一種硒吩類化合物的制作方法
【專利說明】
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一類具有抗乳腺癌活性的硒吩類化合物的制備與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 乳腺癌現(xiàn)已成為女性的第二大惡性腫瘤，是35-55歲女性的頭號殺。在全世界范圍內(nèi)， 乳腺癌患者正在逐年增加，并且年輕化，每年大約有110萬的新增患者。按照目前的發(fā)展趨 勢，預(yù)計到2030年乳腺癌的發(fā)病率將達到264萬，因乳腺癌而引發(fā)的死亡人數(shù)將達到170 萬左右。通過大量的研究表明，乳腺癌是一種全身性的惡性腫瘤，其生長和發(fā)展與內(nèi)分泌激 素失調(diào)有著十分密切的關(guān)系，尤其是雌激素在乳腺癌的增殖過程中起著非常重要的作用。 雌激素是通過與組織中的雌激素受體（EstrogenReceptor,ER)結(jié)合來調(diào)控乳腺的生長、 分化以及功能化，ER信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對乳腺組織的發(fā)育、成熟、退縮等正常機體生理功能以及 癌變過程都起著十分重要的作用。因此，雌激素受體（ER)被認為是治療乳腺癌的一個重要 藥理學(xué)靶點。選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERM)是一類能夠與雌激素受體結(jié)合，并依據(jù)組 織、器官的不同選擇性的發(fā)揮雌激素樣激動效應(yīng)或者拮抗作用的一類結(jié)構(gòu)多樣的化合物， 是目前臨床上廣泛應(yīng)用的一線抗乳腺癌藥物，其中他莫昔芬是第一應(yīng)用于臨床預(yù)防和治療 乳腺癌的SERMs類藥物。盡管SEMRs在乳腺癌的臨床治療方面取得了顯著的效果，但是仍然 有許多局限性。例如，他莫昔芬對非荷爾蒙依賴型（ER)乳腺癌和大約一半的荷爾蒙依賴型 乳腺癌無效、并產(chǎn)生耐藥性（參考文獻：A.M.Brzozowski,A.C.Pike,Z.Dauter,R. E.Hubbarde,T.Bonn, 0.Engstrom，LOhman，G.L.Greene,J.A.Gustafsson，M. Carquist，Molecularbasisofagonismandantagonismintheestrogenreceptor, Nature，389 (1997) 753-758)。因此，發(fā)展高效、理想的"SERMs"成為新型抗乳腺癌藥物 研究的重點。
[0003] 硒作為人體的一種非常重要的微量元素，在人體組織的發(fā)育和功能維持上扮演著 不可替代的角色。最近臨床試驗不斷的表明硒能夠抑制多種癌癥，如硒能夠誘導(dǎo)抑制乳腺 癌血管生成，增加硒（富硒大蒜、亞硒酸鈉）能夠?qū)е氯橄倌[瘤內(nèi)微血管密度明顯降低。此 外，硒對人機體的毒性比較少，而且比較穩(wěn)定。因此，將硒引入到了SERMs中能夠增強抗乳 腺癌活性，同時又能夠減少SERMs的副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有抗乳腺癌活性的硒吩類化合物及其合成 方法和用途。
[0005] 本發(fā)明所提供的硒吩類化合物烯類化合物，具有以下通式所示的結(jié)構(gòu)：
其中， 札為4-0H或5-OH;
R3為H、2-Me、3-Me、3, 5-diMe、2, 6-diMe、2-F、3-F、4-F、2-C1 或 3-C1。
