有DNA分子2、則待測樣本中不含有或疑似不含有越 南衛(wèi)星DNA;(3)如果PCR擴增產(chǎn)物中同時含有DNA分子1和DNA分子2,則待測樣本中 含有或疑似含有番茄黃化曲葉病毒和越南衛(wèi)星DNA0;(4)如果PCR擴增產(chǎn)物中同時不含有 DNA分子1和DNA分子2,則待測樣本中不含有或疑似不含有番茄黃化曲葉病毒和越南衛(wèi)星 DNAP；
[0048] d2)-種檢測待測樣本是否含有番茄黃化曲葉病毒的方法，可包括如下步驟：
[0049]提取待測樣本的基因組DNA，以上述任一所述引物對TY進行PCR擴增，然后進行如 下評判：如果PCR擴增產(chǎn)物中含有DNA分子1、則待測樣本中含有或疑似含有番茄黃化曲葉 病毒，如果PCR擴增產(chǎn)物中不含有DNA分子1、則待測樣本中不含有或疑似不含有番茄黃化 曲葉病毒；
[0050] d3) -種檢測待測樣本是否含有越南衛(wèi)星DNAI3的方法，可包括如下步驟：
[0051] 提取待測樣本的基因組DNA，以上述任一所述引物對0進行PCR擴增，然后進行 如下評判：如果PCR擴增產(chǎn)物中含有DNA分子2、則待測樣本中含有或疑似含有越南衛(wèi)星 DNAP，如果PCR擴增產(chǎn)物中不含有DNA分子2、則待測樣本中不含有或疑似不含有越南衛(wèi)星 DNAP；
[0052] 所述DNA分子1可為如下（1)或⑵或（3)所示的DNA分子：
[0053] (1)核苷酸序列是序列表序列3所示的DNA分子；
[0054] (2)與（1)限定的核苷酸序列具有89%以上一致性；
[0055] (3)在嚴格條件下與⑴或⑵限定的核苷酸序列進行雜交的DNA分子。
[0056] 所述DNA分子2可為如下⑷或（5)或（6)所不的DNA分子：
[0057] (4)核苷酸序列是序列表序列6所示的DNA分子；
[0058] (5)與⑷限定的核苷酸序列具有79%以上一致性；
[0059] (6)在嚴格條件下與⑷或（5)限定的核苷酸序列進行雜交的DNA分子。
[0060] 上述任一所述"具有89%以上一致性"具體可為97. 66%以上一致性，"97. 66%以 上一致性"包括與本發(fā)明序列表序列3所示的核苷酸序列具有97. 66%或更高，或98. 00% 或更高一致性的核苷酸序列。
[0061] 上述任一所述"具有79%以上一致性"具體可為97. 80%以上一致性，"97. 80%以 上一致性"包括與本發(fā)明序列表序列6所示的核苷酸序列具有97. 80%或更高，或99. 00% 或更高一致性的核苷酸序列。
[0062] 這里使用的術(shù)語"一致性"指與天然核酸序列的序列相似性。一致性可以用肉眼或 計算機軟件進行評價。使用計算機軟件，兩個或多個序列之間的一致性可以用百分比（％ ) 表示，其可以用來評價相關(guān)序列之間的一致性。
[0063] 上述任一所述方法中，所述待測樣本可為植物樣本或微生物樣本。所述植物樣本 可為番茄葉片。
[0064] 本發(fā)明還提供了el)和/或e2)的方法：
[0065] el) -種檢測待測病毒是否為候選的番茄黃化曲葉病毒的方法，可包括如下步 驟：
[0066] 提取待測病毒的基因組DNA，以上述任一所述引物對TY或上述任一所述引物組進 行PCR擴增，然后進行如下評判：如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA分子1、則待測病毒為 候選的番前黃化曲葉病毒，如果PCR擴增產(chǎn)物中不含有所述DNA分子1、則待測病毒為候選 的非番茄黃化曲葉病毒；
[0067] e2) -種檢測待測病毒是否為候選的越南衛(wèi)星DNA0的方法，可包括如下步驟：
[0068] 提取待測病毒的基因組DNA，以上述任一所述引物對0或上述任一所述引物組進 行PCR擴增，然后進行如下評判：如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA分子2、則待測病毒為 候選的越南衛(wèi)星DNA0，如果PCR擴增產(chǎn)物中不含有所述DNA分子2、則待測病毒為候選的 非越南衛(wèi)星DNA0。
[0069] 本發(fā)明中所述越南衛(wèi)星DNAP記載在如下文獻和數(shù)據(jù)庫（文獻中的名稱為 TomatoyellowleafcurlVietnamvirusDNAmoleculeP，數(shù)據(jù)庫中的名稱為Tomato yellowleafcurlVietnambetasatellite，后一個名稱更符合規(guī)則且被廣泛引用，按照 規(guī)則中文譯文為越南番茄黃化曲葉衛(wèi)星DNA，在本發(fā)明中越南番茄黃化曲葉衛(wèi)星DNA0 簡稱為越南衛(wèi)星DNA0。）中：R.Blawida;TransreplicationofaTomatoyellowleaf curlThailandvirusDNA-BandreplicationofaDNA?componentbyTomatoleaf curlVietnamvirusandTomatoyellowleafcurlVietnamvirus；VirusResearch； 2008, 136, 107 _ 11.(文南犬），http: //www.ncbi.nlm.nih.R〇v/nuccore/DQ641714. 1(NCBI 數(shù)據(jù)庫）。
