1.一種經(jīng)修飾的mrna，其包括：
2.根據(jù)權利要求1所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna包括poly-a區(qū)和5'帽區(qū)，所述poly-a區(qū)包括兩個或更多個poly-a尾，所述5'帽區(qū)包括一個5'帽。
3.根據(jù)權利要求1所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna包括poly-a區(qū)和5'帽區(qū)，所述poly-a區(qū)包括一個poly-a尾，所述5'帽區(qū)包括兩個或更多個5'帽。
4.根據(jù)權利要求1所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna包括poly-a區(qū)和5'帽區(qū)，所述poly-a區(qū)包括兩個或更多個poly-a尾，所述5'帽區(qū)包括兩個或更多個5'帽。
5.根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna包括5'非翻譯區(qū)(5'utr)和3'非翻譯區(qū)(3'utr)，其中所述orf位于所述5'utr與所述3'utr之間，其中所述3'utr位于所述orf與所述poly-a區(qū)之間，并且其中所述5'utr位于所述5'帽區(qū)與所述orf之間。
6.根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna是線性mrna，其中所述5'帽區(qū)位于所述經(jīng)修飾的mrna的5'端處，并且所述poly-a區(qū)位于所述經(jīng)修飾的mrna的3'端處。
7.根據(jù)權利要求5或6所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna是環(huán)狀mrna，其中所述poly-a區(qū)位于所述3'utr與所述5'帽區(qū)之間。
8.根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括兩個或更多個poly-a尾，并且所述poly-a尾的至少兩個實例通過第一接頭共價連接。
9.根據(jù)權利要求8所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
10.根據(jù)權利要求9所述的經(jīng)修飾的mrna，其中n1的每個實例是1。
11.根據(jù)權利要求10所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例與所述第一poly-a尾的內(nèi)部核苷酸共價連接。
12.根據(jù)權利要求10或11所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例在第二poly-a尾的3'核苷酸處與所述第二poly-a尾共價連接。
13.根據(jù)權利要求10至12中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例包括通過使兩個正交點擊化學柄反應而形成的至少一個部分。
14.根據(jù)權利要求13所述的經(jīng)修飾的mrna，其中通過使兩個正交點擊化學柄反應而形成的至少一個部分具有下式：
15.根據(jù)權利要求10至14中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
16.根據(jù)權利要求10至15中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞烯基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞炔基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜烯基和經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜炔基的每個實例的母鏈中的一個或多個碳原子獨立地被替換。
17.根據(jù)權利要求10至16中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
18.根據(jù)權利要求10至17中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例具有下式：
19.根據(jù)權利要求9所述的經(jīng)修飾的mrna，其中n1的每個實例獨立地是介于2與20之間，包含端值，的整數(shù)。
20.根據(jù)權利要求19所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例包括樹枝狀大分子。
21.根據(jù)權利要求20所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述樹枝狀大分子的至少一個實例是聚酰胺胺(pamam)樹枝狀大分子。
22.根據(jù)權利要求21所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述pamam樹枝狀大分子的至少一個實例具有下式：
23.根據(jù)權利要求22所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述pamam樹枝狀大分子的至少一個實例包括：
