度。結(jié)果:FGH-1001對U251細(xì)胞的增殖無顯著影響。
[0036] 實施例1:
[0037]本實施例的FGH-1001對胰腺癌細(xì)胞增殖和腫瘤形成的抑制作用的分析如下：
[0038] MIF在胰腺癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌等多種實體腫瘤中表達(dá)升高。大量的 研究表明MIF的表達(dá)水平與上述腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。
[0039] 我們首先觀察了FGH-1001對胰腺癌細(xì)胞PANC-1凋亡的影響。參見圖6所示，將不同 濃度的FGH-1001與胰腺癌細(xì)胞系PANC-1細(xì)胞(5xl06)孵育不同時間后在光學(xué)顯微鏡下觀察 細(xì)胞的形態(tài)。結(jié)果顯示FGH-1001顯著促進(jìn)PANC-1細(xì)胞的凋亡。
[0040]我們進(jìn)一步觀察了FGH-1001對腫瘤細(xì)胞集落形成的影響。參見圖7所示，將不同濃 度的FGH-1001與胰腺癌細(xì)胞系PANC-1細(xì)胞（lxlO4)孵育24小時后觀察集落形成。結(jié)果顯示 FGH-1001顯著抑制PANC-1細(xì)胞集落的形成數(shù)。
[0041 ] 我們觀察了 PANC-1細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤的影響。參見圖8所示，將PANC-1細(xì)胞 (5xl06)種植于BALB/C裸鼠皮下，然后給小鼠灌胃給予不同劑量的FGH-1001 (b. i . d)，并在 不同的時間用游標(biāo)卡尺測定腫瘤大小。結(jié)果顯示FGH-1001顯著抑制PANC-1腫瘤形成，*P〈 0·05;**Ρ〈0·01〇
[0042] 實施例2:
[0043] 本實施例的FGH-1001對LPS誘導(dǎo)的炎癥的抑制作用。
[0044] 研究表明，MIF通過抑制糖皮質(zhì)激素等途徑而導(dǎo)致巨噬細(xì)胞向Ml (炎癥性)方向極 化，從而參與炎癥過程。本實驗觀察了FGH-1001對LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的影響。將六周齡的 雄性C57小鼠隨機分成兩組，每組10只，分別灌胃給予溶劑(對照組)或FGH-1001(50mg/kg， 13.1(1.)三天后給動物腹腔注射10(^11^3(1〇1^/ 1111)，然后在苯巴比妥深度麻醉的情況下 收集腹腔巨噬細(xì)胞，用懸浮芯片技術(shù)(Luminex)檢測細(xì)胞因子的水平并用Real-time PCR技 術(shù)檢測M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的基因表達(dá)水平。結(jié)果顯示，F(xiàn)GH-1001顯著抑制炎性細(xì)胞因子的 產(chǎn)生(如圖9所示）。
[0045] 實施例3:
[0046]本實施例的FGH-1001對缺血性中風(fēng)后腦組織損傷的抑制作用。
[0047] 研究表明，MIF在動脈粥樣硬化患者的病灶部位高表達(dá)，且MIF的基因沉默顯著抑 制中風(fēng)后腦組織損傷。我們的實驗研究了 FGH-1001對大鼠中風(fēng)模型(MCA0)腦組織損傷的影 響。將八周齡的雄性大鼠隨機分成兩組，每組10只，分別構(gòu)建大腦中動脈阻塞(MCA0)的中風(fēng) 模型。手術(shù)后灌胃給予溶劑(對照組)或FGH-1001(50mg/kg，b.i.d.)三周后斷頭取腦，冰凍 切片（10M1)，用GFAP抗體進(jìn)行免疫組化染色(A)，計算損傷面積，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析(B)。結(jié)果 顯示，F(xiàn)GH-1001顯著抑制MCA0大鼠腦組織的損傷(如圖10所示）。
[0048] 實施例4:
[0049] 鑒于FGH-1001對MIF的互變異構(gòu)酶活性的顯著性抑制作用以及對MIF介導(dǎo)的細(xì)胞 內(nèi)ERK1/2和AKT的活性以及對細(xì)胞增殖的抑制作用，我們對該化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，以期獲 得一系列作用和代謝動力學(xué)參數(shù)相似或更優(yōu)的化合物。通過結(jié)構(gòu)改造，我們發(fā)現(xiàn)了一系列 MIF的選擇性抑制劑。
[0050] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1002為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0052] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1003為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0054] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1004為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
〇
[0056] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1005為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0058] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1006為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
0
[0060] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1007為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
.C
[0062] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1008為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
π
[0064] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-1009為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0066] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-10010為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
.0..
[0068] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-10011為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0070] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-10012為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0072] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-10013為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0074] 優(yōu)選的，F(xiàn)GH-10014為FGH-1001的衍生物，其分子結(jié)構(gòu)如下：
[0076]以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技 術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修 改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種巨噬細(xì)胞移動抑制因子三環(huán)小分子抑制劑，其特征在于，所述巨噬細(xì)胞移動抑 制因子三環(huán)小分子抑制劑分子結(jié)構(gòu)式如下：其中，R\R2、R3和R4獨立選自于包含如下基團的組合:氫、鹵素、C1-C3烷基、雜烷基、芳香 基、雜芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)和鹵代烷基;R5、R6和R8獨立選自于包含如下基團的組合:硫基、 氧基、氮基、雜烷基、芳香基、雜芳烷基;R 7獨立選自于包含如下基團的組合:羥基、鹵素、雜 烷基、芳香基、芳氧基、雜芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)和鹵代烷基。2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的巨噬細(xì)胞移動抑制因子三環(huán)小分子抑制劑，其特征在于:所述 巨噬細(xì)胞移動抑制因子三環(huán)小分子抑制劑為FGH-IOOl，其分子式如下：3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的巨噬細(xì)胞移動抑制因子三環(huán)小分子抑制劑，用于制備抑制 MIF介導(dǎo)的疾病藥物的應(yīng)用。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的巨噬細(xì)胞移動抑制因子三環(huán)小分子抑制劑，用于制備動脈粥 樣硬化癥、腎小球腎炎、Crohn病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腫瘤、遲發(fā)性超敏反 應(yīng)、移植排斥反應(yīng)、神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、中風(fēng)、脊髓損傷在內(nèi)的藥物的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)三環(huán)小分子抑制劑，其分子結(jié)構(gòu)式如下：其中，R1、R2、R3和R4獨立選自于包含如下基團的組合：氫、鹵素、C1-C3烷基、雜烷基、芳香基、雜芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)和鹵代烷基；R5、R6和R8獨立選自于包含如下基團的組合：硫基、氧基、氮基、雜烷基、芳香基、雜芳烷基；R7獨立選自于包含如下基團的組合：羥基、鹵素、雜烷基、芳香基、芳氧基、雜芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)和鹵代烷基等，該MIF三環(huán)小分子抑制劑可用于治療由MIF表達(dá)或活性升高所致的各種疾病。
【IPC分類】A61K31/4439, A61P35/00, A61P37/08, A61K31/4709, A61K31/497, A61P13/12, C07D409/14, C07D401/14, A61P37/02, A61K31/4196, A61P3/10, C07D413/14, C07D409/04, A61P29/00, A61P9/10, A61P25/28, C07D249/12, C07D403/04, C07D405/14, A61P19/02
【公開號】CN105481834
【申請?zhí)枴緾N201610018586
【發(fā)明人】范國煌
【申請人】范國煌
【公開日】2016年4月13日
【申請日】2016年1月12日