技術(shù)特征：

1.一種利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌缺失pfk1和pfk2基因；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌還缺失cit2和icl1基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌還過(guò)表達(dá)ada基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌還缺失ald2、ald3、ald4、ald5和ald6基因。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌還缺失acs1、acs2和ach1基因。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌還缺失yat1、yat2、crc1和cat2基因。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌，其特征在于，所述工程菌的出發(fā)菌株包括釀酒酵母。

8.一種制備權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌的方法，其特征在于，所述方法包括：

9.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的利用葡萄糖和乙醇雙碳源穩(wěn)定生產(chǎn)3-羥基丙酸的酵母工程菌在生產(chǎn)3-羥基丙酸中的應(yīng)用。

10.一種生產(chǎn)3-羥基丙酸的方法，其特征在于，所述方法包括：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種提高酵母菌中乙醇到乙酰輔酶A轉(zhuǎn)化率的方法、工程菌及其在生產(chǎn)3?羥基丙酸中的應(yīng)用。所述工程菌缺失pfk1和pfk2基因；所述工程菌還過(guò)表達(dá)mutACC1、MCRC、MCRN、Zwf1、Gnd1、Tal1、Rki1、Rpe1、Tkl1以及融合的CaGAPDH和Pos5基因。本發(fā)明通過(guò)在釀酒酵母內(nèi)對(duì)乙醇到乙酰輔酶A的代謝途徑進(jìn)行系統(tǒng)梳理和改造，有效提高了乙醇到乙酰輔酶A的轉(zhuǎn)化率，并通過(guò)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)室進(jìn)化重塑細(xì)胞內(nèi)的還原力和能量平衡，實(shí)現(xiàn)了3?羥基丙酸在釀酒酵母中的高效穩(wěn)定合成。此外，本發(fā)明通過(guò)重塑酵母中樞代謝，為利用合成生物學(xué)手段高效轉(zhuǎn)化低碳化合物提供了新的思路。

技術(shù)研發(fā)人員：于濤,陳凱迪,田飛,薛技科
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳先進(jìn)技術(shù)研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10