18H19ClN6O2 (%), calculated: C, 55.89; H, 4.95; N, 21.73; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71 〇
[0025] 實(shí)施例10 8-氯-Ν'-(4-(二甲氨基）-2-羥基苯亞甲基）_[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼 黃白色固體，產(chǎn)率92%，m.p.28〇_28l aC^HNMR (DMS0-d6，5〇ΟΜΗζ), δ: 2.99(s, 6H, 2CH3), 6. 78(d, ^8.8Hz, 2H, Ar), 7. 24(t, ^7. 2Hz, 1H, Py), 7. 54(d, ^8. 7Hz, 1H, Ar), 7.81(d, ^7. 2Hz, 1H, Py), 8.49 (s, 1H, CH), 9. 21(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 12. 50(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 343(M+1)+. Elemental anal. For C16H15ClN6O (%), calculated: C, 56.06; H, 4.41; N, 24.52; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71〇
[0026] 實(shí)施例11 8-氯-Ν'-(呋喃-2-基亞甲基）-[l，2,4]三唑[4,3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白色固 體，產(chǎn)率 9〇%，m.p. 27S-279UQ1H NMR (DMS0-d6，5〇ΟΜΗζ), δ: 6. 93(d, 2H, Furan), 7. 07 (t, ^6. 9Hz, 1H, Py), 7. 54-7. 57 (m, 2H, Py and Furan), 8. 32 (s, 1H, CH), 9. 33(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 11.20(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 290(M+1)+. Elemental anal. For C12H8ClN5O2 (%), calculated: C, 49.75; H, 2.78; N, 24.18; found: C, 51. 65; H, 3. 76; N, 22. 71〇
[0027] 實(shí)施例12 8-氯-Ν'-(3, 4, 5-三甲氧基苯亞甲基）-[1,2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白 色固體，產(chǎn)率 94%, In-P-MOOaC^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 3.96(s, 9H, 30CH3)， 7. 04(s, 2H, Ar), 7. 28 (t, ^7. 0Hz, 1H, Py), 7. 84(d, ^6. 9Hz, 1H, Py), 8. 55 (s, 1H, CH), 9. 21(d, ^7. 2Hz, 1H, Py), 12.83(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 390 (M+l) +. Elemental anal. For C17H16ClN5O4 (%), calculated: C, 52.38; H, 4.14; N, 17.97; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71〇
[0028] 實(shí)施例13 8-氯-Ν'-(4-硝基苯亞甲基）-[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白色固體， 產(chǎn)率 96%，In-P-MOOaC^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 7. 27(t,歲 7.0Hz，1H，Py), 7. 72(t, 1H, Py), 7. 84-7. 87 (m, 2H, Ar), 8. 10-8. 17 (m, 2H, Ar), 9. 08 (s, 1H, CH), 9. 21(d, ^6.8Hz, 1H, Py), 12. 21(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 345 (M+l) +. Elemental anal. For C14H9ClN6O3 (%), calculated: C, 48.78; H, 2.63; N, 24.38; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71〇
[0029] 實(shí)施例14 8-氯-Ν'-(2, 4-二氯苯亞甲基）-[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白色固體， 產(chǎn)率 98%，In-P-MOOaC^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 7. 27(t,歲 7.0Hz，1H，Py), 7. 53(d, ^8. 3Hz, 1H, Ar), 7. 74(s, 1H, Ar), 7. 85 (d, ^7. 2Hz, 1H, Py), 8. 03 (d, ^8. 5Hz, 1H, Ar), 9.05 (s, 1H, CH), 9.21(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 12. 13(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369 (M+l) +. Elemental anal. For C17H16ClN5O4 (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71〇
