醇單乙締基酸、1，5-戊二醇單乙締基酸、1，6-己二醇 單乙締基酸或二乙二醇單乙締基酸和所用的環(huán)脂族乙締基酸是環(huán)己燒二甲醇單乙締基酸， 特別優(yōu)選1，4-下二醇單乙締基酸、1，5-戊二醇單乙締基酸、二乙二醇單乙締基酸或環(huán)己燒 二甲醇單乙締基酸。
[0064] 所用的交聯(lián)劑優(yōu)選地是式II的化合物。給出的優(yōu)先選擇是使用二乙締基丙締 脈（1,3-二乙締基-四氨喀晚-2-酬）或特別優(yōu)選二乙締基乙締脈（1,3-二乙締基咪挫 口林-2-酬）。 陽〇化]親水取代的烷基乙締基酸相對于聚合物的重量的比例典型地在1% (按重量計） 和90% (按重量計）之間或烷基乙締基酸的最大重量比例（基于雙官能交聯(lián)劑，其對應(yīng)于 摩爾比2:1，如果烷基乙締基酸不均聚的話）。親水取代的烷基乙締基酸的比例優(yōu)選地在10 和80%餅重量）之間，特別優(yōu)選地在35和60%之間。因此，交聯(lián)劑的比例在10和99餅 重量）之間，優(yōu)選地在20和90%之間，特別優(yōu)選地在40和65%之間。
[0066] 在另一個優(yōu)選的實施方案中，聚合物是多孔的，具有在2和200nm之間、更優(yōu)選在 30和150皿之間的孔徑。
[0067] 在另一個實施方案中，聚合物呈現(xiàn)為具有在25和250化之間、最優(yōu)選在30-90化 之間的平均粒徑的顆粒形式。
[0068] 聚合物攜帶包含陰離子交換基團的配體。
[0069] 在優(yōu)選的實施方案中，聚合物已經(jīng)借助于已通過接枝聚合連接到聚合物的結(jié)構(gòu)衍 生。
[0070] 在優(yōu)選的實施方案中，聚合物已經(jīng)借助于已通過用姉（IV)催化的接枝聚合連接 到聚合物的結(jié)構(gòu)衍生，優(yōu)選地依據(jù)US5453186第9頁實施例8,其中優(yōu)選荷電基團是帶正電 荷的Ξ甲基錠烷基。
[0071] 關(guān)于要用于本發(fā)明的方法的材料和關(guān)于其生產(chǎn)的更多細節(jié)可在wo2007/014591 中發(fā)現(xiàn)。
[0072] 配體是色譜領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。配體是早在基礎(chǔ)材料的合成過程中或隨后可引 入載體材料并影響載體材料的表面性能的取代基。特別是，借助于配體有針對性地衍生載 體材料產(chǎn)生具有某些色譜特性的載體材料。特別是，用于本發(fā)明的配體可具有W下末端基 團： 離子或可離子化基團，例如 -NR7rS或-NR7rSr9， 其中 R7和RS彼此獨立地為H、具有1-5個C原子的烷基， 和 r9為具有1-5個C原子的烷基 前提是，如果X=-NR7rV，則R嘴R8不能是H， -脈鹽。
[0073] 在優(yōu)選的實施方案中，要用作本發(fā)明方法中的基質(zhì)的聚合物通過與觸須狀結(jié)構(gòu)接 枝聚合來衍生，其可進而攜帶對應(yīng)的配體或通過后者被官能化。接枝優(yōu)選地根據(jù)EP0 337 144第12頁實施例8或US5453186第9頁實施例8,使用N-(2-Ξ甲基錠乙基）-丙締酷 胺進行。所用的聚合催化劑是姉（IV)離子，因為運種催化劑在基礎(chǔ)材料的表面上形成游離 基位點，單體的接枝聚合從該位點開始。
