mmol)，室溫攪 拌1小時。反應結束，減壓濃縮得到粗品，經(jīng)Combi-flash柱層析純化得到黃色固體化合物 23-d(50mg)，直接用于下一步反應。純度：42%。MSm/z(ESI):359.0[M+H] +。
[0330] 步驟 4 :向化合物 23_d (37mg，0· lmmol),化合物 3_a (33mg，0· lmmol)的 6ml 二氧六 環(huán)溶液中加入三（二亞芐基丙酮）二鈀（1〇1^，0.01臟〇1)，4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基 氧雜蒽（12mg，0. 02mmol)，碳酸銫（70mg，0. 21mmol)，160°C微波攪拌100分鐘。反應結束， 冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品，經(jīng)制備液相分離純化得化合物J-23 (16mg)，純 度：18% (UV254)。MS m/z(ESI):527.3[M+H] +。
[0331] 測試例1 :對野生型EGFR和突變型EGFR激酶的活性抑制測試
[0332] 以下z' -lyte測試方法中所用試劑均購自Invitrogen。
[0333] 利用 z' -lyte 方法測定對 T790M/L858R 雙突變型 EGFR 激酶（Invitrogen， PV4879)、野生型 EGFR 激酶（Invitrogen，PV3872)的抑制活性。
[0334] 10μ L T790M/L858R激酶反應體系中各組分的工作濃度為：25μΜ ΑΤΡ，0. lng/μ L T790M/L858R激酶，2μΜ Tyr04底物（Invitrogen，PV3193)。加入本發(fā)明上述實施例制備 的化合物（即待測物）后DMS0的濃度為2vol %。
[0335] 10 μ L野生型EGFR (EGFR WT)激酶反應體系中各組分的工作濃度為：10 μ Μ ATP， 0.8ng/yL野生型 EGFR激酶，2μΜ Tyr04 底物（Invitrogen，PV3193)。加入待測物后 DMSO 的濃度為2vol%。
[0336] 室溫溶解10mM的藥物儲存液，經(jīng)8vol % DMS0溶液梯度稀釋至終濃度 4-0. 002 μ M。每孔中加入2. 5 μ L的待測物溶液以及5 μ L經(jīng)反應緩沖液稀釋的T790M/L858R 激酶（或野生型EGFR激酶）與Tyr04底物的混合物，再加入2. 5 μ L的ΑΤΡ啟動反應。其 中C1孔用反應緩沖液代替ATP，C2孔不加入任何藥物，C3孔按說明書描述加入磷酸化的底 物。在25度搖床避光反應60分鐘后。加入5μL Development Reagent B(Invitrogen， 用TR-FRET稀釋緩沖液進行稀釋），于室溫搖床反應60分鐘。在VictorX5熒光酶標儀 (PerkinElmer)上讀板，測定激發(fā)波長為405nm、發(fā)射波長為450nm和520nm的光吸收（例 如，C3 52Qnni表示C3孔在520nm的讀值）。
[0337] 抑制率計算方法（參照Invitrogen，PV3193的說明書）如下：
[0338] 1、ER = Coumarin Emission(450nm)/Fluorescein Emission(520nm)
[0339] 2、磷酸化率=(l-((ERXC3520nni-C3450nniV((Cl 450nni-C3450J+ERX(C3520nni-Cl520n n)))) X100%
[0340] 3、抑制率（IR) = (1-(測試化合物的磷酸化率V(C2的磷酸化率））X 100%
[0341] 用XLFIT5. 0軟件（英國IDBS公司）擬合計算半數(shù)抑制濃度IC5。。
[0342] 表1酶抑制活性與選擇抑制活性
[0343]
[0344]
[0345] 由表1可知，與陽性對照物BIBW2992(阿法替尼）和AZD-9291 (制備方法參見 TO2013014448A1，結構如下）相比，本發(fā)明的實施例化合物對EGFR突變型酶（T790M/L858R) 表現(xiàn)出較強的抑制活性，而對EGFR野生型酶抑制活性較弱，因此本發(fā)明的化合物對EGFR突 變型酶具有較好的選擇抑制活性。
