技術(shù)特征：

1.一種基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法，其特征在于，所述吸收值為525-610nm處的吸收值；

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法，其特征在于，所述滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)包括如下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法，其特征在于，所述滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物與納米金自組裝結(jié)合的反應(yīng)體系包括：納米金、bspp、無(wú)機(jī)鹽和滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物；

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法，其特征在于，所述方法包括：

6.一種基于poly?a金膠比色生物傳感器，其特征在于，所述生物傳感器包括：含有polyt的鎖環(huán)探針、納米金和被檢測(cè)mirna；

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器，其特征在于，計(jì)算所述生物傳感器基于低鹽濃度的反應(yīng)體系的a525/a610比值a1，作mirna濃度對(duì)數(shù)-a1的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測(cè)樣本中所含mirna的濃度；

8.一種基于poly?a金膠比色檢測(cè)mirna的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包括權(quán)利要求6或7所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器。

9.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器檢測(cè)mirna的方法、權(quán)利要求6或7所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器或權(quán)利要求8所述的基于poly?a金膠比色檢測(cè)mirna的試劑盒中任意一種或至少兩種的組合在mirna檢測(cè)中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求6或7所述的基于poly?a金膠比色生物傳感器和/或權(quán)利要求8所述的基于poly?a金膠比色檢測(cè)mirna的試劑盒在制備檢測(cè)mirna的品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種基于poly?A金膠比色生物傳感器及其檢測(cè)方法和應(yīng)用。本發(fā)明開(kāi)發(fā)了一種比色法，通過(guò)滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)輔助金納米顆粒實(shí)現(xiàn)了對(duì)miRNA的超靈敏和特異性檢測(cè)。在預(yù)成環(huán)序列中所設(shè)計(jì)的poly?T經(jīng)過(guò)目標(biāo)物觸發(fā)滾環(huán)擴(kuò)增后，產(chǎn)生的poly?A具有高吸附親和力直接組裝到金表面。滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物與金結(jié)合形成具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的聚合物，通過(guò)紫外?可見(jiàn)光譜法測(cè)量金的聚集。并且由于該生物傳感器在兩種鹽濃度下的聚集離散程度不同，實(shí)驗(yàn)中利用這兩種翻轉(zhuǎn)的現(xiàn)象實(shí)現(xiàn)了信號(hào)的增強(qiáng)，將不同鹽濃度下的紫外吸收值比值來(lái)確定被檢測(cè)RNA的量，且檢測(cè)過(guò)程中納米金無(wú)需格外修飾，這種方法大大提高了靈敏度，檢測(cè)限為0.42fM。

技術(shù)研發(fā)人員：李蘭英,劉剛,王樂(lè)樂(lè),聞艷麗,楊佳琪,陶晴
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海市計(jì)量測(cè)試技術(shù)研究院（中國(guó)上海測(cè)試中心、華東國(guó)家計(jì)量測(cè)試中心、上海市計(jì)量器具強(qiáng)制檢定中心）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10