[0074] 通過設(shè)及姉鹽的終止反應(yīng)終止聚合。為此理由，（平均）鏈長可受基礎(chǔ)材料、引發(fā) 劑和單體的濃度比例的影響。而且，可W使用一致的單體或不同單體的混合物；在后一種情 況下，形成接枝共聚物。
[0075]用于制備接枝聚合物的合適的單體和關(guān)于接枝程序的進一步的細節(jié)例如公開于 W0 2007/01459UEP0337 144,特別是第12頁，實施例8和US5453186第9頁，實施例8 中。
[0076] 優(yōu)選地，所述基質(zhì)通過接枝聚合，用離子基團衍生，從而使生成的接枝到基礎(chǔ)聚合 物基質(zhì)上的鏈具有2和100之間、優(yōu)選5和60之間、特別是在10和30之間的單體單元的 長度，每個單元典型地攜帶一個離子基團。
[0077] 優(yōu)選的離子基團是帶正電荷的Ξ甲基錠乙基基團。
[0078] 所述基質(zhì)除了陰離子交換基團，還可攜帶另外的其它官能團像疏水性或親水性基 團，但在任何情況下，其具有陰離子交換基團。 陽0巧]要用于本發(fā)明的陰離子交換基質(zhì)的離子容量典型地在600和1200帕ol/g之間， 優(yōu)選地在700和1000帕ol/g之間，最優(yōu)選在800和1000帕ol/g之間。
[0080] 待用于本發(fā)明方法的合適的材料是得自MerckKGaA,Germany的Eshmuno(R)QPX 和Eshmuno(R)QPXHicap。運些樹脂包含依據(jù)公開于WO2007/014591的程序合成的聚 乙締酸珠粒，采用依據(jù)EP0337 144第12頁實施例8和US5453186第9頁實施例8的接 枝技術(shù)并產(chǎn)生攜帶帶正電荷的Ξ甲基錠乙基基團的表面聚合物結(jié)構(gòu)，使聚合物結(jié)構(gòu)接枝到 所述珠粒，其中在EshmunoQPX和EshmunoQPXHicap樹脂的情況下的電荷密度被調(diào)整至 600-1200 帕ol/g。
[0081] 為了進行本發(fā)明的方法，使樣品經(jīng)受陰離子交換色譜，從而色譜基質(zhì)是用如上所 述的陰離子基團官能化的親水性聚乙締酸。
[0082] 樣品優(yōu)選地是包含免疫球蛋白G、優(yōu)選75-99%重量的IgG的預-純化的血漿樣品。 樣品優(yōu)選地包含至少80%重量，更優(yōu)選至少85%重量，特別優(yōu)選超過90%重量，最優(yōu)選在92 和98%重量之間的免疫球蛋白G。"％重量"在運種情況下設(shè)及干燥血漿樣品的質(zhì)量。
[0083] 在將樣品施加于所述基質(zhì)之前，所述基質(zhì)可被洗涂和/或平衡。
[0084] 洗涂可W用中等酸性的抑4. 0-5. 5的緩沖液像乙酸鹽緩沖液，任選地與鹽例如 化C1 一起進行。緩沖液典型地具有200和1000mM/1之間的濃度。
[0085] 平衡用具有4和7. 4之間的抑的平衡緩沖液進行。優(yōu)選地，平衡緩沖液的抑與 樣品的pH相同。平衡緩沖液的濃度典型地在0. 005-2MoVI范圍內(nèi)，優(yōu)選地在0. 005-0. 05 Mol/1的范圍內(nèi)。
[0086] 平衡緩沖液典型地與樣品緩沖液相同。
[0087] 在用平衡緩沖液洗涂和/或平衡所述基質(zhì)之前，用具有抑超過10、優(yōu)選地為約14 的堿性水性液體處理所述基質(zhì)是可能的。運樣一種處理對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的。 從所述基質(zhì)除去潛在的雜質(zhì)是合適的。合適的液體是氨氧化鋼水溶液或氨氧化鐘水溶液。 堿性水性液體可直接用平衡緩沖液或用弱酸性水性洗涂緩沖液像乙酸緩沖液，優(yōu)選地W例 如200-1000mM/1之間濃度的乙酸鹽，從基質(zhì)除去。
