1.一種基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法及應(yīng)用，其特征在于，是在清洗活化后的絲網(wǎng)印刷電極表面分別修飾上制備的納米金-殼聚糖、納米碳纖維-納米金復(fù)合物，然后在修飾好的電極上分別滴加二茂鐵-適配體、適配體，以二茂鐵和納米碳纖維分別作為探針得到檢測抗生素的比率型適配體傳感器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，所用電極為絲網(wǎng)印刷電極，包括一印制電極的基片、基片上印制的外部絕緣層和三根電極引線，其特征在于所述的基片上還印制有三個電極，一個工作電極：碳電極；一個對電極：碳電極，直徑3mm；和一個參比電極：Ag/AgCl電極，各電極對應(yīng)連接有一電極引線，該電極電化學(xué)性能穩(wěn)定，均一性好。
3.根據(jù)權(quán)利要求1 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，步驟如下：
1）納米金/納米金-殼聚糖復(fù)合物、納米碳纖維、二茂鐵-適配體的制備；
2）清洗活化絲網(wǎng)印刷電極，得到預(yù)處理的絲網(wǎng)印刷電極；
3）將步驟1）制備得到的納米金-殼聚糖復(fù)合物和納米碳纖維/納米金分別修飾到步驟2）預(yù)處理的絲網(wǎng)印刷電極上，得到修飾好的絲網(wǎng)印刷電極；
4) 將二茂鐵-適配體、適配體分別滴加到步驟3）所得的修飾好的絲網(wǎng)印刷電極上，自然晾干后得到基于絲網(wǎng)印刷電極的基礎(chǔ)適配體傳感器；
5）優(yōu)化步驟4）所得的基礎(chǔ)適配體傳感器的三種試驗(yàn)條件；
6）在步驟5）所得的最優(yōu)條件下，對四環(huán)素等抗生素進(jìn)行檢測。
4.根據(jù)權(quán)利要求3 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，步驟1）所述納米金-殼聚糖復(fù)合物、納米碳纖維、二茂鐵-適配體分別是以殼聚糖為分散劑分散納米金，取一定濃度的納米碳纖維溶液，將二茂鐵與適配體混合得到分散均勻的懸濁液。
5.根據(jù)權(quán)利要求3 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，步驟3）所述絲網(wǎng)印刷電極電極的修飾，是分別先將7 μL納米金-殼聚糖復(fù)合物、30% 納米碳纖維溶液和納米金溶液滴加到預(yù)處理的絲網(wǎng)印刷電極上，室溫下晾干，分別得到納米金-殼聚糖，納米碳纖維/納米金修飾的絲網(wǎng)印刷電極。
6.根據(jù)權(quán)利要求3 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，步驟4）所述在修飾好的電極上分別滴加7 μL 二茂鐵-適配體復(fù)合物、適配體溶液，是將7 μL 二茂鐵-適配體復(fù)合物滴加到納米金-殼聚糖修飾好的絲網(wǎng)印刷電極上，將7 μL 適配體溶液滴加到納米碳纖維/納米金修飾的絲網(wǎng)印刷電極上，在4℃條件下干燥，得到兩種適配體生物傳感器。
7.根據(jù)權(quán)利要求3 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，步驟5）所述兩種適配體生物傳感器的三種試驗(yàn)條件測試底液pH值、適配體濃度、孵育時間分別進(jìn)行了優(yōu)化：pH值為7.0，適配體濃度為6 μM，孵育時間為60 min。
8.根據(jù)權(quán)利要求3 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：
1） 納米金/納米金-殼聚糖復(fù)合物、納米碳纖維、二茂鐵-適配體的制備：100 mL 質(zhì)量體積比為0.01%的氯金酸滴加到燒杯中，置于電爐上加熱，邊加熱邊攪拌直至沸騰，然后迅速加入2.5 mL 1% 檸檬酸鈉溶液，隨著反應(yīng)的進(jìn)行該溶液很快變成了紅寶石顏色，說明指示的金納米粒子的形成；劇烈攪拌該溶液持續(xù)1小時后，得到所制備的納米金溶液；稱取0.5 g殼聚糖置于燒杯中，加入1.0 %的醋酸溶液攪拌溶解，將溶解好的溶液置于250 mL容量瓶中并定容，定容后的溶液倒入燒杯中，在磁力攪拌器下磁力攪拌10 h，得到0.2%的殼聚糖溶液；將20 mL 1％的殼聚糖乙酸溶液攪拌加入到上述納米金溶液中得到納米金-殼聚糖復(fù)合物；1 g二茂鐵加入到100 mL 乙醇溶液中超聲30 min，得到 1%二茂鐵溶液，然后將適配體溶液加入到二茂鐵溶液中，在4 ℃下攪拌混勻12小時，得到二茂鐵-適配體復(fù)合物；
