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      高滴度雙報告基因的可視化模擬病毒及其應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:12411549閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.本發(fā)明公開了高滴度雙報告基因的可視化模擬病毒及其應(yīng)用。其特征在于:利用慢病毒三質(zhì)粒包裝系統(tǒng)的技術(shù)獲得同時表達(dá)綠色熒光蛋白和熒光素酶雙報告基因的模擬病毒。

      2.按照權(quán)利要求1所述的高滴度雙報告基因的可視化模擬病毒的制備方法,其特征在于,包括以下方法:

      (1)擴(kuò)增雙報告基因gluc-2A-eGFP;

      (2)AgeI和XhoI雙酶切轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pCS-CG和gluc-2A-eGFP;

      (3)將步驟(2)獲得的pCS-CG和gluc-2A-eGFP進(jìn)行連接,得到表達(dá)雙報告基因的轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pCS-gluc-2A-eGFP;

      (4)將包裝質(zhì)粒pCMV HR’ΔR8.2、轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pCS-gluc-2A-eGFP和包膜質(zhì)粒pCMV-VSVG共轉(zhuǎn)染293FT細(xì)胞,48h后收獲上清,獲得高滴度雙報告基因的可視化模擬病毒。

      3.按照權(quán)利要求1和2所述的高滴度雙報告基因模擬病毒在高致病性病原微生物可視化追蹤和定量分析等方面的應(yīng)用。

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