胰高血糖素類似物的制作方法【
技術(shù)領(lǐng)域：
】[0001]本發(fā)明涉及胰高血糖素類似物及其例如在治療肥胖和體重過重、糖尿病及其他代謝疾病中的醫(yī)療用途?！?br>背景技術(shù)：
】[0002]前胰高血糖素原（pre-proglucagon)是158個氨基酸的前體多肽，其在組織中被差異性加工而形成多種結(jié)構(gòu)上相關(guān)的胰高血糖素原衍生肽，包括胰高血糖素（Glu)、胰高血糖素樣肽-1(61^-1)、胰高血糖素樣肽-2(61^-2)和胃泌酸調(diào)節(jié)素（(《7111:〇1]1〇(1111;[11，0父皿)。這些分子參與很多種生理功能，包括葡萄糖內(nèi)穩(wěn)態(tài)、胰島素分泌、胃排空和腸生長，以及食物攝取調(diào)節(jié)。[0003]胰高血糖素是29個氨基酸的肽，其對應(yīng)于前胰高血糖素原的53至81位氨基酸。胃泌酸調(diào)節(jié)素（OXM)是37個氨基酸的肽，其包含胰高血糖素的全部29個氨基酸序列和八肽羧基端延伸（前胰高血糖素原的82至89位氨基酸，被稱為"間插肽I(interveningp印tide1)"或IP-1)。GLP-I的主要生物學(xué)活性片段作為30個氨基酸、對應(yīng)于前胰高血糖素原之98至127位氨基酸的C端酰胺化肽而產(chǎn)生。[0004]胰高血糖素幫助維持血液中的葡萄糖水平，這通過與肝細(xì)胞上的胰高血糖素受體結(jié)合并經(jīng)由糖原分解而使肝釋放以糖原形式儲存的葡萄糖來實(shí)現(xiàn)。隨著這些儲存的消耗，胰高血糖素刺激肝臟通過糖異生作用合成額外的葡萄糖。這些葡萄糖釋放到血流中，從而防止發(fā)生低血糖。[0005]GLP-I通過提高葡萄糖刺激的胰島素分泌來降低升高的血糖水平，并且主要通過降低食物攝取來促進(jìn)體重減輕。[0006]OXM響應(yīng)于食物攝入而釋放到血液中，并與膳食的卡路里含量成比例。已顯示OXM在人中抑制食欲并抑制食物攝?。–ohen等，JournalofEndocrinologyandMetabolism，88,4696-4701，2003;W02003/022304)。除了與GLP-I類似的那些食欲抑制作用以外，OXM一定還通過其他機(jī)制影響體重，因?yàn)橛梦该谒嵴{(diào)節(jié)素處理的大鼠與對飼（pair-fed)大鼠相比顯示更少的體重增長（Bloom，Endocrinology2004,145,2687)。用OXM處理肥胖嚙齒類動物還改善了它們的葡萄糖耐量（Parlevliet等，AmJPhysiolEndocrinolMetab，294,E142-7,2008)并抑制了體重增長（W02003/022304)。[0007]OXM活化胰高血糖素受體和GLP-I受體二者，其對胰高血糖素受體的效力是GLP-I受體的2倍，但是比天然胰高血糖素和GLP-I對于其各自受體的效力低。人胰高血糖素也能夠活化這兩種受體，但相對于GLP-I受體而言對胰高血糖素受體有強(qiáng)偏好性。另一方面，GLP-I不能活化胰高血糖素受體。胃泌酸調(diào)節(jié)素的作用機(jī)制還不是很清楚。尤其是，不了解該激素的一些肝外作用是通過GLP-I受體和胰高血糖素受體介導(dǎo)，還是通過一種或更多種尚未鑒定出的受體介導(dǎo)。[0008]已顯示另一些肽結(jié)合并活化胰高血糖素受體和GLP-I受體二者（Hjort等，JournalofBiologicalChemistry，269,30121-30124,1994)，而且抑制體重增長并降低食物攝取（參見，例如WO2006/134340、TO2007/100535、TO2008/10101、TO2008/152403、WO2009/155257,WO2009/155258,W02010/070252,W02010/070253,W02010/070255,W02010/070251、TO2011/006497、TO2011/160630、W02011/160633)。[0009]肥胖是日益增多的全球性健康問題，其與多種疾病有關(guān)，特別是心血管疾病(cardiovasculardisease，CVD)、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暫停、某些類型的癌癥和骨關(guān)節(jié)炎。因此，已發(fā)現(xiàn)肥胖降低預(yù)期壽命。根據(jù)世界衛(wèi)生組織所作的2005預(yù)測，全世界有4億成人（年齡>15)被劃歸為肥胖。在美國，目前認(rèn)為肥胖是僅次于吸煙的可預(yù)防性死亡(preventabledeath)之第二大原因。[0010]肥胖的增多驅(qū)使糖尿病的增多，約90%患2型糖尿病的人可劃歸為肥胖。