[0347] 測試例 2 :EGFR T790M 抑制劑對 A431 (EGFR 野生型）及 H1975 (EGFR T790M 突變） 細胞EGFR磷酸化水平的抑制（ELISA法測定）
[0348] 以下方法中的試劑、溶液的配置方法以及細胞處理和裂解液制備步驟、ELISA檢測 步驟均按照R&D DYC3570, R&D DYC1095E以及R&D DYC1095BE的說明書進行操作。
[0349] -、試劑和溶液
[0350] 細胞裂解緩沖液：1% (W/V)NP-40,20mM Tris(pH8. 0)，137mM NaCl，10% (V/V)甘 油 glycerol, ImM NaV03,2mM EDTA。
[0351] 細胞裂解液：細胞裂解緩沖液+10 μ g/mL抑肽酶（Aprotinin) (Sigma)，lOug/mL亮 抑蛋白肽酶（Leupeptin) (Sigma),現(xiàn)配現(xiàn)用。
[0352] lxPBS 緩沖液：NaCl:0. 137M，KC1:0. 0027M，Na2P04-12H20:0. 01M，ΚΗ2Ρ04:0· 0015M， ρΗ7· 4。
[0353] 洗滌緩沖液：含有0· 05% (V/V) Tween-20的PBS緩沖液。
[0354] 檢測抗體稀釋液：20mM Tris，137mM NaCl，0.05% (V/V)Tween-20,0. 1% (W/V) BSA，ρΗ7· 2-7. 4。
[0355] 封閉液：含有1 % (W/V) BSA的PBS緩沖液。
[0356] ELISA 試劑盒：R&D DYC3570, R&D DYC1095E 和 R&D DYC1095BE。
[0357] 二、H1975 細胞
[0358] 2. 1 :H1975細胞處理和裂解液制備
[0359] (1)將H1975細胞（購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫）以1 X 104/ 孔的密度種到96孔板中，每孔90微升含10% (V/V)FBS的1640培養(yǎng)基，37°C、5% (V/V)C02 培養(yǎng)過夜。
[0360] (2)將待測化合物按照MTT實驗中藥物稀釋方法稀釋，將10 μ L稀釋后的化合物 或稀釋后的DMSO加入到細胞培板的對應孔中，DMSO終濃度為0. 5% (V/V)，37°C、5% (V/V) C02培養(yǎng)1小時。以純DMS0處理的細胞培養(yǎng)體系作為細胞對照。
[0361] (3)吸掉培養(yǎng)基后加入100 μ L細胞裂解液，封板模封置于_80°C冰箱中過夜。以 細胞裂解緩沖液作為空白對照。
[0362] 2. 2 :ELISA 檢測步驟
[0363] 按照R&D DYC1095E或R&D DYC1095BE給定說明書進行操作。
[0364] (1)R&D捕獲抗體（(DYC1095BE或DYC1095E))用PBS1:180稀釋，稀釋好的抗體 100 μ L/ 孔加入 ELISA 反應板（Corning costar42592)，25°C搖床包被過夜；
[0365] (2) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0366] (3)加入300 μ L封閉液，25°C搖床孵育2小時；
[0367] (4) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0368] (5)加入40 μ L細胞裂解緩沖液和60 μ L細胞裂解液，25°C搖床孵育2小時；
[0369] (6) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0370] (7)檢測抗體用檢測抗體稀釋液以試劑盒說明規(guī)定比例稀釋，每孔加入100μ L， 25°C搖床避光孵育1小時；
[0371] (8) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0372] (9)將ΤΜΒ底物（R&D DY999)中的Α試劑和Β試劑以1:1進行混合，每孔100 μ L， 25 °C搖床避光孵育20分鐘；
[0373] (10) 2N H2S04 每孔加入 50 μ L ;