[0088] 所述樣品典型地施加于在緩沖液中的色譜基質(zhì)（也稱為負載緩沖液或樣品緩沖 液）。緩沖液優(yōu)選地具有4. 0和7. 4之間的抑。合適的緩沖液是碳酸/娃酸鹽緩沖液、乙酸 緩沖液、巧樣酸鹽緩沖液、憐酸鹽緩沖液、甘氨酸緩沖液和/或2-(N-嗎嘟代）乙橫酸（ME巧 緩沖液。最優(yōu)選的是乙酸鹽緩沖液。
[0089] 所述緩沖液典型地W5和500mmol/1之間，優(yōu)選5和100mmol/1之間，最優(yōu)選5 和50mmoVI之間的濃度使用。
[0090] 樣品進料的IgG濃度通常被調(diào)整在1-50 之間。
[0091] 要加載在所述基質(zhì)上的樣品量在寬范圍內(nèi)是可變的。
[0092] 所述基質(zhì)可用極少量的樣品加載，像例如10g樣品/1升基質(zhì)體積。加載高達150 g樣品/升基質(zhì)體積也是可能的。優(yōu)選地加載超過25gパ基質(zhì)體積，最優(yōu)選25和100 之間。
[0093] 樣品的色譜純化可W結(jié)合-和-洗脫模式或優(yōu)選地W流通模式進行。在流通模式 中，祀分子基本上不結(jié)合或吸附于基質(zhì)。那意味著祀分子（基本上與溶劑前端-即負載緩沖 液的前端-一起）移動通過所述基質(zhì)并從基質(zhì)（基本上與溶劑前端一起）被回收。已經(jīng)發(fā) 現(xiàn)，當W流通模式使用依據(jù)本發(fā)明的基質(zhì)時，祀分子可典型地用相對于基質(zhì)體積的5-倍、 優(yōu)選3-倍、非常優(yōu)選2-倍體積的洗脫液，從基質(zhì)洗脫。在運種情況下，洗脫液與負載緩沖 液相同。雜質(zhì)被保留在基質(zhì)上。采用流通模式，至少80%，優(yōu)選地超過90%，最優(yōu)選超過95% 的祀分子可從基質(zhì)回收。
[0094] 已經(jīng)進一步發(fā)現(xiàn)，雜質(zhì)與基質(zhì)的結(jié)合是非常穩(wěn)定的，只要基質(zhì)用負載緩沖液洗脫。 運也提供擴大用于洗脫祀分子的負載緩沖液的體積至超過基質(zhì)的5-倍體積的可能性（如 果必要），W使祀分子可W被幾乎完全洗脫（約97%收率），同時其純度仍非常高（典型地 〉99. 5〇/〇)。
[0095]W流通模式進行的本發(fā)明的方法尤其適合于從雜質(zhì)像IgA、gM、白蛋白和絲氨酸蛋 白酶像因子XIa分離作為祀分子的免疫球蛋白G。
[0096] 但是對于分離包含IgM的產(chǎn)物或?qū)τ诜蛛xIgA、IgM和/或因子XIa也是合適的。 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當W流通模式進行色譜純化時，免疫球蛋白G基本上用溶劑前端洗脫。在洗脫 IgG后，洗脫緩沖液（其用于洗脫IgG時與負載緩沖液相同）可被改變W支持洗脫更多的第 二祀分子像IgA、IgM和因子XIa。例如第二祀分子可W是IgA和IgM的混合物。為此，洗 脫緩沖液的酸性通常增加。優(yōu)選地，對于此種應(yīng)用的洗脫緩沖液具有4和5. 5之間的抑，從 而抑在任何情況下低于負載緩沖液的抑。典型地，用來洗脫IgA、IgM和/或因子XIa的 緩沖液的抑在低