種引起白化的巴馬香豬MC1R突變基因,其特征在于,MC1R基因的第894位之后新插入CC兩個堿基,該突變可引起巴馬香豬白化并呈現(xiàn)隱性遺傳。

      2.一種利用權(quán)利要求1所述的引起白化的巴馬香豬MC1R突變基因在制備醫(yī)用動物模型中的應(yīng)用。

      3.一種利用權(quán)利要求1所述的引起白化的巴馬香豬MC1R突變基因在制備白化寵物用豬的應(yīng)用。

      4.一種利用權(quán)利要求1所述的引起白化的巴馬香豬MC1R突變基因在制備一種遺傳標(biāo)記,作為評判品種的純度、遺傳穩(wěn)定性、親緣關(guān)系及在遺傳育種配套系培育中確定親本的雜交組合類型中的應(yīng)用。

      5.一種檢測巴馬香豬隱性白化位點(diǎn)的基因型的方法,其特征在于,是以檢測巴馬香豬MC1R基因第894位脫氧核糖核酸是否有CC插入,即第889位脫氧核糖核酸為起始的六個連續(xù)C是否突變?yōu)榘藗€連續(xù)C,確定待測巴馬香豬的基因型是--/--、CC/--或者CC/CC,其中CC/CC基因型的巴馬香豬的毛色呈現(xiàn)全白,而--/--和CC/--基因型的巴馬香豬的毛色呈現(xiàn)兩頭烏黑中間白;所述--/--基因型的個體為巴馬香豬MC1R基因的自5’末端第894位脫氧核糖核酸無CC插入的純合體;所述CC/CC基因型的個體為巴馬香豬MC1R基因的自5’末端第894位脫氧核糖核酸有CC插入的純合體;所述CC/--基因型的個體則為兩個等位基因中僅有一個基因有CC插入的雜合體。

      6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測巴馬香豬隱性白化位點(diǎn)的基因型的方法,其特征在于,確定待測巴馬香豬MC1R基因第894位脫氧核糖核苷酸后是否插入CC的方法可采用測序分析方法。

      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測巴馬香豬隱性白化位點(diǎn)的基因型的方法,其特征在于,測序分析包括PCR擴(kuò)增和對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序;所述PCR擴(kuò)增用的引物對設(shè)計:以巴馬香豬基因組DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物含有巴馬香豬MC1R基因的第889位至第896位脫氧核糖核苷酸;PCR擴(kuò)增得到的DNA片段為序列1所示的核苷酸序列或序列2所示的核苷酸序列。

      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測巴馬香豬隱性白化位點(diǎn)的基因型的方法,其特征在于,測序方法中,設(shè)計引物如下:

      正向引物F:5’-GGAGAGGAGGCTGCTGG-3’

      反向引物R:5’-TGGACACCTCCAGGCACT-3’

      用上述引物對在巴馬香豬基因組DNA中進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR反應(yīng)體系為:2×Taq Unicorn Premix 12.5μl,DNA(1/100)1.0μl,Primer F2(10μM)0.5μl,Primer R2(10μM)0.5μl,Add H2O To 25.0μl;PCR反應(yīng)程序:94℃4min;94℃20sec,57℃20sec,72℃20sec,20cycles;72℃3min;10℃。

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