[0374] (11)用酶標儀讀板（Thermo Multiskan Κ3)分別測定細胞對照、空白對照以及藥 物處理情況下的0D450值和0D570值，并用相同孔的0D450值減去相應0D570值分別得到 〇D細胞、0D空白和0D纖處理。
[0375] 2. 3數(shù)據(jù)分析
[0376] 抑制率（％ ) = 100% X (0D細胞-0D藥物處理）/(0D細胞-0D空白）
[0377] 2. 4將計算得到的抑制率用XLFIT5. 0軟件計算出IC5。值，參見表2。
[0378] 三、A431 細胞
[0379] 3. 1A431細胞的處理和測試步驟
[0380] (1)將A431細胞（購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫）以1 X 104/孔 的密度種到96孔板中，每孔90微升含有10% FBS的DMEM培養(yǎng)基37°C、5% C02培養(yǎng)過夜。
[0381] (2)將A431細胞培養(yǎng)基更換為90微升無血清DMEM培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)過夜。
[0382] (3)將待測化合物按照MTT實驗中藥物稀釋方法稀釋，將10 μ L稀釋后的化合物或 稀釋后的DMS0加入到細胞培板的對應孔中，DMS0終濃度為0. 5%，37°C、5% C02培養(yǎng)1小 時。然后在除細胞對照孔外的每孔中加入10微升2 μ g/L的EGF，在細胞孔加入10微升無 血清DMEM培養(yǎng)45分鐘；以不加入EGF與藥物處理的細胞作為細胞對照，以不加入藥物的只 加入EGF處理的細胞作為EGF對照。
[0383] (4)吸掉培養(yǎng)基后加入100 μ L細胞裂解液，封板模封置于-80°C冰箱中過夜。
[0384] 3.2ELISA 檢測步驟
[0385] 參照R&D DYC3570E說明書進行操作。
[0386] (1)R&D捕獲抗體（DYC3570E)用PBS1:180稀釋，稀釋好的抗體100μL7孔加入 ELISA 反應板（Corning costar42592)，25°C搖床包被過夜；
[0387] (2) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0388] (3)加入200 μ L封閉液，25°C搖床孵育2小時；
[0389] (4) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0390] (5)加入40 μ L細胞裂解緩沖液和60 μ L細胞裂解液，25°C搖床孵育2小時；
[0391] (6) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0392] (7)檢測抗體用檢測抗體稀釋液以試劑盒說明規(guī)定比例稀釋，每孔加入100μ L， 25°C搖床避光孵育1小時；
[0393] (8) 360 μ L洗滌緩沖液洗3次；
[0394] (9)將ΤΜΒ底物（R&D DY999)中的Α試劑和Β試劑以1:1進行混合，每孔100 μ L， 25 °C搖床避光孵育20分鐘；
[0395] (10) 2N H2S04 每孔加入 50 μ L ;
[0396] (11)用酶標儀讀板（Thermo Multiskan Κ3)分別測定細胞對照、空白對照以及藥 物處理情況下的0D450值和0D570值，并用相同孔的0D450值減去相應0D570值分別得到 0DEGF、0D藥物、0D細胞。
[0397] 3. 3數(shù)據(jù)分析
[0398] 抑制率（％ ) = 100% X (0DEGF-0D藥物V(0DEGF-0D細胞）
[0399] 3. 4將計算得到的抑制率用XLFIT5. 0軟件計算出IC5。值，參見表2。
[0400] 表2細胞活性ELISA法測定結果
[0401]
[0402] 由表2可知，與陽性對照物BIBW2992相比，本發(fā)明實施例的化合物對EGFR突變型 細胞具有較好的選擇抑制活性。
[0403] 測試例3 :MTT (3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴鹽）方法檢測細胞 抑制活性
