本發(fā)明涉及檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其指一種利用南極假絲酵母源脂肪酶結(jié)合超聲輔助醇解甘三酯，經(jīng)過高效液相色譜分離提取、衍生化后利用氣相色譜檢測富含多不飽和脂肪酸的油脂甘三酯中sn-2位脂肪酸的方法。
背景技術(shù)：
：多不飽和脂肪酸(PUFA)指含有兩個(gè)或兩個(gè)以上雙鍵且碳鏈長度為18～22個(gè)碳原子的直鏈脂肪酸。通常分為omega-3和omega-6，在多不飽合脂肪酸分子中，距羧基最遠(yuǎn)端的雙鍵在倒數(shù)第3個(gè)碳原子上的稱為omega-3；在第六個(gè)碳原子上的，則稱為omega-6。多不飽和脂肪酸在人體中具有許多特殊的生理功能。其中，DHA和ARA是人體大腦和視神經(jīng)發(fā)育的重要物質(zhì)，尤其是對提高孕期和嬰兒期智力和視力具有重要作用，因此，普遍添加于嬰幼兒配方中。此外，EPA和DHA對防治心血管疾病、糖尿病和腫瘤等方面也發(fā)揮著積極的功效。目前，深海魚油、微藻油和微生物油脂是Omega-3和Omega-6系列多不飽和脂肪酸的主要來源。富含多不飽和脂肪酸的油脂中甘三酯是其主要成分，其含量占總脂類的90％以上。甘油三酯是由一分子甘油和三分子脂肪酸通過酯化反應(yīng)縮合而成的，?；晌挥趕n-2和sn-1,3，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：由于多不飽和脂肪酸來源、脂肪酸種類和含量，碳鏈長短、雙鍵數(shù)目、雙鍵位置的不同而具有不同的理化和流變性質(zhì)，尤其是多不飽和脂肪酸在甘油三酯中位置分布影響其消化，吸收，代謝及營養(yǎng)價(jià)值。富含多不飽和脂肪酸甘三酯的油脂進(jìn)入人體內(nèi)，經(jīng)胰脂酶部分水解生成sn-1,3游離脂肪酸和sn-2單甘酯，與膽鹽形成乳糜微粒而被小腸粘膜吸收。然而，兩者的代謝途徑不同，游離多不飽和脂肪酸一部分被運(yùn)往肝臟進(jìn)行β-氧化為機(jī)體提供能量，而另一部分游離的長鏈脂肪酸易與Ca2+和Mg2+形成鈣鎂皂，引起便秘，同時(shí)造成鈣質(zhì)流失，不能發(fā)揮其應(yīng)有的生理功能；而sn-2單甘酯則重新酯化，通過淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)輸送至腦部和眼部可以充分發(fā)揮其生理功效。因此，準(zhǔn)確測定多不飽和脂肪酸在甘三酯中的位置分布是評價(jià)其營養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)。目前，常用的測定甘三酯中脂肪酸位置分布的方法有胰脂酶水解法和烯丙基溴化鎂降解法。胰脂酶水解法是根據(jù)胰脂酶的sn-1,3特異性，通過水解甘三酯sn-1,3位上的脂肪酸，對sn-2-單甘酯進(jìn)行測定，分析脂肪酸的位置分布的一種常用的酶解方法。然而，研究表明胰脂酶無法有效地水解長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)，存在局限性。另一種方法是烯丙基溴化鎂降解法，依據(jù)格氏降解反應(yīng)將甘三酯sn-1or3位酯化脂肪酸降解，對生成的sn-1,2orsn-2,3甘二酯進(jìn)行測定，從而計(jì)算出脂肪酸位置分布的一種化學(xué)方法。此方法可以避免胰脂酶對脂肪酸的選擇性水解，但是，烯丙基溴化鎂遇水極易失活，且具有毒性。因此，探索其他適合測定富含LC-PUFA甘三酯的脂肪酸位置分布的方法對有重要的意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本部分的目的在于概述本發(fā)明的實(shí)施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實(shí)施方式。在本部分以及本申請的說明書摘要和發(fā)明名稱中可能會(huì)做些簡化或者省略以避免本部分、說明書摘要和發(fā)明名稱的目的模糊，而這種簡化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。鑒于現(xiàn)有測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法、制備方法和應(yīng)用中存在的問題，提出了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的目的是提供了一種有效測定富含多不飽和脂肪酸油脂的甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法，其包括，利用脂肪酶Lipozyme435結(jié)合超聲輔助醇解富含多不飽和脂肪酸甘三酯；將得到的超聲輔助酶法醇解產(chǎn)物經(jīng)高效液相進(jìn)行分離，得到sn-2單甘油酯并收集；將所得的sn-2單甘油酯進(jìn)行甲酯化衍生處理，獲取衍生物；氣相色譜檢測所得的衍生產(chǎn)物，測定甘油三酯中sn-2位脂肪酸的組成及含量。