24.根據(jù)權利要求21所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞烯基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞炔基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜烯基和經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜炔基的每個實例的母鏈中的一個或多個碳原子獨立地被替換。
25.根據(jù)權利要求24所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例具有下式：
26.根據(jù)權利要求8至25中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例與所述第一poly-a尾的3'核苷酸共價連接。
27.根據(jù)權利要求8至26中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例與所述第二poly-a尾的3'核苷酸共價連接。
28.根據(jù)權利要求1至27中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna的所述poly-a區(qū)包括一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸。
29.根據(jù)權利要求28所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述兩個或更多個poly-a尾中的至少一個poly-a尾的最后10個核苷酸中的3個或更多個核苷酸是經(jīng)修飾的核苷酸和/或非腺苷核苷酸。
30.根據(jù)權利要求28或29所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)的一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸是經(jīng)修飾的腺苷核苷酸。
31.根據(jù)權利要求28至30中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)的一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸是經(jīng)修飾的非腺苷核苷酸。
32.根據(jù)權利要求28至31中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)的一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的核堿基。
33.根據(jù)權利要求32所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的核堿基選自由以下組成的組：黃嘌呤、烯丙基氨基尿嘧啶、烯丙基氨基胸苷、次黃嘌呤、地高辛化腺嘌呤、地高辛化胞嘧啶、地高辛化鳥嘌呤、地高辛化尿嘧啶、6-氯嘌呤核苷、n6-甲基腺嘌呤、甲基假尿嘧啶、2-硫代胞嘧啶、2-硫尿嘧啶、5-甲基尿嘧啶、4-硫代胸苷、4-硫尿嘧啶、5,6-二氫-5-甲基尿嘧啶、5,6-二氫尿嘧啶、5-[(3-吲哚基)丙酰胺-n-烯丙基]尿嘧啶、5-氨基烯丙基胞嘧啶、5-氨基烯丙基尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-溴胞嘧啶、5-羧基胞嘧啶、5-羧甲基酯尿嘧啶、5-羧基尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、5-甲?；奏?、5-甲?；蜞奏?、5-羥基胞嘧啶、5-羥甲基胞嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶、5-羥基尿嘧啶、5-碘胞嘧啶、5-碘尿嘧啶、5-甲氧基胞嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、5-甲基胞嘧啶、5-甲基尿嘧啶、5-炔丙基氨基胞嘧啶、5-炔丙基氨基尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、6-氮雜胞嘧啶、6-氮雜尿嘧啶、6-氯嘌呤、6-硫鳥嘌呤、7-脫氮雜腺嘌呤、7-脫氮雜鳥嘌呤、7-鳥嘌呤-7-炔丙基氨基腺嘌呤、7-脫氮雜-7-炔丙基氨基鳥嘌呤、8-氮雜腺嘌呤、8-疊氮基腺嘌呤、8-氯腺嘌呤、8-氧代腺嘌呤、8-氧代鳥嘌呤、阿糖腺嘌呤(araadenine)、阿糖胞嘧啶(aracytosine)、阿糖鳥嘌呤(araguanine)、阿糖尿嘧啶(arauracil)、生物素-16-7-脫氮雜-7-炔丙基氨基鳥嘌呤、生物素-16-氨基烯丙基胞嘧啶、生物素-16-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁3-5-炔丙基氨基胞嘧啶、花菁3-6-炔丙基氨基尿嘧啶、花菁3-氨基烯丙基胞嘧啶、花菁3-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁5-6-炔丙基氨基胞嘧啶、花菁5-6-炔丙基氨基尿嘧啶、花菁5-氨基烯丙基胞嘧啶、花菁5-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁7-氨基烯丙基尿嘧啶、dabcyl-5-3-氨基烯丙基尿嘧啶、脫硫生物素-16-氨基烯丙基-尿嘧啶、脫硫生物素-6-氨基烯丙基胞嘧啶、異鳥嘌呤、n1-乙基假尿嘧啶、n1-甲氧基甲基假尿嘧啶、n1-甲基腺嘌呤、n1-甲基假尿嘧啶、n1-丙基假尿嘧啶、n2-甲基鳥嘌呤、n4-生物素-obea-胞嘧啶、n4-甲基胞嘧啶、n6-甲基腺嘌呤、o6-甲基鳥嘌呤、假異胞嘧啶、假尿嘧啶、噻吩并胞嘧啶、噻吩并鳥嘌呤、噻吩并尿嘧啶、黃苷、3-脫氮雜腺嘌呤、2,6-二氨基腺嘌呤、2,6-二氨基鳥嘌呤、5-甲酰胺-尿嘧啶、5-乙基尿嘧啶、n6-異戊烯基腺嘌呤(i6a)、2-甲基-硫代-n6-異戊烯基腺嘌呤(ms2i6a)、2-甲基硫代-n6-甲基腺嘌呤(ms2m6a)、n6-(順式-羥基異戊烯基)腺嘌呤(io6a)、2-甲基硫代-n6-(順式-羥基異戊烯基)腺嘌呤(ms2io6a)、n6-甘氨?；被柞；汆堰?g6a)、n6-蘇氨?；被柞；汆堰?t6a)、2-甲基硫代-n6-蘇氨?；被柞；汆堰?ms2t6a)、n6-甲基-n6-蘇氨?；被柞；汆堰?m6t6a)、n6-羥基正纈氨酰基氨基甲?；汆堰?hn6a)、2-甲基硫代-n6-羥基正纈氨?；被柞；汆堰?ms2hn6a)、n6,n6-二甲基腺嘌呤(m62a)和n6-乙酰基腺嘌呤(ac6a)。
