1.一種制備二萜母核化合物的方法,包括:以三尖杉烷二萜合成酶催化香葉基香葉基焦磷酸,產(chǎn)生二萜母核化合物產(chǎn)物;
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述保守性變異蛋白包括選自:
3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述三尖杉烷二萜合成酶的保守性變異蛋白包括:
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的方法,其特征在于,所述三尖杉烷二萜合成酶或其保守性變異蛋白為n端被截短的蛋白;較佳地,相應(yīng)于seq?id?no:1所示氨基酸序列的蛋白、截去其n端第2-54位氨基酸殘基,或相應(yīng)于seq?id?no:2、截去其n端第2-54位氨基酸殘基。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法在體外進(jìn)行或在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行;
6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述含有ipp與dmapp合成模塊的細(xì)胞內(nèi)包括:
7.如權(quán)利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述細(xì)胞還表達(dá):香葉基香葉基二磷酸合成酶、三尖杉烷二萜合成酶,或含有編碼所述蛋白的核酸構(gòu)建物;
8.三尖杉烷二萜合成酶的應(yīng)用,用于催化香葉基香葉基焦磷酸形成二萜母核化合物;其中,所述三尖杉烷二萜合成酶為具有seq?id?no:1或seq?id?no:2所示氨基酸序列的酶或其保守性變異蛋白;
9.一種三尖杉烷二萜合成酶,其為具有seq?id?no:1或seq?id?no:2所示氨基酸序列的酶或其保守性變異蛋白;
10.如權(quán)利要求9所述的三尖杉烷二萜合成酶,其特征在于,所述三尖杉烷二萜合成酶的保守性變異蛋白包括:
11.如權(quán)利要求9或10所述的三尖杉烷二萜合成酶,其特征在于,所述三尖杉烷二萜合成酶或其保守性變異蛋白為n端被截短的蛋白;較佳地,相應(yīng)于seq?id?no:1所示氨基酸序列的蛋白、截去其n端第2-54位氨基酸殘基,或相應(yīng)于seq?id?no:2、截去其n端第2-54位氨基酸殘基。
12.一種核酸分子,其編碼權(quán)利要求9或10所述的三尖杉烷二萜合成酶。
13.一種核酸構(gòu)建物,含有權(quán)利要求12所述的核酸分子;較佳地,所述核酸構(gòu)建物是載體,例如克隆載體、整合載體或表達(dá)載體。
14.一種宿主細(xì)胞,該細(xì)胞:
15.如權(quán)利要求14所述的宿主細(xì)胞,其特征在于,所述宿主細(xì)胞是含有ipp與dmapp合成模塊的細(xì)胞;較佳地,所述含有ipp與dmapp合成模塊的細(xì)胞內(nèi)包括:
16.如權(quán)利要求14或15所述的宿主細(xì)胞,其特征在于,所述細(xì)胞還表達(dá):香葉基香葉基二磷酸合成酶或含有編碼所述蛋白的核酸構(gòu)建物;較佳地,所述細(xì)胞還表達(dá)hmg-coa-還原酶。
17.一種用于制備二萜母核化合物的試劑盒,其中包括: