一種從金銀花露殘液中提取和分離綠原酸與木犀草苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工技術(shù)領(lǐng)域，涉及生物活性成分的提取分離工藝，特別提供了一種利用大孔樹脂同時(shí)提取和分離金銀花露生產(chǎn)殘液中綠原酸與木犀草苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]金銀花(Flοs1nicerae)為忍冬科(CaprifoIiaceae)忍冬屬(Lonicera)植物忍冬(Lonicera japonica thunb)及同屬多種植物的干燥花蕾，是一種“藥食同源”的綠色天然產(chǎn)物，為中醫(yī)常用藥，具有清熱解毒、涼風(fēng)散熱、抗病毒、保肝利膽的功能。
[0003]金銀花中主要含揮發(fā)油類、綠原酸類、黃酮類、三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜類及無機(jī)元素。其中黃酮類化合物包括木犀草素-3-0-a-D-葡萄糖苷、木犀草素-7-0-13_D-半乳糖苷、槲皮素-7_0-13-D-葡萄糖苷、金絲桃苷、忍冬苷、5-羥基-3' ,47，7_三甲氧基黃酮和紫堇黃酮等。早期研究認(rèn)為綠原酸是金銀花的主要活性成分之一，其含量被作為評(píng)價(jià)金銀花藥材品質(zhì)優(yōu)劣的指標(biāo)。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物也是金銀花有效成分之一，其含量也應(yīng)成為金銀花質(zhì)量的評(píng)價(jià)指標(biāo)。
[0004]綠原酸被認(rèn)為是眾多藥材和中成藥抗菌解毒、消炎利膽的主要有效成分，通常被作為定性甚至定量的指標(biāo)。據(jù)報(bào)道，綠原酸具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等主要生物活性，是保健食品、藥品、化妝品等工業(yè)的重要原料，20%綠原酸含量金銀花提取物價(jià)格連續(xù)幾年都在每噸15萬元左右。金銀花黃酮與抗菌活性有關(guān)，不僅能止咳祛痰、抗炎、抗菌、抗病毒，還具有優(yōu)良的抗氧化、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血糖血脂、自由基清除功能以及調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)的作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。
[0005]目前，分別針對(duì)金銀花中綠原酸和黃酮類化合物的提取分離研究很多。關(guān)于如何從金銀花露生產(chǎn)殘液中同時(shí)提取主要成分綠原酸和黃酮化合物的報(bào)道幾乎沒有，這在很大程度上制約了金銀花綜合利用和深加工產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。
[0006]劉磊等人(中國(guó)現(xiàn)代中藥，2008，10(5):24-25)采用水提醇沉和大孔樹脂純化金銀花中的綠原酸，綠原酸的含量能達(dá)20%以上。
[0007]范遠(yuǎn)景等人(安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38(24): 13052-13053，13057)利用大孔樹脂Dl OI純化金銀花綠原酸，純度達(dá)到58.3%。
[0008]王雪梅等人(重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué))，2011，35 (3): 47-50)通過正交試驗(yàn)確定了水提法提取金銀花綠原酸的最佳條件，綠原酸提取率達(dá)90%。
[0009]丁利君等人(食品科學(xué)，2002，23(2):62-66)證實(shí)超聲波法提取金銀花黃酮效果最好，60倍40%乙醇浸泡20h，超聲提取45min，黃酮浸出量16.91 %。
[0010]李榮等人(安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，41(4):410-412)通過正交設(shè)計(jì)研究表明金銀花總黃酮最佳提取工藝為12倍90%乙醇提取3次，每次Ih，總黃酮得率12.26%。
[0011]徐清萍等人(食品工程，2008，4:35-37)采用常溫乙醇浸提法提取金銀花黃酮，生藥總黃酮提取率達(dá)到13.88%，利用大孔樹脂分離純化得到總黃酮含量最高為70g/100g。
[0012]劉澤峰(化學(xué)工程與裝備，2009，8: 23-25)采用響應(yīng)面法表明金銀花黃酮提取工藝的最佳條件為:74%乙醇，提取2h，液料比14.6(mL/g)，提取3次，黃酮含量9.32%。
