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      一種具有胞嘧啶脫氨功能的融合蛋白及其應用

      文檔序號:39345811發(fā)布日期:2024-09-10 12:09閱讀:來源:國知局

      技術特征:

      1.一種融合蛋白,其特征在于,其含有胞嘧啶脫氨功能域,所述胞嘧啶脫氨功能域包括sdd和ddda的e1347a突變體,所述sdd和所述ddda的e1347a突變體之間通過接頭進行連接,所述接頭為如seq?id?no.7所示的氨基酸序列。

      2.如權利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述sdd為sdd7、sdd3、或sdd6中的任一種;

      3.如權利要求1或2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白還包括一個或多個定位序列;

      4.如權利要求1-3中任一項所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白還包括尿嘧啶dna糖基化酶抑制劑,或所述融合蛋白與尿嘧啶dna糖基化酶抑制劑共表達;

      5.一組融合蛋白,其包括左融合蛋白和右融合蛋白,其特征在于,所述左融合蛋白由定位序列、tale-l、e1347a突變體和ugi所組成,所述右融合蛋白由定位序列、tale-r和sdd所組成。

      6.如權利要求5所述的融合蛋白,其特征在于,所述sdd為sdd7、sdd3、或sdd6中的任一種;

      7.一種表達構建體,其特征在于,所述表達構建體含有編碼如權利要求1-6中任一項所述的融合蛋白的核苷酸序列。

      8.一種堿基編輯系統(tǒng),其特征在于,所述堿基編輯系統(tǒng)含有如權利要求1-6中任一項所述的融合蛋白,和/或如權利要求7所述的表達構建體。

      9.一種堿基編輯方法,其特征在于,采用如權利要求8所述的堿基編輯系統(tǒng)與人類或動物的雙鏈dna反應。

      10.如權利要求1-6中任一項所述的融合蛋白或如權利要求7所述的表達構建體或如權利要求8所述的堿基編輯系統(tǒng)在人類或動物基因編輯領域的應用。


      技術總結
      本發(fā)明提供了一種具有胞嘧啶脫氨功能的應用于人類或動物基因編輯的融合蛋白、表達構建體、堿基編輯系統(tǒng)及其應用。具體的,本發(fā)明提供了一種包含DddA<subgt;E1347A</subgt;與Sdd的融合蛋白,該融合蛋白包括單融合蛋白模式和雙融合蛋白模式。兩種模式下該融合蛋白均可實現(xiàn)對雙鏈DNA的非5'?TC序列基序依賴性的胞嘧啶脫氨功能。在此基礎上構建的胞嘧啶堿基編輯系統(tǒng),在保持高堿基編輯效率的基礎上極大地克服現(xiàn)有技術中DdCBE對底物DNA?5'?TC序列基序依賴性,從而擴大C到T堿基編輯的適用范圍。

      技術研發(fā)人員:方麗珊,李日清,李奕萱,陳少靜,龔慧,胡家豪,全娜麗
      受保護的技術使用者:中山大學附屬第八醫(yī)院(深圳福田)
      技術研發(fā)日:
      技術公布日:2024/9/9
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