eliloU) ACCC17631 的含量為5X109c化/g，鋼酸錠的質(zhì)量百分含量為0.2%;對照組l根瘤菌劑中首 猜中華根瘤菌（Sinorhizobiummeliloti)ACCC17631的含量為5X109cfu/g，鋼酸錠的質(zhì)量 百分含量均為0. 2%。
[00化]1.4、丸衣首猜種子的制備
[0086] 1. 4. 1中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑丸衣種子的制備
[0087] 用95%乙醇浸泡中首一號紫花首猜種子5min，再用新潔爾滅表面滅菌5min，最后 用滅菌水清洗10次，得到無菌中首一號紫花首猜種子。
[0088] 取lOOg步驟1. 3中的根瘤菌劑（根瘤菌劑1、根瘤菌劑2、根瘤菌劑3或?qū)φ战M1 根瘤菌劑），向其中加入40mL濃度為4% (4g/100mL)的簇甲基纖維素鋼作為粘著劑，并加 入0.1%化lg/100血）的脫脂乳20血，攬拌均勻，再加入lOOOg無菌中首一號紫花首猜種 子，反復攬拌，使每粒種子上都粘上有根瘤菌劑的粘著劑，最后加入300g膨潤±作為基質(zhì) 再反復攬拌，使每粒種子都裹上一層丸衣材料，使其丸衣緊實，表面光潔，單粒率高。將丸衣 種子放通風處，陰干待用，分別得到中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑1丸衣種子、中首 一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑2丸衣種子、中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑3丸衣 種子和中首一號紫花首猜種子對照組1根瘤菌種衣劑丸衣種子。
[0089] 2、水蘇堿和葫蘆己堿組成的組合物對中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑接種 效果的影響
[0090] 分別將步驟1中得到的中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑1丸衣種子（記為 S1+T1組）、中首一號紫花首猜種子根瘤菌種衣劑2丸衣種子（記為S2+T1組）、中首一號紫 花首猜種子根瘤菌種衣劑3丸衣種子（記為S1+T2組）和中首一號紫花首猜種子對照組1 根瘤菌種衣劑丸衣種子（記為對照組1)W條播的方式播種到田間，每個處理重復3次，每 個重復播種一個小區(qū)，小區(qū)為2. 5X2m2,對照組未經(jīng)過根瘤菌種衣劑包衣的中首一號紫花 首猜種子，按照同樣的方式播種。試驗地在河北省國家牧草產(chǎn)業(yè)技術體系滄州綜合試驗站， 地處滄州市東北部，地理坐標 38。23' 35"-38° 33' 44"N，117° 18' 15"-117° 38' 17"E，東溯勸海，試驗地鹽堿程度高，理化性質(zhì)見表1。種植當季氣溫較高，降雨少。
[0091] 表1、試驗地±壤理化性質(zhì)
[0092]
[0093] 待中首一號紫花首猜在田間生長進入現(xiàn)蕾期化月28日播種，9月20日收獲），田 間生長83天后觀測各組中首一號紫花首猜的單株干重（地上部分的平均干重）、單株根瘤 總數(shù)及莖葉粗蛋白含量。
[0094] 結(jié)果見表2,與對照組的中首一號紫花首猜單株干重（1.06 + 0. 21g/株）相比， S1+T1組化04 + 0. 48g/株，增加率為186. 79 % )和S化T1組（1. 98 + 0. 55g/株，增加率 為86. 79% )的中首一號紫花首猜的單株干重的增加率均高于對照組1 (1. 39 + 0. 04g/株， 增加率為31. 13% );與對照組的中首一號紫花首猜單株根瘤總數(shù)化34 + 0. 14個/株） 相比，S1+T1組化32 + 0. 48個/株，增加率為582. 35 % )和S2巧1組（1. 66 + 0. 75個 /株，增加率為388.24% )的中首一號紫花首猜的單株根瘤總數(shù)的增加率均高于對照組 1 (0. 89 + 0. 31個/株，增加率為161. 76% );與對照組的中首一號紫花首猜單株莖葉粗蛋 白含量（185.6±12.0邑/1^莖葉干重）相比，51+1'1組（226.6±14.0邑/1^莖葉干重，增加率 為22. 09% )和S化T1組（215. 6 + 10. 8g/kg莖葉干重，增加率為16. 16% )的中首一號紫 花首猜的單株莖葉粗蛋白含量的增加率均高于對照組1 (204. 8 + 3.Og/kg莖葉干重，增加 率為10. 34% )。上述結(jié)果顯示，適宜濃度的水蘇堿和葫蘆己堿的組合物對于中首一號紫花 首猜的產(chǎn)量、品質(zhì)和單株根瘤菌總數(shù)都具有明顯的促進作用；濃度為10μΜ的水蘇堿和濃 度為10μΜ的葫蘆己堿的組合物對于中首一號紫花首猜具有最強的促進生長作用，濃度為 20μΜ的水蘇堿和濃度為10μΜ的葫蘆己堿的組合物對中首一號紫花首猜的促進生長作用 次之，濃度為10μΜ的水蘇堿和濃度為20μΜ的葫蘆己堿的組合物對中首一號紫花首猜無 明顯促進生長作用。
[0095] 表2、水蘇堿和葫蘆己堿組成的組合物對中首一號紫花首猜產(chǎn)量和品質(zhì)的影響
[0096]
【主權(quán)項】
1. 用于制備根瘤菌培養(yǎng)基的組合物，其活性成分由組分A和組分B組成，所述組分A為 水蘇堿或其鹽酸鹽，所述組分B為萌蘆巴堿或其鹽酸鹽。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于：所述活性成分中所述組分A和所述組 分B的摩爾比為（1-2) :1。3. -種根瘤菌培養(yǎng)基，其特征在于：所述根瘤菌培養(yǎng)基含有權(quán)利要求1所述的組合物。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的根瘤菌培養(yǎng)基，其特征在于：所述根瘤菌培養(yǎng)基是在普通根 瘤菌培養(yǎng)基中加入權(quán)利要求1或2所述的組合物得到含有所述組分A和所述組分B的培養(yǎng) 基；所述根瘤菌培養(yǎng)基中，所述組分A的含量為10μΜ-20μM，所述組分B的含量為10μΜ; 所述普通根瘤菌培養(yǎng)基不含所述組分Α和所述組分Β。5. 