一種體外肝灌流裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)裝置，尤其涉及一種體外肝灌流裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]原代豬肝細(xì)胞是BAL治療中最合適的異種肝細(xì)胞源，現(xiàn)有成熟的肝細(xì)胞分離所采用的方法是酶消化法，該方法是將膠原酶等注入肝臟血管，作用于肝組織，使肝細(xì)胞間復(fù)雜的纖維連接溶解，從而獲得完整的個體肝細(xì)胞。對于大動物，如豬，狗和人的肝臟等，由于體積大，灌流液用量大，時間長，無論原位還是體外灌流都無法采用傳統(tǒng)的人工注射器注入式灌流，只能選用灌流泵。而使用灌流泵灌流時，由于缺乏專用的成套設(shè)備，致使灌流分離過程中極易造成細(xì)菌等污染。由于膠原酶對溫度要求很高，37°C為其最佳作用溫度，沒有專門的灌流設(shè)備很難控制灌流液溫度，因此，往往由于溫度控制不好，而影響了最終的細(xì)胞消化效果，不能達(dá)到所需細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量要求，而且造成昂貴膠原酶的浪費(fèi)，增加分離培養(yǎng)肝細(xì)胞的成本。
[0003]因此，目前需要一種適于消化分離大動物肝臟肝細(xì)胞的體外肝灌流裝置。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]為解決上述問題，本實(shí)用新型提供了一種體外肝灌流裝置，種體外肝灌流裝置，其特征在于:包括灌流液儲存容器組、四通管、灌流泵、熱交換系統(tǒng)、氧合器、去泡器、灌流導(dǎo)管、三通管和回流泵；所述灌流液儲存容器組包括容器A、容器B和容器C，所述容器A、容器B、容器C均設(shè)有進(jìn)液口和帶有截止閥的出液口，所述容器C還設(shè)有回流口；所述灌流泵、熱交換器、氧合器、去泡器、灌流導(dǎo)管和回流泵均設(shè)有進(jìn)液口和出液口 ；所述四通管的四個管口分別與容器A的出液口、容器B的出液口、容器C的出液口和灌流泵的進(jìn)液口通過軟管相連；灌流泵的出液口與熱交換系統(tǒng)的進(jìn)液口、熱交換系統(tǒng)的出液口與氧合器的進(jìn)液口、氧合器的出液口與去泡器的進(jìn)液口、去泡器的進(jìn)液口與灌流導(dǎo)管的進(jìn)液口、回流泵的出液口與容器C的回流口均通過軟管相連；所述灌流導(dǎo)管的出液口伸入裝肝臟容器中，所述裝肝臟容器的底部還設(shè)有出液口 ；所述三通管位于裝肝臟容器的下方，三通管的其中兩個管口分別通過軟管連接裝肝臟容器的出液口、回流泵的進(jìn)液口，三通管的第三個管口連接廢液管，所述廢液管上設(shè)有截止閥。
[0005]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述容器A的進(jìn)液口、容器B的進(jìn)液口和容器C的進(jìn)液口均為帶液體滅菌濾膜的進(jìn)液漏斗，分別位于相應(yīng)容器的頂部；所述容器A的出液口、容器B的出液口和容器C的出液口均位于底部；所述容器A、容器B和容器C的頂部均設(shè)有帶空氣濾膜的透氣孔；所述容器A、容器B和容器C均設(shè)有液位計(jì)。
[0006]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述熱交換系統(tǒng)由熱交換器、熱循環(huán)泵和恒溫水浴鍋組成。
[0007]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述容器A的容積為4-10L，容器B的容積為1_2L，容器C的容積為 2_4L0
[0008]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述裝肝臟容器帶有帽蓋。
[0009]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述軟管的內(nèi)徑為6mm-10mm。
[0010]本實(shí)用新型利用熱循環(huán)泵將水浴鍋中37-42°C的熱循環(huán)水以100-200mL/min的速度注入熱交換器中加熱灌流液，使灌流液在整個灌流過程中保持37°C恒溫。
[0011]利用氧合器向灌流液中進(jìn)行加氧處理，使灌流液中溶解氧分壓保持在180-260mmHg，降低了肝細(xì)胞的缺氧時間，減少肝細(xì)胞內(nèi)空泡，提高肝細(xì)胞的活力。
[0012]利用去泡器在灌流液進(jìn)入肝臟前去除灌流液中大小氣泡，避免氣泡在肝臟血管中形成氣體栓子，使肝臟灌流更加充分均勻。