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述脂肪酶Lipozyme435為利用南極假絲酵母發(fā)酵產(chǎn)的sn-1,3特異性脂肪酶。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述超聲輔助醇解中，超聲波功率為200～400W。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述高效液相進(jìn)行分離，其條件為：硅膠柱，柱溫：25～45℃；流動(dòng)相：A柱正己烷:異丙醇＝99:1；B柱異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2；流速0.5～1.5mL/min；進(jìn)樣量50μL。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：在利用脂肪酶Lipozyme435結(jié)合超聲輔助醇解富含多不飽和脂肪酸甘三酯之后，將得到的超聲輔助酶法醇解產(chǎn)物經(jīng)高效液相進(jìn)行分離，得到sn-2單甘油酯并收集之前，還包括，先進(jìn)油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，作為判定單甘油酯的保留時(shí)間以進(jìn)行高效液相分離。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述將所得的sn-2單甘油酯進(jìn)行甲酯化衍生處理，獲取衍生物是將sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入體積比為2:1的正己烷和1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液得到衍生物。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述氣相色譜檢測所得的衍生產(chǎn)物，其條件為：初始溫度80～100℃，保持2-5min，以(5～15)℃/min升至160～200℃，保持2～5min，再以(5～15)℃/min升溫至210～230℃；載氣為純度≥99.99％的氮?dú)?；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度250～300℃；進(jìn)樣體積1.0μL。作為本發(fā)明所述一種測定多不飽和脂肪酸甘三酯中sn-2位脂肪酸組成的方法的優(yōu)選方案，其中：所述測定甘油三酯中sn-2位脂肪酸的組成及含量，其通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。本發(fā)明首先利用南極假絲酵母源脂肪酶(Lipozyme435)結(jié)合超聲輔助的醇解反應(yīng)富含多不飽和脂肪酸甘三酯，該酶在醇解反應(yīng)中具有很強(qiáng)的sn-1,3特異性，適用于富含多不飽和脂肪酸甘三酯的sn-1,3特異性酶促醇解反應(yīng)，同時(shí)結(jié)合超聲波輔助提高了醇解反應(yīng)速率。因此，本發(fā)明提供的富含多不飽和脂肪酸甘三酯超聲輔助醇解反應(yīng)及sn-2單甘酯分離和甘三酯sn-2位脂肪酸組成的測定方法，準(zhǔn)確度和靈敏度高、重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性強(qiáng)。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖。其中：圖1為采用本發(fā)明測定方法得到的脂肪酸乙酯標(biāo)品氣相圖譜圖。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面通過本發(fā)明的具體實(shí)施方式做詳細(xì)的說明。在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本發(fā)明，但是本發(fā)明還可以采用其他不同于在此描述的其它方式來實(shí)施，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的情況下做類似推廣，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實(shí)施例的限制。