[0404] MTT測試方法步驟采用本領域技術人員熟知的方法進行，方法中所用試劑均可市 購得到。
[0405] 首先，移除培養(yǎng)基并加入lmLO. 25%的胰酶/EDTA(Gibco,25200-056)。洗一次后， 再加入1. 5mL胰酶/EDTA消化貼壁細胞，至細胞分離，然后加入3. 5mL培養(yǎng)基終止消化。將 消化完的細胞懸浮液移至15mL離心管，1300rpm離心3分鐘后棄上清，并用新鮮的培養(yǎng)基重 懸細胞。然后細胞計數(shù)，并稀釋細胞至以下濃度：H1975細胞每毫升2. 78萬，A431細胞和 NIH3T3細胞（購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫）每毫升3. 33萬。將細胞種 入96孔板（BD3072)，每孔90 μ L，培養(yǎng)過夜。
[0406] Α431 細胞培養(yǎng)基為：10% FBS(Gibco, 10099-141) DMEM(Hyclone SH30243. 01Β);
[0407] NIH3T3 細胞培養(yǎng)基為：10 % FBS(Gibco,10099-141)DMEM(Hyclone SH30243. 01B)；
[0408] H1975 細胞培養(yǎng)基為：10 % FBS(Gibco,10099-141)RPMI-1640(Hyclone SH30809. 01B)；
[0409] 取20 μ LlOmM待測化合物，按照如下濃度梯度（2000,666. 67, 222. 22, 74. 07， 24. 69,8. 23, 2. 74,0.91 μ M)稀釋200X藥品，再加入無血清培養(yǎng)基（終濃度為：100,33. 33， 11. 11，3. 704,1. 235,0. 412,0. 137,0.046 μ M)，并每孔加入10ul藥品到細胞培養(yǎng)板內其中 DMS0終濃度為0. 5%。
[0410] 加藥后將細胞放入培養(yǎng)箱，培養(yǎng)72小時后，每孔加入10 μ L的5mg/ml的 MTT(Sigma，M5655)溶液，然后將96孔板放入37°C 5% C02培養(yǎng)箱孵育4小時。
[0411] 再在2000rpm，5min的條件下離心平板，移除上清后，每孔加入150μ L DMS0,并在 搖床中震蕩平板至所有結晶紫溶解。最后使用酶標儀測定492nm光吸收，使用XLFIT5. 0軟 件（英國IDBS公司）計算IC50。
[0412] 表3化合物對細胞生長的抑制活性和選擇性
[0413]
[0414] 由表3可知，與陽性對照物BIBW2992相比，本發(fā)明實施例化合物對EGFR突變型細 胞（H1975細胞）表現(xiàn)出較強的抑制活性，而對EGFR野生型細胞（A431細胞）表現(xiàn)出較弱 抑制活性，因此本發(fā)明的化合物對EGFR突變型細胞具有較好的選擇抑制活性。
[0415] 表4化合物對NIH3T3細胞的毒性測試結果

[0417] 由表4可知，與陽性對照物BIBW2992相比，本發(fā)明實施例化合物對NIH3T3細胞具 有較高的IC 5。值，因此顯示出較小的毒性。
[0418] 從體外激酶活性抑制、細胞內EGFR磷酸化水平抑制、細胞生長抑制實驗顯示，在 納摩爾濃度下，本發(fā)明實施例化合物對突變型EGFR酶活性、EGFR磷酸化水平、細胞增殖表 現(xiàn)出較強的抑制活性，而對野生型EGFR酶活性、EGFR磷酸化水平、細胞增殖表現(xiàn)出較弱抑 制活性，因此本發(fā)明化合物對EGFR突變株細胞具有較好的選擇抑制活性。
[0419] 而且，細胞毒性實驗中對NIH-3T3細胞有極弱的抑制作用，故表現(xiàn)出較低的細胞 毒性。
[0420] 因此，此類化合物對T790M突變的EGFR有較好的選擇抑制活性且細胞毒性低，是 第二代EGFR-TKI的理想替代物。同時本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出良好的生物利用度。
[0421] 在本發(fā)明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨 引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內容之后，本領域技術人員可 以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范 圍。