全世界有2.46億人患有糖尿病，預(yù)計(jì)到2025年將會有3.8億人患糖尿病。許多人還有另外的心血管風(fēng)險(xiǎn)因素，包括高/異常LDL和甘油三酸酯以及低HDL。[0011]發(fā)明概述[0012]在第一方面，本發(fā)明提供了具有下式的化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物：[0013]R1-X-Z-R2[0014]其中[0015]R1是H、Cη烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙?；?；[0016]R2是OH或NH2;[0017]X是具有下式的肽：[0018]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLS(SEQIDNO：1)[0019]HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA(SEQIDNO：2)[0020]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKAAKDFIEffLLSA(SEQIDNO：4)[0021]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLESA(SEQIDNO：5)[0022]HSQGTFTSDYSRYLDSKAAEDFVEffLLRA(SEQIDNO：6)[0023]HSQGTFTSDYSKYLDSKAAEDFVEffLLRA(SEQIDNO：7)[0024]HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLS(SEQIDNO：8)[0025]HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLR(SEQIDNO：9)[0026]HSQGTFTSDYSKYLDEKAAHEFVEffLESA(SEQIDNO：10)[0027]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKRAKDFIEffLLS(SEQIDNO：11)[0028]HSQGTFTSDYSRYLDSKAAHDFVEffLLSA(SEQIDNO：12)[0029]H-Aib-HGTFTSDYSKYLESKAAEEFIEffLESA(SEQIDNO：17)[0030]HSHGTFTSDYSKYLEEKAAHEFIEffLESA(SEQIDNO：18)[0031]H-Aib-HGTFTSDYSKYLEEKAAHEFVEffLESA(SEQIDNO：19)；[0032]并且Z不存在或者是具有1-20個氨基酸單元的序列，所述氨基酸單元獨(dú)立地選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn0[0033]在第二方面，本發(fā)明提供了具有下式的化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物：[0034]R1-X-OH[0035]其中[0036]R1是Η、(^_4烷基、乙酰基、甲?；?、苯甲酰基或三氟乙酰基；[0037]并且X是SEQIDNO:3、13或14的肽：[0038]HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA(SEQIDNO：3)[0039]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA(SEQIDNO：13)[0040]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKRAKDFIEffLLSA(SEQIDNO：14)[0041]在第三方面，本發(fā)明提供了具有下式的化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物：[0042]R1-X-Z-R2[0043]其中[0044]R1是H、Cp4烷基、乙?；⒓柞；?、苯甲?；蛉阴；?；[0045]R2是OH或NH2;[0046]X是SEQIDNO:15的肽：[0047]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKAAKDFIEffLESA(SEQIDN0：15),[0048]或者如果與SEQIDNO:15不同，則在至多3個如下位置處與SEQIDNO:15不同：[0049]第2位殘基選自Ser和D-Ser[0050]第3位殘基選自His和Hse[0051]第12位殘基是Arg[0052]第15位殘基是Glu[0053]第16位殘基是Ser[0054]第18位殘基是Arg[0055]第20位殘基選自His和Glu[0056]第21位殘基是Glu[0057]第23位殘基是Val[0058]第28位殘基選自Arg和Glu[0059]第29位殘基不存在；[0060]并且Z不存在或者是具有1-20個氨基酸單元的序列，所述氨基酸單元獨(dú)立地選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn0[0061]在某些實(shí)施方案中，第20位殘基不可變并且是His。