2）絲網(wǎng)印刷電極的清洗、活化：首先，將絲網(wǎng)印刷碳電極放入盛有1mM 氫氧化鈉溶液的小燒杯中超聲清洗5分鐘，超純水清洗，氮?dú)獯蹈?，然后，將電極放入盛有1mM 鹽酸溶液的小燒杯中超聲清洗5分鐘，超純水清洗，氮?dú)獯蹈?，之后，用無水乙醇清洗電極，氮?dú)獯蹈?，最后，在pH 5.0的磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行電流-時間曲線掃描300s，之后，進(jìn)行循環(huán)伏安曲線掃描，直至性能穩(wěn)定；
3）絲網(wǎng)印刷電極的修飾：在絲網(wǎng)印刷電極上分別滴加7 μL 納米金-殼聚糖復(fù)合物、30% 納米碳纖維溶液和納米金溶液滴加到預(yù)處理的絲網(wǎng)印刷電極上，室溫下晾干，分別得到納米金-殼聚糖，納米碳纖維/納米金修飾的絲網(wǎng)印刷電極；
4）適配體的固定：在上述的電極上滴加7 μL二茂鐵-適配體復(fù)合物滴加到納米金-殼聚糖修飾好的絲網(wǎng)印刷電極上，將7 μL 適配體溶液滴加到納米碳纖維/納米金修飾的絲網(wǎng)印刷電極上，在室溫下干燥，得到兩種適配體生物傳感器，并將制備好的電極放于4 ℃干燥的環(huán)境中保存?zhèn)溆茫?/p>
5）試驗(yàn)條件的優(yōu)化：制備一系列pH值的磷酸鹽緩沖液，pH值分別為6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，并分別配成了一系列的檢測底液，在這些底液中對傳感器電流值進(jìn)行檢測，篩選出最佳pH值7.0；分別向電極負(fù)載2 μM、4 μM、5 μM、6 μM、8 μM的適配體，對其電流值進(jìn)行檢測，篩選出最佳適配體濃度為6 μM；用同一濃度的四環(huán)素孵育時間分別控制為30 min、40 min、50 min、60 min、70 min、80 min、90 min，對其電流值進(jìn)行檢測，篩選出最佳孵育時間為60 min；
6）四環(huán)素的檢測：在最優(yōu)條件下：pH 7.0，適配體濃度 6 μM，孵育時間60 min，在兩種適配體傳感器上對不同濃度的四環(huán)素進(jìn)行電流檢測，并分別建立了建立不同四環(huán)素濃度與絲網(wǎng)印刷電極電流變化之間的關(guān)系曲線，進(jìn)而得到不同濃度的四環(huán)素的對數(shù)值與電流峰值比率之間的線性回歸方程，在濃度范圍10-11～10-9g/mL內(nèi)得到y(tǒng)=-0.02854x - 0.02655，相關(guān)系數(shù)為 0.994；在濃度范圍10-9～10-3g/mL內(nèi)得到y(tǒng) = -0.00225x + 0.20538，相關(guān)系數(shù)0.997。
9.根據(jù)權(quán)利要求1 所述基于絲網(wǎng)印刷電極檢測抗生素殘留的比率型適配體傳感器的制備方法，其特征在于，牛奶中四環(huán)素等抗生素殘留具體檢測步驟如下：
1）牛奶樣品的前處理：在當(dāng)?shù)爻匈徺I牛奶，把牛奶按照1:10的比例進(jìn)行稀釋，然后分裝到離心管中，以20000轉(zhuǎn)/秒的速度離心90min；離心結(jié)束后，牛奶分為明顯的三層，上、下層是脂肪和酪蛋白等大分子物質(zhì)，為了避免大分子物質(zhì)對抗生素的包裹，我們?nèi)ブ虚g一層的乳清，搜集乳清，向搜集好的乳清中添加四環(huán)素等抗生素，濃度分別是5×10-10 g/mL，5×10-9g/mL，5×10-8g/mL，5×10-7g/mL；
2）樣品的檢測：在最優(yōu)條件下：pH 7.0，適配體濃度 6μM ，孵育時間60 min，對牛奶樣品進(jìn)行檢測；
3）根據(jù)權(quán)利要求8步驟6）中建立的相應(yīng)的線性關(guān)系，計(jì)算出相應(yīng)樣品的四環(huán)素等抗生素殘留量。