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      用于捕獲和鑒定循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片的制作方法

      文檔序號(hào):12410516閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一種用于捕獲和鑒定循環(huán)腫瘤細(xì)胞的微流控芯片,其特征在于,包括:依次疊放在一起并相互密封的三層結(jié)構(gòu),由上至下分別為微閥控制層、微閥薄膜層以及帶有多個(gè)功能區(qū)的基板;

      所述微閥控制層上設(shè)有六個(gè)貫通控制層的孔以及三條氣體通道;其中,三個(gè)孔為加樣孔,連通基板,用于樣品和試劑流入和流出;其余三個(gè)孔分別連接三條氣體通道,用于注入氣體,控制微閥的開(kāi)啟與閉合;

      所述微閥薄膜層上設(shè)有三個(gè)貫通薄膜層的孔,分別與上述微閥控制層的三個(gè)加樣孔對(duì)應(yīng)連通;

      所述基板上設(shè)有三個(gè)功能區(qū),呈“品”字型排布,分別為雜質(zhì)過(guò)濾區(qū)、細(xì)胞分離區(qū)以及單細(xì)胞定位和熒光鑒定區(qū);所述三個(gè)功能區(qū)由三條主流體通道連通,每條主流體通道的開(kāi)啟與閉合由單獨(dú)的氣體微閥控制;其中,所述雜質(zhì)過(guò)濾區(qū)包括前、中、后三個(gè)區(qū)域,入口處分為兩條分支流道,用于樣品分流,過(guò)濾區(qū)內(nèi)設(shè)置有陣列化平行排布的微柱,不同區(qū)域相鄰兩微柱之間間隔不同;所述細(xì)胞分離區(qū)為一條漸寬的微流體通道,通道寬度從入口至出口逐漸加寬;所述單細(xì)胞定位和熒光鑒定區(qū),入口處分為兩條分支流道,用于樣品分離,該功能區(qū)內(nèi)設(shè)置有陣列化平行排布的V形或U形定位單元,用于單細(xì)胞的捕獲定位及熒光鑒定。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述微閥控制層厚度為2-5毫米,所述氣體通道深度為30-100微米。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的微流控芯片,其特征在于,所述微閥薄膜層的厚度為30-50微米。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的微流控芯片,其特征在于,所述基板上雜質(zhì)過(guò)濾區(qū)的微柱高度為20-30微米,直徑為10-40微米。

      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微流控芯片,其特征在于,在所述雜質(zhì)過(guò)濾區(qū)的前、中、后三個(gè)區(qū)域,相鄰兩個(gè)微柱的間距分別為100微米、50微米和32微米;優(yōu)選所述雜質(zhì)過(guò)濾區(qū)共布置有1500個(gè)微柱。

      6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的微流控芯片,其特征在于,所述基板上細(xì)胞分離區(qū)的微流體通道,其深度為20微米,入口寬度為1毫米,出口寬度為7毫米。

      7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的微流控芯片,其特征在于,所述基板上單細(xì)胞定位和熒光鑒定區(qū),其V形定位單元的高度為20-30微米,最大開(kāi)口15微米,最小開(kāi)口3微米,相鄰兩個(gè)定位單元行間距為35微米,列間距為40微米,前后定位單元采用交替式陣列排布;優(yōu)選所述單細(xì)胞定位和熒光鑒定區(qū)共布置有6000個(gè)V形定位單元。

      8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的微流控芯片,其特征在于,所述微閥控制層由透明材質(zhì)制成,所述透明材質(zhì)包括玻璃、PDMS;所述微閥薄膜層由PDMS材料制成,在氣體通道對(duì)應(yīng)的薄膜層區(qū)域,在氣壓控制下可發(fā)生彎曲形變;所述基板的材質(zhì)為硅或硅-玻璃。

      9.循環(huán)腫瘤細(xì)胞捕獲、鑒定和自動(dòng)化計(jì)數(shù)系統(tǒng),其特征在于,包括權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的微流控芯片,熒光探針,熒光成像系統(tǒng)和分析計(jì)數(shù)系統(tǒng),泵,單片機(jī)控制的氣壓控制裝置。

      10.用于鑒定循環(huán)腫瘤細(xì)胞的試劑盒,其特征在于,包括盒體、設(shè)在盒體內(nèi)的權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述微流控芯片,以及設(shè)在盒體內(nèi)的熒光探針,所述熒光探針為多種帶有熒光標(biāo)記的抗體或多肽,所述抗體或多肽可識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面特定的抗原。

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