實(shí)施例1步驟1、脂肪酶LipozymeRMIM超聲輔助醇解寇氏隱甲藻油甘油三酯稱取寇氏隱甲藻油0.1g于10mL具塞試管中，加入Lipozyme435脂肪酶10mg，再加入95％乙醇5mL，蓋上塞子小心搖動(dòng)，立即將試管放入超聲水浴鍋中，功率200W，保持反應(yīng)15min，取出，加入1mL正己烷，蓋上塞子振蕩，5000r/min離心5min分離，吸取正己烷層，用0.45μm濾膜過濾到樣品瓶中；步驟2、高效液相色譜法分離sn-2單甘油酯利用高效液相-蒸發(fā)光檢測器色譜(HPLC-ELSD)分離醇解產(chǎn)物中的sn-2-甘一酯和乙酯。HPLC-ELSD分析條件：LiChrospherSi柱，5μm，4.6×250mm，柱溫：35℃；流動(dòng)相：A(正己烷:異丙醇＝99:1):B(異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2)；流速1.0mL/min；進(jìn)樣量50μL；ELSD漂移管溫度65℃，空氣壓力3.0bar。先進(jìn)一針油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，再分析處理好的樣品。即將到達(dá)單甘油酯的保留時(shí)間時(shí)，打開制備閥門，將洗脫液收集在洗脫液于50mL離心管中；步驟3、sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入1mL正己烷和0.5mL1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液渦旋混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液；步驟4、氣相色譜法測定sn-2位脂肪酸組成及含量吸取上清液于進(jìn)樣瓶中，采用氣相色譜-氫火焰離子(GC-FID)檢測sn-2位脂肪酸組成，分析條件為：島津GC-2014氣相色譜儀，色譜柱SP-2560，100m×0.25mm，0.20μm毛細(xì)管柱，采用程序升溫，初始溫度80℃，保持4min，以15℃/min升至180℃，保持4min，再以5℃/min升溫至215℃；載氣為高純氮?dú)?≥99.99％)；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度260℃；FID檢測器溫度為300℃；進(jìn)樣體積1.0μL。通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。實(shí)施例2步驟1、脂肪酶LipozymeRMIM超聲輔助醇解裂殖壺藻油甘油三酯稱取裂殖壺藻油0.2g于10mL具塞試管中，加入Lipozyme435脂肪酶25mg，再加入95％乙醇8mL，蓋上塞子小心搖動(dòng)，立即將試管放入超聲水浴鍋中，功率300W，保持反應(yīng)25min，取出，加入1mL正己烷，蓋上塞子振蕩，5000r/min離心5min分離，吸取正己烷層，用0.45μm濾膜過濾到樣品瓶中；步驟2、高效液相色譜法分離sn-2單甘油酯利用高效液相-蒸發(fā)光檢測器色譜(HPLC-ELSD)分離醇解產(chǎn)物中的sn-2-甘一酯和乙酯。HPLC-ELSD分析條件：LiChrospherSi柱，5μm，4.6×250mm，柱溫：35℃；流動(dòng)相：A(正己烷:異丙醇＝99:1):B(異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2)；流速0.8mL/min；進(jìn)樣量50μL；ELSD漂移管溫度65℃，空氣壓力3.0bar。先進(jìn)一針油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，再分析處理好的樣品。即將到達(dá)單甘油酯的保留時(shí)間時(shí)，打開制備閥門，將洗脫液收集在洗脫液于50mL離心管中；步驟3、sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入1mL正己烷和0.5mL1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液渦旋混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液；步驟4、氣相色譜法測定sn-2位脂肪酸組成及含量吸取上清液于進(jìn)樣瓶中，采用氣相色譜-氫火焰離子(GC-FID)檢測sn-2位脂肪酸組成，分析條件為：島津GC-2014氣相色譜儀，色譜柱SP-2560，100m×0.25mm，0.20μm毛細(xì)管柱，采用程序升溫，初始溫度80℃，保持4min，以15℃/min升至180℃，保持4min，再以5℃/min升溫至225℃；載氣為高純氮?dú)?≥99.99％)；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度260℃；FID檢測器溫度為300℃；進(jìn)樣體積1.0μL。