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      DNA免疫吸附劑及其制備方法與流程

      文檔序號(hào):12327212閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.DNA免疫吸附劑,所述DNA免疫吸附劑包括吸附劑載體,所述吸附劑載體上負(fù)載有DNA,其特征在于:

      所述DNA免疫吸附劑還包括交聯(lián)聚乙烯醇膜,所述交聯(lián)聚乙烯醇膜對(duì)所述吸附劑載體形成包膜作用。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑,其特征在于:

      所述交聯(lián)聚乙烯醇膜的理論交聯(lián)度為10%至30%。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA免疫吸附劑,其特征在于:

      所述交聯(lián)聚乙烯醇膜是采用戊二醛、馬來(lái)酸酐、乙二酸、丙二酸、丁二酸、己二酸或這四種酸相應(yīng)的酸酐作為交聯(lián)劑制備的;

      所述吸附劑載體為大孔吸附樹脂或活性炭或炭化樹脂,所述吸附劑載體的粒徑范圍在0.1毫米到1.18毫米之間。

      4.DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

      首先執(zhí)行步驟A或步驟B;

      步驟A:使聚乙烯醇水溶液中的聚乙烯醇發(fā)生交聯(lián)反應(yīng),形成交聯(lián)聚乙烯醇溶液,在所述交聯(lián)聚乙烯醇溶液中加入DNA溶液,形成包膜液,加入吸附劑載體,用所述包膜液對(duì)所述吸附劑載體進(jìn)行包膜;

      步驟B:在聚乙烯醇水溶液中加入DNA溶液后與吸附劑載體混合,再加入交聯(lián)劑和催化劑,聚乙烯醇發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)形成交聯(lián)聚乙烯醇膜,所述交聯(lián)聚乙烯醇膜及DNA對(duì)所述吸附劑載體形成包膜作用;

      然后執(zhí)行步驟C,過濾后用水洗滌至無(wú)溶劑殘留,溶液的pH接近中性;

      最后,干燥得到成品。

      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:當(dāng)聚乙烯醇的理論交聯(lián)度小于15%時(shí),則選擇執(zhí)行所述步驟A;

      在執(zhí)行所述步驟C的過程中,用濾袋過濾后加入乙醇分散所述吸附劑載體并瀝干。

      6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:當(dāng)聚乙烯醇的理論交聯(lián)度≥15%時(shí),則選擇執(zhí)行所述步驟B。

      7.根據(jù)權(quán)利要求4至6任一項(xiàng)所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:

      所述聚乙烯醇水溶液的濃度范圍是2‰至2%(w/v)。

      8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:

      加入的所述DNA溶液與所述交聯(lián)聚乙烯醇溶液的體積比為0.8:1至1.2:1。

      9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:

      所述聚乙烯醇水溶液與所述DNA溶液的體積比為1:0.8至1:1.2。

      10.根據(jù)權(quán)利要求4至6任一項(xiàng)所述的DNA免疫吸附劑的制備方法,其特征在于:

      采用戊二醛、馬來(lái)酸酐、乙二酸、丙二酸、丁二酸、己二酸或這四種酸相應(yīng)的酸酐作為交聯(lián)劑;

      采用大孔吸附樹脂或活性炭或炭化樹脂作為所述吸附劑載體,控制所述吸附劑載體的粒徑范圍在0.1毫米到1.18毫米之間;

      聚乙烯醇的種類為PVA-1792、PVA-1788、PVA-2099、PVA-2088或PVA-1588;聚乙烯醇水溶液的配制過程為:把聚乙烯醇加入到處于攪拌狀態(tài)的水中,分散均勻后升溫至80℃,攪拌2小時(shí)后得到溶解充分、混合均勻的聚乙烯醇水溶液;

      DNA溶液的配制過程為:首先把純度85%以上的小牛胸腺DNA溶解于0.2mol/L的pH=7.4的Tris-HCL緩沖溶液中,得到濃度為2mg/ml至6mg/ml的DNA原溶液;然后在DNA原液中依次加入等體積的氯化四氮唑蘭飽和溶液和等體積的無(wú)水乙醇,攪拌或振蕩至完全溶解,得到DNA溶液;

      在所述過濾和水洗滌的步驟中,用2倍至5倍吸附劑載體體積的無(wú)水乙醇分散所述吸附劑載體,所述pH被水洗滌至中性,在所述干燥過程中,首先風(fēng)干至具有流動(dòng)性,然后在50℃至60℃下烘干2小時(shí)并冷卻;

      所述聚乙烯醇發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)的理論交聯(lián)度的計(jì)算公式為:理論交聯(lián)度=(nCLA*Z/nPVA)×100%,其中,nCLA表示交聯(lián)劑的物質(zhì)的量,Z表示交聯(lián)劑與聚乙烯醇上OH基體的結(jié)合數(shù),nPVA表示聚乙烯醇單體的物質(zhì)的量;

      所述催化劑為硫酸溶液,所述硫酸溶液的濃度為0.5mol/L,所述硫酸溶液的加入體積為所述交聯(lián)劑物質(zhì)的量的0.1倍至0.5倍。

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