34.根據(jù)權利要求28至33中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的糖。
35.根據(jù)權利要求34所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的糖選自由以下組成的組：2'-硫代核糖、2',3'-二脫氧核糖、2'-氨基-2'-脫氧核糖、2'脫氧核糖、2'-疊氮基-2'-脫氧核糖、2'-氟-2'-脫氧核糖、2'-o-甲基核糖、2'-o-甲基脫氧核糖、3'-氨基-2',3'-二脫氧核糖、3'-疊氮基-2',3'-二脫氧核糖、3'-脫氧核糖、3'-o-(2-硝基芐基)-2'-脫氧核糖、3'-o-甲基核糖、5'-氨基核糖、5'-硫代核糖、5-硝基-1-吲哚基-2'-脫氧核糖、5'-生物素-核糖、2'-o,4'-c-亞甲基連接的核糖、2'-o,4'-c-氨基連接的核糖和2'-o,4'-c-硫代連接的核糖。
36.根據(jù)權利要求28至35中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的磷酸酯。
37.根據(jù)權利要求36所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的磷酸酯選自由以下組成的組：硫代磷酸酯(phosphorothioate，ps)、硫代磷酸酯(thiophosphate)、5'-o-甲基膦酸酯、3'-o-甲基膦酸酯、5'-羥基膦酸酯、羥基膦酸酯、硒代磷酸酯(phosphoroselenoate)、硒代磷酸酯(selenophosphate)、氨基磷酸酯、碳膦酸酯(carbophosphonate)、甲基膦酸酯、苯基膦酸酯、乙基膦酸酯、h-膦酸酯、胍環(huán)、三唑環(huán)、硼磷酸酯(boranophosphate，bp)、甲基膦酸酯和胍基丙基氨基磷酸酯。
38.根據(jù)權利要求36或37所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括1至3、3至5、5至10、10至15、15至30、30至50、50至100或100至200個硫代磷酸酯。
39.根據(jù)權利要求38所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括5至30個硫代磷酸酯。
40.根據(jù)權利要求28至39中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括3至5、5至10、10至15、15至30、30至50、50至100或100至200個脫氧核糖。
41.根據(jù)權利要求40所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括5至30個脫氧核糖。
42.根據(jù)權利要求28至41中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述mrna包括3'末端核苷酸，其中所述3'末端核苷酸是二脫氧腺苷、二脫氧胞苷、二脫氧鳥苷、二脫氧胸苷、二脫氧尿苷或反向脫氧胸苷。
43.根據(jù)權利要求1至42中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括25至500個核苷酸。
44.根據(jù)權利要求43所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括50至100、100至150、150至200、200至300、300至400或400至500個核苷酸。
45.根據(jù)權利要求1至44中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)包括所述poly-a區(qū)包括10個或更多個腺苷核苷酸。
46.根據(jù)權利要求1至45中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述poly-a區(qū)的核苷酸的25-100％、30-100％、40-100％、50-100％、60-100％、70-100％、80-100％、90-100％、95-100％、96-100％、97-100％、98-100％或99-100％是腺苷核苷酸。
47.根據(jù)權利要求8至46中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一poly-a尾包括10至50個腺苷核糖核苷酸、1至10個包括連接點的經(jīng)修飾的尿苷脫氧核糖核苷酸和3'末端雙脫氧核糖核苷酸或反向脫氧核糖核苷酸；并且所述第二poly-a尾包括10至50個腺苷核糖核苷酸。
48.根據(jù)權利要求47所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
49.根據(jù)權利要求47或48所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的尿苷脫氧核苷酸是5-辛二炔基脫氧尿苷。