[0006] 本發(fā)明通過體外乳腺癌細胞抑制活性實驗，發(fā)現(xiàn)上述硒吩類化合物可進一步用 于抗乳腺癌藥物研究。優(yōu)選的，尤其是下列化合物： 2, 5-二（4-羥基苯基）硒吩（9a)、 2, 5-二（2-甲基-4-羥基苯基）硒吩（9b)、 2, 5-二（3-甲基-4-羥基苯基）硒吩（9c)、 2, 5-二（3, 5-二甲基-4-羥基苯基）硒吩（9d)、 2, 5-二（2, 6-二甲基-4-羥基苯基）硒吩（9e)、 2, 5-二（2-氣_4_羥基苯基）硒吩（9f)、 2, 5-二（2-氯-4-羥基苯基）硒吩（9g)、 2, 5-二（3-氯-4-羥基苯基）硒吩（9h)、 2, 5_二（2_氣_5_羥基苯基）砸吩（9i)、 2, 5-二（4-氟-5-羥基苯基）硒吩（9j)、 3, 4-二（4-羥基苯基）硒吩（10a)、 3, 4-二（3-甲基-4-羥基苯基）硒吩（10b)、 3, 4-二（2-氟-4-羥基苯基）硒吩（10c)、 3, 4-二（3-氟-4-羥基苯基）硒吩（10d)、 3-溴-2, 5-二（4-羥基苯基）硒吩（11a)、 3-溴-2, 5-二（2-甲基-4-羥基苯基）硒吩（11b)、 3-溴-2, 5-二（3-甲基-4-羥基苯基）硒吩（11c)、 3-溴-2, 5-二（3, 5-二甲基-4-羥基苯基）硒吩（lid)、 3-溴-2, 5-二（3-氯-4-羥基苯基）硒吩（lie)、 3-溴-2, 5-二（4-氟-5-羥基苯基）硒吩（Ilf)、 2, 3, 5-三（4-羥基苯基）硒吩（12a)、 2, 3, 5-三（3-甲基-4-羥基苯基）硒吩（12b)、 2, 3, 5-三（3, 5-二甲基-4-羥基苯基）硒吩（12c)或 2, 3, 5-三（3-氯-4-羥基苯基）硒吩（12d)。
[0007] 本發(fā)明還提供前面結(jié)構(gòu)式所表示的硒吩類化合物的制備方法，包括以下步驟： (1)在避光的條件下，將硒吩溶于無水Λ，二甲基甲酰胺中，緩慢加入（1毫克/秒） ，溴代丁二酰亞胺，室溫下攪拌18小時；反應(yīng)結(jié)束之后用水洗除Λ，二甲基甲酰胺，二氯 甲烷萃取產(chǎn)物，無水硫酸鈉干燥，旋干二氯甲烷得經(jīng)柱層析純化后得無色油狀物2, 5-二溴 硒吩1;硒吩和，溴代丁二酰亞胺的物質(zhì)的量比為1 :1. 2 ; (2) 將硒吩溶于醋酸中，緩慢滴加（0. 2毫升/秒）溴，室溫下攪拌18小時；反應(yīng)結(jié)束之 后蒸除醋酸得粗品，經(jīng)柱層析純化后得無色油狀物2, 3, 4, 5-四溴硒吩2;硒吩和溴的物質(zhì) 的量比為1 :5. 0 ; (3) 將2, 3, 4, 5-四溴硒吩2溶于醋酸和水的混合溶劑中，在37 °C下加入鋅，反應(yīng)12 小時；反應(yīng)結(jié)束之后過濾，旋干濾液，柱層析分離，得無色油狀物3, 4-二溴硒吩3;醋酸和水 為體積比1:1 ;2, 3, 4, 5-四溴硒吩與鋅的物質(zhì)的量比為1 :4 ; (4) 將硒吩溶于氯仿和醋酸的混合溶劑中，冰浴下滴加溴，自然升至室溫反應(yīng)12小時 后，加熱至70 °C繼續(xù)反應(yīng)5小時，冷卻至室溫，用20wt%的NaOH溶液和飽和NaCl洗滌， 無水硫酸鈉干燥，旋干濾液，柱層析分離，得2, 3, 5-三溴硒吩4;氯仿和醋酸為體積比1:1 ; 硒吩與溴的物質(zhì)的量比為1 :3. 1 ; (5) Ar保護下，將化合物1、3或4溶于無水甲苯和除氧去離子水的混合溶劑中，加入 Na2C03、四（三苯基膦）鈀和相應(yīng)的苯硼酸，120 °C下回流反應(yīng)24小時，冷卻至室溫；用乙 酸乙酯萃取，有機相用飽和NaCl洗滌，無水Na2S04干燥，旋干濾液，柱層析分離，得到甲氧基 苯基取代的硒吩化合物5a-j、6a-h、7a_f或8a_d;無水甲苯和除氧去離子水為體積比1:1 ; 在制備化合物5a-j、5a-d和7a-f時，2, 5-二溴硒吩1、3, 4-二溴硒吩3或2, 3, 5-三溴硒 吩4與相應(yīng)的苯硼酸、鈀催化劑的物質(zhì)的量比為1 :3 :0. 