[0013]陳福明等于2005年在公開號(hào)CN1746149A，名稱為“一種由金銀花粗提物制備高純度綠原酸的方法”中以金銀花粗提物為原料，采用醇沉、逆流萃取、濃縮、柱析、結(jié)晶干燥得到綠原酸含量50?92%的產(chǎn)品。
[0014]陳旭良于2005年在公開號(hào)CN 1687009A，名稱為“一種高效提取金銀花有效成分的新方法”中采用乙醇和微波作用巧妙結(jié)合提高金銀花有效成分收率。
[0015]張現(xiàn)濤等于2005年在公開號(hào)CN 1730015A，名稱為“金銀花提取物及其制備方法和應(yīng)用”中采用水提、大孔樹脂吸附、洗脫、乙酸乙酯萃取等步驟得到金銀花提取物中綠原酸的重量百分含量25%以上。
[0016]李雄輝等于2009年在公開號(hào)CN 101602668A，名稱為“一種綠原酸提取的方法”中將大孔樹脂富集、乙酸乙酯萃取、混合溶劑分相法相結(jié)合得到純度較高的綠原酸產(chǎn)品。
[0017]張彤等于2009年在公開號(hào)CN 101837039A，名稱為“一種不含綠原酸的金銀花提取物及制備方法”中采用醇浸泡、大孔樹脂吸附、洗脫等步驟去除金銀花中綠原酸，得到木犀草苷含量達(dá)40.0%以上。
[0018]張彤等于2009年在公開號(hào)CN 101838200A，名稱為“一種從金銀花中提取分離綠原酸的方法”中通過醇提、打孔樹脂富集、萃取和重結(jié)晶得到純度98%以上的綠原酸產(chǎn)品。
[0019]羅亞東等于2010年在公開號(hào)CN 102001947A，名稱為“一種金銀花綠原酸的制備方法”中以金銀花及其枝葉為原料，采用三相萃取方法，選擇性地直接富集和分離純化得到綠原酸初產(chǎn)品，后經(jīng)過脫色、結(jié)晶和干燥得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%綠原酸產(chǎn)品。
[0020]趙勇彪等于2011年在公開號(hào)CN102285885A，名稱為“從金銀花中快速高效提取綠原酸的方法”中采用取液壓濾、吸附洗脫、納濾濃縮等步驟有效提高綠原酸提取效率和純度。
[0021]這些研究均只限于從金銀花中提取綠原酸或者黃酮化合物，沒有對(duì)從金銀花資源進(jìn)行合理科學(xué)的綜合開發(fā)和利用;這些技術(shù)或采用大量有機(jī)溶劑，或采用萃取等技術(shù)，也使得生產(chǎn)工藝更為復(fù)雜，生產(chǎn)成本高，不利于產(chǎn)業(yè)化。
[0022]現(xiàn)階段，人們開始關(guān)注金銀花資源的綜合利用和深加工開發(fā)高附加值產(chǎn)品，但仍存在頗多不足之處。
[0023]張樹軍等于2010年在公開號(hào)CN 101985421A，名稱為“一種從金銀花中同時(shí)制備綠原酸和木犀草苷的方法”中通過DlOl型大孔樹脂富集、硅膠柱、聚酰胺柱分離純化和重結(jié)晶得到純度大于95 %的綠原酸和木犀草苷;該方法工藝復(fù)雜，操作繁瑣，工業(yè)化成本高。
[0024]楊俊等于2010年在公開號(hào)CN 101941908A，名稱為“一種從金銀花露加工殘液中制備及半合成綠原酸的方法”中采用大孔樹脂分離、酸水解、離子交換柱分離、半合成和重結(jié)晶等步驟得到純度大于99%的綠原酸，充分利用了咖啡?？崴犷愇镔|(zhì)，但在金銀花有效成分的充分利用方面還不足，同時(shí)操作繁瑣，生產(chǎn)成本高。
[0025]李錦宇等于2011年在公開號(hào)CN 102327312A，名稱為“一種從金銀花葉莖藤中提取有效成份的方法”中采用熱水超聲提取，經(jīng)減壓濃縮、水復(fù)溶、乙醇沉淀、淋洗、濃縮、真空干燥工序得粗多糖;采用乙醇超聲提取，用石油醚脫色，乙酸乙酯萃取，大孔樹脂吸附，濃縮和干燥得綠原酸粗品，再經(jīng)乙酸乙酯萃取，分相劑分相、低溫放置、真空干燥工序得綠原酸產(chǎn)品；采用乙酸乙酯萃取得到粗黃酮，再經(jīng)濃縮、上柱吸附、乙醇洗脫、濃縮、干燥工序得黃酮產(chǎn)品。該法工藝復(fù)雜，引入大量有機(jī)溶劑脫色萃取，不利于商業(yè)化生產(chǎn)。
[0026]金銀花露屬其他劑型藥品，是暑濕類非醫(yī)保非處方藥品，可以清熱，消暑，解毒，多用于緩解暑溫口渴，小兒痱毒，熱毒瘡癤等癥狀。金銀花露的生產(chǎn)采用水蒸汽蒸餾法收集餾分而得到，而蒸餾剩下的殘液目前或丟棄，或廉價(jià)售出，殘液中含量較為豐富的綠原酸和黃酮類化合物等生物活性物質(zhì)未能得到充分的開發(fā)和利用，造成了資源浪費(fèi)。
[0027]所以，研究設(shè)計(jì)出一種能夠簡(jiǎn)單的大量提取分離金銀花露生產(chǎn)殘液中綠原酸和黃酮的工藝十分重要，可以有效的利用植物資源，提高金銀花的藥用價(jià)值，促進(jìn)金銀花的綜合利用和深加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，具有顯著的經(jīng)