50.根據(jù)權利要求8至46中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一poly-a尾和所述第二poly-a尾包括10至50個腺苷核糖核苷酸和3'末端疊氮化物部分。
51.根據(jù)權利要求50所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一poly-a尾和所述第二poly-a尾包括如以下所示的核苷酸序列：
52.根據(jù)權利要求8至46中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一poly-a尾和所述第二poly-a尾包括10至50個腺苷核糖核苷酸和5'末端疊氮化物部分。
53.根據(jù)權利要求52所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一poly-a尾和所述第二poly-a尾包括如以下所示的核苷酸序列：
54.根據(jù)權利要求1至53中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括兩個或更多個5'帽，并且所述5'帽的至少兩個實例通過第二接頭共價連接。
55.根據(jù)權利要求54所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
56.根據(jù)權利要求55所述的經(jīng)修飾的mrna，其中m1的每個實例是1。
57.根據(jù)權利要求56所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例與所述第一5'帽的內(nèi)部核苷酸共價連接。
58.根據(jù)權利要求56或57所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例在第二5'帽的3'核苷酸處與所述第二5'帽共價連接。
59.根據(jù)權利要求56至58中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例包括通過使兩個正交點擊化學柄反應而形成的至少一個部分。
60.根據(jù)權利要求59所述的經(jīng)修飾的mrna，其中通過使兩個正交點擊化學柄反應而形成的至少一個部分具有下式：
61.根據(jù)權利要求56至60中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
62.根據(jù)權利要求49至54中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞烯基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞炔基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜烯基和經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-200亞雜炔基的每個實例的母鏈中的一個或多個碳原子獨立地被替換。
63.根據(jù)權利要求56至62中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
64.根據(jù)權利要求56至62中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例具有下式：
65.根據(jù)權利要求56所述的經(jīng)修飾的mrna，其中m1的每個實例獨立地是介于2與20之間，包含端值，的整數(shù)。
66.根據(jù)權利要求65所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例包括樹枝狀大分子。
67.根據(jù)權利要求66所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述樹枝狀大分子的至少一個實例是聚酰胺胺(pamam)樹枝狀大分子。
68.根據(jù)權利要求67所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述pamam樹枝狀大分子的至少一個實例具有下式：
69.根據(jù)權利要求67或68所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述pamam樹枝狀大分子的至少一個實例包括：
70.根據(jù)權利要求68所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞烯基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞炔基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜烷基、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜烯基和經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的c1-10亞雜炔基的每個實例的母鏈中的一個或多個碳原子獨立地被替換。
71.根據(jù)權利要求68所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一接頭的至少一個實例具有下式：
72.根據(jù)權利要求50至71中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例與所述第一5'帽的5'或3'核苷酸共價連接。
73.根據(jù)權利要求50至72中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第二接頭的至少一個實例與所述第二5'帽的至少一個實例的5'或3'核苷酸共價連接。