8 ;在制備化合物8a-d時，2, 3, 5-三 溴硒吩4與相應(yīng)的苯硼酸、鈀催化劑的物質(zhì)的量比為1 :4 :0. 8 ;相應(yīng)的苯硼酸為4-甲氧基 苯硼酸、2-甲基-4-甲氧基苯硼酸、3-甲基-4-甲氧基苯硼酸、3, 5-二甲基-4-甲氧基苯 硼酸、2, 6-二甲基-4-甲氧基苯硼酸、2-氟-4-甲氧基苯硼酸、2-氯-4-甲氧基苯硼酸、 3-氯-4-甲氧基苯硼酸、2-氟-5-甲氧基苯硼酸、4-氟-5-甲氧基苯硼酸或3-氟-4-甲氧 基苯硼酸。
[0008] (6)Ar保護下，將化合物5a-j、6a-h、7a_f或8a_d溶于無水二氯甲烷中，-20 °C 下加入三溴化硼，反應(yīng)12小時后，加入水萃滅反應(yīng)，用飽和碳酸氫鈉洗滌，用乙酸乙酯萃 取，無水硫酸鈉干燥，柱層析分離，得到權(quán)利要求1所述硒吩類化合物；5a-j、6a_h和7a_f 與三溴化硼的物質(zhì)的量比為1 :3 ;8a_d與三溴化硼的物質(zhì)的量比為1 :9 ; 化合物1，化合物2，化合物3，化合物4,化合物5a-j，化合物6a-d，化合物7a-f，化合物 8a_d結(jié)構(gòu)式如下：
本發(fā)明得到的上述具有抗乳腺癌活性的硒吩類化合物對ER+乳腺癌細胞較強的抑制 活性，同時能夠?qū)R乳腺癌細胞也有良好的抑制活性。體外活性實驗表明，這類新型的 硒吩類化合物能夠有效的抑制荷爾蒙依賴型乳腺癌MCF-7細胞和非荷爾蒙依賴型乳腺癌 MDA-MB-231細胞；與現(xiàn)有抗乳腺癌藥物他莫昔芬相比，大部分硒吩類化合物對正常細胞 Vero細胞沒有毒性和治療指數(shù)，而他莫昔芬有毒性。這類目標(biāo)化合物是溴代硒吩為原料通 過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備得含羥基苯基取代的硒吩類化合物。
[0009]
【具體實施方式】
[0010] 一、2, 5-二（甲氧基苯基）硒吩5a-j的合成路線：
2, 5-二溴硒吩1的合成 在避光的條件下，將硒吩（2. 086g, 15. 90mmol)溶于25mL無水DMF中，以1毫克/ 秒的速度加入，溴代丁二酰亞胺（NBS，5.407g，19. 11mmol)，室溫下攪拌18小時；反 應(yīng)結(jié)束之后用50mL水洗除DMF，二氯甲燒（3X30mL)萃取產(chǎn)物，無水硫酸鈉干燥，旋干 二氯甲烷得粗品，經(jīng)柱層析純化后得3.545g無色油狀物。產(chǎn)率為77. 2%。4NMR(400MHz, CDC13)J7.00 (s，2H).13CNMR(100MHz,CDC13)J132.98，115.60.MS(ESI)m/ z= 290([M+H]+). 2, 5-二（甲氧基苯基）硒吩5a-j的合成 將25mL的雙口瓶、磁子在110 °C下烘烤15min后，趁熱裝置，無水無氧操作，在通Ar下，稱取化合物1 (500. 3mg, 1. 73mmol)溶于10mL無水甲苯和除氧去離子水的混合溶 齊lj(V:V= 1:1)中，加入Na2C03(366 . 7mg, 3.46mmol)、Pd(PPh3)4(1.595g，1. 38mmol) 和相應(yīng)的苯硼酸（3equiv.)，120 °C下回流反應(yīng)24小時，冷卻至室溫；用乙酸乙酯（3X 20mL)萃取，有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2S04干燥，旋干濾液，柱層析分離， 得到了甲氧基苯基取代的硒吩。
