国产精品1024永久观看,大尺度欧美暖暖视频在线观看,亚洲宅男精品一区在线观看,欧美日韩一区二区三区视频,2021中文字幕在线观看

  • <option id="fbvk0"></option>
    1. <rt id="fbvk0"><tr id="fbvk0"></tr></rt>
      <center id="fbvk0"><optgroup id="fbvk0"></optgroup></center>
      <center id="fbvk0"></center>

      <li id="fbvk0"><abbr id="fbvk0"><dl id="fbvk0"></dl></abbr></li>

      基于XRCC3與XPC基因分析卵巢癌早期篩查方法與流程

      文檔序號:40281798發(fā)布日期:2024-12-11 13:21閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,包括以下步驟:

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟三中,所述mrna的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)采用cbcscript逆轉(zhuǎn)錄酶,以保證逆轉(zhuǎn)錄效率和cdna的完整性,通過將從實驗組-臨床卵巢癌患者和對照組-其他良性疾病就診患者收集的mrna混合,并根據(jù)cbcscript逆轉(zhuǎn)錄酶的用戶手冊中提供的反應(yīng)條件設(shè)置,包括適宜的溫度和時間,在反應(yīng)完成后,利用瓊脂糖凝膠電泳法確認(rèn)cdna的質(zhì)量,通過比較cdna的條帶大小與標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記,以驗證完整性。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟四中,加入全基因組擴(kuò)增試劑的濃度范圍為1-5μl,并保持反應(yīng)體系的體積在20-50μl,在擴(kuò)增過程中采用熱循環(huán)程序,包括以下階段:

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟五中,片段化后的dna樣本需經(jīng)過酶解處理,其酶的選擇包括限制性內(nèi)切酶或dna片段化酶,生成的dna片段在200-500bp范圍內(nèi),在dna沉淀后,通過離心和洗滌去除未結(jié)合的試劑和酶,得到高純度的片段化dna樣本,并重懸于適當(dāng)?shù)碾s交緩沖液中。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟六中,片段化后的dna樣本經(jīng)過變性處理,使其轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂溞问?,此時,dna樣本中的序列與芯片上位點特異的50個堿基探針進(jìn)行退火結(jié)合,每個微珠bead上連接著不同的50個堿基序列。

      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟七中,將芯片放入xc4試劑中進(jìn)行包被,使芯片的表面包裹上一層粘性透明液體,在芯片外形成保護(hù)層。

      7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟八中,將經(jīng)過雜交和延伸反應(yīng)處理的芯片放入掃描儀中,通過激光激發(fā)芯片上單堿基延伸產(chǎn)物的熒光基團(tuán),掃描儀獲取由熒光基團(tuán)發(fā)出的熒光信號,并生成高分辨率的圖像數(shù)據(jù),所得的圖像數(shù)據(jù)直接導(dǎo)入luxscan3.0圖像分析軟件處理與分析,提取每個樣本的snp分型數(shù)據(jù)。

      8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于xrcc3與xpc基因分析卵巢癌早期篩查方法,其特征在于,所述步驟九中,根據(jù)目標(biāo)基因的序列信息設(shè)計特異性引物,引物的tm值相近,在在rt-pcr反應(yīng)中,設(shè)定初始變性溫度為95℃,退火溫度為60℃,延伸溫度為72℃,每個循環(huán)設(shè)定為30秒,pcr產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳分離,確認(rèn)擴(kuò)增的特異性和大小,通過比較擴(kuò)增產(chǎn)物的條帶強(qiáng)度及位置,確認(rèn)上調(diào)和下調(diào)基因的表達(dá)差異。


      技術(shù)總結(jié)
      本發(fā)明公開基于XRCC3與XPC基因分析卵巢癌早期篩查方法,在通過識別基因多態(tài)性為卵巢癌的早期診斷提供新的生物標(biāo)志物,該方法包括從臨床卵巢癌患者和對照組收集外周血樣本,提取全基因組DNA并進(jìn)行純化,隨后,利用22K?Human?Genome?Array芯片進(jìn)行基因雜交,分析XRCC3和XPC基因的特定多態(tài)性位點,經(jīng)過擴(kuò)增、片段化和雜交后,使用激光掃描儀獲取高分辨率的熒光圖像,并通過圖像分析軟件評估基因表達(dá)差異,最終,通過RT?PCR技術(shù)驗證顯著差異基因,通過XRCC3和XPC基因的特定多態(tài)性位點,有助于早期診斷卵巢癌。

      技術(shù)研發(fā)人員:白延霞,趙成,胡艷,霍丹,閆莉
      受保護(hù)的技術(shù)使用者:陜西省腫瘤醫(yī)院(陜西省腫瘤防治研究所)(陜西省第三人民醫(yī)院)
      技術(shù)研發(fā)日:
      技術(shù)公布日:2024/12/10
      當(dāng)前第2頁1 2 
      網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
      • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
      1