種微量元素，能夠作為生產(chǎn)復(fù)合微生物水溶性肥的原料，對能源的循環(huán)利用具有 重要意義。
[0032] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0033] 本發(fā)明提供了一種復(fù)合微生物菌劑，將不同功能的微生物進行復(fù)合，并對其組合 進行配伍優(yōu)化，混合得到的復(fù)合菌用于中草藥廢液的處理，具有以下優(yōu)點：（1)針對中草藥 廢液中的成分，采用了合理的菌種組成，大部分有害物質(zhì)都有對應(yīng)的菌株對其進行降解，有 效提高了菌劑的專一性；（2)本發(fā)明的復(fù)合菌劑通過產(chǎn)生多種酶，能夠有效的分解中草藥 廢液中的COD、BOD等物質(zhì)；(3)復(fù)合微生物菌劑分泌產(chǎn)生的物質(zhì)能夠有效抑制病原微生物 的生長，減少臭味的產(chǎn)生；(4)經(jīng)處理的中草藥廢液中含有多種活性成分，能夠促進作物生 長，防治植物病蟲害；（5)本發(fā)明中的一些微生物對重金屬有很強的鈍化作用，減少重金屬 對環(huán)境的污染。本發(fā)明專門用于中草藥廢液的處理，使用簡單、成本低廉、效果持久。
【具體實施方式】
[0034] 下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的優(yōu)選實施方式進行詳細(xì)說明。需要理解的是以下實 施例的給出僅是為了起到說明的目的，并不是用于對本發(fā)明的范圍進行限制。本領(lǐng)域的技 術(shù)人員在不背離本發(fā)明的宗旨和精神的情況下，可以對本發(fā)明進行各種修改和替換。
[0035] 本發(fā)明所用試劑和原料均為市售可得。
[0036] 實施例1
[0037] 實施例1用于說明本發(fā)明所述的復(fù)合微生物菌劑。
[0038] 所述復(fù)合微生物菌劑包括：
[0039] 枯草芽抱桿菌 VTS-2 (Bacillus subtilis)，活菌數(shù)為 I X 108_6 X 108cfu/mL ;
[0040] 巨大芽孢桿菌為VTS-I (Bacillus megatherium)，其活菌數(shù)為 I. 5X 107-5X 107cfu/mL ；
[0041 ]畢赤酵母 VTJ-6 (Pichia pastoris)，活菌數(shù)為 2X 108-4X 108cfu/mL ;
[0042] 犁頭霉 VTJ-3 (Absidia)，活菌數(shù)為 I X 106-4X 106cfu/mL。
[0043] 實施例2
[0044] 實施例2用于說明本發(fā)明所述復(fù)合微生物菌劑的制備方法。
[0045] 包括如下步驟：
[0046] 1)固體斜面培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌VTS-2 (Bacillus subtilis)、巨大芽孢 桿菌VTS-I (Bacillus megatherium)接種于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中，畢赤酵母 VTJ-6(Pichia pastoris)、毛霉（犁頭霉VTJ-3(Absidia))接種于PDA固體培養(yǎng)基中，于 28°C恒溫培養(yǎng)1天，使菌株活化；
[0047] 其中，牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方為牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，水 lOOOmL，瓊脂20g ;PDA固體培養(yǎng)基配方為土豆200g，葡萄糖20g，水lOOOmL，瓊脂20g。
[0048] 2) -級種子培養(yǎng)：將步驟1)中活化的枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌菌株接種于牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，活化的畢赤酵母、毛霉接種于PDA培養(yǎng)基中，于28°C，160rpm下培養(yǎng) 1天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度〇D_值達(dá)到0. 6時停止培養(yǎng)，即得一級種子；
[0049] 其中，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，H2O 1000 mL ; PDA培養(yǎng)基配方為土豆200g，葡萄糖20g，H201000mL。
[0050] 3)二級種子培養(yǎng)：將所得枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌一級種子液分別接種于牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，畢赤酵母、毛霉接種于PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)，于28°C，160rpm下培養(yǎng)1 天，即得二級種子液；所述牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和PDA培養(yǎng)基同步驟2)。
[0051] 4)將步驟3)中獲得的枯草芽孢桿菌種子液以5%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中， 于28°C，llOrpm，通氣量1.0 vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑 A ;發(fā)酵培養(yǎng)基配方按質(zhì)量百分比為：糖蜜4%、玉米粉0. 35%、硫酸銨0. 5%，磷酸二氫鉀 0· 05 %，硫酸鎂0· 05 %，余量為水，pH為7. 0。
[0052] 5)將步驟3)中獲得的巨大芽孢桿菌種子液以5%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中， 于28°C，160rpm，通氣量1.0 vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑B。 發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟4)。
[0053] 6)步驟3)中獲得的畢赤酵母的種子液以以5%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，于 28°C，llOrpm，通氣量0. 8vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑C。發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟4)。