74.根據(jù)權利要求50至73中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的mrna的所述5'帽區(qū)包括一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸。
75.根據(jù)權利要求74所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的核堿基。
76.根據(jù)權利要求75所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的核堿基選自由以下組成的組：黃嘌呤、烯丙基氨基尿嘧啶、烯丙基氨基胸苷、次黃嘌呤、地高辛化腺嘌呤、地高辛化胞嘧啶、地高辛化鳥嘌呤、地高辛化尿嘧啶、6-氯嘌呤核苷、n6-甲基腺嘌呤、甲基假尿嘧啶、2-硫代胞嘧啶、2-硫尿嘧啶、5-甲基尿嘧啶、4-硫代胸苷、4-硫尿嘧啶、5,6-二氫-5-甲基尿嘧啶、5,6-二氫尿嘧啶、5-[(3-吲哚基)丙酰胺-n-烯丙基]尿嘧啶、5-氨基烯丙基胞嘧啶、5-氨基烯丙基尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-溴胞嘧啶、5-羧基胞嘧啶、5-羧甲基酯尿嘧啶、5-羧基尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、5-甲酰基胞嘧啶、5-甲酰基尿嘧啶、5-羥基胞嘧啶、5-羥甲基胞嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶、5-羥基尿嘧啶、5-碘胞嘧啶、5-碘尿嘧啶、5-甲氧基胞嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、5-甲基胞嘧啶、5-甲基尿嘧啶、5-炔丙基氨基胞嘧啶、5-炔丙基氨基尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、6-氮雜胞嘧啶、6-氮雜尿嘧啶、6-氯嘌呤、6-硫鳥嘌呤、7-脫氮雜腺嘌呤、7-脫氮雜鳥嘌呤、7-鳥嘌呤-7-炔丙基氨基腺嘌呤、7-脫氮雜-7-炔丙基氨基鳥嘌呤、8-氮雜腺嘌呤、8-疊氮基腺嘌呤、8-氯腺嘌呤、8-氧代腺嘌呤、8-氧代鳥嘌呤、阿糖腺嘌呤、阿糖胞嘧啶、阿糖鳥嘌呤、阿糖尿嘧啶、生物素-16-7-脫氮雜-7-炔丙基氨基鳥嘌呤、生物素-16-氨基烯丙基胞嘧啶、生物素-16-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁3-5-炔丙基氨基胞嘧啶、花菁3-6-炔丙基氨基尿嘧啶、花菁3-氨基烯丙基胞嘧啶、花菁3-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁5-6-炔丙基氨基胞嘧啶、花菁5-6-炔丙基氨基尿嘧啶、花菁5-氨基烯丙基胞嘧啶、花菁5-氨基烯丙基尿嘧啶、花菁7-氨基烯丙基尿嘧啶、dabcyl-5-3-氨基烯丙基尿嘧啶、脫硫生物素-16-氨基烯丙基-尿嘧啶、脫硫生物素-6-氨基烯丙基胞嘧啶、異鳥嘌呤、n1-乙基假尿嘧啶、n1-甲氧基甲基假尿嘧啶、n1-甲基腺嘌呤、n1-甲基假尿嘧啶、n1-丙基假尿嘧啶、n2-甲基鳥嘌呤、n4-生物素-obea-胞嘧啶、n4-甲基胞嘧啶、n6-甲基腺嘌呤、o6-甲基鳥嘌呤、假異胞嘧啶、假尿嘧啶、噻吩并胞嘧啶、噻吩并鳥嘌呤、噻吩并尿嘧啶、黃苷、3-脫氮雜腺嘌呤、2,6-二氨基腺嘌呤、2,6-二氨基鳥嘌呤、5-甲酰胺-尿嘧啶、5-乙基尿嘧啶、n6-異戊烯基腺嘌呤(i6a)、2-甲基-硫代-n6-異戊烯基腺嘌呤(ms2i6a)、2-甲基硫代-n6-甲基腺嘌呤(ms2m6a)、n6-(順式-羥基異戊烯基)腺嘌呤(io6a)、2-甲基硫代-n6-(順式-羥基異戊烯基)腺嘌呤(ms2io6a)、n6-甘氨酰基氨基甲?；汆堰?g6a)、n6-蘇氨?；被柞；汆堰?t6a)、2-甲基硫代-n6-蘇氨酰基氨基甲?；汆堰?ms2t6a)、n6-甲基-n6-蘇氨?；被柞；汆堰?m6t6a)、n6-羥基正纈氨?；被柞；汆堰?hn6a)、2-甲基硫代-n6-羥基正纈氨酰基氨基甲?；汆堰?ms2hn6a)、n6,n6-二甲基腺嘌呤(m62a)和n6-乙?；汆堰?ac6a)。
77.根據(jù)權利要求74至76中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的糖。
78.根據(jù)權利要求77所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的糖選自由以下組成的組：2'-硫代核糖、2',3'-二脫氧核糖、2'-氨基-2'-脫氧核糖、2'脫氧核糖、2'-疊氮基-2'-脫氧核糖、2'-氟-2'-脫氧核糖、2'-o-甲基核糖、2'-o-甲基脫氧核糖、3'-氨基-2',3'-二脫氧核糖、3'-疊氮基-2',3'-二脫氧核糖、3'-脫氧核糖、3'-o-(2-硝基芐基)-2'-脫氧核糖、3'-o-甲基核糖、5'-氨基核糖、5'-硫代核糖、5-硝基-1-吲哚基-2'-脫氧核糖、5'-生物素-核糖、2'-o,4'-c-亞甲基連接的核糖、2'-o,4'-c-氨基連接的核糖和2'-o,4'-c-硫代連接的核糖。
79.根據(jù)權利要求74至78中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸包括經(jīng)修飾的磷酸酯。
