br>[0036] 一種聚乙二醇重氮聚合物，其具有式（1)所示結構：
[0037]
[0038] 其中n為8-135的整數(shù)。
[0039] 其合成工藝路線如下所示： W40] 本發(fā)明所述的活化毛細管裸柱的方法包括如下步驟：
[0041] 先后分別用0.Imol?L1的氨氧化鋼溶液、蒸饋水、0.Imol?L1鹽酸溶液、蒸饋水 及甲醇沖洗毛細管裸柱，時間分別為30min、10min、30min、lOmin和lOmin，最后用成吹干毛 細管裸柱，即可獲得活化的毛細管裸柱。 陽042] 實施例1
[0043] 一種聚乙二醇重氮聚合物的制備方法，包括下述步驟：
[0044] S1、合成雙氯代聚乙二醇： W45] 將干燥后的聚乙二醇（PEG,分子量Mw為400)和N，N-二甲基甲酯胺值MF)于反應 蓋中，形成溶液A;將氯化亞諷置于恒壓滴液漏斗中，形成B液，在50°C條件下，將B液逐滴 滴入溶液A中，至混合均勻；其中聚乙二醇與N，N-二甲基甲酯胺和氯化亞諷的摩爾比分別 為1 : 2. 0和1 : 3. 0。將混合液于60°C回流條件下反應2化后，將產物用飽和食鹽水洗 涂，無水碳酸鐘調節(jié)抑值為7. 0,真空干燥去除水分，過濾除去氯化鋼，得產物雙氯代聚乙 二醇（C1-PEG-C1);
[0046]S2、合成端氨基苯基聚乙二醇：
[0047] 將對氨基苯酪，氨氧化鋼和相轉移催化劑四下基漠化錠（TBAB)加入反應瓶中；所 述的雙氯代聚乙二醇（C1-陽G-C1)與對氨基苯酪、氨氧化鋼和四下基漠化錠（TBAB)的摩爾 比分別為1 : 2.0、1 : 8.0和1 : 0.03。于室溫條件下攬拌lOmin后，加入干燥的雙氯代 聚乙二醇（C1-陽G-C1)，將混合物加熱到60°C，恒溫攬拌反應2地。待反應液冷卻后，加入 lOOmL的二氯甲燒溶解粗產物，經過5次離屯、去除固體不容物，將上層液常壓蒸饋去除二氯 甲燒，真空干燥后得到產物端氨基苯基聚乙二醇。
[0048] S3合成聚乙二醇重氮聚合物： W例將端氨基苯基聚乙二醇和鹽酸水溶液加入到反應器中，冰水浴冷卻至o°c后，滴加 濃度為0.Imol?L1的亞硝酸鋼溶液；所述的端氨基苯基聚乙二醇與鹽酸溶液和濃亞硝酸 鋼溶液的摩爾比分別為1 : 2.5和1 : 2.0。用淀粉-KI試紙檢測反應終點，再攬拌反應 0. 5h，即可生成聚乙二醇重氮聚合物。圖1所示為聚乙二醇和本發(fā)明的聚乙二醇重氮聚合 物的傅立葉變換紅外譜儀測得。
[0050] 利用上述聚乙光譜分析曲線圖，傅立葉變換紅外光譜分析圖由Tensor27型紅外 光二醇重氮聚合物在毛細管內壁涂層的方法，包括下述步驟：
[0051] 將活化后的毛細管裸柱用濃度為2.Omg?ml1的聚乙二醇重氮聚合物溶液用注射 器緩慢注入活化后的毛細管中，所述聚乙二醇重氮聚合物溶液注射器的驅動力的作用下沿 所述石英毛細管內壁生長完成自組裝過程。將組裝好的毛細管用蒸饋水沖洗，同時置于波 長為325nm的紫外燈下曝光，曝光時間為20min，即可構筑具有感光性聚乙二醇結構的抗蛋 白吸附共價鍵合涂層。由于毛細管內壁上的娃徑基與涂層間發(fā)生光固化交聯(lián)反應而被屏 蔽，所W該共價鍵合涂層具有優(yōu)異的抗蛋白吸附性能，圖2所示為本實施例的毛細管對四 種常見蛋白質1、細胞色素C，2、溶菌酶，3、牛血清白蛋白，4、核糖核酸酶A，電泳分離性能的 比較，聚乙二醇重氮聚合物的毛細管共價鍵合的涂層能夠對常見的四種蛋白質進行很好的 基線分離，而毛細管裸柱則無法對運四種蛋白質進行分離。
[00巧圖2的蛋白質分離性能由a-1020型毛細管電泳儀測得，被分析物中四種蛋白質 (細胞色素C、溶菌酶、牛血清白蛋白、核糖核酸酶A)的濃度均為0. 5mg?ml1，紫外檢測波 長均為214nm，共價鍵合毛細管涂層與毛細管裸柱的有效長度均為40cm，內徑均為75ym， 檢測的柱溫均為25°C，分離電壓均為+15KV，分離介質均是濃度為40mM的憐酸鹽緩沖溶液， 其抑=3. 0。