[0011] 2, 5-二（4-甲氧基苯基）硒吩5a 化合物5a是由4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為32%，黃色的固 體，mp. 179-181。C; 4NMR(400MHz,CDC13)J7.49 (d，/= 8.8Hz, 4H)，7.30 (s, 2H), 6. 90 (d, / = 8. 8Hz, 4H), 3. 84 (s, 6H). 2, 5-二（2-甲基-4-甲氧基苯基）硒吩5b 化合物5b由2-甲基-4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為36%，黃 色的固體，mp. 174-176。C;1!!NMR(400MHz,CDC13) J 7.35 (d，/= 8.4 Hz, 2H)， 7.07 (d, /= 3.0Hz, 2H), 6.81 (d, / = 2.4Hz, 2H), 6.77 (d, / = 2.6 Hz, 1H), 6.75 (d, /= 2.6Hz, 1H), 3.82 (s, 6H), 2.44 (d, / = 7. 2 Hz, 6H). 13CNMR (100 MHz,CDC13)J157. 96, 147. 83, 136. 06, 130. 56, 127. 89, 127. 25, 115. 07, 110. 15, 54. 21, 20. 53. 2, 5-二（3-甲基-4-甲氧基苯基）硒吩5c 化合物5c由3-甲基-4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為40%，黃 色的固體，mp. 175-177。C;蟲NMR(400MHz,CDC13) J 7.37 (d，/= 2.0 Hz, 1H)， 7.34 (s, 3H), 7.28 (s, 2H), 6.81 (d, / = 8.0Hz, 2H), 3.85 (s, 6H), 2.25 (s, 6H).13CNMR(100MHz,CDC13)J157.47，148.73，128.97，128.44，127.07，124.88， 124.48, 110.20, 55.46, 29.71, 16.28. 2, 5-二（3, 5-二甲基-4-甲氧基苯基）硒吩5d 化合物5d由3, 5-二甲基-4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為48%， 黃色的固體，mp. 120-122 °C; 4NMR(400MHz,CDC13) J7.30 (s，2H), 7.20 (s， 4H)，3.73 (s，6H)，2.31 (s，12H). 13CNMR (100MHz, CDC13) J156.75，149.04， 132.07, 131.36, 126.49, 125.60, 59.80, 16.18. 2, 5-二（2, 6-二甲基-4-甲氧基苯基）硒吩5e 化合物le由2, 6-二甲基-4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為30%， 黃色的固體，mp133-135 °C; 4NMR(400MHz,CDC13)J6.88 (s, 2H), 6.67 (s， 4H)，3.81 (s，6H)，2.25 (s，12H). 13CNMR (100MHz, CDC13) J157.91，147.57， 138.11, 127.81, 127.64, 111.60, 54.07, 20.14. 2, 5-二（2-氟-4-甲氧基苯基）硒吩5f 化合物5f由2-氟-4-甲氧基苯硼酸通過Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)制備的。產(chǎn)率為28%，黃色 的固體，mp140-142。C; 4NMR(400MHz,CDC13)J7.67-7.63 (m, 2H), 7.60 (s， 2H)，6.70-6. 74 (m，4H)，3.96 (s，6H).13CNMR(100MHz,CDC13)J160.58，160.