80.根據(jù)權利要求79所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的磷酸酯選自由以下組成的組：硫代磷酸酯(phosphorothioate，ps)、硫代磷酸酯(thiophosphate)、5'-o-甲基膦酸酯、3'-o-甲基膦酸酯、5'-羥基膦酸酯、羥基膦酸酯、硒代磷酸酯(phosphoroselenoate)、硒代磷酸酯(selenophosphate)、氨基磷酸酯、碳膦酸酯、甲基膦酸酯、苯基膦酸酯、乙基膦酸酯、h-膦酸酯、胍環(huán)、三唑環(huán)、硼磷酸酯(bp)、甲基膦酸酯和胍基丙基氨基磷酸酯。
81.根據(jù)權利要求79或80所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括1至3、3至5、5至10、10至15、15至30、30至50、50至100或100至200個硫代磷酸酯。
82.根據(jù)權利要求81所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括5至30個硫代磷酸酯。
83.根據(jù)權利要求74至82中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括3至5、5至10、10至15、15至30、30至50、50至100或100至200個脫氧核糖。
84.根據(jù)權利要求83所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括5至30個脫氧核糖。
85.根據(jù)權利要求74至84中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述mrna包括3'末端核苷酸，其中所述3'末端核苷酸是二脫氧腺苷、二脫氧胞苷、二脫氧鳥苷、二脫氧胸苷、二脫氧尿苷或反向脫氧胸苷。
86.根據(jù)權利要求50至85中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括25至500個核苷酸。
87.根據(jù)權利要求86所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括50至100、100至150、150至200、200至300、300至400或400至500個核苷酸。
88.根據(jù)權利要求50至87中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括1至3、3至5、5至7或7至10個5'帽。
89.根據(jù)權利要求50至88中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括一個或多個包括5'-5'三磷酸酯鍵的7-甲基鳥苷酸帽。
90.根據(jù)權利要求50至89中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括一個或多個包括5'-5'三磷酸酯鍵的2,2,7-三甲基鳥苷帽。
91.根據(jù)權利要求50至90中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括一個或多個經(jīng)修飾的5'帽。
92.根據(jù)權利要求91所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的5'帽是經(jīng)鎖定核酸(lna)修飾的帽、包括由5'-硫代磷酸酯修飾的5'-5'三磷酸酯鍵的5'帽或包括5'-5'四磷酸酯鍵的5'帽。
93.根據(jù)權利要求91或92所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述5'帽區(qū)包括一個或多個包括一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸的5'帽。
94.根據(jù)權利要求93所述的經(jīng)修飾的mrna，其中一個或多個經(jīng)修飾的核苷酸是2'-o-甲基化核苷酸。
95.根據(jù)權利要求50至94中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一5'帽包括10至50個核糖核苷酸、1至10個包括連接點的經(jīng)修飾的尿苷脫氧核糖核苷酸和5'帽；并且所述第二5'帽包括10至50個核糖核苷酸和5'帽。
96.根據(jù)權利要求95所述的經(jīng)修飾的mrna，其中：
97.根據(jù)權利要求95或96所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述經(jīng)修飾的尿苷脫氧核苷酸是5-辛二炔基脫氧尿苷。
98.根據(jù)權利要求50至94中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一5'帽包括5至10個核糖核苷酸和5'疊氮化物部分；并且所述第二5'帽包括10至50個核糖核苷酸、3'疊氮化物部分和5'帽。
99.根據(jù)權利要求98所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述第一5'帽包括如以下所示的核苷酸序列：
100.一種產(chǎn)生根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna的方法，所述方法包括在存在rna連接酶的情況下，將包括編碼蛋白質(zhì)的開放閱讀框(orf)的第一rna與包括兩個或更多個poly-a尾的加尾核酸和/或包括兩個或更多個5'帽的加帽核酸連接，由此所述rna連接酶在所述第一rna的3'核苷酸與所述加尾核酸的5'核苷酸之間形成共價鍵，和/或在所述第一rna的5'核苷酸與所述加帽核酸的3'核苷酸之間形成共價鍵，以產(chǎn)生所述經(jīng)修飾的mrna。
101.根據(jù)權利要求100所述的方法，其中所述經(jīng)修飾的mrna包括5'非翻譯區(qū)(5'utr)和3'非翻譯區(qū)(3'utr)，其中所述orf位于所述5'utr與所述3'utr之間，其中所述3'utr位于所述orf與所連接的加尾核酸之間，并且其中所述5'utr位于所述orf與所連接的加帽核酸之間。
