些脫落的細胞也將會隨著培養(yǎng)基從第一溝道流出，從而確保第一 溝道不會被上述脫落的細胞填滿，進而確保細胞層中的表層細胞在單位時間內能夠從第一 溝道獲得較多的培養(yǎng)基，最終提高細胞的固定化培養(yǎng)的產量。
[0025] 作為上述技術方案的改進方案，至少有一條第一溝道的兩端與細胞層的相對的兩 側邊連通，即不論該第一溝道是否彎曲，其兩端均位于細胞層相對的兩側邊，從而使得第一 溝道的長度較長。由于第一溝道的長度越長，與之接近的表層細胞就越多，因此，通過上述 設置，使得細胞層中更多的表層細胞能夠直接從第一溝道中獲得培養(yǎng)基，從而進一步提高 細胞的固定化培養(yǎng)的產量。
[0026] 為了進一步使細胞層中較多的表層細胞能夠從第一溝道中獲得培養(yǎng)基，作為上述 技術方案及其改進方案的一種優(yōu)化方案，第一溝道的深度為d，細胞層的厚度為t，則d和t 滿足如下關系多d多0. 5t，上述內容已經提及，一般而言，細胞層中表層細胞和底層細胞 各占細胞層的一半，因此，上述設置使得在第一溝道附近，位于表層細胞中任意層面的細胞 均能夠從第一溝道直接獲得培養(yǎng)基，從而使得更多的表層細胞能夠直接從第一溝道中獲得 培養(yǎng)基，進而提高細胞的固定化培養(yǎng)的產量。此外，在不會影響表層細胞從第一溝道中獲得 培養(yǎng)基的前提下，也可使第一溝道的深度和細胞層的厚度相等，從而使得在第一溝道附近， 除表層細胞之外，底層細胞也能夠從第一溝道中獲得培養(yǎng)基，進而進一步提高細胞的固定 化培養(yǎng)的產量。
[0027] 不論上述何種第一溝道，均可通過如下兩種方法形成。
[0028] 如圖2所示，在第一種形成第一溝道的方法中，在步驟10( 8卩"將所述細胞接種在 所述支撐層上，形成附著在所述支撐層上的細胞層"的步驟）之后，進行如下步驟：
[0029] 步驟11、在細胞層中劃出多條第一溝道。具體地，根據所要形成的溝道的厚度以及 深度，選取適當的工具（例如寬度合適的鐵片或塑料片），以適當的力度在細胞層表面劃出 第一溝道。進一步地，對于劃出溝道的工具的材料，優(yōu)選對于當前培養(yǎng)的細胞不具有粘附性 的材料，例如某些塑料或金屬等。此外，在形成第一溝道后，可將因形成第一溝道而從細胞 層脫落的細胞再次接種在支撐層上，以減少形成第一溝道所造成的細胞固定化培養(yǎng)的產量 損失。需要說明的是，該步驟11可在步驟20( 即"向支撐層提供培養(yǎng)基，培養(yǎng)基浸潤支撐層 及細胞層"的步驟）之后進行，也可在步驟20之前進行，本領域技術人員可根據實際情況選 擇進行該步驟11的時機。
[0030] 如圖3所示，在第二種形成第一溝道的方法中，在步驟10( gp "將所述細胞接種在 所述支撐層上，形成附著在所述支撐層上的細胞層"的步驟）前，進行如下步驟：
[0031] 步驟12、在支撐層上設置多個可取下的條狀物；
[0032] 并且，在步驟10后，進行如下步驟：
[0033] 步驟13、取下條狀物以及接種在條狀物上的細胞，在細胞層中形成多條第一溝道。
[0034] 通過上述方法流程，在細胞層中形成與支撐層上放置的條狀物形狀相同的第一溝 道。具體地，例如，根據所要形成的第一溝道的形狀以及位置，在支撐層上放置多條棉線，然 后將待培養(yǎng)的細胞接種至該放置有多條棉線的支撐層上；在接種完畢后，將這些棉線連同 其上附著的細胞一同取下，即可在原棉線的位置形成第一溝道?？梢岳斫獾氖?，通過這種方 式形成的第一溝道，其深度通常與細胞層的厚度相等。此外，在將上述條狀物取下后，可將 附著在條狀物上的細胞沖洗下來并收集，并將這部分細胞再次接種在支撐層上，以減少因 形成第一溝道而造成的細胞的固定化培養(yǎng)的產量損失?？梢岳斫獾氖牵襟E13可在步驟 20(即"向支撐層提供培養(yǎng)基，培養(yǎng)基浸潤支撐層及細胞層"的步驟）之后進行，也可在步驟 20之前進行，本領域技術人員可根據實際情況選擇進行該步驟13的時機。