[0030] 實(shí)施例15 8-氯-Ν'-(2-甲基苯亞甲基）-[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白色固體，產(chǎn)率 97%，Ih-P-MOO = C^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 2. 37(s, 3H，CH3), 7. 24-7. 28(m， 1H, Ar), 7. 37(t, ^7. 5Hz, 1H, Py), 7. 53 (d, ^7. 5Hz, 1H, Ar), 7. 57 (s, 1H, Ar), 7. 73(d, ^7. 2Hz, 1H, Py), 7.84(d, ^7. 2Hz, 1H, Py), 8. 51(s, 1H, CH), 9. 21(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 12.91(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369 (M+l) +. Elemental anal. For C17H16ClN5O4 (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; Η, 3.76; Ν, 22.71〇
[0031] 實(shí)施例16 8-氯-Ν'-(4-(三氟甲基）苯亞甲基）-[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼黃白色 固體，產(chǎn)率 90%, In-P-MOOaC^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 7. 28(t,歲 7.2Hz, 1H， Py), 7. 82-7. 85 (m, 3H, Ar and Py), 7. 97 (d, ^8. 0Hz, 2H, Ar) 8. 72 (s, 1H, CH), 9. 21(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 13.02(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369(M+1)+. Elemental anal. For C15H9ClF3N5O (%), calculated: C, 48.99; H, 2.47; N, 19.05; found: C, 51. 65; H, 3. 76; N, 22. 71〇
[0032] 實(shí)施例17 8-氯-Ν'-(4-甲基苯亞甲基）-[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶-3-碳酰肼，黃白色固體， 產(chǎn)率 95%，In-P-MOOaC^1HNMR (DMS0-d6，500 MHz), δ: 2. 36(s, 3H，CH3), 6.68(t， J=-I. 5Hz, 1H, Py), 7. 65 (d, J=-I. 5Hz, 2H, Ar), 7. 85 (d, J=-I. 4Hz, 2H, Ar), 8. 07 (d, ^4.4Hz, 1H, Py), 8. 51(s, 1H, CH), 9.21(d, ^6.9Hz, 1H, Py), 12. 78(s, 1H, NH). MS (ESI), m/z: 369 (M+l) +. Elemental anal. For C17H16ClN5O4 (%), calculated: C, 45.62; H, 2.19; N, 19.00; found: C, 51.65; H, 3.76; N, 22. 71〇
[0033] 實(shí)施例18殺菌活性測(cè)試 試驗(yàn)對(duì)象：番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病、黃瓜枯萎病、番茄灰霉病。
[0034] 試驗(yàn)方法：采用盆栽試驗(yàn)法。分別將黃瓜種子和番茄種子經(jīng)過(guò)50°C浸泡后，催芽 后播種于育苗缽中，待生長(zhǎng)至2片真葉供試驗(yàn)。
[0035] 藥劑準(zhǔn)備：供試藥，取藥配成100 ppm，取實(shí)施例1-17種化合物各5 mg，加丙 酮溶解后再加10 %吐溫80,最后加水充分溶解。因 IOOppm為100 mg/L所以加水量=5 mg*1000/100 mg=50 ml，因有機(jī)溶劑最終含量彡1%所以加丙酮的量=50 ml*l%=0. 5 ml(溶 解)，因吐溫最終含量為0. 1%所以50 ml水里應(yīng)有吐溫0. 05 ml，g卩：應(yīng)加10 %吐溫0. 05 ml 〇
[0036] 對(duì)照藥劑：3%中生菌素 WP - 800倍液0. 01 g藥+8 ml水；75%甲基托布津 WP - 1000倍液0· 01 g藥+15 ml水；50%嘧菌環(huán)胺水分散粒劑一1000倍液0· 01 g藥+15ml 水。
[0037] 施藥方法：番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和番茄灰霉病實(shí)驗(yàn)中，番茄苗長(zhǎng)出兩片復(fù)葉時(shí)，用噴 壺將供試藥劑與對(duì)照藥劑均勻噴施在供試植株上。黃瓜枯萎病實(shí)驗(yàn)中，將黃瓜種子浸泡于 各要處理2h后進(jìn)行接種處理。
[0038] 接種方法： 番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病采用菌懸液噴霧法接種：將培養(yǎng)好的番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌兌蒸餾水 稀釋成3X 107cfu/ml菌懸液，用噴壺噴霧接種。接種后保濕培養(yǎng)。
[0039] 番茄灰霉病采用打菌絲接種法接種：通過(guò)紗布過(guò)濾把液體培養(yǎng)基和菌塊分開(kāi)，用 粉碎儀把帶有少量液體的培養(yǎng)基的菌塊打碎，再用過(guò)濾好的液體培養(yǎng)基與打碎的菌塊混合 配成一定濃度的溶液，并用分光光度計(jì)測(cè)定溶液透光率（λ =630 nm，0D=9. 8)。