102.根據(jù)權利要求100或101所述的方法，其中所述加尾核酸包括第一poly-a尾和一個或多個第二poly-a尾，其中所述第一poly-a尾與所述3'utr共價連接。
103.一種經(jīng)修飾的mrna，其通過根據(jù)權利要求98至100中任一項所述的方法產(chǎn)生。
104.一種遞送劑，其包括根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna，其中所述遞送劑包括脂質(zhì)、肽、蛋白質(zhì)、抗體、碳水化合物、納米顆粒或微粒。
105.根據(jù)權利要求104所述的遞送劑，其中所述納米顆?；蛩鑫⒘Ｊ侵|(zhì)納米顆?；蛑|(zhì)微粒、聚合物納米顆?；蚓酆衔镂⒘！⒌鞍踪|(zhì)納米顆?；虻鞍踪|(zhì)微?；蚬腆w納米顆?；蚬腆w微粒。
106.一種細胞，其包括根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna。
107.根據(jù)權利要求106所述的細胞，其中所述細胞是哺乳動物細胞。
108.一種組合物，其包括根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑或根據(jù)權利要求106或107所述的細胞。
109.根據(jù)權利要求108所述的組合物，其中所述組合物進一步包括另外的藥劑。
110.根據(jù)權利要求109所述的組合物，其中所述另外的藥劑是在施用于受試者時具有治療效應的藥劑。
111.根據(jù)權利要求109或110所述的組合物，其中所述另外的藥劑是核苷酸、核酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、小分子、適體、脂質(zhì)或碳水化合物。
112.根據(jù)權利要求111所述的組合物，其中所述另外的藥劑是shrna、sirna或aso。
113.根據(jù)權利要求109至111中任一項所述的組合物，其中所述另外的藥劑是抗原或佐劑。
114.根據(jù)權利要求108至113中任一項所述的組合物，其中所述組合物是藥物組合物，其中所述藥物組合物進一步包括藥學上可接受的賦形劑。
115.一種方法，其包括將根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna或根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑引入到細胞中。
116.一種方法，其包括將根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求106或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物引入到受試者體內(nèi)。
117.一種預防有需要的受試者的疾病的方法，所述方法包括將有效量的根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求105或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物引入到所述受試者體內(nèi)，其中所述經(jīng)修飾的mrna的所述開放閱讀框編碼蛋白質(zhì)。
118.一種治療有需要的受試者的疾病的方法，所述方法包括將有效量的根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求106或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物引入到所述受試者體內(nèi)，其中所述經(jīng)修飾的mrna的所述開放閱讀框編碼蛋白質(zhì)。
119.根據(jù)權利要求117或權利要求118所述的方法，其中所述蛋白質(zhì)是來自引起所述疾病的細胞或病毒的蛋白質(zhì)抗原或其片段。
120.根據(jù)權利要求117或權利要求118所述的方法，其中所述蛋白質(zhì)是在所述受試者體內(nèi)以比參考值的水平更低的水平表達的蛋白質(zhì)。
121.一種替換受試者體內(nèi)的酶的方法，所述方法包括將根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求106或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物引入到所述受試者體內(nèi)，其中所述經(jīng)修飾的mrna的所述開放閱讀框編碼酶。
122.根據(jù)權利要求116至117中任一項所述的方法，其中所述受試者是人。
123.根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求106或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物，其用于預防有需要的受試者的疾病。
124.根據(jù)權利要求1至99中任一項所述的經(jīng)修飾的mrna、根據(jù)權利要求104或105所述的遞送劑、根據(jù)權利要求106或107所述的細胞或根據(jù)權利要求108至114中任一項所述的組合物，其用于治療有需要的受試者的疾病。
125.一種試劑盒，其包括權利要求100至102中任一項的所述第一rna、所述加尾核酸和/或所述加帽核酸。
126.根據(jù)權利要求125所述的試劑盒，其進一步包括rna連接酶。
127.一種試劑盒，其包括根據(jù)權利要求114所述的藥物組合物、用于將所述藥物組合物施用于受試者的裝置以及用于將所述藥物組合物施用于受試者的說明書。