1.絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有用于檢測(cè)絲狀網(wǎng)尾線蟲的引物對(duì)和探針，所述引物和taqman探針的核苷酸序列如下所示：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述taqman探針的5'端標(biāo)記fam熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記mgb-nfq淬滅基團(tuán)。
3.絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法，其特征在于：步驟s1中，所述絲狀網(wǎng)尾線蟲樣本取自全血、直腸拭子、血清、腦、心臟、肺臟、肝臟、膽囊、腎臟、腸、膀胱的其中一個(gè)或多個(gè)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法，其特征在于：步驟s2中，所述引物和taqman探針mix中的正向引物濃度為440nm、反向引物濃度為440nm、taqman探針濃度為120nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法，其特征在于：步驟s3中，所述探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量pcr的擴(kuò)增程序?yàn)椋?0℃2min，1個(gè)循環(huán)；95℃10min，1個(gè)循環(huán)；95℃15s，60℃1min，40個(gè)循環(huán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)方法，其特征在于，步驟s3中，所述定量檢測(cè)包括標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立，具體步驟如下：
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述定性結(jié)果判讀方式如下：在探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)質(zhì)量在控情況下，若被檢樣品ct值≤35并出現(xiàn)特異的s型熒光擴(kuò)增曲線，則判定為相應(yīng)被檢測(cè)樣本陽(yáng)性；若無(wú)ct值且無(wú)特異的熒光擴(kuò)增曲線，則判定為相應(yīng)被檢測(cè)樣本陰性；若35＜ct值＜40并出現(xiàn)特異的熒光擴(kuò)增曲線，則判定為不確定樣本，需重新提取核酸后進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢仍有s型熒光擴(kuò)增曲線且ct值＜40則判定相應(yīng)被檢測(cè)樣本為陽(yáng)性，否則判為陰性。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絲狀網(wǎng)尾線蟲的實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述定量結(jié)果判讀方式如下：將絲狀網(wǎng)尾線蟲的目的片段構(gòu)建到pmd18-t載體上，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到j(luò)m109大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中，擴(kuò)大培養(yǎng)后提取質(zhì)粒dna，經(jīng)酶切電泳測(cè)序鑒定正確后作為質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定質(zhì)粒dna濃度，通過(guò)拷貝數(shù)換算公式轉(zhuǎn)換成具體的質(zhì)?？截悢?shù)，進(jìn)行10倍系列稀釋，以各稀釋濃度的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品為模板進(jìn)行探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量pcr反應(yīng)，以模板濃度的lg值為x軸，以對(duì)應(yīng)的ct值為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將待測(cè)樣本的ct值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算絲狀網(wǎng)尾線蟲拷貝數(shù)進(jìn)行定量檢測(cè)。