通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。實(shí)施例3步驟1、脂肪酶LipozymeRMIM超聲輔助醇解吾肯氏壺藻油甘油三酯稱取吾肯氏壺藻油0.2g于10mL具塞試管中，加入Lipozyme435脂肪酶20mg，再加入95％乙醇6mL，蓋上塞子小心搖動(dòng)，立即將試管放入超聲水浴鍋中，功率300W，保持反應(yīng)25min，取出，加入1mL正己烷，蓋上塞子振蕩，5000r/min離心5min分離，吸取正己烷層，用0.45μm濾膜過濾到樣品瓶中；步驟2、高效液相色譜法分離sn-2單甘油酯利用高效液相-蒸發(fā)光檢測器色譜(HPLC-ELSD)分離醇解產(chǎn)物中的sn-2-甘一酯和乙酯。HPLC-ELSD分析條件：LiChrospherSi柱，5μm，4.6×250mm，柱溫：35℃；流動(dòng)相：A(正己烷:異丙醇＝99:1):B(異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2)；流速0.8mL/min；進(jìn)樣量50μL；ELSD漂移管溫度65℃，空氣壓力3.0bar。先進(jìn)一針油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，再分析處理好的樣品。即將到達(dá)單甘油酯的保留時(shí)間時(shí)，打開制備閥門，將洗脫液收集在洗脫液于50mL離心管中；步驟3、sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入1mL正己烷和0.5mL1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液渦旋混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液；步驟4、氣相色譜法測定sn-2位脂肪酸組成及含量吸取上清液于進(jìn)樣瓶中，采用氣相色譜-氫火焰離子(GC-FID)檢測sn-2位脂肪酸組成，分析條件為：島津GC-2014氣相色譜儀，色譜柱SP-2560，100m×0.25mm，0.20μm毛細(xì)管柱，采用程序升溫，初始溫度80℃，保持4min，以15℃/min升至180℃，保持4min，再以5℃/min升溫至225℃；載氣為高純氮?dú)?≥99.99％)；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度260℃；FID檢測器溫度為300℃；進(jìn)樣體積1.0μL。通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。實(shí)施例4步驟1、脂肪酶LipozymeRMIM超聲輔助醇解深海魚油甘油三酯稱取深海魚油0.2g于10mL具塞試管中，加入Lipozyme435脂肪酶20mg，再加入95％乙醇8mL，蓋上塞子小心搖動(dòng)，立即將試管放入超聲水浴鍋中，功率360W，保持反應(yīng)30min，取出，加入1mL正己烷，蓋上塞子振蕩，5000r/min離心5min分離，吸取正己烷層，用0.45μm濾膜過濾到樣品瓶中；步驟2、高效液相色譜法分離sn-2單甘油酯利用高效液相-蒸發(fā)光檢測器色譜(HPLC-ELSD)分離醇解產(chǎn)物中的sn-2-甘一酯和乙酯。HPLC-ELSD分析條件：LiChrospherSi柱，5μm，4.6×250mm，柱溫：35℃；流動(dòng)相：A(正己烷:異丙醇＝99:1):B(異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2)；流速0.8mL/min；進(jìn)樣量50μL；ELSD漂移管溫度65℃，空氣壓力3.0bar。先進(jìn)一針油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，再分析處理好的樣品。即將到達(dá)單甘油酯的保留時(shí)間時(shí)，打開制備閥門，將洗脫液收集在洗脫液于50mL離心管中；步驟3、sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入1mL正己烷和0.5mL1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液渦旋混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液；步驟4、氣相色譜法測定sn-2位脂肪酸組成及含量吸取上清液于進(jìn)樣瓶中，采用氣相色譜-氫火焰離子(GC-FID)檢測sn-2位脂肪酸組成，分析條件為：島津GC-2014氣相色譜儀，色譜柱SP-2560，100m×0.25mm，0.20μm毛細(xì)管柱，采用程序升溫，初始溫度80℃，保持4min，以15℃/min升至180℃，保持4min，再以5℃/min升溫至225℃；載氣為高純氮?dú)?