[0013]由于采用了上述技術(shù)方案，本實(shí)用新型的裝置具有如下的優(yōu)點(diǎn):
[0014]1.使用方便，運(yùn)行可靠，灌流過程連續(xù)進(jìn)行，單人只需在一小時內(nèi)就可以完成操作，節(jié)約人力、物力和時間。
[0015]2.通過熱交換器，灌流液在整個灌流過程中始終保持37°C恒溫，滿足了肝細(xì)胞分離及膠原酶所需的恒定溫定，保證了消化和分離肝細(xì)胞的活性。
[0016]3.通過氧合器對灌流液進(jìn)行了加氧處理，降低了肝細(xì)胞的缺氧時間，減少肝細(xì)胞內(nèi)空泡，提高肝細(xì)胞的活力。
[0017]4.去泡器避免了肝臟血管中氣體栓子的形成，保證了肝臟中所有細(xì)胞能獲得均勻的灌流。
[0018]5.裝置中采用大容量的灌流液儲存容器，和高流速的蠕動泵勻速灌注，保證了大動物肝臟灌流的壓力和灌流液體積需求。
[0019]6.整個灌注過程中，肝臟都處于有蓋的無菌容器中，灌流液也處于無菌的管路和容器中，避免了細(xì)菌、真菌的污染。
[0020]綜上所述，本實(shí)用新型提供了一種成套的，操作方便的用于消化分離大動物肝臟肝細(xì)胞的體外肝灌流裝置，它可以對離體肝臟進(jìn)行三步肝灌流，最大限度地快速、連續(xù)進(jìn)行前灌流液和消化液的有效灌注，最大程度地質(zhì)控消化肝組織過程，節(jié)約成本，恒定溫度，減少污染，從而保質(zhì)保量的獲得實(shí)驗(yàn)與臨床所用的肝細(xì)胞，尤其是肝細(xì)胞移植、生物人工肝等所需的大量肝細(xì)胞。
[0021]根據(jù)本實(shí)用新型的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本實(shí)用新型上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0022]以下通過實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對本實(shí)用新型的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本實(shí)用新型上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本實(shí)用新型上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本實(shí)用新型的范圍。
【附圖說明】
[0023]圖1為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。圖中:1.灌流液I儲存容器，容積1L ;2.灌流液II儲存容器，容積2L;3.灌流液III儲存容器，容積4L ;4.灌流泵；5.熱交換器；6.氧合器；7.去泡器；8.帶蓋容器；9.回流泵；10.廢液容器；11.進(jìn)液口漏斗；12.進(jìn)液口漏斗；13.進(jìn)液口漏斗；14.液體滅菌濾膜；15.液體滅菌濾膜；16.液體滅菌濾膜；17.通氣孔；18.空氣濾膜；19.通氣孔；20.空氣濾膜；21.通氣孔；22.空氣濾膜；23.液位計(jì)；24.液位計(jì)；25.液位計(jì)；26.液體流出口 ；27.液體流出口 ；28.液體流出口 ；29.截止閥；30.截止閥；31.截止閥；32.液體回流口 ；33.液體流出口 ；34.截止閥；35.恒溫水浴鍋；36.熱循環(huán)泵；37.灌流導(dǎo)管；38.四通管；39.三通管。
【具體實(shí)施方式】
[0024]實(shí)施例1
[0025]如圖1所示的體外肝灌流裝置，包含一個灌流液I儲存容器1，容積10L，儲存容器I上端有進(jìn)液口漏斗11，漏斗11底端安置有一個液體滅菌濾膜14，儲存容器I上端有一個通氣孔17，其上接有一個空氣濾膜18，在儲存容器I側(cè)壁上有一個液位計(jì)23，儲存容器I下端有一個液體流出口 26，出口處有一個截止閥29。本裝置還包含一個灌流液II儲存容器2，容積2L，儲存容器2上端有進(jìn)液口漏斗12，漏斗12底端安置有一個液體滅菌濾膜15，儲存器2上端有一個通氣孔19，其上接有一個空氣濾膜20，在儲存容器2側(cè)壁上有一個液位計(jì)2)，儲存容器2下端有一個液體流出口 27，出口處有一個截止閥30。本裝置還包含一個灌流液III儲存容器3，容積4L，儲存容器3上端有進(jìn)液口漏斗13，漏斗13底端安置有一個液體滅菌濾膜16，儲存容器3上端有一個通氣孔21，其上接有一個空氣濾膜22，在儲存容器3側(cè)壁上部有一個液體回流口 32，另一側(cè)側(cè)