[0040] 黃瓜枯萎病采用培根浸種法接種：將在ro培養(yǎng)基中培養(yǎng)好的黃瓜枯萎病菌用紗 布過(guò)濾菌絲，調(diào)節(jié)孢子濃度到1X106 cfu/ml浸泡種子。
[0041] 待清水充分發(fā)病后進(jìn)行病情調(diào)查，并計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。
[0042] 殺菌活性測(cè)試試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0043] 表1 IOOmM下各化合物的殺菌活性（％防效）

從上表1殺菌活性結(jié)果表明，與對(duì)照藥劑中生菌素、甲基托布津和嘧菌環(huán)胺相比，本發(fā) 明的制得的含[1，2, 4]三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙類(lèi)化合物（I)對(duì)番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病、黃瓜 枯萎病及番茄灰霉病都有優(yōu)異的殺菌效果，其使用范圍更廣，藥效更明顯，適于推廣應(yīng)用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物，其特征在于其結(jié)構(gòu)式如（I)所示：(I) 其中：R為亞乙基，苯亞乙基，2-羥基-4-甲氧基苯亞甲基，2-羥基苯亞甲基，3-硝基苯 亞甲基，5-氯-2-羥基苯亞甲基，5-溴-2-羥基苯亞甲基，1- (4-氟苯基）亞乙基，4-(二乙 氨基）-2-羥基苯亞甲基，4-(二甲氨基）-2-羥基苯亞甲基，呋喃-2-基亞甲基，3, 4, 5-三 甲氧基苯亞甲基，4-硝基苯亞甲基，2, 4-二氯苯亞甲基，2-甲基苯亞甲基或4-(三氟甲基） 苯亞甲基；R'為甲基或H。2. -種如權(quán)利要求1所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其特 征在于包括如下步驟： 1) 在乙醇為溶劑條件下，2, 3-二氯吡啶與水合肼回流制得如式（II)所示的化合物 (II)； 2) 將步驟1)得到的化合物（II)和草酸二乙酯通過(guò)親核取代反應(yīng)合成得如式(III)所示 的化合物(ΠΙ)粗產(chǎn)物； 3) 將步驟2)得到的化合物(III)粗產(chǎn)物經(jīng)重結(jié)晶純化后，與水合肼反應(yīng)得到如式(IV) 所示的化合物(IV); 4) 以乙醇為溶劑，將步驟3)得到的化合物(IV)與酮類(lèi)或醛類(lèi)化合物反應(yīng)獲得式（I)所 示的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法； 制備過(guò)程如下所示：3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其特征 在于步驟3)中重結(jié)晶溶劑為石油醚、乙酸乙酯、正己烷或乙醇中的一種或多種。4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其 特征在于所述的2, 3-二氯吡啶，乙醇與水合肼的物質(zhì)的量之比為I :0. 8~1. 2 :3. 0~5. 0。5. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其 特征在于化合物（II)與草酸二乙酯物質(zhì)的量之比為1:1. 〇~1. 5。6. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其 特征在于化合物(III)與水合肼物質(zhì)的量之比為I: I. 5~2. 0。7. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法，其 特征在于所述的化合物(IV)與酮類(lèi)或醛類(lèi)化合物的物質(zhì)的量比為I :1. 3。8. -種如權(quán)利要求1所述的1，2, 4-三唑[4, 3-a]吡啶環(huán)的腙衍生物的制備方法在防 治番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病、黃瓜枯萎病、番茄灰霉病中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種含[1,2,4]三唑[4,3-a]吡啶環(huán)的腙類(lèi)化合物的制備方法。它在乙醇中，2,3-二氯吡啶與水合肼微波制得化合物（II）；化合物（II）和草酸二乙酯通過(guò)微波反應(yīng)合成化合物（III）；化合物（III）經(jīng)重結(jié)晶純化，與水合肼反應(yīng)微波制備得到化合物（IV）；化合物（IV）與酮或醛以乙醇為溶劑，微波反應(yīng)獲得含三唑吡啶環(huán)的腙類(lèi)化合物。本發(fā)明采用在微波條件下制備，其操作簡(jiǎn)單、對(duì)設(shè)備要求低，后處理方法，且產(chǎn)品收率高，純度高，與其他方法相比，收率提高15%以下，而且該化合物為具有殺菌活性，特別是針對(duì)番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病、黃瓜枯萎病、番茄灰霉病等的防治具有良好的效果，為新農(nóng)藥的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。
【IPC分類(lèi)】A01P1/00, C07D471/04, A01N43/90
【公開(kāi)號(hào)】CN104892602
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510332173
【發(fā)明人】劉幸海, 楊明艷, 翟志文, 趙文, 孫召慧, 翁建全, 譚成俠
【申請(qǐng)人】浙江工業(yè)大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2015年6月16日