[0054] 7)驟3)中獲得的毛霉的種子液以5%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，于28°C， llOrpm，通氣量0. 8vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑D。發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟4)。
[0055] 8)將步驟4)、5)、6)及步驟7)中獲得的菌劑A、菌劑B、菌劑C和菌劑D以體積比 1:1:1:1混合，即得復(fù)合微生物菌劑。
[0056] 實施例3
[0057] 實施例3用于說明本發(fā)明所述復(fù)合微生物菌劑的另一可選的制備方法。
[0058] 包括如下步驟：
[0059] 1)固體斜面培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌接種于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 中，畢赤酵母、毛霉接種于PDA固體培養(yǎng)基中，于29°C恒溫培養(yǎng)2天，使菌株活化；
[0060] 其中，牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方為牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，水 lOOOmL，瓊脂20g ;PDA固體培養(yǎng)基配方為土豆200g，葡萄糖20g，水lOOOmL，瓊脂20g。
[0061] 2) -級種子培養(yǎng)：將步驟1)中活化的枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌菌株接種于牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，活化的畢赤酵母、毛霉接種于PDA培養(yǎng)基中，于29°C，170rpm下培養(yǎng) 3天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度0D_值達(dá)到0. 8時停止培養(yǎng)，即得一級種子；
[0062] 其中，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，H2O 1000 mL ; PDA培養(yǎng)基配方為土豆200g，葡萄糖20g，H201000mL。
[0063] 3)二級種子培養(yǎng)：將所得枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌一級種子液分別接種于牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，畢赤酵母、毛霉接種于PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)，于29°C，170rpm下培養(yǎng)3 天，即得二級種子液；所述牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和PDA培養(yǎng)基同步驟2)。
[0064] 4)將步驟3)中獲得的枯草芽孢桿菌種子液以15%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基 中，于29°C，130rpm，通氣量I. 3vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌 劑A ;發(fā)酵培養(yǎng)基配方按質(zhì)量百分比為：糖蜜6%、玉米粉0. 45%、硫酸銨0. 6%，磷酸二氫 鉀0. 10 %，硫酸鎂0. 10%，余量為水，pH為7. 1。
[0065] 5)將步驟3)中獲得的巨大芽孢桿菌種子液以15%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基 中，于29°C，180rpm，通氣量I. 3vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌 劑B。發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟4)。
[0066] 6)步驟3)中獲得的畢赤酵母的種子液以以15%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中， 于29°C，130rpm，通氣量0. 9vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑C。發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟 4)〇
[0067] 7)驟3)中獲得的毛霉的種子液以10%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，于29°C， 130rpm，通氣量0. 9vvm下進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑D。發(fā)酵培養(yǎng)基同步驟4)。
[0068] 8)將步驟4)、5)、6)及步驟7)中獲得的菌劑A、菌劑B、菌劑C和菌劑D以體積比 1:2:1:3混合，即得復(fù)合微生物菌劑。
[0069] 實施例4
[0070] 實施例4用于說明本發(fā)明所述復(fù)合微生物菌劑的另一可選的制備方法。
[0071] 包括如下步驟：
[0072] 1)固體斜面培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌接種于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 中，畢赤酵母、毛霉接種于PDA固體培養(yǎng)基中，于30°C恒溫培養(yǎng)3天，使菌株活化；
[0073] 其中，牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方為牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，水 lOOOmL，瓊脂20g ;PDA固體培養(yǎng)基配方為土豆200g，葡萄糖20g，水lOOOmL，瓊脂20g。
[0074] 2) -級種子培養(yǎng)：將步驟1)中活化的枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌菌株接種于牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，活化的畢赤酵母、毛霉接種于PDA培養(yǎng)基中，于30°C，180rpm下培養(yǎng) 2天，當(dāng)液體培養(yǎng)菌密度0D_值達(dá)到0. 7時停止培養(yǎng)，即得一級種子；
[0075] 其中，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為牛肉膏