用于提高苜蓿產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物的制備方法，所述制備方法為方法Q， 所述方法Q包括將根瘤菌在權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到的培養(yǎng)物，即 為所述用于提高苜蓿產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述根瘤菌為苜蓿中華根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)ACCC17631〇7. 利用權(quán)利要求5或6所述的方法制備的所述用于提高苜蓿產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌 培養(yǎng)物。8. 含有權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物的根瘤菌種衣劑。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的根瘤菌種衣劑，其特征在于：所述根瘤菌種衣劑由含有根瘤 菌劑、粘著劑和基質(zhì)的原料制成，所述根瘤菌劑、所述粘著劑和所述基質(zhì)這三種組分每種組 分均獨立包裝；所述根瘤菌劑由權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物與根瘤菌吸附劑混勻而 成。10. 下述1)-29)中任一種應用： 1) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌培養(yǎng)基中的應用； 2) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應用； 3) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌種衣劑中的應用； 4) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在制備丸衣苜蓿種子中的應用； 5) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在提高苜蓿產(chǎn)量中的應用； 6) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在提高苜蓿根瘤數(shù)中的應用； 7) 權(quán)利要求1中所述組分A和所述組分B在提高苜蓿品質(zhì)中的應用； 8) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在制備根瘤菌培養(yǎng)基中的應用； 9) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應用； 10) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在制備根瘤菌種衣劑中的應用； 11) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在制備丸衣苜蓿種子中的應用； 12) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在提高苜蓿產(chǎn)量中的應用； 13) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在提高苜蓿根瘤數(shù)中的應用； 14) 權(quán)利要求1或2所述的組合物在提高苜蓿品質(zhì)中的應用； 15) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應用； 16) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在制備根瘤菌種衣劑中的應用； 17) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在制備丸衣苜蓿種子中的應用； 18) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在提高苜蓿產(chǎn)量中的應用； 19) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在提高苜蓿根瘤數(shù)中的應用； 20) 權(quán)利要求3或4所述的根瘤菌培養(yǎng)基在提高苜蓿品質(zhì)中的應用； 21) 權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物在制備根瘤菌種衣劑中的應用； 22) 權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物在制備丸衣苜蓿種子中的應用； 23) 權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物在提高苜蓿產(chǎn)量中的應用； 24) 權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物在提高苜蓿根瘤數(shù)中的應用； 25) 權(quán)利要求7所述的根瘤菌培養(yǎng)物在提高苜蓿品質(zhì)中的應用； 26) 權(quán)利要求8或9所述的根瘤菌種衣劑在制備丸衣苜蓿種子中的應用； 27) 權(quán)利要求8或9所述的根瘤菌種衣劑在提高苜蓿產(chǎn)量中的應用； 28) 權(quán)利要求8或9所述的根瘤菌種衣劑在提高苜蓿根瘤數(shù)中的應用； 29) 權(quán)利要求8或9所述的根瘤菌種衣劑在提高苜蓿品質(zhì)中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種提高苜蓿產(chǎn)量和品質(zhì)的組合物及其應用。本發(fā)明用于制備根瘤菌培養(yǎng)基的組合物，其活性成分由組分A和組分B組成，組分A為水蘇堿或其鹽酸鹽，組分B為葫蘆巴堿或其鹽酸鹽。采用本發(fā)明的用于制備根瘤菌培養(yǎng)基的組合物制備的苜蓿種子根瘤菌種衣劑均提高了中苜一號紫花苜蓿的產(chǎn)量和品質(zhì)。本發(fā)明的中苜一號紫花苜蓿種子根瘤菌種衣劑的原料易得，包衣方式簡單可行，包衣種子適合儲存、運輸和播種，且包衣的方式能為接種根瘤菌侵染根系提供有利的侵染時間和空間。
【IPC分類】A01N63/02, C12N1/20, C12R1/41, A01P21/00
【公開號】CN105255780
【申請?zhí)枴緾N201510772106
【發(fā)明人】鄧波, 劉靜, 張英俊, 李佳歡, 漫靜, 盧靖宜, 張佳良
【申請人】中國農(nóng)業(yè)大學
【公開日】2016年1月20日
【申請日】2015年11月12日