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      一種實時檢測大氣顆粒物生物毒性的方法與流程

      文檔序號:12357887閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種實時檢測大氣顆粒物生物毒性的方法,利用熒光蛋白標記的活體酵母菌作為指示微生物分析大氣顆粒物的毒性,包括如下步驟:

      1)采集大氣顆粒物,溶于水中制成一定濃度大氣顆粒物溶液;

      2)培養(yǎng)SSA1和/或HSP60蛋白基因被熒光探針標記的酵母菌,制成一定濃度的酵母指示菌液;

      3)將一定量的步驟1)中獲得的大氣顆粒物溶液與步驟2)中制備的酵母指示菌液混合,利用光學(xué)方法獲取其特定波長熒光值,分析大氣顆粒物的毒性。

      2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述大氣顆粒物主要是PM2.5顆粒。

      3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,步驟1)中利用TEFLON采樣膜和四通道大氣顆粒物采樣器采集大氣中PM2.5的樣品,采樣時間為24h,采樣流量為100L/min。

      4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述大氣顆粒物溶液的濃度≥0.02mg/mL。

      5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2)中所述熒光探針為綠色熒光蛋白。

      6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2)將所述酵母菌在25℃的搖床中培養(yǎng)48小時,制成濃度一定濃度的酵母指示菌液。

      7.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟3)將樣品加入到96孔板中,利用酶標儀讀取96孔板的熒光值。

      8.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,步驟3)利用酶標儀讀取熒光值時,設(shè)置動態(tài)連續(xù)讀取熒光值,每隔一定時間讀取一次熒光值,讀取多次,讀取時長2小時。

      9.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,對于綠色熒光蛋白標記功能蛋白的酵母菌,步驟3)酶標儀檢測的熒光波長范圍為480~520nm。

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