[0062]所述化合物可具有下式：[0063]R1-X-Z-R2[0064]其中[0065]R1是H、Cp4烷基、乙?；?、甲酰基、苯甲?；蛉阴；?；[0066]R2是OH或NH2;[0067]X是SEQIDNO:15的肽：[0068]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKAAKDFIEffLESA(SEQIDN0：15),[0069]或者如果與SEQIDNO:15不同，則其在以下一個或兩個位置處與SEQIDNO:15不同：[0070]第21位殘基是Glu[0071]第23位殘基是Val[0072]并且Z不存在或者是具有1-20個氨基酸單元的序列，所述氨基酸單元獨(dú)立地選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn;[0073]或者其可藥用鹽或溶劑合物。[0074]在第四方面，本發(fā)明提供了具有下式的化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物：[0075]R1-X-Z-R2[0076]其中[0077]R1是H、Cη烷基、乙酰基、甲?；⒈郊柞；蛉阴；?；[0078]R2是OH或NH2;[0079]X是SEQIDNO:16的肽：[0080]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAEDFVEffLESA(SEQiDNO：16)[0081]或者如果與SEQIDNO:16不同，則其在至多3個如下位置處與SEQIDNO:16不同：[0082]第2位殘基選自Ser和D-Ser[0083]第3位殘基選自His和Hse[0084]第12位殘基是Arg[0085]第15位殘基是Glu[0086]第16位殘基是Glu[0087]第18位殘基是Arg[0088]第20位殘基選自Lys和His[0089]第21位殘基是Glu[0090]第23位殘基是Ile[0091]第28位殘基選自Arg和Glu[0092]第29位殘基不存在[0093]并且Z不存在或者是具有1-20個氨基酸單元的序列，所述氨基酸單元獨(dú)立地選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn0[0094]所述化合物可具有下式：[0095]R1-X-Z-R2[0096]其中[0097]R1是Η、(^_4烷基、乙?；⒓柞；?、苯甲酰基或三氟乙?；籟0098]R2是OH或NH2;[0099]X是SEQIDNO:16的肽：[0100]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAEDFVEffLESA(SEQiDNO：16)[0101]或者如果與SEQIDNO:16不同，則其在以下一個或兩個位置處與SEQIDNO:16不同：[0102]第21位殘基是Glu[0103]第23位殘基是Ile[0104]并且Z不存在或者是具有1-20個氨基酸單元的序列，所述氨基酸單元獨(dú)立地選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Cys、Glu、Lys、Arg、Dbu、Dpr和Orn;[0105]或者其可藥用鹽或溶劑合物。[0106]本發(fā)明第三方面或第四方面的化合物可包含具有以下序列的肽X:[0107]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKAAKDFIEffLESA(SEQIDNO：15)[0108]H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAEDFVEffLESA(SEQIDNO：16)[0109]H-Aib-QGTFTSDYSKYLEEKAAKDFIEffLESA(SEQIDNO：20)[0110]H-Aib-QGTFTSDYSKYLESKAAEDFIEffLESA(SEQIDNO：21)[0111]HSQGTFTSDYSKYLEEKAAKDFIEffLESA(SEQiDNO：22)[0112]H-Aib-QGTFTSDYSKYLESKAAHD當(dāng)前第1頁1 2 3 4 5