[0035] 如圖4所示，進一步地，隨著細胞的固定化培養(yǎng)的進行，細胞層的厚度逐漸變大， 細胞層中表層細胞逐漸增加，并且第一溝道逐漸被細胞層中脫落的細胞填滿并消失。因此， 在細胞的固定化培養(yǎng)初期所形成的第一溝道已經無法為表層細胞提供足夠的培養(yǎng)基，從而 在本發(fā)明實施例中，對于上述技術方案及其改進方案而言，在步驟20 (即"向支撐層提供培 養(yǎng)基，培養(yǎng)基浸潤支撐層及細胞層"的步驟）后，還包括：
[0036] 步驟30、當細胞層的厚度達到時、或各第一溝道被從細胞層脫落的細胞 填滿時，在細胞層中形成多條第二溝道，各第二溝道中儲存有培養(yǎng)基。
[0037] 在步驟30中，可根據細胞層的厚度來判斷形成第二溝道的時間。具體地，由于在 不同的細胞所形成細胞層中，細胞的密集程度不同，一般來說，對于同樣厚度的細胞層而 言，細胞層中的細胞越密集，其消耗培養(yǎng)基的速度就越快。因此，對于細胞比較密集的細胞 層，應當在細胞層厚度較小時在其上劃出第二溝道，使表層細胞能夠獲得充足的培養(yǎng)基；而 對于細胞比較稀疏的細胞層，則應當在細胞層厚度較大時在其上劃出第二溝道，以避免形 成第二溝道時造成細胞層中的細胞減少。由實驗可知，對于大多數細胞而言，當細胞層厚度 在范圍內時，可在細胞層中形成第二溝道。形成第二溝道的具體時機可由本領域 技術人員根據其培養(yǎng)的細胞的密集程度推斷得出。
[0038] 此外，在步驟30中，還可根據第一溝道是否被從細胞層脫落的細胞填滿，來判斷 形成第二溝道的時機。這是由于，對于某些細胞之間附著力較弱的細胞層，其中的細胞會 在固定化培養(yǎng)過程中不斷脫落，進而在細胞層厚度較小時將第一溝道填滿，此時第一溝道 已無法發(fā)揮儲存培養(yǎng)基并向表層細胞提供培養(yǎng)基的作用，因此需要在細胞層中形成第二溝 道，以持續(xù)地為細胞層中的表層細胞提供培養(yǎng)基，確保細胞的固定化培養(yǎng)的產量?？梢岳斫?的是，也可在各第一溝道完全被從細胞層脫落的細胞填滿前，形成第二溝道，防止第一溝道 在未被完全被部分填滿時已無法在單位時間內向表層細胞提供較多的培養(yǎng)基，確保細胞的 固定化培養(yǎng)的產量。
[0039] 進一步地，優(yōu)選第二溝道與第一溝道交叉設置，從而通過相互交叉的第二溝道和 第一溝道，將細胞層分劃為若干個細胞區(qū)域，每個細胞區(qū)域被第一溝道和/或第二溝道包 圍，這使得每個細胞區(qū)域內的細胞層中的表層細胞均能夠從四周任意方向獲得培養(yǎng)液，從 而使得表層細胞在單位時間內獲得的培養(yǎng)基進一步增加，最終提高細胞的固定化培養(yǎng)的產 量。
[0040] 此外，由于隨著細胞的固定化培養(yǎng)的進行，細胞層中可能產生細胞聚集區(qū)域，細胞 聚集區(qū)域內的細胞密集程度大于其他區(qū)域內的細胞密集程度，因此可根據這些細胞聚集區(qū) 域來設置第二溝道的形狀，以使細胞聚集區(qū)域內的第二溝道的條數較多或被更多的第二溝 道環(huán)繞，從而確保細胞聚集區(qū)域內的表層細胞在單位時間內獲得較多的培養(yǎng)基。具體地，第 二溝道的形狀，除長條形外，也可為由多個長條形的第二溝道構成的多邊形，還可為由長條 形的第二溝道首尾相接所構成的圓環(huán)形，其中，可將上述細胞聚集區(qū)域作為中心，設置多邊 形的第二溝道和圓環(huán)形的第二溝道，從而使得細胞聚集區(qū)域內的表層細胞獲得的培養(yǎng)基進 一步增加。
[0041] 如圖5所示，進一步地，由于在細胞的固定化培養(yǎng)時間較長的情況下，第一溝道和 第二溝道可能均被從細胞層脫落的細胞所填滿。因此，為了確保表層細胞能