【主權項】
1. 一種式（I)所示的化合物，或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥：式中， Z1J2各自獨立地為N或CR。；其中，R。選自下組：氫、鹵素、C1 i。烷基、鹵代的C1 i。烷基； Rp R2各自獨立地為氧、鹵素、C1 i。烷基、鹵代的C1 i。烷基、C1 i。烷氧基、C3 8環(huán)烷氧基； R;?為氫*、鹵素、C2 i。烯基、C1 i。烷基、鹵代的C1 i。烷基、C1 i。烷氧基、C3 8環(huán)烷氧基、取代 或未取代的C3 i。環(huán)烷基、取代或未取代的C3 i。雜環(huán)基、取代或未取代的C6 i。芳環(huán)，取代或未 取代的C4 i。環(huán)烯基； 化選自下組：R5為氫、羥基、CN、NO2、鹵素、C1 i。烷基、鹵代的C1 i。烷基、C1 i。烷氧基、C3 i。環(huán)烷基、C3 s 環(huán)烷氧基、-CON(C1 1(]烷基）2、-NC (0) C1 1(]烷基、-C (0) OC1 1(]烷基、-OC (0) C1 1(]烷基、-COC1 10 烷基、-CO-苯基、-SO2C1 1Q 烷基、-SO2-苯基、-S (0) C1 1Q 烷基、-S (0)-苯基、-N (C1 1Q 烷基）2 ; 其中，所述的苯基為未取代的或被1-3個選自下組的取代基所取代：鹵素、C1 i。烷基； R6、R7各自獨立地為氫、C1 i。烷基、取代或未取代的C6 i。芳基； 其中，所述的"取代"是指環(huán)原子上的1至6個氫原子被選自下組的取代基所取代：羥 基、CN、N02、鹵素、C1 1Q 烷基、鹵代的 C1 1Q 烷基、-CON(C1 1Q 烷基 L-C(O)OC1 1Q 烷基、-OC(O) C1 1(]烷基、-COC1 1Q 烷基、-CO-苯基、-SO2C1 i。烷基、-SO2-苯基、-S (0) C1 1Q 烷基、-S (〇)-苯 基、-N(C1 i。烷基）2 ;其中，所述的苯基為未取代的或被1-3個選自下組的取代基所取代：鹵 素、C1 10烷基。2. 如權利要求1所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥，其特征在于，R4選自下組：3. 如權利要求1所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥，其特征在于，R3為甲基、乙基、丙基、異丙基、一氟乙基、二氟甲基、三氟甲基、 環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、取代或未取代的C 3 i。雜環(huán)基、取代或未取代的苯基或取代 或未取代的C48環(huán)烯基。4. 如權利要求1所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥，其特征在于，所述取代或未取代的C 3 i。雜環(huán)基選自下組：其中，Z11 為 CR15 或 N ;Z21 為 CR26 或 N ;Z31 為 CR37 或 N ;Z41 為 CR44 或 N ;ηι 為 1、2 或 3 ;n2 為1或2 ; Rl2、Rl3、Rl4、尺15、R22、R23、R24、尺25、R26、R3I、R32、R33、R34、尺35、R36、R37、R42、R43、R44、尺51、R52、 R53、R54、R61各自獨立地為氫、羥基、CN、NO2、鹵素、鹵代的C 1 i。烷基、C1 i。烷基、-CON(C1 i。烷 基）2、-N(C1 i。烷基）2、-C (0) OC1 i。烷基、-OC (0) C1 i。烷基、-COC1 i。烷基、-CO-苯基、-SO2C1 1Q 烷基、-SO2-苯基、-S (0) C1 1Q烷基、-S (0)-苯基；所述的烷基、苯基為未取代的或被1-3個選 自下組的取代基所取代：氟、氯、甲基； Rn、R21、R41各自獨立地為氫、鹵代的C1 i。烷基、C1 i。烷基、-COC1 i。烷基、-CO-苯 基、-SO2C1 i。烷基、-SO2-苯基；其中，所述的苯基為未取代的或被1-3個選自下組的取代基 所取代：氟、氯、甲基。