[0053] 本實施例提供的一種新型的共價鍵合聚乙二醇毛細管涂層的制備方法，通過感光 性重氮基將具有抗蛋白吸附性能的聚乙二醇（PEG)鍵合在毛細管內壁，從而形成有效而穩(wěn) 定的聚合物涂層應用于毛細管電泳分離蛋白質。
[0054] 實施例2 陽化5] -種聚乙二醇重氮聚合物的制備方法，包括下述步驟：
[0056] S1、合成雙氯代聚乙二醇：
[0057] 將干燥后的聚乙二醇（PEG,分子量Mw為1000)和N，N-二甲基甲酯胺值MF)于反 應蓋中，形成溶液A;將氯化亞諷置于恒壓滴液漏斗中，形成B液，在40°C條件下，將B液逐 滴滴入溶液A中，至混合均勻；其中聚乙二醇與N，N-二甲基甲酯胺和氯化亞諷的摩爾比分 別為1 : 1.5和1 : 2.0。將混合液于85°C回流條件下反應1化后，將產物用飽和食鹽水 洗涂，無水碳酸鐘調節(jié)抑值為7. 0,真空干燥去除水分，過濾除去氯化鋼，得產物雙氯代聚 乙二醇（C1-PEG-C1);
[0058]S2、合成端氨基苯基聚乙二醇：
[0059] 將對氨基苯酪，氨氧化鋼和相轉移催化劑四下基漠化錠（TBAB)加入反應瓶中；所 述的雙氯代聚乙二醇（C1-陽G-C1)與對氨基苯酪、氨氧化鋼和四下基漠化錠（TBAB)的摩爾 比分別為1 : 1.0、1 : 5.0和1 : 0.01。于室溫條件下攬拌lOmin后，加入干燥的雙氯代 聚乙二醇（C1-陽G-C1)，將混合物加熱到90。恒溫攬拌反應15h。待反應液冷卻后，加入 lOOmL的二氯甲燒溶解粗產物，經過5次離屯、去除固體不容物，將上層液常壓蒸饋去除二氯 甲燒，真空干燥后得到產物端氨基苯基聚乙二醇。
[0060] S3合成聚乙二醇重氮聚合物：
[0061] 將端氨基苯基聚乙二醇和鹽酸水溶液加入到反應器中，冰水浴冷卻至5°C后，滴加 濃度為0. 2mol'L1的濃亞硝酸鋼溶液；所述的端氨基苯基聚乙二醇與鹽酸溶液和濃亞硝酸 鋼溶液的摩爾比分別為1 : 2.0和1 : 1.0。用淀粉-KI試紙檢測反應終點，再攬拌反應 3h，即可生成聚乙二醇重氮聚合物。
[0062] 利用上述聚乙二醇重氮聚合物在毛細管內壁涂層的方法，包括下述步驟：
[0063] 將活化后的毛細管裸柱用濃度為1.Omg?ml1的聚乙二醇重氮聚合物溶液用注射 器緩慢注入活化后的毛細管中，所述聚乙二醇重氮聚合物溶液注射器的驅動力的作用下沿 所述石英毛細管內壁生長完成自組裝過程。將組裝好的毛細管用蒸饋水沖洗，同時置于波 長為248nm的紫外燈下曝光，曝光時間為lOmin，即可構筑具有感光性聚乙二醇結構的抗蛋 白吸附共價鍵合涂層。由于毛細管內壁上的娃徑基與涂層間發(fā)生光固化交聯(lián)反應而被屏 蔽，所W該共價鍵合涂層具有優(yōu)異的抗蛋白吸附性能。
[0064] 本實施例提供的一種新型的共價鍵合聚乙二醇毛細管涂層的制備方法，通過感光 性重氮基將具有抗蛋白吸附性能的聚乙二醇（PEG)鍵合在毛細管內壁，從而形成有效而穩(wěn) 定的聚合物涂層應用于毛細管電泳分離蛋白質。 W65] 實施例3
[0066] 一種聚乙二醇重氮聚合物的制備方法，包括下述步驟：
[0067] S1、合成雙氯代聚乙二醇： W側將干燥后的聚乙二醇（PEG,分子量Mw為2000)和N，N-二甲基甲酯胺值M巧于反 應蓋中，形成溶液A;將氯化亞諷置于恒壓滴液漏斗中，形成B液，在60°C條件下，將B液逐 滴滴入溶液A中，至混合均勻；其中聚乙二醇與N，N-二甲基甲酯胺和氯化亞諷的摩爾比分 別為1:2. 5和1:4. 0。將混合液于70°C回流條件下反應1化后，將產物用飽和食鹽水洗涂， 無水碳酸鐘調節(jié)抑值為8. 0,真空干燥去除水分，過濾除去氯化鋼，得產物雙氯代聚乙二醇 (C1-PEG-C1)；
[0069]S2、合成端氨基苯基聚乙二醇：
[0070] 將對氨基苯酪，氨氧化鋼和相轉移催化劑四下基漠化錠（TBAB)加入反應瓶中；所 述的雙氯代聚乙二醇（C1-陽G-C1)與對氨基苯酪、氨氧化鋼和四下基漠化錠（TBAB)的摩爾 比分別為1 : 1.5、1 : 6.0和1 : 0.02。于室溫條件下攬拌l