[0070] 實驗證明，本發(fā)明提供的檢測番茄黃化曲葉病毒和/或越南衛(wèi)星DNA0的方法可 準確的檢測番茄黃化曲葉病毒和/或越南衛(wèi)星DNAP。本發(fā)明提供試劑盒對番茄黃化曲葉 病毒質(zhì)粒DNA的最小檢測限為Ing/mL，對越南衛(wèi)星DNA0質(zhì)粒DNA的最小檢測限為Ing/mL。
【附圖說明】
[0071]圖1為番茄黃化曲葉病毒的靈敏度實驗。
[0072] 圖2為越南衛(wèi)星DNAI3的靈敏度實驗。
[0073] 圖3為番茄黃化曲葉病毒和越南衛(wèi)星DNA0的靈敏度實驗。
【具體實施方式】
[0074] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0075] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0076] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0077] 下述實施例中的番前黃化曲葉病毒（Tomatoyellowleafcurlvirus，TYLCV) 和中國番木瓜曲葉病毒（PapayaleafcurlChinavirus，PaLCuCNV)均記載在如下文 獻中：熊艷等；PaLCuCNV和TYLCCNV復(fù)合侵染引起更嚴重的番茄黃化曲葉??；園藝學(xué)報； 2014,41(2) :268-276.，公眾可從山東農(nóng)業(yè)大學(xué)（即申請人）獲得，該生物材料只為重復(fù)本 發(fā)明的相關(guān)實驗所用，不可作為其它用途使用。
[0078] 本發(fā)明中所述越南衛(wèi)星DNAP記載在如下文獻和數(shù)據(jù)庫（文獻中的名稱為Tomato yellowleafcurlVietnamvirusDNAmoleculeP，數(shù)據(jù)庫中的名稱為Tomatoyellow leafcurlVietnambetasatellite，后一個名稱更符合規(guī)則且被廣泛引用，按照規(guī)則中 文譯文為越南番茄黃化曲葉衛(wèi)星DNAI3，在以下實施例中越南番茄黃化曲葉衛(wèi)星DNAI3簡 稱為越南衛(wèi)星DNA0。）中：R.Blawida;TransreplicationofaTomatoyellowleaf curlThailandvirusDNA-BandreplicationofaDNA?componentbyTomatoleaf curlVietnamvirusandTomatoyellowleafcurlVietnamvirus；VirusResearch； 2008, 136, 107 _ 11.(文南犬），http: //www.ncbi.nlm.nih.R〇v/nuccore/DQ641714. 1(NCBI 數(shù)據(jù)庫）。公眾可從山東農(nóng)業(yè)大學(xué)（即申請人）獲得，該生物材料只為重復(fù)本發(fā)明的相關(guān)實 驗所用，不可作為其它用途使用。
[0079] 下述實施例中的DNA分子1為如下（1)或⑵或（3)所示的DNA分子：
[0080] (1)核苷酸序列是序列表序列3所示的DNA分子；
[0081] (2)與（1)限定的核苷酸序列具有97. 66%以上一致性；
[0082] (3)在嚴格條件下與⑴或⑵限定的核苷酸序列進行雜交的DNA分子。
[0083] 下述實施例中的DNA分子2為如下（4)或（5)或（6)所示的DNA分子：
[0084] (4)核苷酸序列是序列表序列6所示的DNA分子；
[0085] (5)與（4)限定的核苷酸序列具有97. 80%以上一致性；
[0086] (6)在嚴格條件下與⑷或（5)限定的核苷酸序列進行雜交的DNA分子。
[0087] 載體PMD18-T為TaKaRa公司產(chǎn)品；DNA提取試劑盒為天根生化科技（北京） 有限公司產(chǎn)品；T4DNA連接酶為TaKaRa公司產(chǎn)品；PCR產(chǎn)物膠回收試劑盒為北京百泰克 生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；TaqDNA聚合酶、dNTP均為北京全式金生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品； lOXEasyTaqBuffer(含Mg2+)為北京全式金生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，目錄號為AP111-02的 "EasyTaqDNAPolymerase" 中的組件。
[0088] 實施例1、引物的制備
[0089] 檢測番茄黃化曲葉病毒的引物為引物對TY，由TY_F(序列表中序列1所示的單鏈 DNA)和TY-R(序列表中序列2所示的單鏈DNA)組成。<