5.如權利要求1所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥，其特征在于，所述式（I)化合物為式（II)、式（III)、式（IV)、式（V)、式（VI)、 式（VII)、式（VIII)、或式（IX)所示的化合物 ：式中，Rn、R12、R13、R14Z11如權利要求4所定義；R。、Ri、R 2、R4如權利要求1所定義；式中，R21、R22、R 23、R24、R25、Z21如權利要求4所定義；R。、&、R 2、R4如權利要求1所定義；式中，R31、R32、R33、R34、R 35、R36、Z31如權利要求4所定義；R。、Rp R2、R4如權利要求1所定 義；式中，R41、R42、R43、Z41如權利要求4所定義；R。、Ri、R 2、R4如權利要求1所定義；式中，R51、R52、R 53、R54如權利要求4所定義；R。、R2、R4如權利要求1所定義；式中，R61、ηι、n 2如權利要求4所定義；R。、Rp R2、R4如權利要求1所定義；式中，R41、R42、R43、Z41如權利要求4所定義；R。、R 2、R4如權利要求1所定義；式中，R51、R52、R53、R54如權利要求4所定義；R。、Ri、R 2、R4如權利要求1所定義。6.如權利要求1所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構 體、或其前藥，其特征在于，所述式（I)化合物選自下組：7. -種藥物組合物，所述組合物包括權利要求1至6中任一項所述的化合物、或其藥學 上可接受的鹽、或其溶劑化物、或其立體異構體、或其前藥；以及藥學可接受的載體。8. 如權利要求1至6中任一項所述的化合物、或其藥學上可接受的鹽、或其溶劑化物、 或其立體異構體、或其前藥在（i)制備調控EGFR酪氨酸激酶活性的藥物或者（ii)制備預 防和/或治療EGFR相關疾病的藥物中的應用。9. 如權利要求8所述的應用，其特征在于，所述的EGFR相關疾病選自：癌癥、糖尿病、 免疫系統(tǒng)疾病、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病或使用EGFR調節(jié)劑治療期間具有獲得性耐藥 性的疾病。10. 如權利要求9所述的應用，其特征在于，所述獲得性耐藥性的疾病是由EGFR外顯子 20編碼的T790突變所引起的疾病、或者包含EGFR外顯子20編碼的T790突變所引起的疾 病。11. 一種藥用組合物，所述藥用組合物包括：權利要求1-6中任一項所述的化合物、或 其藥學上可接受的鹽、或其立體異構體、或其溶劑化物、或其前藥；以及其它藥物，所述其它 藥物為選自下組藥物中的一種或多種：吉非替尼、厄洛替尼、?？颂婺?、拉帕替尼、XL647、 NVP-AEE-788、ARRY-334543、EKB-569、BIBW2992、HKI272、BMS-690514、CI-1033、凡德他尼、 PR)0299804、WZ4002、西妥昔單抗、曲妥珠單抗、帕尼突單抗、馬妥珠單抗、尼妥珠單抗、扎魯 木單抗、帕妥珠單抗、MDX-214、CDX-110、頂C-11F8、Zemab、Her2 疫苗 PX 1041、HSP90 抑制 劑、CNF2024、坦螺旋霉素、阿螺旋霉素、IPI-504、SNX-5422、NVP-AUY922。
【專利摘要】本發(fā)明涉及氮雜雙環(huán)衍生物、其制法與醫(yī)藥上的用途。具體地，本發(fā)明公開了式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、溶劑化合物或前藥，及其制備方法，及其在EGFR抑制劑方面的應用，式中各基團的定義詳見說明書。
【IPC分類】A61P37/02, A61K31/53, C07D519/00, A61P35/00, A61P3/10, A61P9/00, C07D487/04, A61P25/28
【公開號】CN105524068
【申請?zhí)枴緾N201410520700
【發(fā)明人】金云舟, 卜平, 何琦, 蘭炯, 周福生, 張亮, 何向宇
【申請人】上海海雁醫(yī)藥科技有限公司, 揚子江藥業(yè)集團有限公司
【公開日】2016年4月27日
【申請日】2014年9月30日
【公告號】WO2016050165A1