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      一種用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠及其制備方法與流程

      文檔序號(hào):11946393閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠,其特征在于:所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠至少包括CD45免疫磁珠,還可以包括或不包括CD14免疫磁珠和CD15免疫磁珠中的一種或兩種,其中,CD45免疫磁珠、CD14免疫磁珠和CD15免疫磁珠為CD45抗體、CD14抗體和CD15抗體分別與磁性微球偶聯(lián)得到的免疫磁珠;所述CD45免疫磁珠、CD14免疫磁珠和CD15免疫磁珠的結(jié)構(gòu)式為:A-NH-N=CH-B,其中A表示磁性微球,B表示抗體,或者A表示抗體,B表示磁性微球。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠,其特征在于:所述磁性微球?yàn)楹藲そY(jié)構(gòu)的無機(jī)或有機(jī)高分子包裹的磁性微球。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠,其特征在于:所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的粒徑為200~300nm。

      4.一種制備權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的方法,其步驟包括:

      s1.磁性納米簇的制備;

      s2.氨基修飾的磁性微球的制備;

      s3.肼基修飾的A部分的制備;

      s4.醛基修飾的B部分的制備;

      s5.免疫磁珠的制備:將步驟s3所述肼基修飾的A部分與步驟s4所述醛基修飾的B部分混合,在4~25℃下進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)2~24小時(shí),得到所述免疫磁珠。

      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的制備方法,其特征在于:所述步驟s3中的肼基修飾的A部分是通過:將氨基修飾的磁性微球或抗體用摩爾當(dāng)量為10~50倍的SANH進(jìn)行肼基修飾后得到的。

      6.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的制備方法,其特征在于:所述步驟s4中的醛基修飾的B部分是通過:將氨基修飾的磁性微球或抗體用摩爾當(dāng)量為5~20倍的SFB進(jìn)行醛基修飾后得到的。

      7.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的制備方法,其特征在于:所述步驟s1中的磁性納米簇是通過如下方法制備得到:

      1)在空氣中,向二價(jià)鐵鹽的水溶液中加入氨水,然后攪拌使溶液變成黑色,得到黑色Fe3O4顆粒;

      2)向步驟1)中加入油酸,混合均勻后轉(zhuǎn)移至密閉的反應(yīng)釜中,在60~130℃下加熱反應(yīng)3~5小時(shí),即可得到所述磁性納米簇。

      8.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的制備方法,其特征在于:所述步驟s2中的氨基修飾的磁性微球部分為核殼結(jié)構(gòu)的二氧化硅包裹的磁性微球,通過如下方法制備得到:向含有磁性納米簇的溶液中加入氨水、硅烷化試劑和氨基硅烷偶聯(lián)劑,反應(yīng)1~3天后得到氨基修飾的磁性微球部分;所述磁性納米簇、氨水、硅烷化試劑、氨基硅烷偶聯(lián)劑加入的質(zhì)量比為:1:(12.5~40):(2~8):(0.5~3)。

      9.根據(jù)權(quán)利要求4所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠的制備方法,其特征在于:所述步驟s5中,磁性微球部分和抗體部分的質(zhì)量比為1: (0.01~1)。

      10.一種用于捕獲白細(xì)胞的的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒中含有權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠,所述用于捕獲白細(xì)胞的免疫磁珠為CD45免疫磁珠、CD14免疫磁珠和CD15免疫磁珠混合得到。

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