≥99.99％)；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度260℃；FID檢測器溫度為260℃；進(jìn)樣體積1.0μL。通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。實(shí)施例5步驟1、脂肪酶LipozymeRMIM超聲輔助醇解高山被孢霉微生物油脂(產(chǎn)EPA和ARA)甘油三酯稱取高山被孢霉微生物油脂0.1g于10mL具塞試管中，加入Lipozyme435脂肪酶10mg，再加入95％乙醇5mL，蓋上塞子小心搖動(dòng)，立即將試管放入超聲水浴鍋中，功率300W，保持反應(yīng)20min，取出，加入1mL正己烷，蓋上塞子振蕩，5000r/min離心5min分離，吸取正己烷層，用0.45μm濾膜過濾到樣品瓶中；步驟2、高效液相色譜法分離sn-2單甘油酯利用高效液相-蒸發(fā)光檢測器色譜(HPLC-ELSD)分離醇解產(chǎn)物中的sn-2-甘一酯和乙酯。HPLC-ELSD分析條件：LiChrospherSi柱，5μm，4.6×250mm，柱溫：35℃；流動(dòng)相：A(正己烷:異丙醇＝99:1):B(異丙醇:正己烷:乙酸＝1:1:0.2)；流速0.8mL/min；進(jìn)樣量50μL；ELSD漂移管溫度65℃，空氣壓力3.0bar。先進(jìn)一針油酸sn-2單甘油酯標(biāo)樣，記下sn-2單甘油酯的保留時(shí)間，再分析處理好的樣品。即將到達(dá)單甘油酯的保留時(shí)間時(shí)，打開制備閥門，將洗脫液收集在洗脫液于50mL離心管中；步驟3、sn-2-甘一酯甲酯化使用氮吹儀將溶劑揮發(fā)掉，并向離心管中加入1mL正己烷和0.5mL1.5mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液，將混合液渦旋混勻1min，5000r/min離心3min，收集上清液；步驟4、氣相色譜法測定sn-2位脂肪酸組成及含量吸取上清液于進(jìn)樣瓶中，采用氣相色譜-氫火焰離子(GC-FID)檢測sn-2位脂肪酸組成，分析條件為：島津GC-2014氣相色譜儀，色譜柱SP-2560，100m×0.25mm，0.20μm毛細(xì)管柱，采用程序升溫，初始溫度80℃，保持4min，以15℃/min升至180℃，保持4min，再以5℃/min升溫至225℃；載氣為高純氮?dú)?≥99.99％)；載氣流速為1.0mL/min；分流比100～50∶1；氣化室溫度260℃；FID檢測器溫度為260℃；進(jìn)樣體積1.0μL。通過脂肪酸甲酯混標(biāo)的保留時(shí)間來鑒定脂肪酸種類，相對含量表示為mol％。對比實(shí)例：不同脂肪酶醇解魚油效率對比醇解反應(yīng)胰脂肪酶催化LipozymeTLIM催化LipozymeRMIM催化反應(yīng)耗時(shí)60min25min20min單甘脂得率％64.56％80.37％86.82％由此可見，本發(fā)明酶法醇解是利用脂肪酶的sn-1,3特異性，進(jìn)行醇解反應(yīng)測定脂肪酸在甘三酯中位置分布的方法，同時(shí)結(jié)合超聲波技術(shù)促進(jìn)醇解反應(yīng)效率。當(dāng)超聲波作用在反應(yīng)體系時(shí)，液體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量的氣泡，氣泡將隨著超聲振動(dòng)而逐漸生長和增大，然后又突然破滅和分裂，分裂后的氣泡又連續(xù)生長和破滅。這些小氣泡急速崩潰時(shí)在氣泡內(nèi)產(chǎn)生高溫高壓，且因氣泡周圍的液體高速?zèng)_入氣泡而在氣泡附近的液體中產(chǎn)生強(qiáng)烈的局部激波，也形成局部的高溫高壓。這些結(jié)果增加了反應(yīng)物的活性，促進(jìn)了原料油醇解反應(yīng)的發(fā)生，從而增強(qiáng)傳質(zhì)過程、加快反應(yīng)速率。無超聲波輔助條件下，酶法醇解反應(yīng)需要耗時(shí)1h，且結(jié)果還表明，超聲結(jié)合酶法醇解法可以降低反應(yīng)能耗，節(jié)省物料。上述說明已經(jīng)充分揭露了本發(fā)明的具體實(shí)施方式。需要指出的是，熟悉該領(lǐng)域的技術(shù)人員對本發(fā)明的具體實(shí)施方式所做的任何改動(dòng)均不脫離本發(fā)明的權(quán)利要求書的范圍。相應(yīng)地，本發(fā)明的權(quán)利要求的范圍也并不僅僅局限于前述具體實(shí)施方式。當(dāng)前第1頁1 2 3