技術(shù)特征：

1.一種用于檢測(cè)肺結(jié)節(jié)良惡性的引物探針組合，其特征在于，包括檢測(cè)基因突變位點(diǎn)和甲基化位點(diǎn)的引物對(duì)和探針；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，檢測(cè)所述egfr?l858r位點(diǎn)、所述egfr?19del位點(diǎn)、所述hoxa7基因甲基化位點(diǎn)、所述ccna1基因甲基化位點(diǎn)和所述znf808基因甲基化位點(diǎn)的探針，其5'端均標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端均標(biāo)記淬滅基團(tuán)。

3.根據(jù)權(quán)利要求3所述的引物探針組合，其特征在于，所述熒光基團(tuán)為fam、vic、hex、rox和cy5中的一種；所述淬滅集團(tuán)為mgb、super?quencher?1、bhq1、bhq2和bhq3中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，檢測(cè)所述egfr?l858r位點(diǎn)的探針的第12位-第15位堿基為隨機(jī)錯(cuò)配序列；檢測(cè)所述egfr?19del位點(diǎn)的探針的第11位-第14位堿基為隨機(jī)錯(cuò)配序列。

5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合在制備鑒別肺結(jié)節(jié)良惡性的試劑盒中的應(yīng)用。

6.一種用于鑒別肺結(jié)節(jié)良惡性的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合。

7.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合在制備肺癌早期篩選的試劑盒中的應(yīng)用。

8.一種用于肺癌早期篩選的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合。

9.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合在構(gòu)建肺癌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型中的應(yīng)用。

10.一種肺癌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型，其特征在于，利用權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物探針組合對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行熒光擴(kuò)增檢測(cè)，得到egfr?l858r基因突變的熔曲rm、egfr?19del基因突變的熔曲rm、hoxa7基因甲基化位點(diǎn)的ct值、ccna1基因甲基化位點(diǎn)的ct值和znf808甲基化位點(diǎn)的ct值；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及基因檢測(cè)領(lǐng)域，特別是涉及一種用于檢測(cè)肺結(jié)節(jié)良惡性的引物探針組合、試劑盒及其應(yīng)用。該引物探針組合包括檢測(cè)基因突變位點(diǎn)和甲基化位點(diǎn)的引物對(duì)和探針，可實(shí)現(xiàn)一次檢測(cè)同時(shí)覆蓋EGFR?L858R突變位點(diǎn)、EGFR?19Del突變位點(diǎn)以及HOXA7、CCNA1和ZNF808基因甲基化位點(diǎn)。由此可見(jiàn)，本發(fā)明是一種簡(jiǎn)便、快捷且精準(zhǔn)的輔助鑒別肺結(jié)節(jié)良惡性的DNA甲基化和基因突變的聯(lián)合檢測(cè)方案；同時(shí)該引物探針組合能夠?qū)崿F(xiàn)癌前快速篩查，還具有精準(zhǔn)用藥指導(dǎo)以及預(yù)后轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)等應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)研發(fā)人員：周文剛,何小用,李欣芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海君遠(yuǎn)生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9