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      一種病毒RNA的提取試劑盒和提取方法與流程

      文檔序號:12411810閱讀:來源:國知局

      技術特征:

      1. 一種病毒RNA的提取試劑盒,其特征在于,包括裂解結合液A、洗滌液B、洗脫液C和消解液D,所述裂解結合液A含有20~50mM蔗糖,20~50mM硫酸銨,10~50mM Tris-HCl,1~5%(V/V) Brij-58,0.2~0.5mg/mL磁珠;pH值為4.5~5.5,所述洗滌液B含有1~5% (V/V)Brij-58,5~25mM Tris-HCl,0.5~1mg/mL蛋白酶K,pH值為6~7。

      2. 根據(jù)權利要求1所述的病毒RNA的提取試劑盒,其特征在于,所述洗脫液C含有10~20 mM Tris-HCl,0.5mM EDTA,pH值為8.5。

      3.根據(jù)權利要求1所述的病毒RNA的提取試劑盒,其特征在于,所述消解液D含有20mg/mL蛋白酶K。

      4.根據(jù)權利要求1所述的病毒RNA的提取試劑盒,其特征在于,所述磁珠的粒徑為0.5~1μm。

      5.一種利用權利要求1至4任一項所述試劑盒進行核酸提取的方法,其特征在于,包括以下步驟:

      S1. 取樣本,加入消解液D和裂解結合液A,混勻離心后,吸棄上清液;

      S2. 加入洗滌液B,混勻10min離心后,再次吸棄上清液;

      S3. 加入洗滌液B,混勻1min離心后,再次吸棄上清液;

      S4. 加入洗脫液C,溫浴一段時間,溫浴期間震蕩混勻,離心后,吸取上清液至新的離心管即得核酸。

      6.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,S1所述樣本和裂解結合液A的混合體積比為1:3。

      7.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,S4所述溫浴的條件為56~75℃,洗脫液C的加入體積為50~100μL。

      8.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,S2和S3所述洗滌液B的加入體積為300~600μL。

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