1.同時檢測多種微生物的組合物,其特征在于,所述組合物包括12對引物對,所述12對引物對的核苷酸序列如seq?id?no.1-seq?id?no.24所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物,其特征在于,所述組合物還包括12個探針,所述12個探針的核苷酸序列如seq?id?no.25-seq?id?no.36所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物,其特征在于,所述探針的5’端標記熒光基團,3’端標記淬滅基團。
4.同時檢測多種微生物的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權(quán)利要求1-3中任一所述的組合物。
5.同時檢測多種微生物的dna芯片,其特征在于,所述dna芯片包括權(quán)利要求1-3中任一所述的組合物。
6.權(quán)利要求1-3中任一所述的組合物、權(quán)利要求4所述的試劑盒或權(quán)利要求5所述的dna芯片在檢測環(huán)境樣本中12種微生物中的應(yīng)用,所述12種微生物為鮑氏不動桿菌、嗜水氣單胞菌、空腸彎曲桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌、阪崎腸桿菌、糞腸球菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、堪薩斯分枝桿菌、邦戈沙門氏菌、痢疾志賀氏菌和/或創(chuàng)傷弧菌。
7.權(quán)利要求1-3中任一所述的組合物在制備用于檢測權(quán)利要求6中所述的12種微生物的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
8.一種同時檢測多種微生物的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述多重實時熒光定量pcr的反應(yīng)程序為:25℃溶解2min;50℃溶解15min;95℃預(yù)變性10min;40個循環(huán),每個循環(huán)包括95℃變性3s,60℃退火延伸1min。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述多重實時熒光定量pcr的反應(yīng)體系中,每個引物的濃度為900nm,探針的濃度為250nm。